EDTA依赖性假性血小板减少
EDTA依赖性假性血小板减少症1例
EDTA依赖性假性血小板减少症1例乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)作为血细胞分析的抗凝剂已经国际血液学标准委员会(ICSH)认定及《全国临床检验操作规程》推荐使用，广泛应用于临床。
但临床发现EDTA可引起少数患者的血小板发生聚集，经血细胞自动分析仪检测可出现假性血小板减少(pseudothrombocytopenia，PTCP)，称为EDTA依赖性假性血小板减少(EDTA - PTCP)。
国内外已见多例报告1-3，我科近期发现一例EDTA-PTCP，报告如下。
1 病例资料患者，女，48岁。
主诉：发热、畏寒、咳嗽、咽痛。
无既往病史。
查体：体温39℃，咽部充血，四肢未见出血点及瘀斑，无牙龈出血。
拟诊为上感。
实验室检查：血常规全血细胞计数分析仪分析显示白细胞计数10.1×109/L，血小板计数37×109/L（EDTA-K2抗凝全血）。
凝血酶原时间(PT) 11.5s, 国际标准化比值0.91, 部分凝血活酶时间(APTT) 29.4s, 凝血酶时间(TT) 16.2s, 纤维蛋白原( FIB )2.5g/L。
疑为PTCP。
2 材料与方法2.1 血小板计数手工法末梢血目视计数：20μl末梢血加入3.8ml的1% 草酸铵稀释液中，混匀后计数。
血细胞自动分析仪分析：使用仪器Coulter-HMX血细胞全自动分析仪，EDTA-K2抗凝全血及枸橼酸钠（CTAD）抗凝全血混匀后上机分析。
2.2 血涂片瑞氏染色镜检：参照《全国临床检验操作规程》4进行操作。
3 结果EDTA抗凝全血标本血细胞自动分析仪分析血小板计数结果显著低于CTAD抗凝全血标本血细胞自动分析仪分析血小板计数结果及末梢血手工计数法结果，见表1。
EDTA及CTAD法采血后10分钟分析与1小时后分析血小板计数结果间无显著差异。
EDTA抗凝标本血涂片瑞氏染色后镜下见血小板凝集，CTAD标本血小板镜下未见凝集。
表格 1 不同抗凝剂及放置时间下的血小板计数结果血小板计数(×109 L-1)EDTACTAD手工法t=10m37145149t=1h391424 讨论PTCP常由血标本中的EDTA抗凝剂引起，导致EDTA-PTCP。
EDTA致血小板计数假性减少的分析
EDTA致血小板计数假性减少的分析摘要目的:了解EDTA盐依赖性假性血小板减少的原因及意义。
方法:用EDTA-K2抗凝真空管采集静脉血,在自动血液分析仪上检测,4例血小板计数明显减少者改用枸橼酸钠抗凝真空管采集静脉血在血液分析仪上重新检测,同时做血涂片检查,采末梢血手工计数血小板。
结果:4例EDTA-K2抗凝计数血小板显著减少者,血涂片见血小板聚集成团,而用枸橼酸钠抗凝及手工计数者血小板均在正常范围内。
结论:EDTA作为血液分析仪的抗凝剂,有时会导致血小板计数假性减少,应引起临床的足够重视。
关键词EDTA 血小板计数血小板聚集资料与方法2007年2月～2009年3月住院患者4例,年龄分别为55岁、65岁、68岁、72岁,男1例,女3例。
仪器与试剂:日本光电MEK-6318K血液分析仪及配套试剂;Olmpus显微镜;草酸铵血小板稀释液(按操作规程[1]配制);EDTA-K2真空抗凝管与枸橼酸钠真空抗凝管;瑞氏染色液。
方法:仪器法为病房护士晨起按要求采集静脉血于EDTA-K2真空抗凝管内至2ml刻度处,检验科收到标本后,在自动旋转式混匀器上混匀,上机检测,发现血小板明显减少者重新采集血液于枸橼酸钠真空抗凝管内,上机检测,同时按操作规程[1]采集末稍血手工计数血小板。
对2种抗凝剂全血进行涂片瑞氏染色显微镜检查。
结果结果见表1。
讨论血小板在体内主要参与止血与血栓形成,此外在动脉粥样硬化和炎症反应中起着重要的作用。
血小板数量的检测是临床上最常用的检测项目之一,EDTA所导致的血小板假性减少如未及时发现,会给病人的诊断和治疗带来很多麻烦,增加不必要的其他检查或治疗,甚至引起医疗纠纷。
因此,检验科工作人员在工作过程中如发现血小板计数明显减少时,必须进行复查及涂片染色显微镜检查,看血小板是否假性减少,涂片是否有血小板成堆现象。
EDTA抗凝原理是与血液中的凝血因子Ⅳ(钙离子)结合成螯合物,使其失去凝血作用,从而阻止血液凝固。
EDTA依赖性假性血小板减少症实验室分析
EDTA依赖性假性血小板减少症实验室分析【关键词】EDTA-K2 假性血小板减少；血小板计数；血小板聚集EDTA盐(EDTA-K2)作为血细胞分析的抗凝剂是国际血液标准化委员会认定并得到广泛使用，目前血小板计数实验室普遍采用的是全自动血细胞分析仪[1]，操作方便,重复性好,准确度高等优点已被普及应用，通常情况下使用EDTA二钾作为抗凝剂，对血细胞和血小板计数的影响较小，但临床发现EDTA盐有时会引起少数患者的血小板聚集导致血细胞分析仪在血小板计数出现假性偏低的现象，检测时需要实验室结合临床、排除干扰因素、选择科学可行的检测方法，才能正确报告血小板计数结果。
