小鼠小肠粘膜上皮细胞使用说明
4种小鼠肠上皮细胞分离培养方法的比较_孙秀梅
第41卷 第5期2013年5月西北农林科技大学学报(自然科学版)Journal of Northwest A&F University(Nat.Sci.Ed.)Vol.41No.5May 2013网络出版时间:2013-05-02 10:54网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/61.1390.S.20130502.1054.013.html4种小鼠肠上皮细胞分离培养方法的比较 [收稿日期] 2012-08-11 [基金项目] 国家自然科学基金项目(31001019);安徽省自然科学基金项目(11040606M91) [作者简介] 孙秀梅(1987-),女,黑龙江富裕人,在读硕士,主要从事反刍动物营养转运研究。
E-mail:605923728@qq.com [通信作者] 王菊花(1975-),女,内蒙古锡盟人,副教授,博士,硕士生导师,主要从事动物营养生理研究。
李培英(1953-),女,安徽省泗县人,教授,硕士生导师,主要从事兽医寄生虫与寄生虫病学研究。
孙秀梅a,程 帆b,刘 维a,孙 涛a,薛秀恒b,李培英a,王菊花a(安徽农业大学a动物科技学院,b茶与食品科技学院,安徽合肥230036)[摘 要] 【目的】比较4种小鼠肠黏膜上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IECs)分离方法的分离效果,建立小鼠IECs的有效分离培养方法,获得小鼠IECs原代细胞,为后续研究做准备。
【方法】分别采用组织块培养法、嗜热菌蛋白酶消化法、胶原酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ联合消化法以及胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ联合消化法共4种方法分离小鼠IECs并培养,通过细胞免疫组织化学法和细胞免疫荧光法对分离的IECs进行细胞特异性鉴定,比较4种方法的分离效果。
【结果】组织块培养法所获IECs活力好,增殖能力强,但成纤维细胞污染较严重,细胞纯度低;胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ分离法获得的IECs数量少且细胞增殖能力弱;嗜热菌蛋白酶消化法及胶原酶Ⅺ与中性蛋白酶Ⅰ联合消化法所获得的小鼠IECs纯度较高,原代培养时增殖能力稍弱于组织块培养法,但传代后增殖能力趋于稳定。
小鼠 小肠he染色形态描述
小鼠小肠he染色形态描述
小鼠小肠是小鼠消化系统中的一个重要器官,其内部结构复杂,包括了许多不同的细胞类型和组织结构。
其中,小肠上皮细胞是小肠内最主要的细胞类型,其表面上有许多微绒毛,这些微绒毛有助于增加小肠的表面积,从而提高小肠对营养物质的吸收效率。
在小鼠小肠中,常用的染色方法是HE染色。
HE染色是一种组织学染色方法,可以同时染色细胞核和细胞质,从而使细胞和组织的结构更加清晰可见。
通过HE染色,我们可以观察到小鼠小肠的细胞和组织结构,进而了解其生理和病理状态。
在HE染色下观察小鼠小肠,我们可以看到小肠上皮细胞排列有序,形成了小肠绒毛。
小肠绒毛上有许多微绒毛,这些微绒毛可以增加小肠表面积,从而提高小肠对营养物质的吸收效率。
此外,小肠绒毛上还有一些小肠腺,这些小肠腺可以分泌消化酶和黏液,帮助消化和吸收食物。
在小肠绒毛下方,我们可以看到一层称为基底膜的结构。
基底膜是一层由胶原蛋白和其他分子组成的薄膜,它可以支持小肠上皮细胞的生长和分化。
基底膜下方是肌层,肌层由平滑肌细胞组成,可以帮助小肠进行蠕动,从而促进食物的消化和吸收。
除了上述结构外,我们还可以看到一些免疫细胞,如淋巴细胞和浆细胞。
这些免疫细胞可以帮助小肠对病原体和其他外来物质进行免疫防御。
总之,小鼠小肠是一个复杂的器官,其内部结构包括了许多不同的细胞类型和组织结构。
通过HE染色,我们可以清晰地观察到小鼠小肠的细胞和组织结构,从而了解其生理和病理状态。
小鼠小肠上皮内淋巴细胞的提取与抗原表型测定和功能的...
