第9章常见植物的脱毒与快速繁殖技术案例
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常见植物的脱毒与快速繁殖技术
甘蔗脱毒
甘蔗脱毒是指通过一定的技术手段去除甘蔗植株体内病毒 的过程，使其恢复健康生长。常用的脱毒方法包括热处理、 化学处理和微茎尖培养等。
快速繁殖
脱毒后的甘蔗植株可以通过组织培养技术进行快速繁殖， 在人工控制的条件下，利用幼嫩的茎尖或根尖培养出大量 的无病毒植株。
案例效果
通过甘蔗脱毒与快速繁殖技术，可以快速获得大量无病毒 的甘蔗种苗，提高甘蔗产量和品质，增加农民收入。
常见植物的脱毒与快速繁殖技术
目录
• 植物脱毒技术 • 植物快速繁殖技术 • 植物脱毒与快速繁殖的应用 • 植物脱毒与快速繁殖的前景与挑战 • 案例分析
01 植物脱毒技术
热处理脱毒
总结词
通过加热植物组织，使病毒粒子失活或抑制其复制，从而达到脱毒目的。
详细描述
热处理脱毒通常是将植物组织暴露在高温下，如热水或热蒸汽，使病毒粒子失 去活性。这种方法适用于多种植物，尤其是难以通过其他方法脱毒的植物。
在园艺上的应用
花卉产业的发展
01
通过植物脱毒与快速繁殖技术，可以快速大量繁殖各类花卉苗
木，满足市场需求，促进花卉产业的发展。
园林绿化的优化
02
无病毒种苗生长健壮，抗性强，能够改善城市绿化效果，提高
园林景观品质。
切花和盆栽植物的生产
03
利用植物脱毒与快速繁殖技术，可以大量生产优质切花和盆栽
植物，丰富人们的家居生活。
马铃薯脱毒与快速繁殖案例
01 02
马铃薯脱毒
马铃薯脱毒是指通过一定的技术手段去除马铃薯植株体内病毒的过程， 使其恢复健康生长。常用的脱毒方法包括热处理、化学处理和微茎尖培 养等。
快速繁殖
脱毒后的马铃薯植株可以通过组织培养技术进行快速繁殖，在人工控制 的条件下，利用幼嫩的茎尖或根尖培养出大量的无病毒植株。
《植物种苗脱毒技术》 学历案
《植物种苗脱毒技术》学历案一、学习主题植物种苗脱毒技术二、学习目标1、了解植物病毒的危害及传播方式。
2、掌握植物种苗脱毒的基本原理和常见方法。
3、学会运用植物种苗脱毒技术解决实际问题。
三、学习资源1、教材：《植物病理学》、《植物生物技术》。
2、网络资源：相关的科普文章、视频资料。
四、学习过程（一）植物病毒的危害及传播1、植物病毒的危害植物病毒是一类能够引起植物病害的病原微生物。
它们会导致植物生长发育异常，如叶片变色、畸形、植株矮化、果实品质下降等，严重时甚至会造成植株死亡，给农业生产带来巨大的损失。
例如，烟草花叶病毒会使烟草叶片出现黄绿相间的斑驳，降低烟叶的产量和质量；马铃薯 Y 病毒会导致马铃薯块茎变小、畸形，影响马铃薯的产量和商品价值。
2、植物病毒的传播方式植物病毒的传播方式多种多样，主要包括以下几种：（1）介体传播：昆虫、螨类、线虫等生物介体可以携带病毒在植物之间传播。
例如，蚜虫可以传播多种植物病毒，如黄瓜花叶病毒、桃蚜传花叶病毒等。
（2）汁液接触传播：在农事操作过程中，如修剪、嫁接、移栽等，植物的汁液相互接触，容易导致病毒传播。
（3）种子和花粉传播：有些病毒可以通过种子或花粉进行传播。
例如，大麦条纹花叶病毒可以通过种子传播，玉米矮花叶病毒可以通过花粉传播。
（4）土壤传播：某些病毒可以在土壤中的病残体上存活，并通过土壤中的线虫、真菌等传播给健康植株。
（二）植物种苗脱毒的原理植物种苗脱毒的基本原理是利用植物细胞的全能性，即植物的每个细胞都具有发育成完整植株的潜能。
通过一定的技术手段，去除植物体内的病毒，培养出无病毒的种苗。
由于病毒在植物体内的分布不均匀，在根尖和茎尖等分生组织区域，病毒的浓度相对较低或不存在。
这是因为分生组织细胞分裂速度快，病毒在细胞内的繁殖速度跟不上细胞分裂的速度，而且分生组织区域缺乏维管组织，病毒难以传播。
因此，通过切取植物的茎尖或根尖进行培养，可以获得无病毒的种苗。
（三）植物种苗脱毒的方法1、热处理脱毒热处理脱毒是利用病毒和寄主植物对高温忍耐性的差异，将感染病毒的植物材料在高于正常温度的环境中处理一定时间，使病毒失去活性或钝化，而植物材料仍然保持活力，从而达到脱毒的目的。
马铃薯的脱毒培养快繁PPT课件
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马铃薯的脱毒试管苗
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再将其转入生长箱中，每天光照16 h， 光照强度3000-4000 lx。2 周后去掉顶芽， 以促进腋芽的生长。当腋芽长到1-2 cm时， 折下腋生枝，用于消毒、接种。
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（2）消毒： 水洗干净，无菌条件下先用70%的酒精
浸组织15-20 s，再用2%次氯酸钠溶液浸泡 4-5 min，然后用无菌水冲洗3 次。
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（3）接种： 把芽置于解剖镜下，左手用一把镊子将
芽按住，右手用解剖针将叶片和叶原基剥 掉，当形似一个闪亮半圆球的顶端分生组 织充分暴露出来后，用锋利的长颈刀片将 分生组织切下来，上面可带/也可不带叶原 基，再用刀片将其接种到培养基上。
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（4）培养基： MS 培 养 基 （ 提 高 NH4+ 、 K+ 浓 度 ， 利 于
