疏水层析和反相层析的原理及区别

疏水层析：
根据蛋白表面疏水性的不同，利用蛋白和疏水层析介质疏水表面可逆的相互作用来分离蛋白，高浓度盐与水分子发生强烈作用，导致疏水分子周围形成空穴的水分子减少，促进疏水性分子与介质的疏水配基之间发生结合。

常用：苯基琼脂糖凝胶
反相层析:
在吸附层析中，高极性物质在层析柱上吸附较牢，洗脱时发生拖尾现象和保留时间长的问题。

如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类，洗脱液用极性强的溶剂，如甲醇和水的混合物。

则被分离样品中的极性强的物质不被吸附，最先洗下来，得到较好的分离效果。

这种层析法与普通的吸附层析法相反，故称为反相层析。

目前用HPLC做反相层析常用的ODS柱，即在支持物的表面上连接了C18H37Si—基团（C18柱）。

二者的区别：
疏水作用层析：溶液配置简单，性状温和，能保持蛋白活性，但操作复杂，分离效率低
反向液相层析：洗脱液要求高，蛋白变性，操作简单，分离效率高。