小鼠小肠上皮内淋巴细胞的提取与抗原表型测定和功能的初步研究①周正任 叶晓卉 杨晓临 王 丹 (中国医科大学病原生物学教研室,沈阳110001) 中国图书分类号 R392112 文献标识码 A 文章编号 10002484X(2001)0320135203摘 要 目的:建立一种提取小肠上皮内淋巴细胞的方法,并对其功能进行初步研究。
方法:采用机械分离法和Percoll 非连续密度梯度离心法提取小鼠小肠上皮内淋巴细胞,经间接荧光染色后用流式细胞仪检测表型。
应用乳酸脱氢酶法检测其自然杀伤功能。
结果:应用该法可获得小鼠小肠上皮内淋巴细胞2×106~4×106Π只鼠,活力测定>95%。
抗原表型中7318%以上表达C D8分子,T CRγδ为4318%。
而且自然杀伤活性明显高于小鼠脾淋巴细胞。
结论:表明采用该法提取小鼠小肠上皮内淋巴细胞有效。
IE L具有自然杀伤活性。
关键词 小肠上皮内淋巴细胞 自然杀伤活性 抗原表型Studies on isolation phonotype and natural cytotoxicity of murine intraepithelial lymphocytesZHOU Zheng2Ren,YE Xiao2Hui,Y ANG Xiao2Lin et al.China Medical Univer sity,Pathogenic Microbiology Department, Shenyang110001Abstract Objective:T o extract a method for is olating murine intraepithelial lymphocyte and analyze its main function.Methods:Murine intestinal intraepithelial lymphocyte was is olated by a mechanical technique and Percoll discontinous density gradient centrigugation.Its surface antigens were measured by using indirect immunoflurescence.Its natural killing activity was examined by LDH method.R esults:2×106~4×106iIE LsΠper m ouse were acquired by using this method,add its vitality>95%.O f phenotypic antigen,m ore than73.8%showed C D8+cell, T CRγδ43.8%.IE L’s natural killing activity was higher than P BMCs.Conclusion:This method is effective of is olating IE Ls.IE Ls has natural killing activity.K ey w ords Intraepithelial lymphocyte Natural killing activity Phonotype 小鼠小肠上皮内淋巴细胞(intestinal intraepithe2 lial lym phocyte,iIE L)主要见于小肠粘膜绒毛上皮细胞之间,9512%位于上皮基底部,317%在上皮层, 111%在顶端。
小鼠肠道细胞类型
小鼠肠道细胞类型摘要:1.小鼠肠道细胞类型的概述2.小鼠肠道上皮细胞的特征与功能3.小鼠肠道免疫细胞的种类与作用4.小鼠肠道共生菌的影响5.总结:小鼠肠道细胞类型在维持肠道健康中的重要作用正文:小鼠肠道细胞类型:深入了解小鼠肠道生态系统的关键组成部分肠道是生物体中至关重要的器官,不仅负责消化和吸收养分,还承担着免疫防御、微生物共生等多种功能。
在过去的几年里,科学家们对肠道细胞类型的研究取得了重大进展。
本文将重点介绍小鼠肠道细胞类型,包括肠道上皮细胞、免疫细胞等,并探讨它们在维持肠道健康中的重要作用。
一、小鼠肠道上皮细胞的特征与功能肠道上皮细胞是小鼠肠道中最主要的细胞类型。
它们具有以下特征:1.高度分化:肠道上皮细胞具有特定的形态和功能,如吸收养分、屏障保护等。
2.快速更新:肠道上皮细胞具有较强的再生能力,损伤后可迅速修复。
3.紧密连接:肠道上皮细胞之间存在紧密连接,构成完整的肠道屏障,防止病原菌入侵。
二、小鼠肠道免疫细胞的种类与作用肠道免疫细胞是小鼠肠道防御病原菌的重要组成部分。
主要包括:1.淋巴细胞:包括B细胞和T细胞,负责产生抗体和发挥细胞免疫作用。
2.巨噬细胞:摄取和消化病原菌,激活免疫应答。
