甘薯的脱毒培养与快繁
脱毒甘薯种薯及种苗病毒检测与繁育规1
种薯药剂处理50%甲基托布津或50%多菌灵500倍或90%甲基托布津800倍浸种10分钟50%甲基托布津或50%多菌灵500倍或90%甲基托布津800倍浸种10分钟50%甲基托布津或50%多菌灵500倍或90%甲基托布津800倍浸种10分钟4脱毒苗的病毒检测方法与标准4.1脱毒苗的病毒检测方法4.1.1目测法目测法是根据甘薯叶片和薯块上出现的典型症状判断甘薯是否感染病毒。
甘薯病毒病的症状主要包括：（1）叶斑型。
主要有紫色羽状斑、紫斑、紫环斑、黄色斑或者枯斑（2）花叶型。
苗期感病后，初期叶脉呈网状透明，后沿叶脉出现不规则黄绿相间的花叶斑纹（3）卷叶型。
叶片边缘上卷，严重者可形成杯状（4）叶片皱缩型。
病苗叶片较小，皱缩，叶缘不整齐，甚至扭曲畸形（5）叶片黄化型。
包括叶片黄化及网状黄脉。
薯块上的症状主要是产生黑褐色或黄褐色龟裂纹。
病毒病的症状可因病毒种类、甘薯品种以及环境条件等因素的影响而改变，因此根据症状只能作初步判断。
另外，目测法还应注意区分甘薯品种特性以及由于土壤水份对大、营养失调等原因造成的生理病害与病毒病症状的差异。
4.1.2指示植物法常用巴西牵牛(Ipomoea setosa)作指示植物，几乎所有侵染甘薯的病毒都能感染巴西牵牛，因此，将薯苗嫁接在巴西牵牛上，从巴西牵牛的显症情况可判断薯苗是否带毒。
具体嫁接方法如下：以薯苗芽尖作接穗，将芽尖削成楔形，另将具3-4片真叶的巴西牵牛作砧木，在其茎中部切一斜口把楔形接穗插入，用封口膜扎住，置防虫网室内遮阴保湿3-4天，然后在自然光照下观察记载牵牛的显症情况，一般嫁接后25～30天左右开始出现症状,显症初期新生叶出现系统性明脉，以后发展为花叶或皱缩等症状。
4.1.3甘薯病毒的血清学检测常用的血清学检测方法为酶联免疫吸附法（ELISA）或在此基础上改进的斑点酶联免疫吸附法（Dot-Blot ELISA）等。
Dot-Blot ELISA具有快速和能检测大量样品的特点，在大量检测样品时较常应用。
甘薯脱毒快繁及微型薯生产技术研究
的检测一般先采取 目测 法淘汰弱苗 和显症苗 ， 然后
再用血清学方 法或 分子 生物 学方 法 进行 筛选 。经 血清学或分子 生物 学方 法检 测呈 阴性 的样 品再 进
去多余 的水 分 ， 手和接 种工 具严 格消毒 后 ， ４ Ｘ 在 ０ 解剖 镜 下 ， 无 菌 刀 片或 解 剖针 挑 下 ０ １ ０ ２ 用 ． — ．
从 另一侧 轻轻一 挑 将 茎尖 粘 于 刀 片 上 ， 速接 种 迅 于培养基 。为 防污染 ， 每个 培养皿 接种 １ —２个微 茎尖 ， 人培养 室 内进 行培 养 。环 境条 件为 ： 放 温度 ２ ± １ 湿 度 ７ 一 ８ 、 照 强 度 ３ ５ ℃、 Ｏ ０， 光 ９ ６ ０ ｄ前
灯火 焰等原 因易使 茎尖 变干 ， 丧失 活力 。解 剖刀 、
解 剖针 、 子等要 浸于 ７ 的消 毒酒 精 中并用 火 镊 ０
焰 灼烧消 毒 ， 最好 准备 两套 刀片与 解剖 针 ， 替使 交 用， 以防灼烧 过热 伤 及 茎尖 。在切 取 茎 尖 时 可 以
从 一 侧 切 至 仅 与 另 一 侧 有 少 许 连 接 ， 后 用 刀 片 然
・
１ ・ ８
陕
西
农
业
科
学
２ｌ（） Ｏ Ｏ ４
甘 薯脱 毒 快 繁 及微 型薯 生 产 技 术研 究
曹秀敏 ，张 明 。 李延 龙 ，王利亚 ，乔保建 （ 平顶 山 市农 业科 学院 农业 生物技 术 实验 室 ， 河南 平顶 山
摘
４７ ０） ６ ０ １
要 ： 对甘 薯 长期 大 田种 植 ， 毒 侵 染 ， 性 退 化 ， 性 降 低 ， 针 病 种 抗 产量 和 品 质 下 降 的 特 点 ． 出 对甘 薯 进 行 脱 提
甘薯脱毒和组培快繁技术研究初探
甘薯(Ipomoea batatas Lam.)又称山芋、番薯、红薯、地瓜,为旋花科甘薯属一年生或多年生蔓性草本植物,耐旱,耐贫瘠,产量高,富含多种营养物质,具有良好的保健功能。
我国的甘薯种植面积及产量均居世界首位,主要用作粮食、饲料及工业原料,在国家粮食安全与能源安全方面占有重要地位。
病毒病是甘薯的主要病害之一[1-2],一旦感染病毒,会导致产量品质降低,种性退化,严重者可导致减产[3]。
为提高甘薯脱毒率,满足脱毒苗产业化生产的需求,笔者对甘薯茎尖培养、高温和药剂3种脱毒方法进行了研究;对繁殖速度慢的甘薯品种进行了增殖培养基的筛选试验,以提高繁殖速率,短期内获得大量的脱毒组培苗。
1材料与方法1.1试验材料试验甘薯品种为烟薯25、京6、济薯26、普薯32,由北京市农业技术推广站及北京市密云区和合元种植专业合作社提供。
本试验于2018-2020年进行。
1.2试验材料准备准备大号塑料钵,底部铺设报纸,以防浇水时基质随水从排水孔中流出;栽培基质选用蛭石和草炭,比例2∶1;基质提前用500倍百菌清溶液喷湿,将薯块平铺或直插入基质中,注意直插时分清上下部,浇水后放于适宜温度下催芽。
催芽温度条件29~32℃。
