植物油中磷脂含量的测定资料
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The End
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结果计算
根据被测液的吸光值,从标准曲线查得磷量(P),按公式(1)计算磷脂含量:
式中: P─
标准曲线查得的磷量,m源自文库;
V1── 样品灰化后稀释的体积,ml; V2── 比色时所取的被测液体积,ml;
26.31─ 每毫克磷相当于磷脂的毫克数;
W── 试样重量,g。
双试验结果允许差不超过0.04%,求其平均数,即为测定结果。测定结果取 小数点后第二位。 大豆油中磷脂含量在1.1%-3.5%
1. 50%氢氧化钾溶液; 2. 盐酸、硫酸、氧化锌、滤纸; 3. 0.015%硫酸联氨溶液; 4. 2.5%钼酸钠稀硫酸溶液:量取140 ml硫酸注入 300 ml水中,摇匀,冷却至室温,加入 12.5 g钼酸 钠,溶解后加水至500 ml,摇匀,静置24 h备用。 5. 磷标准溶液:称取无水的磷酸二氢钾0.4391 g 溶于1000 ml水中,作为1号液,含磷0.1 mg/ml,吸 取1号液10 ml,加水稀释至100 ml,含磷0.01 mg/ml,作为2号液,比色用。
操作步骤
2. 制备被测液:用坩埚称取试样约10 g(准确至0.001 g),加氧化锌0.5 g(氧化锌在灰化中能和磷形成磷酸锌 防止磷以氧化物的形式挥发造成损失),先在电炉上加热 炭化,然后送入550~600℃的高温炉中灼烧至灰化(白 色),灼烧时间约1 h,取出坩埚冷却至室温,用热盐酸 (1∶1)10 ml溶解灰分,并加热微沸5 min,将溶解液过 滤注入100 ml容量瓶中,用热水冲洗坩埚和滤纸,待滤液 冷却至室温后,用50%氢氧化钾溶液中和至出现混浊,缓 慢滴加盐酸使氧化锌沉淀全部溶解后,再滴2滴,最后用水 稀释至刻度,摇匀。
操作步骤
1. 绘制标准曲线:取4只50 ml比色管,编成1,2,4,8 五个号码,按号码顺序分别注入磷标准2号液1,2,4,8 ml,再按顺序分别加水9,8,6,2 ml。接着向4只管内各 加0.015%硫酸联氨溶液8.0ml;各加钼酸钠稀硫酸溶液2.0 ml,加塞、摇匀。去塞,将4只管置于正在沸腾的水浴中加 热10 min,取出冷却至室温,用水稀释至50 ml,充分摇匀, 静置10 min后,用分光光度计在波长650 nm 下,用1cm液 槽,用水调整零点,分别测定吸光度值。以吸光度为纵坐标, 以磷量(0.01、0.02、0.04、 0.08 mg)为横坐标绘制标准 曲线。
项目五植物油中磷脂含量的测定
食品分院刘深勇
主要内容
实验目的
掌握用油脂中磷脂测定的原理和方法。
学习吸收曲线的制作和结果计算。 进一步熟练掌握分光光度计的使用方法。
磷脂的定义
实验原理
•植物油脂中的磷脂经灼烧成五氧化二磷,被热盐 酸变成磷酸,遇钼酸钠生成磷钼酸钠,用硫酸联氨 还原形成钼蓝,在680nm,用分光光度法测定其含 量。
操作步骤
3. 比色:用移液管吸取被测液10 ml注入50 ml比色管中, 加入0.015%硫酸联氨8.0 ml,加2.0 ml钼酸钠稀硫酸溶液, 加塞,摇匀。去塞,将比色管置于正在沸腾的水浴中加热 10 min,取出冷却至室温,用水稀释至50 ml,充分摇匀, 静置10 min后,用分光光度计在波长650 nm下,用1cm液 槽,用水调整零点,测定吸光度值。
磷脂测定仪器和器具
钼蓝比色法 1. 瓷坩埚或石英坩埚; 2. 分光光度计或带塞的50 ml比色管; 3. 移液管:5、10 ml; 4. 电炉、高温炉; 5. 容量瓶:100、500、1000 ml; 6. 表面皿、烧杯、量筒; 7. 恒温水浴锅; 8. 漏斗、坩埚钳、试剂瓶等
磷脂测定的试剂