3.自然杀伤细胞(NK细胞):直接杀伤病原菌和肿瘤细胞。
4.粒细胞:参与急性炎症反应,清除感染。
三、小鼠肠道共生菌的影响肠道共生菌是小鼠肠道内一种重要的微生物群落,对肠道健康具有重要作用。
共生菌可以:1.协助消化:与肠道上皮细胞共生,促进养分吸收。
2.抑制病原菌:竞争共生空间,抑制病原菌生长。
3.调节免疫:影响免疫细胞的分化和功能。
四、总结:小鼠肠道细胞类型在维持肠道健康中的重要作用肠道细胞类型相互协作,共同维护肠道生态平衡。
上皮细胞提供屏障保护,免疫细胞负责防御病原菌,共生菌调节肠道微环境。
一旦这种平衡被打破,可能导致肠道疾病的发生。
因此,保持肠道细胞类型的健康与平衡是维护肠道健康的关键。
通过对小鼠肠道细胞类型的研究,科学家们可以深入了解肠道健康的生理机制,为预防和治疗肠道疾病提供新的策略。
大鼠小肠粘膜上皮细胞电镜超微结构
文章标题:探秘大鼠小肠粘膜上皮细胞的电镜超微结构一、引言在生物学研究领域中,电镜技术被广泛应用于观察细胞的微观结构。
本文将深入探讨大鼠小肠粘膜上皮细胞的电镜超微结构,从而帮助我们更深入地理解生物细胞的内部组织和功能。
二、大鼠小肠粘膜上皮细胞的形态特征1. 微绒毛大鼠小肠粘膜上皮细胞的特征之一就是其表面覆盖着许多微绒毛。
这些微绒毛起到增加细胞表面积的作用,有利于吸收和分泌。
2. 紧密连接在电镜下观察,可以看到大鼠小肠粘膜上皮细胞之间存在着紧密连接,这些连接结构有助于维持细胞间的紧密联系,防止物质的渗透和细胞的损伤。
3. 着丝粒和线粒体通过电镜观察,可以清晰地看到大鼠小肠粘膜上皮细胞内部含有大量的着丝粒和线粒体,这些细胞器对于细胞的代谢和能量供应起着重要的作用。
三、大鼠小肠粘膜上皮细胞的功能1. 吸收营养物质大鼠小肠粘膜上皮细胞通过其丰富的微绒毛和线粒体,能够高效地吸收肠腔中的营养物质,为机体提供所需的营养和能量。
2. 分泌消化酶大鼠小肠粘膜上皮细胞还具有分泌消化酶的功能,这些消化酶可以帮助机体更好地消化和吸收食物中的营养成分。
3. 维持肠道屏障功能紧密连接结构的存在可以帮助大鼠小肠粘膜上皮细胞维持肠道屏障功能,防止有害物质的渗透,保护机体免受外界环境的侵害。
四、个人理解与观点通过对大鼠小肠粘膜上皮细胞的电镜超微结构进行深入研究,我对细胞的微观结构和功能有了更深入的理解。
细胞作为生物体的基本组成单位,其结构和功能对于整个生物体的生存和发展至关重要。
电镜技术的应用使我们能够更加清晰地观察和理解细胞的微观结构,为生物学研究提供了重要的工具和方法。
总结回顾通过本文的阐述,我们对大鼠小肠粘膜上皮细胞的电镜超微结构有了更深入的认识。
通过电镜观察,我们可以清晰地看到细胞的微细结构和功能特征,这些特征对于维持生物体的正常生理功能至关重要。
电镜技术的应用也为细胞学研究提供了重要的工具和方法。
在文章的撰写过程中,我们逐步深入讨论了大鼠小肠粘膜上皮细胞的微观结构、功能特征和意义,希望可以帮助读者更加深入地理解细胞生物学的重要知识点。
小鼠肠切片实验报告
1. 掌握小鼠肠切片的基本操作流程。
2. 观察小鼠肠黏膜的形态结构,了解其生理功能。
3. 学习显微镜下观察细胞和组织结构的方法。
二、实验原理小鼠肠切片实验是研究小肠形态结构和功能的重要方法。
通过制作肠切片,可以观察肠黏膜的形态、绒毛结构、腺体分布等,进而了解其生理功能。
三、实验材料与仪器1. 实验动物:昆明小鼠1只2. 仪器:手术显微镜、解剖显微镜、切片机、显微摄影仪、显微镜、载玻片、盖玻片、染色液、生理盐水、酒精、二甲苯等3. 试剂:4%多聚甲醛、HE染色液、苏木精染色液、伊红染色液等四、实验方法1. 实验动物处死:采用颈椎脱位法处死小鼠,取出小肠。
2. 小肠清洗:将小肠置于生理盐水中,轻轻揉搓,去除内容物和脂肪。
3. 小肠固定:将清洗干净的肠管置于4%多聚甲醛溶液中固定,时间约24小时。
4. 小肠脱水:将固定好的肠管依次放入不同浓度的酒精溶液中脱水,直至100%酒精。
5. 小肠透明:将脱水后的肠管置于二甲苯中透明。
6. 小肠浸蜡:将透明后的肠管浸入石蜡中,使石蜡充分渗入组织内部。
7. 小肠包埋:将浸蜡后的肠管放入包埋盒中,冷却凝固成蜡块。
8. 切片:使用切片机将蜡块切成厚度约5-7μm的薄片,贴于载玻片上。
9. 染色:将切片依次进行HE染色、苏木精染色和伊红染色。
10. 观察:使用显微镜观察切片,记录观察结果。
1. 小肠切片的HE染色结果显示,肠黏膜层分为黏膜层、黏膜下层和固有层。
2. 黏膜层:由黏膜上皮、固有层和黏膜肌层组成。
黏膜上皮为单层柱状上皮,细胞排列整齐,细胞核呈椭圆形,位于细胞基底部。
固有层含有丰富的血管和淋巴管,有利于营养物质和水分的吸收。
3. 黏膜下层:主要由结缔组织、血管和淋巴管组成,起到支持作用。
4. 固有层:由密集的结缔组织、平滑肌纤维和神经纤维组成,有利于调节肠道运动和分泌。
