《植物组织培养技术》植物脱毒与快繁

《植物组织培养技术》植物脱毒与快繁模块介绍本模块针对组培研发岗位的工作职责与任职要求，编排了试验方案设计和数据调查与分析二个实训项目，主要内容包括组培的基本理论、提高组培苗遗传稳定性的措施、组培试验方案的制订等，重点阐述了组培快繁的程序与类型、组培研究的技术路线与试验设计方法、组培快繁的常见问题、组培数据调查与分析方法等。

在理论学习的同时，开展项目实践活动，培养学生会设计组培试验、撰写试验方案、编制组培试验观察表和技术指标统计分析，具备组培研发工所要求的理论知识、技能水平和相应的职业素质。

模块结构设计见表1。

表1 模块结构设计项目1 蔬菜组培与快繁/马铃薯脱毒与快繁一、学习目标（一）终极目标掌握植物脱毒与鉴定技术，培育马铃薯等蔬菜脱毒、快繁与脱毒苗的鉴定技术。

（二）促成目标1.熟悉植物脱毒的意义、原理与方法，能够运用脱毒技术培育马铃薯等蔬菜脱毒苗；2.掌握脱毒苗鉴定技术，清楚马铃薯等蔬菜脱毒苗鉴定方法；3.清楚马铃薯等蔬菜脱毒苗的保存与无病毒苗繁育体系、方法；4.提高操作水平和分析解决问题能力，培养团队精神、敬业精神、责任意识。

二、学习内容1．蔬菜组织培养概况；2.马铃薯组培概况；3.马铃薯脱毒种薯繁育流程；4.脱毒苗的优势(含病毒的种类、传染途径、表现症状与危害)；5.植物脱毒技术；6.脱毒苗鉴定技术；7.马铃薯脱毒苗培育与鉴定；8.马铃薯脱毒苗快繁与微型薯诱导；9.马铃薯等蔬菜脱毒苗的保存与繁殖；10.甘薯脱毒与快繁技术要点（拓展）；11.大蒜脱毒与快繁技术要点（拓展）；12.紫背天葵组培与快繁技术（拓展）；13.结球甘蓝组培与快繁技术（拓展）。

三、知识点1.蔬菜组织培养概况；2.马铃薯组培概况；3.马铃薯脱毒种薯繁育流程；4.脱毒苗的含义、实质与培育优势(含病毒的种类、传染途径、表现症状与危害)；5.植物脱毒技术（热处理、微茎尖培养、其它脱毒方法）；6.脱毒苗鉴定技术（指示植物法、嫁接法等）；7.马铃薯脱毒苗培育与鉴定；8.马铃薯脱毒苗快繁与微型薯诱导（实验室诱导、温室生产）。

四、技能点1.热处理和微茎尖培养脱毒；2.培养基配方设计与无菌操作；3.马铃薯脱毒苗鉴定；4.马铃薯脱毒苗快繁；5.微型薯诱导。

五、教学重点1. 脱毒苗的含义与实质与优势；2. 热处理脱毒与微茎尖培养脱毒；3. 马铃薯脱毒技术；4. 马铃薯等脱毒苗鉴定技术；5. 马铃薯脱毒苗繁育体系；6. 影响马铃薯脱毒与快繁的因素；7. 微型薯诱导方法。

六、教学难点1.脱毒苗的含义与实质；2.热处理脱毒与微茎尖培养脱毒原理；3.脱毒苗鉴定；4.影响马铃薯脱毒与快繁的因素；5.微茎尖剥离。

七、教学设计八、拓展学习1.甘薯脱毒与快繁技术要点；2.大蒜脱毒与快繁技术要点；3.紫背天葵组培与快繁技术；4.结球甘蓝组培与快繁技术。

九、作业1.分组完成项目实训报告。

十、学习建议1.项目1（包括项目2～4）是在前期学习掌握组培操作与试验设计等技术的基础上，应用组培技术进行项目实训或真正生产。

建议撰写培养方案时，要全面、综合应用所学知识科学设计、全面规划，综合考虑。

2.建议两人或组内合作学习，集思广议，客观分析对待组培过程中出现的问题。

3.善于回忆、联想和跟踪观察，多思多问，注重操作细节；4.项目生产持续时间较长，要有持之以恒精神。

十一、教学评价项目1评价单项目2 果树组培与快繁/蓝莓组培与快繁一、学习目标（一）终极目标掌握蓝莓快繁技术，培育蓝莓组培苗。

（二）促成目标1.能通过茎尖、茎段诱导生长获得蓝莓嫩茎梢；2.掌握蓝莓苗瓶外生根与驯化移栽技术；3.熟练进行蓝莓组培苗快繁，培育健壮增殖苗；4.提高操作水平，培养团队精神和责任意识。