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4、微型种薯的扩大繁殖 采用试管、温室、底畦生产的微型薯原原 种，可进一步通过塑料大棚或大田在春秋 两季扩大繁殖，以提供足够大田使用的优 良种薯。
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思考题：
１、对马铃薯脱毒苗的培养大致分几个 阶段？各阶段是怎样操作的？ ２、马铃薯的生物学习性有哪些？
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第26页/共27页
感谢您的观看！
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（二）微型薯生产技术 1、试管生产 （1）单茎节扩大繁殖：由无性繁殖的
试管苗中获得茎切段（每个茎段带1-2个 叶 片 或 腋 芽 ） ， 每 个 三 角 瓶 里 接 4-5 个 茎 段，进行培养。
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（1）单茎节扩大繁殖： 培养条件：22 ℃，16 h补充光照1000 lx
马铃薯的脱毒试管苗
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再将其转入生长箱中，每天光照16 h， 光照强度3000-4000 lx。2 周后去掉顶芽， 以促进腋芽的生长。当腋芽长到1-2 cm时， 折下腋生枝，用于消毒、接种。
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（2）消毒： 水洗干净，无菌条件下先用70%的酒精
浸组织15-20 s，再用2%次氯酸钠溶液浸泡 4-5 min，然后用无菌水冲洗3 次。
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（3）接种： 把芽置于解剖镜下，左手用一把镊子将
芽按住，右手用解剖针将叶片和叶原基剥 掉，当形似一个闪亮半圆球的顶端分生组 织充分暴露出来后，用锋利的长颈刀片将 分生组织切下来，上面可带/也可不带叶原 基，再用刀片将其接种到培养基上。
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（4）培养基： MS 培 养 基 （ 提 高 NH4+ 、 K+ 浓 度 ， 利 于
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4、微型种薯的扩大繁殖 采用试管、温室、底畦生产的微型薯原原 种，可进一步通过塑料大棚或大田在春秋 两季扩大繁殖，以提供足够大田使用的优 良种薯。
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思考题：
１、对马铃薯脱毒苗的培养大致分几个 阶段？各阶段是怎样操作的？ ２、马铃薯的生物学习性有哪些？
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（二）微型薯生产技术 1、试管生产 （1）单茎节扩大繁殖：由无性繁殖的
试管苗中获得茎切段（每个茎段带1-2个 叶 片 或 腋 芽 ） ， 每 个 三 角 瓶 里 接 4-5 个 茎 段，进行培养。
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（1）单茎节扩大繁殖： 培养条件：22 ℃，16 h补充光照1000 lx
植物快速繁殖和脱毒
浸蘸法是在网架薄膜上加1滴重蒸馏水，将 病株叶片或幼芽的新鲜切口在水滴中 浸几秒钟，吸去多余水分，再进行染 色，然后放到电镜下观察。
7.4.5 分子检测法
如RT-PCR（反转录PCR）法：将待测样 品的总RNA与cDNA合成的试剂盒进行反 应，合成cDNA，然后利用病毒DNA特有 的序列设计引物进行PCR反应，即可知道 在寄主中是否有病毒基因的存在及表达。
本章内容主要掌握以下几点问题： 1.掌握植物快速繁殖的途径和方法。 2.掌握植物快速繁殖中茎尖培养脱毒原理和步骤。 3.知道茎尖以外其他途径脱毒的优缺点。 4.理解脱毒苗的常用鉴定方法原理及优缺点，并
学会操作技能。 5.熟悉脱毒后防病毒再感染措施。
作业题
1、植物快速无性繁殖的概念、特点和程序？ 2、茎尖分生组织培养的目的是什么？ 3、简述茎尖分生组织培养的方法。 4、脱毒苗的鉴定方法有哪些？各有何优缺点？
7.4.3 抗血清鉴定法
serologic test
原理：
抗原
当动物被病毒感染或人工注射异体蛋白质时
一种特异性丙种球蛋白称为免疫球蛋白
抗体
抗体在特殊细胞内形成，进入血液存在于血清和体液内。 这种含有特异性“抗体”的血清称为“抗血清”。
方法:
如玻璃片凝集法：在清洁玻璃片的一端，用毛细管 滴加5滴稀“抗血清”，另一端滴加等量对照血清。 然后各加滴被检植物压榨出的原汁液两滴。用玻璃 棒搅匀，在常温下静置20－50min，然后在40－ 60倍显微镜下观察。带病毒的叶绿体发生典型的凝 集现象。
③ 茎尖越小对培养基的要求越高，成功率越低
茎尖越小，茎尖内营养、水分越难长时间 维持。因此对培养基营养组成，渗透压、酸碱 度、激素种类及浓度要求也就越高。茎尖越小， 剥离技术要求越高。
7.4.5 分子检测法
如RT-PCR（反转录PCR）法：将待测样 品的总RNA与cDNA合成的试剂盒进行反 应，合成cDNA，然后利用病毒DNA特有 的序列设计引物进行PCR反应，即可知道 在寄主中是否有病毒基因的存在及表达。