以防差错事故的发生，以免给临床医生带来困扰，防止医疗纠纷。
1.资料和方法1.1临床资料：患者，女18岁主诉发热、头痛、鼻塞、咳嗽、咽干咽痛等上呼吸道症状。
查体：体温38.2度、咽部充血、扁桃体无肿大，乡镇卫生院拟定为上感进行系列检查，实验室检查:白细胞10.8x109/L,红细胞3.47x1012、血红蛋白115 g／L、血小板计数为27x109/L(EDTA抗凝全血)既往健康、医生建议来上级医院院复查。
我院再次实验室检查：白细胞10.5x109/L、红细胞 3.54x1012、血红蛋白117 g／L、血小板21x109、凝血酶原时间:12.8s、活化部分凝血活酶时间:25.4s、凝血酶时间：12.5s、纤维蛋白原:2.48s、患者平日经期血量正常，无皮肤黏膜出血倾向，四肢未见出血点瘀斑。
怀疑为EDTA依赖性假性血小板减少症。
1.2方法1.2.1仪器与材料：采用希森美康XS500i全自动血液分析仪进行分析，试剂(溶血剂、稀释液、清洗液)为仪器配套试剂。
EDTA-K2抗凝剂和枸橼酸钠抗凝剂。
仪器采用专用校准品进行校准,每日室内质控均在控，参加卫生部室间质评亦在控。
1．8 mg／ml的EDTA-K2真空采血管、109 mmol／L的枸橼酸钠真空采血管均有河北超然医疗器械有限公司提供。
血小板假性减少怎么办？
血小板假性减少怎么办？常见血小板假性减少的原因通常为：标本凝集、EDTA依赖性假性血小板减少、冷凝集、大血小板。
一、标本凝集主要包括：（1）采血不顺利，包括技术不熟和患者血管难以采集，造成采集时间过长，使组织因子进入血标本中而产生肉眼看不见的微小凝块；（2）颠倒混匀不充分，影响抗凝效果，从而造成凝块产生或血小板聚集；（3）抽血量与抗凝剂比例不当，造成血小板被稀释或抗凝效果不好。
此时重新采血一般能解决问题。
二、EDTA依赖性假性血小板减少由于用EDTA盐（EDTA盐干粉抗凝剂，乙二胺四乙酸）干粉抗凝剂，在作为免疫介导的血液中，可出现的冷抗血小板自身抗体，使血小板互相凝集现象。
这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体，直接作用于血小板膜糖蛋白IIb/IIIa上。
同时，这种与血小板结合的自身抗体Fc 端可与单核细胞或淋巴细胞膜上Fc受体结合，出现卫星现象。
引起血小板聚集卫星现象后，在全自动血细胞计数仪上检测时，发生假性血小板计数减少的现象。
1、更换抗凝剂：用枸橼酸钠抗凝（凝血象）或肝素抗凝重新采血检测；2、毛细血管发采集末梢血，用预稀释模式检测；3、显微镜计数：采集未抗凝的末梢血20µl，加入到380µl草酸铵稀释液中，计数中央大方格四角及正中五个小方格血小板是数量；三、冷凝集冷凝集：是指由自身抗体引起的，红细胞在冷环境中的凝集成团的现象，采血管壁可见细沙样凝集颗粒。
冷凝集反应一般出现在31℃以下，在0～4℃时最强，红细胞凝集最明显；随温度的升高，抗原抗体复合物逐渐解离，凝块消失。
1、将标本立即放在37℃水浴中，约半小时后，立即机测定；2、将患者带到实验室内，在血球仪仪器旁抽静脉血，在数秒钟内立即上机测定；3、用等量生理盐水置换血浆，将标本离心后，去掉血浆，加入等量生理盐水后上机检测；4、毛细血管发采集末梢血，用预稀释模式检测；5、显微镜计数：将37℃孵育的血液10ul 加入到2.0ml的37℃温盐水中，混合均匀，滴到计数板上计数（可预先将计数板放37℃水浴中加温）。
EDTA依赖假性血小板减少症临床表现、发生机制、怀疑情况及处理措施
EDTA依赖假性血小板减少症临床表现、发生机制、怀疑情况及处理措施EDTA依赖假性血小板减少症乙二胺四乙酸是国际血液学标准化委员会推荐进行全血细胞计数时首选的抗凝剂。
EDTA具有对血液样本中的细胞形态和计数影响非常小等优点，目前在临床广泛使用。
但在少数情况下，EDTA可以引起血小板聚集，在血细胞分析仪上进行检测时，造成血小板计数的假性减低，这种现象被称为EDTA依赖性假性血小板减少。
疾病发生率约为0.09%—0.21%。
EDTA依赖假性血小板减少症的发生机制目前还不明确，普遍认为可能与EDTA诱导血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物中隐藏抗原的暴露或对其进行修饰，导致自身抗体的产生有关。
可以确定发生EDTA依赖假性血小板减少症的原因之一是在EDTA盐作为抗凝剂的前提下，出现的免疫介导的冷抗血小板自身抗体。
EDTA依赖假性血小板减少怀疑情况1、血小板计数<100 X 109 /L。
2、室温下EDTA抗凝的标本发生血小板减少，由其他抗凝剂抗凝的标本或是将标本保存在37摄氏度，能大大削减血小板减少程度。
3、随标本采集到检测时间的延长，血小板计数越来越低。