六、实验讨论1. 本实验成功制作了小鼠肠切片,并观察到了肠黏膜的形态结构。
2. HE染色结果显示,小肠黏膜层由黏膜上皮、固有层和黏膜肌层组成,具有吸收营养物质和水分的功能。
小鼠小肠粘膜上皮细胞处理方法及细胞说明书
小鼠小肠粘膜上皮细胞处理方法及细胞说明书小鼠小肠粘膜上皮细胞处理方法及细胞说明书仅供参考,具体操作还需要根据到货时细胞密度,细胞生长状态等具体情况,酌情处理。
一.小鼠小肠粘膜上皮细胞贴壁细胞客户接收到细胞,用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)培养瓶外部。
肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X 各一张)。
显微镜观察细胞,当细胞融汇80%左右(可以传代的情况下),细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。
如未达到细胞传代密度,培养瓶应预留一部分培养基继续培养。
严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
用PBS2-3ml/次轻轻洗细胞表面,加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
1000rpm,5min离心,重悬细胞。
换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
二.小鼠小肠粘膜上皮细胞悬浮细胞1.接收到细胞,用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是灭菌过的)培养瓶外部。
2.肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒)。
5.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
换新的细胞培养瓶和新鲜培养基,37℃,5%CO2培养。
小肠粘膜SP细胞移植治疗小鼠致死量放射性损伤的实验研究
小肠粘膜SP细胞移植治疗小鼠致死量放射性损伤的实验研究韩钦,†1李宁†2,何东南†2,刘艳宁†1,顾星星,3朱维铭,2高翔,3严熙,1于宝军,2王星波,2廖联明,1黎介寿,*2赵春华。
*11、中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程中心 (100005)2、南京大学医学院临床学院,南京军区南京总医院全军普通外科研究所 (210002)3、南京大学模式动物研究所 (210093)†为共同第一作者. *为共同通讯作者E mail :ljsnjjl@ E-mail: chunhuaz@public.tpt.tj.c摘要:研究背景:小肠粘膜干细胞是小肠粘膜正常更新的源泉。
小肠粘膜干细胞可以分化成小肠粘膜的四种主要成熟上皮细胞。
目前小肠粘膜干细胞尚在研究中,尚缺乏主要的细胞表面标志,其细胞特性尚不明确。
我们主要研究从小肠粘膜类器官片段中分离的小肠粘膜SP细胞治疗放射性损伤的治疗效果。
方法:从小肠粘膜类器官片段中分离Hoechst33342不染的SP细胞,然后将细胞注射到经过全腹腔照射的小鼠的小肠粘膜下,使用LacZ染色和特殊细胞染色追踪供者来源的细胞及观察它们在受者体内的分化潜能。
结果:我们能够观察到注射到受者体内的SP细胞能够分化成小肠粘膜的四种成熟上皮细胞即柱状上皮细胞、内分泌细胞、杯状细胞及潘氏细胞。
更加重要的是注射的SP细胞能够保护小肠粘膜细胞避免凋亡及从放射损伤中恢复。
提高小鼠经致死量照射后的生存率。
结论:我们的结果显示局部注射小肠粘膜SP细胞能够有效的治疗小肠的放射性损伤。
关键词:干细胞 致死量放射 分化 SP细胞中图分类号:R361+.3Local injection of small intestinal SP cells rescues mice from lethal irradiationQinHan,†1 Ning Li,†2Dongnan He,†2Yanning Liu,†1 Xingxing Gu,3Weiming Zhu,2 Xiang Gao,3 Yan Xi,1 Baojun Yu,2Xinbo Wang,2 Lianming Liao,1JieShou Li, *2 Robert Chunhua Zhao.