本章内容主要掌握以下几点问题： 1.掌握植物快速繁殖的途径和方法。 2.掌握植物快速繁殖中茎尖培养脱毒原理和步骤。 3.知道茎尖以外其他途径脱毒的优缺点。 4.理解脱毒苗的常用鉴定方法原理及优缺点，并
学会操作技能。 5.熟悉脱毒后防病毒再感染措施。
作业题
1、植物快速无性繁殖的概念、特点和程序？ 2、茎尖分生组织培养的目的是什么？ 3、简述茎尖分生组织培养的方法。 4、脱毒苗的鉴定方法有哪些？各有何优缺点？
7.4.3 抗血清鉴定法
serologic test
原理：
抗原
当动物被病毒感染或人工注射异体蛋白质时
一种特异性丙种球蛋白称为免疫球蛋白
抗体
抗体在特殊细胞内形成，进入血液存在于血清和体液内。 这种含有特异性“抗体”的血清称为“抗血清”。
方法:
如玻璃片凝集法：在清洁玻璃片的一端，用毛细管 滴加5滴稀“抗血清”，另一端滴加等量对照血清。 然后各加滴被检植物压榨出的原汁液两滴。用玻璃 棒搅匀，在常温下静置20－50min，然后在40－ 60倍显微镜下观察。带病毒的叶绿体发生典型的凝 集现象。
③ 茎尖越小对培养基的要求越高，成功率越低
茎尖越小，茎尖内营养、水分越难长时间 维持。因此对培养基营养组成，渗透压、酸碱 度、激素种类及浓度要求也就越高。茎尖越小， 剥离技术要求越高。
茎尖脱毒与快繁概论
• 7、病毒检测。主要用ELISA或指示植物方 法鉴定。
• 8、在无菌条件下，将试管苗切割成带一腋 芽的茎段，接种在培养基：MS+6-BA 1.0+ 蔗糖3%+琼脂0.6%上成苗和快繁。之后进 行炼苗移栽或进行试管微薯的培育。
• 作业 • 1、茎尖培养为什么能脱出植物病毒？ • 2、常用的病毒植株的检测方法有哪些？ • 3、如何提高茎尖培养脱毒效果？
• 2、待芽长至2cm时，将发芽块茎放入37℃ 的光照培养箱，光照时间12h/d，处理时间 28d左右。
• 3、剪取经过热处理的发芽块茎的茎尖 1~2cm，自来水冲洗0.5h，剥去外面的叶 片。在超净工作台上进行严格的消毒。
• 4、用75%的酒精浸15s，无菌水冲洗2次，再用 0.1%的升汞浸泡8~10min，无菌水冲洗3~5次， 每次冲5min，放在灭过菌的培养皿中待用。
• [仪器与用具]
• 光照培养箱、超净工作台、镊子、酒精灯、 棉球、三角瓶、培养皿、解剖刀、解剖针、 解剖镜
• [材料与试剂]
• 1材料：马铃薯块茎、或大蒜鳞茎，
• 2试剂MS各种母液、6-BA、NAA、GA3、 酒精、升汞、蔗糖。
• [方法步骤]
• 1、将表面光滑的马铃薯切块，埋在湿润的 沙土中在室温下催芽。
• 炼苗移栽
• （1） 、当试管苗长高到3~4cm，具有5~7个浓绿 色的小叶时进行移栽。在移栽前4~5d开盖炼苗， 然后取出苗，洗净根部培养基，将其移入珍珠岩 基质。移栽时用镊子将基质压割成1~2cm深的槽 沟，覆上基质，用水浇湿，以便根部与土壤密接， 易于成活。保持较高空气湿度，土壤不要过湿， 光照应当充足，气温不宜超过30℃。
• （5） 20d后，培养温度升高。
• [思考题] • 1、茎尖培养为什么能脱出植物病毒？ • 2、常用的病毒植株的检测方法有哪些？ • 3、影响微薯诱导的因素有哪些
• 8、在无菌条件下，将试管苗切割成带一腋 芽的茎段，接种在培养基：MS+6-BA 1.0+ 蔗糖3%+琼脂0.6%上成苗和快繁。之后进 行炼苗移栽或进行试管微薯的培育。
• 作业 • 1、茎尖培养为什么能脱出植物病毒？ • 2、常用的病毒植株的检测方法有哪些？ • 3、如何提高茎尖培养脱毒效果？
• 2、待芽长至2cm时，将发芽块茎放入37℃ 的光照培养箱，光照时间12h/d，处理时间 28d左右。
• 3、剪取经过热处理的发芽块茎的茎尖 1~2cm，自来水冲洗0.5h，剥去外面的叶 片。在超净工作台上进行严格的消毒。
• 4、用75%的酒精浸15s，无菌水冲洗2次，再用 0.1%的升汞浸泡8~10min，无菌水冲洗3~5次， 每次冲5min，放在灭过菌的培养皿中待用。
• [仪器与用具]
• 光照培养箱、超净工作台、镊子、酒精灯、 棉球、三角瓶、培养皿、解剖刀、解剖针、 解剖镜
• [材料与试剂]
• 1材料：马铃薯块茎、或大蒜鳞茎，
• 2试剂MS各种母液、6-BA、NAA、GA3、 酒精、升汞、蔗糖。
• [方法步骤]
• 1、将表面光滑的马铃薯切块，埋在湿润的 沙土中在室温下催芽。
• 炼苗移栽
• （1） 、当试管苗长高到3~4cm，具有5~7个浓绿 色的小叶时进行移栽。在移栽前4~5d开盖炼苗， 然后取出苗，洗净根部培养基，将其移入珍珠岩 基质。移栽时用镊子将基质压割成1~2cm深的槽 沟，覆上基质，用水浇湿，以便根部与土壤密接， 易于成活。保持较高空气湿度，土壤不要过湿， 光照应当充足，气温不宜超过30℃。
• （5） 20d后，培养温度升高。
• [思考题] • 1、茎尖培养为什么能脱出植物病毒？ • 2、常用的病毒植株的检测方法有哪些？ • 3、影响微薯诱导的因素有哪些
组织培养常见植物脱毒与快繁
为微型薯 不带病毒;增产效果一般在40%以上 1 试管生产 微型薯一般只有1～5g 用组织培养
方法生产微型薯分以下两个步骤： 1单茎段扩大繁殖 2微型薯的诱导
2 温室多层架盘工厂化生产 3 低网畦生产
二 甘薯的脱毒与快繁
一茎尖培养 1 茎尖培养脱毒
取高产 优质母株枝条;切成带1芽小段 自来水 流水冲洗; 70%酒精10s; 0 1%的升汞10min; 无菌水4～5次;或2%次氯酸钠5min;无菌水3～ 4次 2 茎尖剥离和培养 解剖镜下剥去芽上较大幼叶;切取0 3～0 5mm含1～2个叶原基的茎尖分生组织;迅速接 种到制备好的培养基上
原 球 茎 的 增 殖
3 苗的分化培养 兰科植物与其他草本花卉不同;它不易受生