4、血涂片显示或血球仪提示有血小板聚集。
5、缺乏血小板减少的临床症状和表现，如出血。
处理措施1、仪器法。
重新采样，用肝素抗凝管或枸橼酸盐抗凝管等非EDTA-K2分别抽取静脉血2ml，充分混匀，在10min内完成测定。
2.手工计数法。
采新鲜指血20ul，稀释后由专业检验人员计数两次并取均值。
3、无任何抗凝剂抽血立即上机，血小板结果也是可以供参考。
4、瑞氏染色涂片镜检看血小板的聚集情况再估算其数量。
5、预稀释仪器法:采新鲜指血20ul，加入稀释液120ul，进行1:7稀释后，在1h内用预稀释法进行测定。
6、对这类患者采血之前抗凝剂中添加阿米卡星纠正。
EDTA-K2依赖性血小板假性减少结果分析及处理
EDTA-K2依赖性血小板假性减少结果分析及处理摘要】目的探讨EDTA-K2依赖性血小板假性减少症（EDTA-PTCP）患者血细胞分析中血小板计数结果的准确分析及处理手段。
方法收集21例EDTA-PTCP患者EDTA-K2抗凝静脉血及枸橼酸盐抗凝静脉血各2ml，充分混匀后15min、30min、60min、90min、120min后，采用全自动血细胞分析仪法进行血小板数量检测，并制备血涂片进行瑞氏染色，显微镜下观察血小板形态及分布情况。
结果EDTA-PTCP患者EDTA-K2抗凝静脉血血小板计数明显低于正常值，并随检测时间延长血小板数量逐渐降低，差异有统计学意义（p<0.05）；与EDTA-K2抗凝静脉血结果比较，枸橼酸盐抗凝静脉血血小板计数明显增高，差异有统计学意义（p<0.05），随检测时间延长血小板计数比较差异无统计学意义（p>0.05）。
显微镜下观察显示EDTA-K2抗凝静脉血血涂片中血小板成多少不等的聚集团块，并随时间延长聚集的血小板个数明显增多；枸橼酸盐抗凝静脉血血涂片中血小板大小、形态规则，成单个、散在分布。
结论针对EDTA-PTCP患者，用枸橼酸盐抗凝静脉血代替EDTA-K2抗凝静脉血用于血小板检测，可纠正由EDTA-K2作为抗凝剂引起的血小板假性减少，避免临床误诊、误治。
【关键词】EDTA-K2 枸橼酸盐血小板【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）33-0091-02血小板计数是临床最基本、最常用的检测指标之一，其检测结果准确与否直接影响患者的诊断与治疗。
乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2)由于对血细胞形态影响较少，并可抑制血小板聚集，被国际血液标准委员会（ICSH）推荐为血细胞分析仪首选抗凝剂，广泛应用于临床[1]。
但近年来研究发现，EDTA-K2作为抗凝剂用于血细胞分析时可引起EDTA-K2依赖性假性血小板减少症（EDTA-dependent pseudo thrombocytopenia，EDTA-PTCP)，使血小板计数假性降低。
EDTA依赖性假性血小板减少
EDTA依赖性假性血小板减少标签：EDTA依赖性假性血小板减少症；EDTA随着全自动血细胞分析仪的广泛应用，乙二胺四乙酸盐(EDTA)因其对血细胞影响较小，在临床得到广泛使用。
但国外文献1980年已有报道表明，EDTA 可引起血小板聚集、黏附，导致EDTA依赖性假性血小板减少症(EDTA-dependent pseudo thrombocytopenia，PTCP)发生。
PTCP是一种由EDTA诱导，发生于体外的非稳固性血小板凝聚，临床主要表现为重型假性血小板减少症，且无出血现象［1］。
PTCP产生的假性血小板计数减少会导致患者临床辅助检查增多,严重时易导致临床错误诊治。
因此，PTCP应该在临床检验工作中得到广泛重视。
1资料与方法1.1一般资料回顾性分析30例临床检验过程中发生EDTA依赖性假性血小板减少症患者的门诊或住院资料，其中男17例，女13例，年龄20~68岁，平均(41.6 18.3)岁。
1.2检验方法笔者所在医院检验科采用多种方法为患者进行血小板计数检测，以避免计数结果错误。
（1)全自动细胞分析仪法:使用EDTA盐、枸橼酸钠抗凝管分别采集患者外周静脉血2.0 ml，采血后0、10、30、60、120 min分别用全自动血细胞分析仪及配套试剂进行血常规检测。
（2）手工计数法:根据《全血临床检验操作规程》第3版规程行手工计数,0.38 ml许汝和氏稀释液中置入患者指血20 μl，充分混匀后行血小板显微镜计数。
（3）血涂片瑞氏-姬姆萨染色法:使用EDTA盐、枸橼酸钠抗凝管分别采集患者外周静脉血，在采血后0及60 min 后各涂片1张,常规晾干后瑞氏-姬姆萨染色,显微镜下行血小板计数。
2结果2.1全自动细胞分析仪法不同时间点血小板计数结果EDTA管血小板计数在（10~142）×109/L，随患者血液标本抽取时间的延长而持续下降，10 min后已显著降至正常值以下；而枸橼酸钠管血小板计数则则无明显下降。