待苗出芽后降低温度,控制在25~28℃。
从携带有SPLCV病毒的烟薯25盆栽苗上剪插条,插条长约10cm,去除叶片,插条上部平切,下部斜切;将插条放于500倍百菌清溶液中浸泡10s,再用浓度为100~500mg/kg萘乙酸溶液处理,以利快速生根;扦插基质为蛭石和草炭,扦插容器选用塑料钵,从底部到上部依次为报纸、草炭、蛭石,同样用500倍百菌清溶液处理;将处理好的插条扦插于基质中,喷水后放置于25~28℃的环境条件下培养。
待生根并长出新芽后即可进行药剂脱毒试验。
1.3茎尖剥离技术1.3.1材料准备当甘薯块茎长出新芽后,切下顶部约2cm的芽段,剪去已展开的叶片放入烧杯中,倒入洗涤灵进行洗涤,用流水冲洗30min左右,置于超净工作台上。
彩紫1号甘薯茎尖脱毒与组培快繁技术研究
种植 试 验还 显示 ．彩 紫 １ 号甘 薯 的脱毒 苗能 明显 提 高 甘薯 的产 量 。脱毒 试管 苗 比正常 薯块 未脱 毒苗 增 产 ２ ％，比带毒 苗增 产 ６ ． ，充分 表 明 了脱毒 苗 ５ ２２ ％
的复壮 与增 产作 用 。
参 考 文 献
６ Ｂ 是影 响 甘薯 茎 尖 成 苗 的重 要 因 子 。 出苗 率 随 一Ａ
纬鼓
２１ 不 同培 养基 对 茎尖成 苗 率的 影响 ．
２１第 期 ０年 ３ １
肥 ２ ０ ｇ 过 磷 酸 钙 ６ ０ ｇ 四 周 留保 护 行 。 脱 ０ｋ、 ０ｋ ，
试 验结 果 表 明 （ １ ：ＭＳ培 养基 中添 加不 同 表 ）
毒 苗 种 植 行 株 距 为 ３ｃ ２ ｃ ０ｍ￣ ０ｍ，每 小 区 ２ Ｏ株 苗 ，
目前 全 国年 种植 面积 为 ６ ０多 万 ｈ ２ ０ ｍ ．年 产鲜 薯 １
选 取健 康 无病 斑 的薯 块 ．洗净 后 用 ３ ｍｇ ｇ赤 ０ ／ ｋ
霉 素 （ Ａ ）浸 种 ３ ｒ ｎ Ｇ ０ ｉ ，埋 于 消 毒 过 的 泥 炭 中 ， ａ 放 人 ２ ｃ 培 养 箱 黑 暗 培 养 催 芽 ： 露 芽 后 升 温 至 ５Ｉ ＝ ３ ｃ 培 养 ７ ：剪 取 生 长 旺 盛 的茎 尖 ５ ｍ。切 去 叶 ０Ｉ ＝ ｄ ｅ
．
品种 及其 特性 演 变 ．以求 总结 出主 栽 品种特 性演 变
年 ）和 宁 ８ （ ０ ０年 ） １ ２１ 。其 中 ２ ０ ０ ０年 以前 推 广 的
２４ 脱毒 苗 的大 田种 植效 果 ．
试 管 苗 可 比正 常薯 块 未 脱 毒 苗 增 产 ２ ％ ． 比带 毒 ５ 苗 增产 ６ ．％，增 产效 果 十分显 著 。 ２２
甘薯茎尖脱毒和试管快繁研究
温光条 件培养 ， 般 均借 助 空调 和 日光 灯 等进 行 一 温 光调控， 殖 成本较 高。 繁
本研究探讨 了采 用高 温 预 处 理 植 株 的 ２ ５ ～
１ ２ １ 培 养 基 处 理 ．． 设 ７个 处 理 固 体 培 养 基 ： ＭＳ不 加 激 素 ； ① ② １２ Ｓ 加 激 素 ； １ ２ Ｓ＋ ＩＡ０ ０ ｇ Ｌ； ／Ｍ 不 ◎ ／Ｍ Ａ ２ｒ ／ ④ ａ Ｉ２ ／ ＭＳ＋ Ｉ Ａ０ ０ ／ ； ｌ ２ Ｓ＋ Ｉ ０ ０ Ａ ． ５ ｍｇ Ｌ ⑤ ／ Ｍ ＡＡ １ ｍ ／ ⑥ １２ Ｓ＋ Ｉ ０ １ ／ ⑦ １ ２ Ｓ＋ ｇ Ｌ； ／ Ｍ ＡＡ ． ５ ｍｇ Ｌ； ／Ｍ Ｉ ０２ ＡＡ ．０ｍｇ Ｌ 每 处 理 接 种 ９瓶 ， ２ ～２ ／。 在 ５ ８℃ ．
２ 结 果 与 分 析
２ １ 茎 尖 预 处 理 脱 毒 效 果 ，
温 （ ４ ）２ ３ ±１ Ｉ 预处 理 的生 长势 强 的试 管 植株 ２ ～５ ｍｍ茎 尖 。两处理 各 培养 ３ ０瓶 ， 瓶 接 种 １个 茎 每
尖。
实验 结果表 明， Ｂ处 理 茎 尖 培 养 污染 率 为 ０ ； 成苗率 为 ８ ． ％， 于 Ａ 处 理 （ １ 。 说 明采用 ６７ 优 表 ） 高温 预培 养植株 ２ ～５ｍｍ 茎尖作 为 外植 体 。 组 其 织培养 成苗率 高 ， 脱毒效 果 良好 。
大量研究 和实 践 表 明 ， 薯脱 毒 后 能显 著 提 甘
高 产 量 。 目前 ， 国 甘 薯 脱 毒 技 术 已 趋 成 熟 ， 本 我 基
建立 相应 的脱 毒 苗生产 、 育体 系， 在部 分省 市 繁 并 大 面积推广 应 用【 ｏ 剥取 ０ ２～０ ５ｍｍ 茎 尖 分 １ ］ ． ．
甘薯的脱毒培养与快繁
➢一般培养10 d茎尖膨大并转绿，培养20 d 左右茎尖形成2-3 mm的小芽点，并在基部 逐渐形成绿色愈伤组织。 ➢愈伤组织形成后，应将培养物转入无植物 生长物质的MS培养基上，以便小芽生长和 生根。
5. 茎尖苗的初级快繁 ➢当薯苗长至3-6 cm时，将小植株切断进行 短枝扦插，除顶芽一般带1-2 片展开叶外， 其余的切段均是带一节一叶的短枝 ➢切段直插于三角瓶内无植物生长物质的 MS培养基中 ➢2-3 d内，切段基部产生不定根，30 d左右 长成具6-8 片展开叶的试管苗
6. 严防病虫害：定期喷洒农药，防治蚜虫 及地下害虫。
思考题：
１、甘薯脱毒的过程？ ２、甘薯脱毒苗如何进行快繁？