长调节物质的影响;一般是将原球茎转入离子浓 度较低的培养基中;加入一些如椰子汁等天然提 取物质;效果会更好;原球茎很快再生成植株
lcm高的幼苗转移到壮苗培养基上培养3～6 个月;使其长3～4片叶 3～4条根 3～10cm高; 可移栽在泥炭和蛭石中;保湿弱光施肥
所结薯块即为生产用种薯良种
红薯原原种炼苗
第二节 果树脱毒快繁
利用组织培养方法繁殖果树植株具有占地面积 小;繁殖周期短;全年都能进行繁殖;繁殖系数高等特 点 还可以消除果树的某些病毒病;适应果树向品种 更新快 矮化密植以及无病毒栽培方向发展的需要
一 草莓 一草莓离体快繁技术 1 外植体 6～7月份匍匐茎15～20cm长时取材 2 培养基 初代MS+6BA0 5mg/L+GA30 1mg/L+IBA
0 2mg/L 增殖MS+6BA0 5～1 0mg/L 3 生根和驯化 1/2MS+IBA0 2～1 0mg/L 根2～3cm时炼苗;一周后发新根;四周后可移栽
植物脱毒快繁技术
原理：由于病毒是由蛋白质和核酸组成的，是一种较 好的抗原。将病毒给动物注射后产生抗体。抗原和抗体结 合产生血清反应。抗原：病毒。抗体：是指生物体在外来 抗原的刺激下产生的一种免疫球蛋白，主要存在于血清中， 含抗体的血清称为抗血清。
4、电子显微镜检查法
直接观察有无病毒存在，并根据病毒的大小、形状和 结构等来判断病毒种类。
繁。
植物脱毒快繁技术
注意： 1、培养变异的产生，应及时去除 2、脱毒苗并非永远是无毒苗，由于昆虫等的传播，
不免会再感染病毒，所以要经常脱毒，一般脱毒苗 用1－3代 。
脱毒试管苗为原原种－－繁殖一代为原种－－原 1代－－原2代
植物脱毒快繁技术
枫树快繁图示
植物脱毒快繁技术
枫树快繁图示
植物脱毒快繁技术
植物脱毒快繁技术
2、茎尖微体嫁接
木本植物茎尖培养难以生根成植株，将实生苗砧 木在人工培养基上种植培育，再从成年无病树枝上切 取0.4-1mm茎尖，在砧木上进行试管微体嫁接，以获 得无病毒幼苗。
植物脱毒快繁技术
3、化学疗法脱毒 病毒抑制剂
植物脱毒快繁技术
三、脱毒快繁材料的选择
应注意以下几点： 1）品种要可靠 2）要选择经当地栽培确认的高产优质的品种来作
植物脱毒快繁技术
（四）其它途径脱毒
1、愈伤组织培养脱毒 2、茎尖微体嫁接 3、化学疗法脱毒
植物脱毒快繁技术
1、愈伤组织培养脱毒
愈伤组织细胞带病原菌不均一，部分细胞不带病 毒，由这些细胞再生的植株是无病毒的。多次继代的 愈伤组织中病毒含量下降，甚至检测不出病毒。
植物脱毒快繁技术
愈伤组织的某些细胞不带病毒原因： 1、病毒的复制速度赶不上细胞的增殖速度； 2、有些细胞通过突变获得了抗病毒的抗性。 愈伤组织脱毒的缺陷是植株遗传性不稳定，可 能会产生变异植株。
4、电子显微镜检查法
直接观察有无病毒存在，并根据病毒的大小、形状和 结构等来判断病毒种类。
繁。
植物脱毒快繁技术
注意： 1、培养变异的产生，应及时去除 2、脱毒苗并非永远是无毒苗，由于昆虫等的传播，
不免会再感染病毒，所以要经常脱毒，一般脱毒苗 用1－3代 。
脱毒试管苗为原原种－－繁殖一代为原种－－原 1代－－原2代
植物脱毒快繁技术
枫树快繁图示
植物脱毒快繁技术
枫树快繁图示
植物脱毒快繁技术
植物脱毒快繁技术
2、茎尖微体嫁接
木本植物茎尖培养难以生根成植株，将实生苗砧 木在人工培养基上种植培育，再从成年无病树枝上切 取0.4-1mm茎尖，在砧木上进行试管微体嫁接，以获 得无病毒幼苗。
植物脱毒快繁技术
3、化学疗法脱毒 病毒抑制剂
植物脱毒快繁技术
三、脱毒快繁材料的选择
应注意以下几点： 1）品种要可靠 2）要选择经当地栽培确认的高产优质的品种来作
植物脱毒快繁技术
（四）其它途径脱毒
1、愈伤组织培养脱毒 2、茎尖微体嫁接 3、化学疗法脱毒
植物脱毒快繁技术
1、愈伤组织培养脱毒
愈伤组织细胞带病原菌不均一，部分细胞不带病 毒，由这些细胞再生的植株是无病毒的。多次继代的 愈伤组织中病毒含量下降，甚至检测不出病毒。
植物脱毒快繁技术
愈伤组织的某些细胞不带病毒原因： 1、病毒的复制速度赶不上细胞的增殖速度； 2、有些细胞通过突变获得了抗病毒的抗性。 愈伤组织脱毒的缺陷是植株遗传性不稳定，可 能会产生变异植株。
植物种苗脱毒技术ppt 中图版
植物种苗脱毒技术
病毒对寄主植物可造成毁灭性危害，导 致大幅度减产，甚至全株死亡。 潜隐性病毒侵染植物造成症状不明显的 慢性危害，不易被发现，尤其危险。 国内外解决作物病虫害的有效途径是培 育无病毒苗，实施农作物无病毒化栽培。
无病毒苗
是指不含该种植物的主要危害病毒，即经 检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的 苗木。
指 示 植 物
接 穗
嫁接后 的植物
3、电子显微镜鉴定法
用电子显微镜直接观察经脱毒 培养的叶片，检查是否有病毒粒子 存在，还可测量病毒颗粒的大小、 形状和结构。
4、抗血清鉴定法
利用抗原与抗体特异反应的特性，用 已知病毒的抗血清来鉴定未知病毒的种类， 其中酶联免役吸附反应（ELISA）是常用 的一种方法。
4、节约耕地，提高农产品的商品率
块根、块茎、鳞茎为繁殖器官的作 物，每年产品用留作种的比例：
◆大蒜：留种量占产量的五到八分之一 ◆马铃薯：留种量占产量的十分之一 ◆贝母：留种量占产量的三分之一
5、便于运输
常规的块根、块茎等，体细胞大、 含水量高，包装、运输十分不便。 离体繁殖的种苗体积小，易携带， 运输十分方便。
2、病毒的危害
已发现的植物病毒超过500种，严重危 害农业生产。
草莓病毒曾使日本草莓产量严重下降， 品质退化。
二、植物脱毒的意义
1、能够有效地保持优良品种的特性