EDTA依赖性血小板假性减少
EDTA依赖性血小板减少症是由于用EDTA盐作为抗凝剂的抗凝血在全自动血细胞计数仪上检测时,发生假性血小板计数减少的现象。
这种假性低血小板计数会导致临床无故增加其他不必要的辅助检查,甚至引起临床误诊误治。
临床上假性血小板减少的发生率约为0.09%~0.21%,其主要原因是由于EDTA盐作为抗凝剂诱导抗凝血中血小板互相聚集、堆积和发生卫星现象,致使全自动血细胞计数仪不能确认血小板而使血小板计数偏低。
假性血小板减少无任何病理、生理意义,也与特殊药物使用无关。
故对临床上无任何出血症状与体征、出血和凝血时间正常而血小板计数明显减少者,建议改用肝素化血或手工计数血小板,以免因EDTA所致的假性血小板减少而贻误手术时机,或作一些不必要的针对血小板减少症的治疗。
体检时意外发现单纯血小板减少,无明显出血和不适，鉴别诊断考虑的常见原因为:（1）血小板生成障碍：再生障碍性贫血、白血病、巨幼细胞性贫血、骨髓纤维化、放射线损伤等；（2）血小板破坏过多或消耗过多：免疫性或原发性血小板减少性紫癜、系统性红斑狼疮、恶性淋巴瘤、药物过敏引起的血小板减少、弥散性血管内凝血等；（3）血小板分布异常：脾功能亢进。
故进行骨髓穿刺和活检等形态学检查，明确是否患白血病、骨髓增生异常综合征(MDS)、巨幼细胞性贫血、遗传性血小板减少症等；同时应进行自身免疫性疾病筛选检查，以除外其他自身免疫性疾病；行腹部B超或CT检查明确有无脾大,脾功能亢进。
血小板减少的假性之说有根据吗
血小板减少的假性之说有根据吗假性血小板减少,通过实验和科学分析，在血小板检测中偶有假性血小板减少发现并需澄清以下事实：1、使用血细胞分析仪时会有假性血小板减少发生，其原因：1) EDTA依赖性假性血小板减少(PTCT)。
由于用EDTA盐(EDTA盐干粉抗凝剂，乙二胺四乙酸)干粉抗凝剂，在作为免疫介导的血液中，可出现的冷抗血小板自身抗体，使血小板互相凝集现象。
这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体，直接作用于血小板膜糖蛋白IIb/IIIa 上。
同时，这种与血小板结合的自身抗体Fc端可与单核细胞或淋巴细胞膜上Fc受体结合，出现卫星现象。
引起血小板聚集卫星现象后，在全自动血细胞计数仪上检测时，发生假性血小板计数减少的现象。
2)EDTA诱导"血小板卫星现象"(platelet satellitism)，引起假性血小板减少。
EDTA依赖性血小板减少症(PTCP)应该受到广泛重视。
PTCP的临床发生率约为0.09%-0.21%-0.77%，血小板卫星现象3) 血小板体积偏大引起的血小板假性减少。
4) 高镁血症引起的血小板假性减少。
2、EDTA依赖性假性血小板减少(PTCP)的原因与血小板表面存在某种隐匿性抗原有关。
1)EDTA可引起血小板糖膜(GP)发生改变，即血小板形态发生变化，由正常的圆盘状变为圆球形，改变了血小板膜表面某种隐匿性抗原构象。
2)部分病人血浆中存在的某种自身抗体与这种改变构象的抗原结合后的抗原抗体复合物激活了细胞膜中的磷酯酶，使血小板膜水解并释放AA、ADP、5-TH、胶原、凝血酶原等血小板活性物质。
3)这些血小板活性物质都能不同程度的活化血小板纤维蛋白原受体(FIR-B)，促使血小板与纤维蛋白原受体结合后聚集成团，导致血小板假性减少。
3、高胆固醇和高甘油三酯血症时血小板聚集性增高，可引起假性血小板减少;糖尿病、高血压病患者由于血管内皮易损，致血小板容易聚集不容易解散，常导致机测血小板偏低。
案例分享：1例EDTA依赖性假性血小板减少症的结果分析及处理
案例分享：1例EDTA依赖性假性血小板减少症的结果分析及处理陈广清玉林市第一人民医院指导老师：邹光美检验工作过程中应该主动多发现问题，多思考问题及解决问题；而不是单纯的机械性只会上机操作。
在实际工作中EDTA依赖性假性血小板减少症（EDTA-PTCP）这样的案例并不少见，却在部分基层医院没有引起足够的重视，一旦发错报告不仅导致临床误诊误治，也给患者带来额外的负担。
下面就对遇到的一例EDTA引起血小板假性减少的案例和大家分享。
【案例经过】患者，男，85岁，因肺炎、头晕查因（后循环缺血）病入院。
血常规检测结果显示白细胞与红细胞无明显异常，血小板为51×109/L。
仪器提示PLT聚集报警，PLT直方图异常。
第一反应是查看标本状态，经仔细排查无凝块；使用的检测仪器为希森美康血常规分析仪（型号为XN-1000），为排除检验误差，将该标本颠倒混匀后换另一台血常规仪器重测，结果变化不大。
经询问该患者并无相关皮肤紫癜、淤点淤斑、牙龈出血、鼻出血、胃肠道出血等临床出血症状。
实验室血常规关于血小板复查规则为：PLT<70×109/L。
取该标本推片瑞氏染色后镜检，发现在片尾及两侧可见PLT成堆成簇聚集现象，据估算PLT实际并不少（如下图）。