二、学习内容1.蓝莓组培概况；2.蓝莓组培快繁流程与植株再生途径；3.茎尖和茎段培养方法；4.蓝莓瓶外生根与驯化移栽技术；5.组培苗特点；6.组培苗生境与实生苗生境的比较；7.组培苗驯化移栽的目的、原则与方法；三、知识点1.蓝莓组织培养概况；2.蓝莓组培快繁流程；3.茎尖和茎段培养方法；4.茎尖和茎段培养的影响因素；5.蓝莓瓶外生根技术；6.蓝莓组培苗驯化移栽技术；7.组培苗特点；8.组培苗生境与实生苗生境的差异；9.蓝莓组培植株再生途径；10.组培苗驯化移栽目的、原则与方法。

四、技能点1.蓝莓外植体采集与处理；2.蓝莓培养基配方设计；3.蓝莓无菌操作；4.蓝莓瓶外生根处理；5.蓝莓组培苗驯化移栽。

五、教学重点1.蓝莓组培快繁流程；2.茎尖、茎段培养及影响因素；3.蓝莓瓶外生根技术；4.蓝莓组培苗驯化移栽技术；5.组培苗特点；6.组培苗生境与实生苗生境的差异；7.蓝莓外植体采集与处理；8.蓝莓培养基配方设计；9.蓝莓无菌操作。

六、教学难点1.茎尖、茎段培养的影响因素；3.蓝莓瓶外生根技术；4.蓝莓培养基配方设计；5.蓝莓组培苗驯化移栽；七、教学设计八、拓展学习1.非试管快繁技术；2.树莓组培与快繁技术要点；3.樱桃脱毒与快繁。

九、作业分组完成项目实训报告。

十、学习建议1.蓝莓和草莓同属于浆果类果树，但在组培技术路线与再生途径上却有很大不同。

学习时最好比较学习。

2.蓝莓组培属于无菌短枝型，在学习茎段、茎尖培养一般方法与要求后再学习比较容易；3.比较瓶外生根与瓶内生根、组培苗驯化移栽与实生苗移栽二者在操作与管理上的不同；4.学会应用逆向思维方法考虑问题。

十一、教学评价项目2评价单项目3 果树组培与快繁/草莓脱毒与脱毒苗繁育一、学习目标（一）终极目标掌握草莓脱毒与脱毒苗繁育技术。

（二）促成目标1．能通过形态指标和化学方法确定草莓花粉发育时期；2．了解草莓花药预处理与表面灭菌方法；3．掌握草莓脱毒处理与检测方法；4．掌握草莓脱毒苗快繁方法；5. 清楚草莓无毒苗繁育流程。

二、学习内容1．草莓生物学特性与组织培养概况；2．草莓脱毒与快繁流程；3．草莓脱毒方法（微茎尖培养、花药培养、匍匐茎处理）；4．草莓花粉发育时期的确定；5．草莓脱毒苗鉴定方法；6. 草莓脱毒苗繁育流程与方法。

三、知识点1．草莓生物学特性与组织培养概况；2．草莓脱毒与快繁流程；3．草莓脱毒方法（微茎尖培养、花药培养、匍匐茎处理）；4．草莓花粉发育时期的确定；5．草莓脱毒苗鉴定方法；6. 草莓脱毒苗繁育流程与方法。