任何一种优良品种均需有一个忠 实地保存其遗传性状的繁殖方法。
离体无性繁殖可以很好地 保持品种的优良特性，是异交 作物和无性繁殖品种繁育的理 想途径。
用于自然繁殖极易感染病毒的 植物，如马铃薯、甘薯、甘蔗、香 蕉、石竹、百合等
用于有性繁殖变异范围大而自然 条件下又不易无性繁殖的植物，如非 洲菊、花竹、紫罗兰等
病毒对寄主植物可造成毁灭性危害，导 致大幅度减产，甚至全株死亡。 潜隐性病毒侵染植物造成症状不明显的 慢性危害，不易被发现，尤其危险。 国内外解决作物病虫害的有效途径是培 育无病毒苗，实施农作物无病毒化栽培。
无病毒苗
是指不含该种植物的主要危害病毒，即经 检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的 苗木。
指 示 植 物
接 穗
嫁接后 的植物
3、电子显微镜鉴定法
用电子显微镜直接观察经脱毒 培养的叶片，检查是否有病毒粒子 存在，还可测量病毒颗粒的大小、 形状和结构。
4、抗血清鉴定法
利用抗原与抗体特异反应的特性，用 已知病毒的抗血清来鉴定未知病毒的种类， 其中酶联免役吸附反应（ELISA）是常用 的一种方法。
4、节约耕地，提高农产品的商品率
块根、块茎、鳞茎为繁殖器官的作 物，每年产品用留作种的比例：
◆大蒜：留种量占产量的五到八分之一 ◆马铃薯：留种量占产量的十分之一 ◆贝母：留种量占产量的三分之一
5、便于运输
常规的块根、块茎等，体细胞大、 含水量高，包装、运输十分不便。 离体繁殖的种苗体积小，易携带， 运输十分方便。
2、病毒的危害
已发现的植物病毒超过500种，严重危 害农业生产。
草莓病毒曾使日本草莓产量严重下降， 品质退化。
二、植物脱毒的意义
1、能够有效地保持优良品种的特性
任何一种优良品种均需有一个忠 实地保存其遗传性状的繁殖方法。
离体无性繁殖可以很好地 保持品种的优良特性，是异交 作物和无性繁殖品种繁育的理 想途径。
用于自然繁殖极易感染病毒的 植物，如马铃薯、甘薯、甘蔗、香 蕉、石竹、百合等
用于有性繁殖变异范围大而自然 条件下又不易无性繁殖的植物，如非 洲菊、花竹、紫罗兰等
《植物组织培养技术》植物脱毒与快繁
《植物组织培养技术》植物脱毒与快繁模块介绍本模块针对组培研发岗位的工作职责与任职要求，编排了试验方案设计和数据调查与分析二个实训项目，主要内容包括组培的基本理论、提高组培苗遗传稳定性的措施、组培试验方案的制订等，重点阐述了组培快繁的程序与类型、组培研究的技术路线与试验设计方法、组培快繁的常见问题、组培数据调查与分析方法等。
在理论学习的同时，开展项目实践活动，培养学生会设计组培试验、撰写试验方案、编制组培试验观察表和技术指标统计分析，具备组培研发工所要求的理论知识、技能水平和相应的职业素质。
模块结构设计见表1。
表1 模块结构设计项目1 蔬菜组培与快繁/马铃薯脱毒与快繁一、学习目标（一）终极目标掌握植物脱毒与鉴定技术，培育马铃薯等蔬菜脱毒、快繁与脱毒苗的鉴定技术。
（二）促成目标1.熟悉植物脱毒的意义、原理与方法，能够运用脱毒技术培育马铃薯等蔬菜脱毒苗；2.掌握脱毒苗鉴定技术，清楚马铃薯等蔬菜脱毒苗鉴定方法；3.清楚马铃薯等蔬菜脱毒苗的保存与无病毒苗繁育体系、方法；4.提高操作水平和分析解决问题能力，培养团队精神、敬业精神、责任意识。
二、学习内容1．蔬菜组织培养概况；2.马铃薯组培概况；3.马铃薯脱毒种薯繁育流程；4.脱毒苗的优势(含病毒的种类、传染途径、表现症状与危害)；5.植物脱毒技术；6.脱毒苗鉴定技术；7.马铃薯脱毒苗培育与鉴定；8.马铃薯脱毒苗快繁与微型薯诱导；9.马铃薯等蔬菜脱毒苗的保存与繁殖；10.甘薯脱毒与快繁技术要点（拓展）；11.大蒜脱毒与快繁技术要点（拓展）；12.紫背天葵组培与快繁技术（拓展）；13.结球甘蓝组培与快繁技术（拓展）。
三、知识点1.蔬菜组织培养概况；2.马铃薯组培概况；3.马铃薯脱毒种薯繁育流程；4.脱毒苗的含义、实质与培育优势(含病毒的种类、传染途径、表现症状与危害)；5.植物脱毒技术（热处理、微茎尖培养、其它脱毒方法）；6.脱毒苗鉴定技术（指示植物法、嫁接法等）；7.马铃薯脱毒苗培育与鉴定；8.马铃薯脱毒苗快繁与微型薯诱导（实验室诱导、温室生产）。
常见植物的脱毒与快速繁殖技术
第二节果树脱毒与快繁（二） Nhomakorabea草莓脱毒苗的培养
(2) 继代培养：把芽丛割成芽丛小块，转入MS 培养基中，令其长大 。并进行分株，扩大繁殖。 (3) 生根培养：在培养基中加入NAA1或IBA1。
1、热处理脱毒 将草莓植株在40～41℃温度下处理4～6周。
2、微茎尖脱毒 （1）、初代培养 ：取草莓顶芽，用自来水流水
冲洗2～4h，然后剥去外层叶片，消毒， 切取 0.2mm的茎尖。接入MS + BA0.25 + NAA0.25 培养基中。培养条件为22～25℃，日照16～ 18h光强3000lx。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
1．脱毒种薯生产程序
微茎尖组织培养-----诱导出苗-----联免疫 吸附试验法或指示植物方法鉴定-----脱毒试 管基础苗。
固体、液体培养基相结合-----扩繁基础 苗----在防虫网室栽植或封闭温室扦插----原原种（或称脱毒小薯）。原原种----原种 1代----原种2代----良种1代-----良种2代。
1、病毒种类：苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒和 苹果茎沟病毒等 。
2、微尖嫁接脱毒：砧木：去顶的离体培养幼苗， 接穗：试管培养的无毒新稍；嫁接后培养生叶， 移栽即可。