图一：×40倍图二：×10倍图三：×100倍【案例分析】显然血常规仪器测定血小板结果与镜检不符，详细问看片老师引起血小板假性减少原因。
该老师答复可能是EDTA诱导血小板聚集引起的血小板假性减少，也可能是未发现的微小凝块导致的结果。
为避免误诊，建议该患者次日重新抽血复查。
第二天仪器检测结果及涂片镜检结果与之前相符。
由此，可确定该患者为EDTA-PTCP。
随后老师详细地和我讲了下关于案例方面的相关知识。
对此类报告通常描述镜下形态：镜检血小板可见明显聚集现象，成堆成簇分布，据估算不少。
为进一步了解EDTA-PTCP，本人特查阅了与此有关的文献，以下均来自参考文献部分参考内容。
EDTA-K2诱导致血小板减少临床分析
EDTA-K2诱导致血小板减少临床分析【关键词】EDTA；假性；血小板计数全血细胞分析常用的抗凝剂EDTA对细胞形态和血小板计数影响很小，它不影响细胞数目及体积大小，对红细胞形态影响最小，而且还可以抑制血小板聚集。
根据国际血液学标准化委员会1993年文件建议血细胞计数用EDTA-K2作抗凝剂，用量为EDTA-K2 2H2O 1.5 mg/ml～2 mg/ml血液。
近年来因EDTA-K2引起血小板聚集发生血小板假性减少并不少见，有少数病人经全自动血细胞分析仪进行血细胞分析时，血小板计数值异常偏低，临床反馈与临床症状严重不符，经手工计数或其他方法复检血小板数又正常，为探讨其发生原因，本文对血常规检验中遇到的25病例进行分析报道如下。
1 资料和方法1.1 资料来源对2009年1月～20010年1月间用全自动血球计数仪进行血液分析时，对其中发现的血涂片血小板分布情况与计数值明显不符的25例，初步考虑存在血细胞分析仪血小板计数结果与真值不符的现象，依此做为符合研究条件的病例进行进一步研究。
1.2 方法1.2.1仪器与试剂深圳迈瑞公司Bc－3000全血细胞分析仪，与仪器配套试剂及质控品。
1.2.2 操作方法将血涂片血小板分布情况与计数值明显不符的25例，分别再次用EDTA K2、枸橼酸钠抗凝管各采外周静脉血2.0 ml,于采血后即刻、0.5 h、1 h、2 h在血细胞分析仪上测定并记录PLT，采集患者手指末稍血20 μl加0.38 ml盐酸及草酸铵稀释液进行手工PLT计数，并制备血涂片观察血小板数量，形态和分布情况。
血细胞计数严格按有关操作规程进行。
2 结果结果发该组25份EDTA抗凝血在血球计数仪分析时再次出现血小板计数值明显降低，仅7×１０9/L～33×109/L，用其它方法复检血小板却在正常范围内，其余的检验项目结果均未见明显异常。
临床表现均无明显出血征象，与血小板计数值明显不符。
EDTA依赖的假性血小板减少的临床分析与对策
EDTA依赖的假性血小板减少的临床分析与对策摘要：目的了解临床常见的假性血小板减少的发生概率及其解决方法。
方法回顾性分析我院2014年01月-2015年12月间，住院病人71535例血常规分析时血小板减少1326例，其中EDTA-K2抗凝剂导致的假性血小板减少病例87例。
改用枸橼酸钠抗凝剂再次分析检测，同时涂片瑞-姬氏染色油镜下观察血小板形成分布情况。
结果 87例EDTA-K2抗凝剂PLT为（56±27）×109/L。
换用枸橼酸钠抗凝剂血小板数值（185±39）×109/L，t=1.83，P<0.01，结论 EDTA-K2抗凝剂导致的假性血小板减少发生率为0.12%，极易误诊。
对血小板计数<100×109/L的标本应进行涂片复查。
发现有血小板聚集的情况应改用枸橼酸钠抗凝剂进行再次检测，以防发生误诊误治。
关键词：血小板计数；假性血小板减少；乙二胺四乙酸二钾Abstract：objective to understand the incidence of clinical common pseudo thrombocytopenia and its solution.Methods a retrospective analysis of our hospital in December 2014 01 months -2015 years，71535 cases of hospitalized patients of blood platelet decreased in 1326 cases，which leads to the reduction of false platelet EDTA-K2 anticoagulant in 87 e Sodium Citrate Injection for Transfusion again at the same time analysis and detection，smear Wright Giemsa staining under microscope observation of platelet formation distribution.Results 87 cases of PLT（56 