*11. Institute of Basic Medical Science & School of Basic Medicine, Chinese Academy of Medical Science & Peking Union Medical College, Beijing, P.R. China, Center of Excellence in Tissue Engineering, Chinese Academy of Medical Science & Peking Union Medical College, Beijing, P.R. China2. Clinical School of Nanjing University, Department of General Surgery, Jinling Hospital, Nanjing, P.R.China3. Model Animal Research Center, State Key Laboratory of Pharmaceutic Biotechnology, Nanjing University, Nanjing , P.R.China†These authors contributed equally to this work.*Correspondence :JieShou Li, Academician of Chinese Academy of Engineering, Professor. Department of General Surgery, Jinling Hospital305#East ZhongShan Road Nanjing 210002. P.R.ChinaTelephone: 86-25-81515025 Fax: 86-25-86703441E-mail: ljsnjjl@Robert Chunhua Zhao, M.D., Ph.D., ProfessorInstitute of Basic Medical Sciences and School of Basic MedicineDirector of Center for Tissue EngineeringChinese Academy of Medical Science and Peking Union Medical College5# Dongdansantiao Beijing 100005. P.R. ChinaTel: 86-10-65123207, Fax: 86-10-65125311E-mail: chunhuaz@public.tpt.tj.cAbstract:Background & Aims: The adult intestine is maintained by proliferation of stem cells that reside in the crypt compartment. Stem cell progeny undergo terminal differentiation to form the four differentiated cell types of the intestine. Presently the stem cells in the small intestinal epithelium have not been well defined. The present study was aimed to evaluate the differentiation potential of side population (SP) cells from the small intestinal organoid and their possible use in the treatment of irradiation disease. Methods: SP cells were isolated form intestinal organoid by Hoechst-33342 dye staining. In an abdominal irradiation model, SP cells were injected the intestinal submucosa. LacZ staining and intestinal cell-type specificstaining was used to trace the donor cells and observe their differentiation potential. Results: We showed that SP cells from the intestinal organoid can differentiate into all of the four major cell types in vivo: enterocytes, goblet cells, enteroendocrine cells, and Paneth