（三）脱毒试管苗的大规模移栽技术及管理方法
1. 培育壮苗：降低培养温度、增强光照，株高 3-5 cm为宜。
2. 适当炼苗 ：移苗前，打开瓶塞，在室温和自 然光照下锻炼2-3 d。
3. 精心移栽 ：倒入清水，振摇松动培养 基，洗去根部培养基，移至灭菌的蛭石或 沙土中。苗生根、长出新叶后再移植于土 壤中。
途的生长健壮的甘薯品种植株作为母株； 取枝条，剪去叶片后切成数段，每段
带1腋芽，含顶芽的2-3 节。
脱毒的甘薯种苗
2. 材料消毒： ➢流水冲洗数分钟，用滤纸吸干表面水分后 于70%的酒精浸泡10 s，再用0.1%多菌灵 浸泡8 min，再用0.1%升汞消毒10 min，无 菌水冲洗5 次。 ➢或用10%次氯酸钠溶液消毒15 min，无菌 水冲洗3 次。
3. 茎尖剥离 ➢把消毒好的芽放在解剖镜下，无菌剥去 顶 芽 和 腋 芽 上 较 大 的 幼 叶 ， 切 取 0.3-0.5 mm含1-2 源自叶原基的茎尖组织，接种在培 养基上。
4. 茎尖培养：
我国甘薯脱毒种薯种苗繁育存在的问题及建议
我国甘薯脱毒种薯种苗繁育存在的问题及建议作者：张振臣来源：《植物保护》2020年第06期摘要病毒病是甘薯的重要病害，种植脱毒健康种苗是防治病毒病、提高甘薯产量最有效的方法。
近年来，我国甘薯病毒及其传播介体的发生呈现出新的特点，传统的脱毒种薯种苗繁育体系不能满足当前甘薯生产的需要。
本文综述了当前我国甘薯病毒的种类及危害现状，分析了我国甘薯脱毒种薯种苗繁育中存在的问题，对规范和完善我国甘薯脱毒种薯种苗繁育体系提出了建议。
关键词甘薯病毒病; 脱毒种苗; 繁育体系; 问题和建议中图分类号： S 435.311文献标识码： ADOI： 10.16688/j.zwbh.2019397Abstract Viral diseases are important diseases threatening sweet potato production in China. The most effective measure for controlling viral diseases and improving the yield of sweet potato is planting virus-free sweet potato seeds （cuttings or storage roots）. In recent years， the occurrence of sweet potato viruses and their transmission vectors has exhibited new features in China. Traditional virus-free seed breeding system cannot meet the needs of the current sweet potato production. The species and harm status of sweet potato viruses in China were reviewed， and the problems in the breeding of virus-free sweet potato seeds in China were analyzed. The suggestions for standardizing and improving the breeding system of virus-free sweet potato seeds in China were offered.Key words sweet potato viral disease; virus-free sweet potato seed; breeding system; problem and suggestion甘薯是我国重要的粮食作物，其独特的高产性和广适性曾为解决我国城乡居民的温饱问题作出了重要贡献。
红薯脱毒育苗技术步骤
红薯脱毒育苗技术步骤红薯脱毒育苗是红薯种植的重要环节，通过脱毒育苗可以有效提高红薯的品质和产量。
下面将详细介绍红薯脱毒育苗的技术步骤，供您参考。
一、选材选择良种红薯作为育苗的基础材料，要选择无病无虫的健康红薯块作为种薯，保证材料的品质。
二、消毒1.将红薯块清洗干净，并用清水浸泡3-4小时，然后捞出沥干备用。
2.使用稀释的50%过氧化氢或者0.3%的次氯酸钠水溶液对红薯块进行消毒处理，消毒时间约为20-30分钟。
3.将消毒后的红薯块取出，清水冲洗干净，晾干备用。
三、萌发1.将消毒后的红薯块摆放在通风良好的阴凉处，等待红薯块萌发，一般为3-5天。
2.注意控制湿度和温度，避免过高或太低的温度对红薯萌发产生不良影响。
四、育苗基质准备1.选用适宜的培育基质，一般以腐熟的泥炭、河沙、腐殖土和蛭石粉混合而成，比例为3:3:3:1。
2.将育苗基质装入育苗盘或育苗盆中，压实并进行灭菌处理，保证基质的卫生。
五、播种1.将红薯块切成适当大小的块茎，每块茎留有1-2个芽，然后把块茎均匀地摆放在育苗盘或育苗盆中。