EDTA-K2 decoagulant + 27）* 109/L.For numerical Sodium Citrate Injection for Transfusion（185 + 39）x platelet 109/L，t=1.83，P<0.01，EDTA-K2 decoagulant conclusion false platelet decrease incidence was 0.12%，misdiagnosed.On the platelet count<100 * 109/L of the specimen should be a smear review.Found that platelet aggregation should be tested again by Sodium Citrate Injection for Transfusion，to prevent the occurrence of misdiagnosis.Keywords platelet count pseudo thrombocytopenia two potassium EDTA血小板减少症是指多种原因导致血小板计数结果低于参考值下限（即<100×109/L）。
临床EDTA抗凝剂依赖假性血小板减少症处理方法
临床EDTA抗凝剂依赖假性血小板减少症处理方法
01什么是EDTA抗凝剂依赖假性血小板减少症
EDTA抗凝剂依赖假性血小板减少症是一种发生于体外、EDTA诱导的血小板非稳固性聚集、临床上表现为无出血现象的假性血小板减少症。
02体外EDTA依赖假性血小板减少症产生原因
EDTA依赖假性血小板减少症的发生机制主要是某些患者血液中存在冷抗血小板抗体或抗血小板表面膜糖蛋白IIb/IIIa(GPIIb/IIIa)异二聚体中的隐蔽抗原，在EDTA抗凝剂采血后，静息状态下的血小板被活化，活化后的血小板表面的隐蔽抗原表位构象发生改变，诱导血小板在体外的互相聚集，致使全自动血细胞计数仪不能正确识别血小板而造成的血小板假性减少现象。
03解决方案
针对以上因素，临床上通常有以下几种简便高效的处理方法：
首先EDTA抗凝样本推片镜检，发现涂片中有大量血小板聚集，可确认EDTA抗凝剂依赖的血小板假性减少。
确定EDTA抗凝剂依赖的血小板假性减少,可把EDTA抗凝血放置37℃水浴30分钟，重新检测后血小板计数正常，则考虑冷抗体引起的血小板假性减少。
更换枸椽酸钠抗凝管采血，血小板计数明显高于EDTA抗凝血，涂片无血小板聚集，可使血小板计数减少得以纠正。
避免患者重新采血的痛苦，提高检验效率的同时并节省了更多的医疗资源。
EDTA依赖性假性血小板减少症的鉴别 预防及其解决办法
EDTA依赖性假性血小板减少症的鉴别预防及其解决办法
edta依赖性假性血小板减少症的鉴别-预防及其解决办法
edta依赖性假性血小板减少症的鉴别\\预防及其解决办法
【全文】通过对乙二胺四乙酸(edta)依赖性血小板假性增加症(edta-ptcp)个例分析。
综述利用血小板直方图；送检，血小板进行性增加；edta-k2抗凝血涂片瑞士染色镜检血
小板与否涌入；手工计数血小板时观测有没有HGPRT以及某些仪器通过测量血小板聚集体
去推论、辨别edta-ptcp的存有。
对未知edta-ptcp人群，通过即为改采即测或37℃保温运输标本、转用柠檬酸盐和肝素抗炎凝来防治和防止edta-ptcp现象的出现。
【关键词】edta依赖性血小板假性减少症，涂片，镜检，聚集，聚集体
自从1993年国际血液学标准化委员会(icsh)所推荐edta盐就是做为血液分析的抗凝剂，虽然在确保红细胞、血小板形态的完整性方面强于其他抗凝剂，但也可以导致因edta 盐诱导血小板涌入而引致血液分析仪计数血小板发生假性相对较低现象，即edta盐依赖
性血小板假性增加症(edtaptcp)，虽然发生率仅为0.09％-0．21％[1,2,3,]，但必须引发足够多注重，以防止脑膜炎、误治、医患纠纷的出现，建议具体操作人员必须存有能力辨
别edta-ptcp现象，并采取有效措施防治、防止edta-ptcp的报告单流向临床。
edta依赖性血小板假性减少症(edta-ptcp)发生机理
edta依赖性血小板假性增加症(edta-ptcp)出现机制尚不十分确切，通常存有二种观点:1、可能将与某些患者体内存有抗炎血小板膜糖蛋白(例如糖蛋白b和糖蛋白a)的edta
依赖性抗体或温度依赖性抗炎。
EDTA依赖性假性血小板减少详细版x
常情况。
避免EDTA
尽量避免使用含有EDTA的采血管 ，改用其他抗凝剂如枸橼酸钠。
健康生活方式
保持健康的生活方式，包括合理饮 食、适量运动、戒烟限酒等，有助 于改善血液循环和减少血小板凝集 。
药物治疗
பைடு நூலகம்
抗血小板药物
在医生指导下使用抗血小板药物 ，如阿司匹林、氯吡格雷等，有 助于降低血小板凝集和改善血液 循环。
发病机制与原因