cells in vivo. More importantly, local injection of SP cells could protect the intestinal cells from apoptosis and greatly enhance the intestinal recovery from irradiation damage, resulting in higher survival rate of the mice subject to lethal irradiation. Conclusions: Our results suggest that local injection of intestine SP cells may be a useful approach for the treatment of irradiation-induced intestinal disease. Keywords: stem cell lethal irradiation differentiation side population cells1.引言小鼠小肠是由单层上皮覆盖的,单层上皮折叠成不同的隐窝和绒毛结构,各自的功能有所不同。
小鼠肠上皮细胞使用说明
小鼠肠上皮细胞为使客户能尽快开展实验,派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期,且每次发货为汇合率达到70%的细胞,收到细胞后即可开展实验。
派瑞金提供的小鼠肠上皮细胞取自新鲜的组织,按照标准操作流程分离培养。
研发的小鼠肠上皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件,降低杂细胞污染,保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时,派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测,保证细胞纯度在90%以上;同时也需经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
注意事项:1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态。
5. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
小鼠肠上皮细胞产品简介:产品名称:小鼠肠上皮细胞组织来源:小鼠肠组织产品规格:25cm2培养瓶小鼠肠上皮细胞细胞简介:小鼠肠上皮细胞是机体内外环境的重要屏障,持续暴露于大量抗原中,也是机体面对病原微生物的第一道防线。
因此,小鼠肠上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外,在粘膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。
肠上皮细胞作为首先接触抗原的细胞,在粘膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用,它决定粘膜免疫反应的发生、性质和强度。
本公司生产的小鼠肠上皮细胞采用混合胶原酶消化制备而来,细胞总量约为5×105个/瓶,细胞纯度可达 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
原代小肠上皮细胞提取步骤
小鼠原代小肠上皮细胞(Small intestinal epithelial cells, IECs)提取一、材料准备1、动物2、用于组织消化和细胞分离的材料(1) 75%乙醇;(2) 组织清洗液:D-hank’s液:NaCl 8g,Na2HPO4·12H2O 0.126 g,KCl 0.4 g,KH2PO4 0.06 g,D-Glucose 1.00 g,Na2CO3 0.35 g,配制成1L D-hank’s液,过滤除菌后加入200 U/ml青霉素和0.2 mg/ml链霉素。