2.盖上适量的育苗基质，保持适当的湿润度，利于红薯的发芽和生长。
六、管理1.控制湿度：保持育苗基质的适当湿度，避免过干或过湿的情况发生。
2.温度管理：控制适宜的温度，保持在20-25摄氏度，有利于红薯幼苗的健康生长。
3.光照管理：提供充足的光照，对幼苗进行适当的日照，促进幼苗的正常生长。
七、病虫害防治1.定期巡查：定期检查育苗情况，及时发现病害虫害情况，采取相应的措施进行防治。
2.病虫害防治：采用生物防治或者低毒性农药喷雾进行防治，保证幼苗的健康生长。
八、移栽当红薯幼苗长到一定高度时，可以进行移栽，将红薯幼苗移植到田间地块中进行生长。
红薯脱毒育苗技术步骤，需要严格控制每个环节的质量，确保红薯幼苗的健康生长。
同时在育苗的过程中，要注重科学管理，合理施肥，及时防治病虫害，以保证红薯的良好生长和高产。
甘薯脱毒苗快繁技术
作物栽培现代农村科技2021年第2期甘薯脱毒苗快繁技术刘洋陶春来崔绍玉石颖靳国旺曹立娜高君慧张丹杜德玉(廊坊市农林科学院河北廊坊065000)甘薯属于无性繁殖作物，在种植过程中容易受到病毒侵染，造成产量降低、品质变差，近年来发现的甘薯复合病毒病(SPVD)更成为甘薯的毁灭性病害，对产量影响巨大，减产幅度高达50%~90%冋?。
1脱毒培养1.1茎尖剥离。
选取生长健硕、茎尖饱满的甘薯植株，取顶芽2cm,用水冲洗2~3遍备用。
于无菌环境中，将幼芽用75%的酒精浸泡30s后，再用2%的次氯酸溶液消毒5min,浸泡于无菌水中备用。
将茎尖置于解剖镜下，用手术刀将茎段上可见叶片剥离，切取0.1~0.3mm的茎尖分生组织，接种到分化培养基(MS培养基+1.0mg/L6BA+ 0.5mg/LIAA)上。
于27°C±1°C、光强3000lx、每天13h光照处理条件下培养，诱导芽的形成。
1.2成苗。
在分化培养基中培养20d,待茎尖膨大变绿后，将其转入MS培养基上培养成苗，30d后将小苗转入MS培养基中继代培养。
1.3病毒检测。
组培苗扩繁后，长至5~6片叶时进行病毒检测。
采用RT-PCR检测［3］或甘薯病毒芯片快速检测方法，针对甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)、甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)、甘薯潜隐病毒(SPLV)、甘薯曲叶病毒(SPLCV)及甘薯病毒G(SPVG)等甘薯主要病毒进行检测。
1.4组培苗扩繁。
选取脱毒成功长至5~7片叶的脱毒苗，在无菌环境中截取2cm左右茎段，每茎段须有2~3个节，转入MS培养基上，于温度27C 土1C、光强30001x、每天光照13h条件下培养，每30~40d扩繁1次。
2移栽驯化选择地势高燥、通风向阳、土壤肥沃疏松，并且3年以上没有种过甘薯且无根腐病、黑斑病、茎线虫病等土传病害的温室进行脱毒苗移栽驯化。
温室上下通风口及入口须安装60目的防虫网，入口要设2道防虫纱门。
无公害甘薯生产脱毒苗的技术
无公害甘薯生产脱毒苗的技术
1.取材选择需要进行脱毒的甘薯品种，大田收获后彻底清洗消毒，排种在干净的消毒过的细沙、沙加土或蛭石中，保持28～32℃左右。
经常浸润，促其发芽，当薯块幼苗长至10～15厘米(2～3周时间)时可切取顶端做茎尖组织培养。
2.消毒切取茎尖2～3厘米长，先用0.1％的洗衣粉搅洗5～10min，然后用自来水冲洗30min。
随后在超净工作台上用70％的酒精浸泡半分钟，再用5％的次氯酸钠溶液消毒10min，无菌蒸馏水清洗3次。
3.切取茎尖在无菌操作条件下，将消毒的茎尖置于体视解剖镜下，用解剖刀削去小叶片，切取附带1～2个叶原基的茎尖，长约0.2～0.4毫米。
4.接种将长约0.2～0.4毫米的茎尖用经酒精灯火焰消毒的枪状镊接种到培养试管中，管内装有0.7％琼脂固化，附加适量激素的MS培养基，然后用铝泊纸盖上管口，置入温度28～30℃、光强3000～4000lx、光照16h的培养室内培养试管苗。
5.转管7～14天，待茎尖分生组织转绿并分化出芽后，转移到不加激素的1/2MS培养基上生长，培养条件为温度26～28℃、光强1000～16001x、光照14h，经2～3个月后茎尖分生组织将长成具有2～3个叶片的完整植株。
经过上述程序培育的幼苗再经过病毒检测、优良株系评选、高级脱毒苗快繁、脱毒原原种繁殖、脱毒原种繁殖、脱毒良种繁
殖等几道工序生产的甘薯苗在普通地块上种植，收获的种薯为脱毒良种，为大面积脱毒用种。
脱毒红薯苗的培育方法
脱毒红薯苗的培育方法
有些种植红薯苗的农户，怕是担心问题红薯不增产，中薯率不提高，利用红薯茎尖培育茎尖苗是解决红薯脱毒的唯一途径。
培养出脱毒苗可增产30%以上中薯率提高10%，出干率提高2%-3%，对红薯黑斑病、黑痣病和其他病害的抵抗性明显增强。
脱毒薯增产潜力大，繁殖快，出芽率高。
在生产中推广前景广阔。
培育脱毒薯苗的技术方法有以下几种：
1、切段快繁：在无菌条件下，将茎尖苗每叶切段一节扦插于1/2ms无激素培养基中，30天左右长成5-7片叶的幼苗。