发病机制
EDTA依赖性假性血小板减少的发病机制主要是由于EDTA抗凝剂与血小板表面的糖蛋白发生了结合， 导致血小板计数结果偏低。这种结合作用在某些人群体内较为明显，因此发生假性血小板减少的情况 。
原因
EDTA依赖性假性血小板减少的原因可能与个体差异、药物作用、免疫因素等多种因素有关。某些人群 体内存在特定的基因变异，导致其血小板对EDTA抗凝剂的敏感性增加，容易发生假性血小板减少。此 外，某些药物、感染或免疫因素也可能影响血小板计数结果的准确性。
通过免疫调节或免疫抑制治疗，调节 体内免疫功能，减少异常抗体产生。
PART 04
病例分享与讨论
典型病例介绍
01
02
03
患者
一位65岁的女性，因长期 服用抗凝药物导致EDTA 依赖性假性血小板减少。
症状
无明显出血表现，仅在血 常规检查时发现血小板计 数明显降低。
诊断过程
通过EDTA依赖性假性血 小板减少的特殊检查确诊 。
流式细胞术
通过检测血小板表面标记物， 有助于鉴别EDTA依赖性假性血 小板减少与其他血小板减少性
疾病。
诊断标准与流程
诊断标准
在EDTA抗凝全血中，血小板计数低于正常值（一般为100×10^9/L），但在枸 橼酸钠抗凝或手工计数时血小板计数正常。
EDTA依赖性血小板假性减少的实验分析及应对措施
EDTA依赖性血小板假性减少的实验分析及应对措施目的分析使用血细胞分析仪检测血小板计数出现假性减少的原因及复查方法。
方法根据该实验室复检标准，采用血小板出现假性减少的50例门诊或住院患者作为研究对象，分析假性减少的原因及其复查方法。
结果50例血小板假性减少样本中，42例为乙二胺四乙酸依赖性，3例为大血小板，2例白细胞周围卫星现象，3例冷凝集现象，对这些患者进行复查后可得到正常范围的血小板结果。
结论EDTA-PTCP患者经镜检涂片发现聚集现象，可用枸橼酸钠抗凝、无抗凝剂即刻上机、手工计数复查血小板数值以避免误诊。
标签：血小板计数；血小板聚集；血小板假性减少；EDTA（Pseudo thrombocytopenia，PTCP）是一种体外多病因的现象，包括抗凝相关的血小板凝集、大血小板、血小板卫星现象、冷凝集、微小的凝块等。
乙二胺四乙酸（EDTA）是临床实验室广泛应用于全血细胞计数及分类的一种最理想抗凝剂，同时也是引起血小板聚集而假性减少最常见的原因。
乙二胺四乙酸依赖性假性血小板减少（EDTA -PTCP）导致血细胞计数仪无法准确计数而出现血小板数量减少或明显减少现象，据文献报道[1]其发生率为0.09%～0.21%。
检验出现假性减少结果会造成临床患者的误诊、误治，可能给患者造成不必要的骨髓穿刺和不恰当的治疗，如输注血小板，激素，甚至脾切除等[2]。
此种假性PLT减少一般不需要治疗，但在实际临床工作中需要与真性血小板减少相鉴别，通过检验科人为手段进行对患者的血常规进行特殊流程处理及纠正PLT结果，可以减少患者不必要的辅助检查和治疗，因此研究EDTA-PTCP正确的诊断方法来提高检验人员血小板计数的准确性的能力，避免误导临床医生对患者的诊断和治疗具有非常重要的意义。
该研究报道近2年42例发现为EDTA-PTCP患者的实验室结果分析及应对措施报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料所有血常规标本来自该院2014年6月—2016年6月门诊及住院患者。
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EDTA-dependent pseudothrombocytopenia
2016.03.28
一、患者资料
A 病例：曹××，男，43岁，正常体检者，2002年来院体检。 B 病例：闫××，女，16岁，因血小板减少，激素治疗20天无效。
二、 患者血细胞分析测定结果
人工计数方法系采用未抗凝的末梢血，直接稀释于血小板稀释液中，在 显微镜下直接计数。
如何纠正EDTA依赖性假性血小板减少？
①37℃温浴 ②改用枸橼酸钠抗凝 ③加入氨基糖苷类抗生素，如：阿米卡星、卡那霉 素等
A case report
The patient presented with EDTA-PTCP and was diagnosed with neuroendocrine carcinoma of the stomach. Following systemic chemotherapy, the tumor showed a marked regression and the EDTAPTCP disappeared. The mechanism by which this occurred is not clear but an association of EDTAPTCP with neuroendocrine carcinoma is strongly suggested.