四、技能点1.草莓脱毒方法；2.草莓花粉发育时期的确定；3.草莓脱毒苗鉴定。

五、教学重点1.草莓脱毒与快繁流程；2.草莓脱毒方法；3.草莓花粉发育时期的确定；4.草莓脱毒苗繁育流程与方法。

六、教学难点1.草莓花药培养；2.草莓花粉发育时期的确定。

七、教学设计八、拓展学习1.果树花药培养的影响因素；2.单倍体植株的鉴定与染色体加倍技术。

九、作业1．将受损的花药进行培养,其结果怎样？2.花药培养的花药可能起哪些作用？十、学习建议1.草莓属于浆果类果树，与蓝莓、树莓组培比较学习。

2.草莓花药培养脱毒与以前所学的营养器官培养有较大不同，学习时注意互相比较；3.学会类比学习方法。

十一、教学评价结合阶段性考试进行。

项目4 花卉组培与快繁/蝴蝶兰组培与快繁一、学习目标（一）终极目标掌握蝴蝶兰组培快繁技术，生产出蝴蝶兰组培苗。

（二）促成目标1.熟悉蝴蝶兰组培快繁概况、快繁流程与植株再生途径；2.会采集和处理蝴蝶兰外植体；3.清楚蝴蝶兰培养基的成分、特点，以及组培产生褐化、黄化的原因与对策；4.掌握蝴蝶兰组培快繁的影响因素；5.掌握蝴蝶兰无菌操作技术要求；6.会驯化移栽蝴蝶兰试管苗；7.提高操作水平和分析解决问题能力，培养团队精神和责任心。

二、学习内容1.蝴蝶兰组培概况；2.蝴蝶兰组培与快繁工艺流程；3.蝴蝶兰组培快繁的影响因素；4.蝴蝶兰组培苗褐化、黄化和污染的原因与对策；5.蝴蝶兰组培各阶段培养基配方的成分、特点及培养条件要求；6.蝴蝶兰组培各阶段无菌操作技术要求；7.蝴蝶兰外植体采集、预处理及表面灭菌技术；8.蝴蝶兰组培苗驯化移栽技术。

三、知识点1.蝴蝶兰生物学特性；2.蝴蝶兰组培组培与快繁工艺流程；3.蝴蝶兰组培快繁的影响因素；4.蝴蝶兰组培苗褐化、黄化和污染的原因与对策；5.蝴蝶兰外植体选择与处理6.蝴蝶兰配方及培养条件要求；7.蝴蝶兰植株再生途径；8.蝴蝶兰组培各阶段无菌操作技术要求；9.蝴蝶兰组培苗驯化移栽技术。

10.水苔选购原则；11.组培苗驯化移栽原则、方法与注意事项；12.人工授粉方法；13.提高组培苗移栽成活率的措施。

四、技能点1.蝴蝶兰组培三代培养基制备；2.蝴蝶兰外植体采集与处理；3.蝴蝶兰无菌操作；4.蝴蝶兰组培问题的识别与调控；5.蝴蝶兰驯化移栽。

五、教学重点1.蝴蝶兰组培与快繁工艺流程；2.蝴蝶兰组培快繁的影响因素；3.蝴蝶兰组培苗褐化、黄化和污染的原因与对策；4.蝴蝶兰培养基配方设计与培养基制备；5.蝴蝶兰外植体采集与处理；6.蝴蝶兰转接材料修整与接种；7.蝴蝶兰组培苗驯化移栽；8.组培苗驯化移栽原则方法与注意事项；9.水苔的处理。

六、教学难点1.蝴蝶兰外植体采集与处理；2.蝴蝶兰转接材料修整与接种；3.蝴蝶兰组培苗褐化、黄化和污染的原因与对策；4.蝴蝶兰组培快繁的影响因素；5.蝴蝶兰原球茎发生型再生途径；6.组培苗驯化原则与移栽要领;7.人工授粉方法。

七、教学设计八、拓展学习1.蝴蝶兰脱毒苗培育；2.大花蕙兰组培与快繁技术；3.墨兰组培与快繁技术；4.人工种子；5.种子培养。

九、作业1．项目实训报告。

十、学习建议1.结合台企兰花种苗繁育与工厂化生产管理，学习项目11蝴蝶兰组培快繁技术；2.熟悉蝴蝶兰外植体类型与规格要求，在此基础上学习蝴蝶兰组培各阶段材料修整要求；3.蝴蝶兰花梗不易消毒彻底，本身容易褐化，针对这两方面要重点学习。

4.蝴蝶兰组培每周期持续时间较长，做好及时观察，动态跟踪；发现问题及时分析并寻求解决的办法。

十一、教学评价项目4评价单1项目 4 评价单2。