2、繁微型薯：从无茵苗圃上连柄取下叶片，叶柄端部用杀菌剂溶液消毒，扦插于疏松营养土中，行、株距均为10厘米。
收获期收获微型薯。
3、大棚速繁：将长出5-7片叶的脱毒苗移入防虫大棚中炼苗5-6天，栽入土中，行距30厘米，株距20厘米，勤施肥浇水，20天左右可剪苗扦插春薯。
每隔 10天剪苗1次，后持续剪苗栽夏薯，（6月1日到7月中旬）所育苗可继续在防虫条件下繁殖，或直接繁殖脱毒原种薯。
脱毒红薯温水浸种技术：
1、取开水和凉水若干，按“三开一凉”即3份开水、1份凉水的比例简单对制成温水。
2、用温度计测量水温。
水温达54度即可，用100克甲基托布津或100克多菌灵兑水700倍即可，以达到杀菌效果。
3、把薯种放入缸内，计时。
来回上下翻动几次，使薯种受热均匀。
4、10分钟后将薯种捞出、晾干，大小分类后再进行苗床排薯。
脱毒红心甘薯的工厂化繁育方法与制作流程
本技术涉及一种脱毒红心甘薯的工厂化繁育方法，包括脱毒试管苗、原原种、原种及良种。
方法其具体步骤为：首先将薯块洗净，用50%多菌灵800倍液消毒处理20min，然后进行26℃恒温催芽，待芽长至0.1～0.5cm时，采取每天在26℃时处理16小时，35～40℃时处理8小时的高低温交替处理模式，持续处理30天左右；再结合茎尖脱毒、组培快繁、生根炼苗、水培快繁、薯藤移栽繁育原原种、次年用原原种在带有防虫网的大棚内排薯育苗，移栽大田、田间管理、病虫害防治、霜降前及时收获原种进行贮藏，良种繁育同原种。
本技术能短时间内工厂化扩繁脱毒种苗，降低脱毒种苗的生产成本，最后获得脱毒良种方便农民种植和运输保存。
权利要求书1.一种脱毒红心甘薯的工厂化繁育方法，其特征在于：所述方法的具体步骤为：第一步：脱毒试管苗培育①将薯块进行催芽及热处理将薯块洗净，用50%多菌灵800倍液消毒处理20min，然后选取无病、无腐烂的薯块置于高温灭菌后的珍珠岩中，再放入培养箱中26℃进行催芽，待芽长至0.1～0.5cm时，采取每天在35～40℃下热处理8小时，其余时间恢复至26℃的下交替处理30天；②外植体表面灭菌剂的选择将热处理后茎尖取1～3cm在自来水下冲洗干净并晾干，在超净工作台上用75%酒精浸泡20～30s，再10%的次氯酸钠消毒20min，无菌水冲洗3次后置于无菌滤纸上，吸干水分备用；③组培快繁诱导培养：在超净工作台上，将吸干水分的外植体置于体视镜下剥取长0.2～0.5mm的茎尖分生组织，接种于启动培养基MS+6BA3.0mg/l，诱导再生植株；病毒检测：对再生植株进行编号、培养，经病毒检测，淘汰有病毒的试管苗；增殖生根培养：将确认无病毒的苗剪段接种于MS+IBA0.5mg/l进行增殖和生根同步培养；培养条件：培养温度为26℃，光照2000lx，12-16h/d；第二步：原原种繁育①试管苗炼苗将长至4～5片叶,高5cm左右的生根试管苗连同瓶子一起移出培养室，在大棚里炼苗3～7天；②苗床准备将网棚内的表土除去、整平，用砖砌成宽1.5 m的厢床，腐熟过的农家肥2000kg/亩铺设在厢床底部；网棚内外喷施杀虫杀菌剂；③基质的配置与消毒可用蛭石、珍珠岩、椰糠、泥炭土等1:1:1:1配置基质，也可用松针土+硫酸钾20kg/亩+磷肥25kg/亩混合均匀后填入栽培试管苗的厢面内，铺设厚度为15cm～20cm；再用1%的甲醛浇透基质后，密闭大棚8 d ～10 d，打开棚膜10d～12 d待甲醛气味消散后使用；④试管苗移栽移栽前1d～2d提前浇透厢面水分，翻松、刮平划行距线；于3月～4月气温回升后，将经练苗后的脱毒试管苗用清水将根部培养基洗净，按10*15的株行距移栽到已消毒的大棚的基质里，在生长期内用浓度0.1%尿素+0.2%KH2PO4 或营养液对苗根部进行浇灌，每15天1次，或把试管苗放入漂浮育苗盘中用营养液培养；加盖小拱棚，保温保湿，温度超过30℃时，及时揭开网室大棚的侧膜和小拱棚两头通风透气；⑤剪尖扦插当苗长到15～20cm时，剪尖扦插到已垄好的大棚网室基质上，交足定根水，繁育原原种；⑥原原种收获贮藏霜降前后，原原种长至75～150g时即可收获；收获前15d停止浇水，前一周进行割蔓；在通风干燥的库房内预贮15d～20d后再入库贮藏；贮藏前严格淘汰病、烂、伤、杂及畸形薯；贮藏前用甲醛熏蒸、撒生石灰、喷杀菌剂等方式对地窖进行消毒；贮藏种薯的数量不超过地窖容量的2/3，温度控制在10℃～15℃,相对湿度70%～90%，定期通风；第三步：原种繁育①大棚育苗3月中下旬，将原原种从贮藏窖中取出，剔除烂薯和病薯，用51～54℃温水浸种10分钟，或用70％甲基托布津或用50％多菌灵500液浸种10分钟；整理好厢面后，进行排薯，采用平排，排种时要注意分清头尾，切忌倒排；排种时大小分开，保持上齐下不齐；排种后，撒上细土5～10cm，再用水浇透床土；随即盖上小拱棚封闭升温；②土壤选择选择5年未栽过甘薯，土质肥沃、富含有机质、通透性好、土壤疏松、耕层深厚的黄砂壤地块；③整地施肥深耕细耙，起垄做成深沟高垄；垄距90～110cm，高30～40cm，垄面宽30～40cm，实行大垄双行种植；施肥以基肥为主，每亩施腐熟圈肥1500 