什么是EDTA依赖性假性血小板减少？
血小板减少症是指多种原因导致血小板计数低于 参考值下限即＜100×109/L。EDTA依赖的假性血 小板减少症是由于EDTA抗凝全血后血小板聚集导 致用血液分析仪检测血小板数量减少的现象。其 发生率0.09%~0.21%。这种假性低血小板计数会致 使临床增加其他不必要的辅助检查，甚至引起临 床误诊、误治。
三 血细胞分析仪散点图、直方图和测定数据 A病例：Advia 120 测定数据和散点图，关注红色标记处。
B病例：XE-2100测定数据和散点图，关注红色标记处。
四 血涂片：
（图8-3）：A病例血涂片，较大的血小板聚集体。 （图8-4）：B病例血涂片，血小板聚集体较小，与白细胞大小类似。
（图8-5）：B病例：较大的聚集体，明显大于白细胞 （图8-6）：更大的聚集体，低倍镜下约占视野1/4
综合EDTA依赖性血小板假性减少症(EDTA-PTCP)发生机理以 及病例分析，鉴别EDTA依赖性血小板假性减少症(EDTA-PTCP)
方法如下：
(1)首次血小板计数＜100 × 109/L，或者在LIS的三天内历史 记录中突然显著降低，而患者没有血小板降低的临床症状。 (2)仪器报警：“platelet aggregation” 当满足以上条件中的一条，依次进行以下操作来确诊EDTAPTCP （1）检查标本，排除标本有凝块或是红细胞冷凝集 （2）复检标本，排除随机误差的可能性或是仪器操作失误 （3）血涂片，瑞姬氏染色，镜检观察血小板有聚集 （4）换用其他抗凝管（如枸橼酸钠或肝素钠），血小板计 数有显著提升
为什么EDTA会引起假性血小板减少？
EDTA依赖性假性血小板减少是一种体外现象，是由于抗血 小板自身抗体在EDTA存在条件下，引起血小板聚集，其直 接针对被隐藏的抗原决定簇，这些抗原决定簇平时是在血 小板膜糖蛋白（Gp）Ⅱb/Ⅲa中隐藏。由于GpⅡb/Ⅲa需要 在钙离子存在下保持其异二聚体结构，EDTA可以通过它与 钙离子的螯合作用分离GpⅡb/Ⅲa，导致GpⅡb表簇暴露， 与血浆中的自身抗体结合，激活细胞中的磷脂酶A2和磷脂 酶C，水解血小板膜磷脂并释放花生四烯酸、ADP、5-HT、 胶凝血酶原、内源性钙离子等活性物质。这些活性物质能 够活化血小板与纤维蛋白原受体，促使血小板与纤维蛋白 原聚集成团。
什么时候我们要怀疑EDTA依赖性假性血小板减少？
1、血小板计数<100×109/L 2、室温下EDTA抗凝的标本发生血小板减少，而由其他抗凝剂抗凝的标本 （如柠檬酸盐）或是将标本保存在37摄氏度，能大大削减血小板减少的程度 3、随标本采集到检测时间的延长，血小板计数越来越低 4、血涂片显示或血球仪提示有血小板聚集 5、缺乏血小板减少的临床症状和表现如出血
大量成堆的血小板聚在一起，超过了血小板计数阈值 设定的范围，也超过了红细胞、白细胞的阈值设定范 围，因此它不被认作血小板；如果体积和白细胞大小 接近，有可能会被当作白细胞而计数，造成白细胞假 性增高。在某些情况下可见血小板直方图尾部翘起， 而有关PLT的报警信息，如PLT clumps、PLT abnormal distribution 、Large PLT增多等信息会有出现。
谢谢