3、热处理脱毒：把植株置于38 ℃下25-50天。 4、茎尖培养脱毒：把0.1-0.3mm的茎尖离体培养。 5、脱毒苗的鉴定：抗血清法，电子 显微镜法，
第9章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术
第二节 果树的脱毒与快繁
葡萄
苹果
草莓
第二节果树脱毒与快繁
一、苹果的脱毒与快繁
（一）、苹果的形态特性和生物学特性
苹果（Malus pumila）属落叶乔木，树木高大。果实为 假果。 苹果喜凉；喜光；适合在微酸性到中性土壤中栽种。
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5.1 植物快速繁殖技术
• 概念：所谓快速繁殖，就是将外植体在人工培养基和合适 的条件下进行培养，以在短期内获得大量遗传性一致的个 体的方法。
• 特点：繁殖速度快；使用材料少，生产效率高，省时省工； 可大量繁殖脱毒苗；利于种质资源的保存和交换等；节约 空间，不受季节限制，有利于植物的工厂化生产；在无菌 条件下进行，不受病虫害侵害。
移栽和幼苗的管理
• 从试管中取出发根的小苗，用自来水洗掉根部 粘着的培养基，要全部除去，以防残留培养基 滋生杂菌。但要轻轻除去，应避免造成伤根。 栽植时用一个筷子粗的竹签在基质中插一小孔， 然后将小苗插入，注意幼苗较嫩，防止弄伤， 栽后把苗周围基质压实，栽前基质要浇透水。 栽后轻浇薄水。再将苗移入高湿度的环境中。 搭设小拱棚，以减少水分的蒸发，保证空气湿
减轻褐变现象发生的方法
➢ ①选择合适的外植体 一般来说，最好选择生长处于旺 盛的外植体，这样可以使褐变现象明显减轻。
➢ ②合适的培养条件 无机盐成分、植物生长物质水平、 适宜温度等均可以减轻材料的褐变现象。
➢ ③使用抗氧化剂 在培养基中，使用半胱氨酸、抗坏血 酸、PVP等抗氧化剂能够减轻很多外植体的褐变现象。 另外，使用0.1%-0.5%的活性炭对防止褐变也有较为 明显的效果。
• （2）玻璃化现象
定义：当植物材料不断地进行离体繁殖时， 有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水 渍状，这种现象通常称为玻璃化。
特点：外观形态有明显异常；体内含水量、 矿质元素、糖类、纤维、蛋白质等基本成分 含量有变化，一些酶活和内源激素含量有变 化。
• 影响玻璃化苗发生的因素：
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5.1 植物快速繁殖技术
• 概念：所谓快速繁殖，就是将外植体在人工培养基和合适 的条件下进行培养，以在短期内获得大量遗传性一致的个 体的方法。
• 特点：繁殖速度快；使用材料少，生产效率高，省时省工； 可大量繁殖脱毒苗；利于种质资源的保存和交换等；节约 空间，不受季节限制，有利于植物的工厂化生产；在无菌 条件下进行，不受病虫害侵害。
移栽和幼苗的管理
• 从试管中取出发根的小苗，用自来水洗掉根部 粘着的培养基，要全部除去，以防残留培养基 滋生杂菌。但要轻轻除去，应避免造成伤根。 栽植时用一个筷子粗的竹签在基质中插一小孔， 然后将小苗插入，注意幼苗较嫩，防止弄伤， 栽后把苗周围基质压实，栽前基质要浇透水。 栽后轻浇薄水。再将苗移入高湿度的环境中。 搭设小拱棚，以减少水分的蒸发，保证空气湿
减轻褐变现象发生的方法
➢ ①选择合适的外植体 一般来说，最好选择生长处于旺 盛的外植体，这样可以使褐变现象明显减轻。
➢ ②合适的培养条件 无机盐成分、植物生长物质水平、 适宜温度等均可以减轻材料的褐变现象。
➢ ③使用抗氧化剂 在培养基中，使用半胱氨酸、抗坏血 酸、PVP等抗氧化剂能够减轻很多外植体的褐变现象。 另外，使用0.1%-0.5%的活性炭对防止褐变也有较为 明显的效果。
• （2）玻璃化现象
定义：当植物材料不断地进行离体繁殖时， 有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水 渍状，这种现象通常称为玻璃化。
特点：外观形态有明显异常；体内含水量、 矿质元素、糖类、纤维、蛋白质等基本成分 含量有变化，一些酶活和内源激素含量有变 化。
• 影响玻璃化苗发生的因素：
植物的快繁与脱毒培养
繁殖速度较孢子型 快
为木本植物快速繁殖 方式
肾蕨等 葡萄,杨树等
1.外植体（不定芽）---出芽（不定芽）（直 接再生）
贯叶金丝桃不定芽直接再生过程
2外植体（茎段）---出芽（不定芽）（直接再生）
Shoots developing from parrotfeather internode sections cultured for 7 days on medium with 2-iP.
1.病毒病及其危害
• 脱毒（virus elimination)培养： • 利用植物组织培养技术，脱除植物细胞中的 病毒，生产健康的无毒繁殖材料的过程。
1.2.植物病毒病及其危害
• 定义：由植物病毒寄生引起的病害。 • 症状：
–①变色，叶片的叶绿素形成受阻或积聚，从而产 生花叶、斑点、环斑、脉带和黄化等。花朵的花 青素也可因而改变,使花色变成绿色或杂色等,常 见的症状为深绿与浅绿相间的花叶症如烟草花叶 病。 –②坏死，在叶片上常呈现坏死斑、坏死环和脉坏 死，在茎、果实和根的表面常出现坏死条等。 –③畸形，器官变形，如茎间缩短，植株矮化，生 长点异常分化形成丛枝或丛簇，叶片的局部细胞 变形出现疱斑、卷曲、蕨叶及带化等。
常用的指示植物有:千日红(Gomphrena globosa);苋色藜(Chenopodium amaranticolor)和各种烟草.