kg、硫酸钾肥10～15kg、15:15:15复合肥50kg，硫酸钾肥、复合肥的基追比例为7∶3；④薯藤移栽在4月下旬～5月，当大棚内的薯藤长到40cm以上时，按4～ 5个节间剪藤平插，密度为3500～4500 株/亩；第四步：田间管理移栽后须及时实施查苗补苗；扦插后30～40d 结合追肥进行第1 次中耕，松土保墒;分枝封垄期结合中耕培土，适当追施肥料，促茎叶稳继生长；在8 月上旬对肥力较大的田块用15％多效唑全田喷洒，抑制地上部茎叶生长；第五步：病虫害防治黑斑病的防治是在种植时采用50％多菌灵可湿性粉剂800～1000 倍液浸种苗基部3～5min，或1000～1500 倍液蘸苗基部10min； 600 倍敌百虫加功夫的混合液喷施防治地下害虫；用吡虫啉1000 倍液喷雾防治蚜虫；第六步：原种收获贮藏霜降前后，温度低于15℃度以下时，选择晴天及时收获，在地里分级装框，轻拿轻放，不弄伤薯块及表皮。
甘薯脱毒种薯(苗 )生产技术规程
一、概述甘薯是我国一种重要的粮食作物，广泛种植于南方地区。
甘薯脱毒种薯（苗）生产技术对于甘薯的良种繁育和生产实践具有重要意义。
本文旨在介绍甘薯脱毒种薯（苗）生产技术规程，旨在提高种薯（苗）的品质和产量。
二、选种选用抗病、高产、优质、早熟的良种甘薯品种作为种源，具备以下特点：1. 抗病性强，抗病力强的品种对病毒的抗性较高，能降低病毒传播率。
2. 产量高，优质的种薯要求产量高，既能保证繁殖材料的充足，又能保证后期产薯的丰收。
3. 早熟性强，早熟的品种生长周期短，适应性强，能适应不同的生长环境。
三、病毒的识别和监测1. 通过观察甘薯的叶片和茎部，识别病毒感染的甘薯植株。
通常病毒感染的甘薯叶片会呈现黄化、斑点或变形等现象。
2. 利用酶联免疫吸附试验（ELISA）等技术，对甘薯进行病毒检测。
四、病毒的消毒1. 使用50过氧化氢浸泡法对甘薯进行消毒处理，浸泡时间约为15-20分钟。
2. 选取正常外观、无病斑的甘薯进行消毒处理，确保病毒不会通过种薯传播到下一代。
五、甘薯的扦插和繁殖1. 在甘薯生长盛期，选取生长良好、无病害的茎部或叶片，进行扦插繁殖。
扦插时要确保植株的生长环境湿润、光线充足。
2. 通过扦插繁殖，能够保证种薯的生长环境和品质，有利于良种的延续和繁殖。
六、甘薯的定植和管理1. 选择肥沃土壤，进行定植，保证植株生长的养分供应。
加强对甘薯的病虫害防治，保证植株的健康生长。
2. 定期浇水、施肥，保证甘薯植株的正常生长和产量。
七、甘薯的采收和储藏1. 在甘薯成熟后，进行采收。
采收时要注意不损伤植株，选择正常外观、无病斑的甘薯进行储藏或下一轮的种植。
2. 进行甘薯的储藏管理，确保甘薯的质量和产量。
八、结语甘薯脱毒种薯（苗）生产技术规程是甘薯生产的重要环节，对于良种的繁育和甘薯的高产高效具有重要意义。
通过规范的操作，可以保证甘薯的生产质量和产量，为甘薯产业的健康发展提供有力保障。
希望本文能够对甘薯脱毒种薯（苗）的生产技术有所启发和帮助。
甘薯济黑1号茎尖脱毒与快繁技术研究
甘薯济黑1号茎尖脱毒与快繁技术研究摘要：以甘薯（Ipomoea batatas L.）济黑1号为试材，对济黑1号茎尖脱毒和脱毒苗快繁技术进行研究，并用指示植物法对再生植株无性系进行病毒检测。
结果表明，在薯块出芽30 d内，外植体的处理中采用2%的NaClO溶液处理最好，接种于含有1 mg/L 6-BA的MS培养基中，取材污染率最低，成苗率最高。
快繁过程中普通MS培养基中加入0.02 mg/L IAA对快繁更加有利。
关键词：甘薯（Ipomoea batatas L.）；脱毒；茎尖；快繁甘薯（Ipomoea batatas L.）为无性繁殖作物，是我国四大粮食作物之一。
甘薯体内病毒的积累可造成品种种性退化，品质和产量降低，同时导致甘薯商品率明显降低，对甘薯生产造成严重危害。
国内外迄今尚未育出高抗病毒病的实用甘薯品种，也无防治病毒病的高效农药。
目前利用茎尖分生组织培养脱毒甘薯已成为防治病毒病，提高甘薯产量和品质的首选方法。
茎尖分生组织培养要求技术性强，难度较大，再生植株的成苗受甘薯品种、培养基与激素等多种因素的影响，导致成苗率普遍比较低[1]。
本研究以目前紫薯加工领域中需求越来越大的紫甘薯济黑1号为试材，探索影响甘薯济黑1号茎尖分生组织培养和试管苗快繁的有关因素，为工厂化快速繁育甘薯脱毒苗提供依据。
1 材料与方法1.1 试验材料济黑1号由武汉市农业科学研究所提供，种植于湖北省农业科学院粮食作物研究所甘薯育苗圃；常规药品与试剂均购自北京国药试剂厂。
1.2 试验方法取薯块上萌发的芽苗作为外植体材料，将2～3 cm左右的外植体放入小培养皿中，加入洗洁精反复冲洗，然后用自来水冲洗直至无洗洁精残留。
将培养皿放在超净工作台内，加70%乙醇处理30 s，灭菌水反复冲洗2次以上，2%NaClO 溶液消毒5 min，灭菌水反复冲洗3次后至无残留，备用[4]。
将灭菌后的材料在解剖镜下取带有1～2个叶原基的茎尖分生组织，分别接种于MS基本培养基+1 mg/L 6-BA的诱导再生培养基，植株再生后，分别移植到普通培养基（MS基本培养基+30 g/L蔗糖+9 g/L琼脂、pH 5.8）和再生培养基（MS基本培养基+0.02 mg/L IAA +30 g/L蔗糖+9 g/L琼脂、pH 5.8）进行快繁。
甘薯茎尖脱毒组培快繁技术研究
河南农业2018年第10期（上）LIANG ZHONG LIANG FA良种良法体，经过愈伤诱导、分化、增殖和生根培养，建立甘薯茎尖脱毒组培快繁技术，为生产优良高质量的甘薯组培脱毒苗提供理论依据。
一、材料与方法（一）材料本研究所用的商薯19植株来自郑州师范学院生物工程研究所。
（二）方法1.无菌芽的获得。
选取健康无病斑的商薯块，洗净泥土，用1%高锰酸钾处理15 min，0.5%多菌灵浸泡1 h 后捞出晾干，置于灭菌水中（0.1%的多菌灵）恒温（28 ℃）催芽，相对湿度80%~85%。
薯芽萌发后，于35~40 ℃（8 h/d）下处理将茎尖苗剪切成小的茎段，每个茎段带1节和1片叶，然后用镊子将单茎叶的形态学下端扦插于培养基中，此过程容易污染，镊子及解剖刀应进行频繁消毒。
然后加入生长3组同时进行，编号琼脂9 g/L，pH 值灭菌30 min，所有12 h/d。
可知，外植体以处理A B 效果次之，处理A 和处理B 升汞灭菌的时A。
15天后观察6-BA 和NAA （见图1）；的培养基中，无菌芽伸在不加入激素的MS 培养基中，无菌芽伸长慢，植株高度不正常，芽黄绿色，说明茎尖诱导需要加入一定量的激素，茎尖诱导的培养基最佳选择为A1号（见表2）。
B C 0.1%升汞灭菌4 min 10%次氯酸钠灭菌20 min18.7527.583.5068.7580801522A2A3MS+KT 0.5 mg/LMS茎尖伸长快，高2~3 cm ，芽黄绿色茎尖伸长慢，高1~2 cm ，芽黄绿色92.2585.50河南农业2018年第10期（上）LIANG ZHONG LIANG FA良种良法C8C91/2 mS+NAA 0.3 mg/LMS粗短，平均生根6条细长，平均生根3条90.5067.25（三）苗的增殖0.1%的升汞灭菌6~7 min 为宜，低于6 min 外植体容易发生不同程度的污染，高于7 min 外植体容易死亡，0.1%的升汞灭菌效果好于10%的次氯酸钠。
甘薯快繁脱毒讲解
SPLV侵染的许多甘薯品种不产生明显的叶 部症状，仅产生轻度的斑驳，可经汁液摩擦接 种传播，能侵染旋花科的多种、黎科3种、茄 科9种植物。该病毒的稀释限点为10-2-10-3 ，失 活温度为60-65℃ ，于25℃下体外存活期不超 过24h。
甘薯的经济价值 甘薯是我国的四大粮食作物之一，是一种重要
的粮食、饲料和工业原料作物，具有产量高、营养 丰富、稳产性好等优点。中国的甘薯种植面积达660 万hm2，总产量达1亿t，面积和产量占世界的80%， 居世界首位。
甘薯作为主食除可直接食用鲜薯和薯干外，也 可以与大米、玉米、面等掺在一起，做成煎饼、馒 头、面条等食品。作为副食主要是经过简单加工可 以制成各种食品及食品添加剂。甘薯制成果脯，软 甜可口、物美价廉。甘薯渣可制成酱色、醋等产品。 甘薯罐头在有些国家也很畅销，甘薯还可以制成薯 干、菜肴、味精等。甘薯简单加工、投资小、技术 很容易掌握，很适合农村个体及乡镇企业经营。
病毒的粒子及其微小，直径小于0.lum，只有在 电子显微镜下才可识别，病毒一旦感染植物，就可 以通过植物的维管束和细胞壁上的胞间连丝扩散到 所有的组织和器官。但是植物的茎尖分生组织是由 分生细胞构成，分生区域内无维管束，细胞壁的胞 间连丝也不发达，病毒很难进入，所以生长点往往 不含病毒或含有极少量的病毒，因而采取茎尖分生 组织培养技术就能实现无病毒或去病毒植株的快速 繁殖。
温水钝化病毒处理后，再用50%多菌灵800倍药 液浸泡消毒薯块15min。处理好的薯块一部分置于 塑料盆中，盖上10cm厚消毒好的细河沙，在较洁净 的室内催芽，另一部分植于塑料大棚内发芽。
在30℃左右下催芽，当幼苗长至30cm(3-4周)就 可以剪苗做茎尖培养。
红薯脱毒育苗技术步骤
红薯脱毒育苗技术步骤红薯脱毒育苗技术是一项关键的农业生产工作，其目的是通过科学的方法去除病毒和其他病原体，提高红薯的生长速度和产量。
下面将详细介绍红薯脱毒育苗技术的步骤。
一、材料准备1. 选用健康、无病毒的优良母本植株，切取红薯茎段作为离体材料。
2. 营养基质的准备：可采用含有培养基成分的营养基质，如MS培养基、B5培养基等。
3. 器皿的消毒：使用的器皿、培养瓶、工具等要进行消毒处理，避免外源污染。
二、茎段处理1. 从健康的红薯植株上选择块茎，去皮后切成长约2~3cm的茎段，确保每个茎段都含有一个芽眼。
2. 对切好的茎段进行外源消毒处理，可以使用75%乙醇或者过氧化氢进行消毒，防止外部病原体侵入。
三、培养基上的处理1. 准备好含有培养基成分的培养基质，MS培养基或B5培养基都是常用的营养基质。
2. 将消毒处理过的茎段放入培养瓶中，置于含有植物生长调节剂的培养基质上，促使茎段愈伤组织的形成。