由于病毒的寄生范围不同，所以应根据不同的病毒选 择适合的指示植物。
四、脱毒植物的鉴定方法（续）
血清鉴定(serological test)(抗原抗体反应)：病毒抗血
5. 脱毒效果检测 一般来说，再生植株后，在18个月以内进行病毒 鉴定，因为病毒在植物体内的潜伏期为6-12个月以 上。
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毒种薯生产程序
微茎尖组织培养-----诱导出苗-----联免疫 吸附试验法或指示植物方法鉴定-----脱毒试 管基础苗。 固体、液体培养基相结合-----扩繁基础 苗----在防虫网室栽植或封闭温室扦插----原原种（或称脱毒小薯）。原原种----原种 1代----原种2代----良种1代-----良种2代。
炼苗具体方法：移植前7d左右，将长有3~5片叶、 高2~3cm的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培 养室移至温室排好。为防止强光、高温灼伤试管 苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
（三）、马铃薯无病毒苗的鉴定材料
1、指示植物鉴定 •在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常 用的方法，Ｘ病毒、Ｓ病毒和纺锤块状病毒 很容易通过汁液来接种。 2、鉴定寄主的准备 •马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日 红，茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物 应在无虫网室中培养。
第9章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术
第一节 蔬菜的脱毒与快繁
蕃茄
马铃薯
第一节 蔬菜脱毒与快繁
一、马铃薯的组织培养
第一节 蔬菜脱毒与快繁
微型薯
第一节 蔬菜脱毒与快繁
马铃薯是一种全球性的重要经济作物。 适应性广，营养价值高，耐贮藏适运输， 既是一种重要的粮食作物也是一种调节市 场供应的重要蔬菜。马铃薯原产于拉丁美 洲，当被发现可以食用后，很快传到世界 各地，成为栽培很广的一种作物。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
2．茎尖培养脱毒
（1）茎尖消毒
一般在室内发芽，芽经热处理（38℃）2 周。然后取1厘米的茎尖，水洗干净，无菌 条件下先用70％的酒精浸组织15-20秒，再 用2％次氯酸钠溶液浸泡4--5min，然后用 无菌水冲洗3次。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
取材和接种
把消毒芽在解剖镜下逐层剥去幼叶，露 出圆滑的生长点，留1-2个叶原基，0.2— 0.3毫米，随即接种于MS液体培养基上， 每升加0.1mgNAA 、 0.2mgGA3、0.5BA， 2%蔗糖，p H值5.8。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
培养条件：
温度：21~25℃ 光照度：2000-3000 lx 光照时间：12h/d 2-3周长愈伤，4-5周长绿点，3--6月 长成2-3厘米小芽，越慢越好，出芽 很快的扔掉。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
（2） 继代和生根
培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂盒） 鉴定后（试管苗应每3月检测一次，每年4次） 采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。 取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培 养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右发 育成5~10cm高小植株，继续进行切段繁殖，此 法速度快，每月可繁殖5~8倍，试管苗多节接种 在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
2、 生物学习性
马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻。 发芽适温为12~18℃。 地上茎叶生长温度为17~21℃。 块茎形成要求昼温14~24℃，夜温12~14℃。 结薯期要求12h左右的短日照和疏松、湿润、肥 沃以及通气良好的土壤条件。土壤板结，薯块表 面粗糙和薯形不整。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
本章教学目的与要求
(1)掌握马铃薯的生物学习性，掌握马铃薯脱毒培养的过程以及 马铃薯脱毒苗的鉴定方法；掌握番茄的生物学特性及快速繁 殖方法； (2)掌握苹果的脱 毒方法与快繁技术；掌握葡萄的脱毒与快技 术；掌握草莓的脱 毒与快繁技术； (3)掌握兰花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牵牛、百合等花卉 的生物学特性，组培快速繁殖方法及自然繁殖法； (4)掌握甘薯的生物学特性，脱毒与快繁的方法及技术； (5)掌握芦荟、桔梗等药用植物的快繁技术； (6)掌握毛白杨、河北杨等绿化苗木的快繁技术。
植物组织培养
第9章 常见植物的脱毒与 快速繁殖技术
大 家 好 ︕
第9章 常见植物的脱毒 与快速繁殖技术
本章主要内容(4学时)
蔬菜的脱毒与快繁 果树的脱毒与快繁 花卉植物的脱毒与快繁 农作物的脱毒与快繁 药用植物的试管快繁 树木的脱毒与快繁
第9章 常见植物的脱毒 与快速繁殖技术
第一节蔬菜脱毒与快繁
（四）、马铃薯无病毒株的繁殖
（１） 直接块茎繁殖 （２） 扦插繁殖 （３） 组织培养切段繁殖 A：继代培养 B：低温保存
（二）、马铃薯脱毒技术
通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体 内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、PVG、 PVM、PSW等病毒。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
我国马铃薯栽培现状
全国现有马铃薯播种面积300多万公顷， 每年需合格种薯45亿公斤，脱毒原种4亿 公斤，脱毒小薯或微型薯45亿粒。
我国的马铃薯平均单产仅为13.60吨/公顷， 是世界单产最高国这瑞士（48.80吨/公顷） 的1/4。最主要的因素就是种薯质量差，品 种布局不合理。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
马铃薯病毒的种类
危害有17种之多，如X病毒、S病毒、 Y病毒、M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤 形块茎病毒等。 马铃薯病毒可使块茎产量减少 50%~80%。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
（一）、马铃薯特性和生物学习性
1、形态特性 (1)根 根系由出生根和匍匐根组成。 (2)茎 分地上部分和地下部分。 (3)叶 全缘，心脏形。 (4)花 为聚伞花序。 (5)果实 浆果。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
３.接种液制备及接种
叶片洗净后。在消毒的研钵中研成糊状，用纱 布滤出汁液，再用蒸馏水稀释１０倍作为接种物 (混入６００目的金刚砂)。 用左手心紧靠在鉴定寄主植物的背面，以右 手指蘸取接种液，均匀的在叶背面擦过，以不造 成叶片产生伤痕为度，最后把叶面上多余的接种 物用清水洗净，放置在１５～２４的防虫室中， 一般５－１０天可发病。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
马铃薯继代培养基：
MS+NAA0.2-0.5+D-泛酸钙10，3%蔗糖；
20-25℃，3000-4000LX，14-16hr光照；