四、愈伤组织的形成1. 将装有茎段的培养瓶放置于恒温培养箱中，保持适宜的光照和温度条件，促进茎段的快速愈伤组织的形成。
2. 可以在培养过程中适当添加生长调节剂，促进愈伤组织的生长和增殖。
五、脱毒处理1. 当愈伤组织生长到一定程度后，可以进行脱毒处理。
常用的方法是利用物理方法或化学方法对愈伤组织进行脱毒处理，如低温冷冻、热处理、药物处理等。
2. 通过脱毒处理可以有效去除愈伤组织中的病毒和其他病原体，确保育苗的健康和无病毒。
六、移栽育苗1. 经过脱毒处理的愈伤组织可以进行移栽育苗。
将愈伤组织移植到富含营养物质的培养基中，让其继续生长和分化。
2. 在移栽育苗的过程中，要注意适宜的温度、湿度和光照条件，保持育苗环境的稳定。
通过以上步骤，我们可以完成红薯脱毒育苗的技术工作，获得无病毒的红薯育苗，为红薯种植和生产提供了健康的种苗基础。
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➢甘薯又叫红薯、地瓜等，为旋花科一年 生植物。我国近年来甘薯种植面积达到 666.7万公顷，占世界的80%以上。但采 用营养繁殖导致甘薯病毒蔓延，致使产 量、质量降低。病毒病成为我国甘薯生 产的最大障碍之一。
➢如：甘薯花椰菜花叶病毒（SPCLV），甘薯羽 状 斑 驳 病 毒 （ SPFMV ） ， 甘 薯 潜 隐 病 毒 （SPLV），甘薯脉花叶病毒（SPVMV），甘薯 轻 斑 驳 病 毒 （ SPMMV ） ， 甘 薯 黄 矮 病 毒 （SPYDV），烟草花叶病毒（TMV），烟草条 纹病毒（TSV），黄瓜花叶病毒（CMV）等。
一个繁殖周期，可使用1/2或1/4MS（大量元 素）培养基进行增殖，尽可能用自然光照， 可用食用白糖代替蔗糖，可用经检验合格 的自来水代替蒸馏水或无离子水。
➢防虫（35-45 目）条件下于无菌基质中栽培、 繁殖：将经炼苗后的脱毒试管苗移至蛭石、 河沙等基质中，待成活后，连根拔出栽入已 消毒的土壤中。缓苗后薯苗迅速生长，之后 约10 d左右剪秧扦插，以苗繁苗。
4. 控制湿、温、光等条件：基质维持良好 通气条件，空气应保持湿润，移栽初期用 塑料膜覆盖，温度控制在25-30 ℃为宜， 并注意遮荫。
5. 适时定植：及时移植于防虫网内已消 毒的土壤中，适当密植，剪秧扦插，以苗繁 苗；北方，冬、春可建立防虫温室，并辅以 取暖升温措施，保证全年育苗（原原种薯 苗）。
（三）脱毒试管苗的大规模移栽技术及管理方法
1. 培育壮苗：降低培养温度、增强光照，株高 3-5 cm为宜。
2. 适当炼苗 ：移苗前，打开瓶塞，在室温和自 然光照下锻炼2-3 d。
3. 精心移栽 ：倒入清水，振摇松动培养 基，洗去根部培养基，移至灭菌的蛭石或 沙土中。苗生根、长出新叶后再移植于土 壤中。
➢一般培养10 d茎尖膨大并转绿，培养20 d 左右茎尖形成2-3 mm的小芽点，并在基部 逐渐形成绿色愈伤组织。 ➢愈伤组织形成后，应将培养物转入无植物 生长物质的MS培养基上，以便小芽生长和 生根。
5. 茎尖苗的初级快繁 ➢当薯苗长至3-6 cm时，将小植株切断进行 短枝扦插，除顶芽一般带1-2 片展开叶外， 其余的切段均是带一节一叶的短枝 ➢切段直插于三角瓶内无植物生长物质的 MS培养基中 ➢2-3 d内，切段基部产生不定根，30 d左右 长成具6-8 片展开叶的试管苗
脱毒的甘薯种苗
2. 材料消毒： ➢流水冲洗数分钟，用滤纸吸干表面水分后 于70%的酒精浸泡10 s，再用0.1%多菌灵 浸泡8 min，再用0.1%升汞消毒10 min，无 菌水冲洗5 次。 ➢或用10%次氯酸钠溶液消毒15 min，无菌 水冲洗3 次。
3. 茎尖剥离 ➢把消毒好的芽放在解剖镜下，无菌剥去 顶 芽 和 腋 芽 上 较 大 的 幼 叶 ， 切 取 0.3-0.5 mm含1-2 个叶原基的茎尖组织，接种在培 养基上。
6. 脱毒鉴定：
➢将同一株号的试管苗分成3部分，一部分 保存、一部分用于病毒鉴定、一部分移入 防虫网室内的无菌基质中培养。
➢病毒病症状学诊断法、指示植物检定法、 电子显微镜检定法、血清学检测法等。
脱毒的甘薯试管苗
（二）甘薯的快繁
1、脱毒苗的快繁： ➢试管切段快繁：试管繁殖脱毒苗一般30-40 d为
2、原原种的繁育 ：在防虫温室或网室得无病毒 土壤上种脱毒苗，让其结薯，即为原原种薯 。 3、原种的繁育 ：以原原种为种植材料在防虫网 室的无病毒土壤中栽种，结薯即为原种。 4、种薯的繁育 ：种薯可分为不同的等级，一级 种薯的生产要求：在隔离地块上栽培原种，地 块四周500 m以内的范围内不栽甘薯，种薯每种 一年降一级。 一般2-3年就应更换新的脱毒种苗、 种薯。
6. 严防病虫害：定期喷洒农药，防治蚜虫 及地下害虫。
思考题：
１、甘薯脱毒的过程？ ２、甘MS+0.1-0.2 mg/L IAA+0.1-0.2 mg/L 6-BA+3% 蔗糖，补加0.05 mg/L GA3 （促茎尖生长和成 苗），pH5.8-6.0，每支试管1/3的培养基，接种1 个茎尖。 ➢培养条件：温度25-28 ℃，光照14 h/d ，15002000 lx。