每3周继代一次，单芽茎段约1厘米；
原则试管苗用2年—3年。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
马铃薯试管苗
第一节 蔬菜脱毒与快繁
(3) 驯化
炼苗室温度：白天23~27℃，夜间不低于14℃。
微茎尖组织培养-----诱导出苗-----联免疫 吸附试验法或指示植物方法鉴定-----脱毒试 管基础苗。 固体、液体培养基相结合-----扩繁基础 苗----在防虫网室栽植或封闭温室扦插----原原种（或称脱毒小薯）。原原种----原种 1代----原种2代----良种1代-----良种2代。
炼苗具体方法：移植前7d左右，将长有3~5片叶、 高2~3cm的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培 养室移至温室排好。为防止强光、高温灼伤试管 苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
（三）、马铃薯无病毒苗的鉴定材料
1、指示植物鉴定 •在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常 用的方法，Ｘ病毒、Ｓ病毒和纺锤块状病毒 很容易通过汁液来接种。 2、鉴定寄主的准备 •马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日 红，茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物 应在无虫网室中培养。
第9章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术
第一节 蔬菜的脱毒与快繁
蕃茄
马铃薯
第一节 蔬菜脱毒与快繁
一、马铃薯的组织培养
第一节 蔬菜脱毒与快繁
微型薯
第一节 蔬菜脱毒与快繁
马铃薯是一种全球性的重要经济作物。 适应性广，营养价值高，耐贮藏适运输， 既是一种重要的粮食作物也是一种调节市 场供应的重要蔬菜。马铃薯原产于拉丁美 洲，当被发现可以食用后，很快传到世界 各地，成为栽培很广的一种作物。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
2．茎尖培养脱毒
（1）茎尖消毒
一般在室内发芽，芽经热处理（38℃）2 周。然后取1厘米的茎尖，水洗干净，无菌 条件下先用70％的酒精浸组织15-20秒，再 用2％次氯酸钠溶液浸泡4--5min，然后用 无菌水冲洗3次。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
取材和接种
把消毒芽在解剖镜下逐层剥去幼叶，露 出圆滑的生长点，留1-2个叶原基，0.2— 0.3毫米，随即接种于MS液体培养基上， 每升加0.1mgNAA 、 0.2mgGA3、0.5BA， 2%蔗糖，p H值5.8。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
培养条件：
温度：21~25℃ 光照度：2000-3000 lx 光照时间：12h/d 2-3周长愈伤，4-5周长绿点，3--6月 长成2-3厘米小芽，越慢越好，出芽 很快的扔掉。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
（2） 继代和生根
培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISA（试剂盒） 鉴定后（试管苗应每3月检测一次，每年4次） 采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。 取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培 养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右发 育成5~10cm高小植株，继续进行切段繁殖，此 法速度快，每月可繁殖5~8倍，试管苗多节接种 在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
2、 生物学习性
马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻。 发芽适温为12~18℃。 地上茎叶生长温度为17~21℃。 块茎形成要求昼温14~24℃，夜温12~14℃。 结薯期要求12h左右的短日照和疏松、湿润、肥 沃以及通气良好的土壤条件。土壤板结，薯块表 面粗糙和薯形不整。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
本章教学目的与要求
(1)掌握马铃薯的生物学习性，掌握马铃薯脱毒培养的过程以及 马铃薯脱毒苗的鉴定方法；掌握番茄的生物学特性及快速繁 殖方法； (2)掌握苹果的脱 毒方法与快繁技术；掌握葡萄的脱毒与快技 术；掌握草莓的脱 毒与快繁技术； (3)掌握兰花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牵牛、百合等花卉 的生物学特性，组培快速繁殖方法及自然繁殖法； (4)掌握甘薯的生物学特性，脱毒与快繁的方法及技术； (5)掌握芦荟、桔梗等药用植物的快繁技术； (6)掌握毛白杨、河北杨等绿化苗木的快繁技术。
植物组织培养
第9章 常见植物的脱毒与 快速繁殖技术
大 家 好 ︕
第9章 常见植物的脱毒 与快速繁殖技术
本章主要内容(4学时)
蔬菜的脱毒与快繁 果树的脱毒与快繁 花卉植物的脱毒与快繁 农作物的脱毒与快繁 药用植物的试管快繁 树木的脱毒与快繁
第9章 常见植物的脱毒 与快速繁殖技术
第一节蔬菜脱毒与快繁
（四）、马铃薯无病毒株的繁殖
（１） 直接块茎繁殖 （２） 扦插繁殖 （３） 组织培养切段繁殖 A：继代培养 B：低温保存
（二）、马铃薯脱毒技术
通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体 内脱除PLRV、PVY、PVA、PAF、PVG、 PVM、PSW等病毒。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
我国马铃薯栽培现状
全国现有马铃薯播种面积300多万公顷， 每年需合格种薯45亿公斤，脱毒原种4亿 公斤，脱毒小薯或微型薯45亿粒。
我国的马铃薯平均单产仅为13.60吨/公顷， 是世界单产最高国这瑞士（48.80吨/公顷） 的1/4。最主要的因素就是种薯质量差，品 种布局不合理。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
马铃薯病毒的种类
危害有17种之多，如X病毒、S病毒、 Y病毒、M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤 形块茎病毒等。 马铃薯病毒可使块茎产量减少 50%~80%。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
（一）、马铃薯特性和生物学习性
1、形态特性 (1)根 根系由出生根和匍匐根组成。 (2)茎 分地上部分和地下部分。 (3)叶 全缘，心脏形。 (4)花 为聚伞花序。 (5)果实 浆果。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
３.接种液制备及接种
叶片洗净后。在消毒的研钵中研成糊状，用纱 布滤出汁液，再用蒸馏水稀释１０倍作为接种物 (混入６００目的金刚砂)。 用左手心紧靠在鉴定寄主植物的背面，以右 手指蘸取接种液，均匀的在叶背面擦过，以不造 成叶片产生伤痕为度，最后把叶面上多余的接种 物用清水洗净，放置在１５～２４的防虫室中， 一般５－１０天可发病。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
马铃薯继代培养基：
MS+NAA0.2-0.5+D-泛酸钙10，3%蔗糖；
20-25℃，3000-4000LX，14-16hr光照；
每3周继代一次，单芽茎段约1厘米；
原则试管苗用2年—3年。
第一节 蔬菜脱毒与快繁
马铃薯试管苗
第一节 蔬菜脱毒与快繁
(3) 驯化
炼苗室温度：白天23~27℃，夜间不低于14℃。