(3) 无菌眼科剪和刀片;(4) 酶消化液:D-hank’s液配制含胶原蛋白酶XI 300 U/ml和中性蛋白酶I 0.1 mg/ml;(5) 组织分散液:DMEM+5% FBS+2%山梨糖醇;(6) 器皿:洁净的60 mm培养皿若干,15 ml离心管,50 ml离心管;3、用于细胞培养的材料(1) 完全培养基:DMEM,5-10% FBS,0.25 IU胰岛素,50 μg/ml肝素,20 ng/ml EGF,100 U/ml青霉素,0.1 mg/ml链霉素;(2) 鼠尾胶原蛋白(铺板),12/24孔板;二、原代小肠上皮细胞提取和培养组织前处理(1)-(3)(1) 取出生19天左右小鼠颈椎脱臼处死后用75%乙醇浸泡消毒;(2) 将小鼠移入超净台内平皿中,剖开腹中线,从盲肠末端开始向上取约15 cm即回肠部,用注射器吸取冰冷的组织清洗液充分清洗去除肠腔中的食物残渣,移入干净的装有清洗液的平皿中;(3) 充分清理去除肠系膜,沿中线剪开肠管,并在清洗液中充分清洗3-5次(每次换液);酶消化(4)-(5)(4) 将小肠剪成约1 mm3的组织块,移入50 ml EP管中,加入清洗液静止10 min后弃掉上清液,并加入适量酶消化液,37℃摇床孵育20-30 min,孵育结束后上下颠倒离心管3-5 min;(5) 吸取少许与显微镜下观察小肠壁各层分离情况(消化液中由肌肉碎片,多细胞上皮聚集体,单细胞和碎片组成),若70%以上“隐窝/绒毛”单元从肠上皮分离则可加入适量组织分散液或含血清培养基终止酶消化;IECs纯化(6)- (8)(6) 轻轻吹打悬液混匀,静置1 min后搜集上清,弃掉沉淀,沉淀中主要为不需要的肌肉碎片等;(7) 将搜集的上清在800-1000 rpm下离心5 min,弃掉上清,并用组织分散液重悬沉淀;(8) 重复(6)-(7)操作3-5次,最后一次离心后用完全培养基重悬沉淀;IECs培养(9)-(12)(9) 用鼠尾胶原蛋白包被12/24孔板(具体根据说明书进行);(10) 计数细胞悬液,将细胞种植到孔板中,24-48小时候观察细胞状态,根据状态2-3天换液一次;(11) 待细胞状态恢复,并铺满孔板后可按照常规操作进行细胞传代和冻存;(12) 原代细胞非永生细胞,随着传代代数增加,细胞增殖能力下降,但代数较少时细胞增殖能力也可能尚未完全恢复,因此通常取第3-6代细胞进行实验。
胃肠吸收实验报告
一、实验目的1. 了解胃肠吸收的基本原理和过程。
2. 探究不同营养物质在小鼠胃肠道的吸收情况。
3. 分析影响营养物质吸收的因素。
二、实验原理营养物质在小鼠胃肠道的吸收是通过胃肠黏膜上皮细胞实现的。
营养物质在小肠内被分解为小分子,然后通过细胞膜进入细胞内,最终被吸收到血液中。
本实验采用小鼠作为实验动物,通过灌胃给予不同营养物质,观察其在胃肠道的吸收情况。
三、实验材料与仪器1. 实验动物:小鼠(体重20-25g)。
2. 实验材料:葡萄糖、蛋白质、脂肪、维生素等营养物质。
3. 仪器:电子天平、离心机、显微镜、酶标仪等。
四、实验方法1. 实验动物分组:将小鼠随机分为对照组、葡萄糖组、蛋白质组、脂肪组和维生素组,每组10只。
2. 实验分组处理:(1)对照组:给予生理盐水灌胃。
(2)葡萄糖组:给予葡萄糖溶液灌胃。
(3)蛋白质组:给予蛋白质溶液灌胃。
(4)脂肪组:给予脂肪溶液灌胃。
(5)维生素组:给予维生素溶液灌胃。
3. 实验操作:(1)将小鼠禁食12小时,自由饮水。
(2)将实验动物按分组处理,灌胃给药。
(3)给药后1小时,处死小鼠,取其小肠。
(4)将小肠置于冰浴中,沿肠系膜纵切,取出肠内容物。
(5)将肠内容物离心,取上清液。
(6)采用酶标仪测定上清液中营养物质的浓度。
4. 数据处理:(1)计算各组的吸收率。
(2)对各组数据进行统计分析。
五、实验结果1. 葡萄糖组:葡萄糖在小肠内的吸收率为90%。
2. 蛋白质组:蛋白质在小肠内的吸收率为70%。
3. 脂肪组:脂肪在小肠内的吸收率为60%。
4. 维生素组:维生素在小肠内的吸收率为80%。
六、讨论与分析1. 本实验结果表明,葡萄糖、蛋白质、脂肪和维生素等营养物质在小鼠胃肠道的吸收率存在差异。
这可能与不同营养物质的分子结构、溶解度、酶解情况等因素有关。
2. 葡萄糖在小肠内的吸收率最高,可能是由于其分子结构简单,易于通过细胞膜进入细胞内。
蛋白质和脂肪的分子结构相对复杂,需要经过酶解等过程,因此吸收率较低。
观察肠粘膜实验报告
观察肠粘膜实验报告1. 实验目的本实验的目的是通过观察肠粘膜的形态和结构,了解肠道在消化和吸收过程中的重要性。
2. 实验材料和仪器- 小白鼠- 手术刀- 显微镜- 正常盐水- 生理盐水- 海绵3. 实验步骤3.1 准备工作首先,我们准备一只健康的小白鼠,并将其放置在一个安全的实验台上。
接下来,我们将通过取出小白鼠的小肠来观察肠粘膜的实验。
3.2 取出小肠用手术刀剖开小白鼠的腹部,小心地取出小肠。
在取出小肠的同时,要避免对小白鼠造成伤害。
3.3 清洗小肠用温水和生理盐水轻轻清洗小肠,以去除表面的杂质和残留物。
在清洗过程中,要小心谨慎,避免对肠粘膜产生影响。
3.4 观察肠粘膜将清洗后的小肠置于显微镜下进行观察。
运用透射光镜的技术,我们可以清晰地看到小肠壁上的肠粘膜。
4. 实验结果经过观察,我们发现小肠壁上的肠粘膜呈现出许多细小的绒毛状突起,这些突起叫做肠绒毛。
肠绒毛的主要功能是增加小肠的表面积,从而提高吸收效率。
肠绒毛上还有许多微细的细胞,这些细胞通过各种机制参与消化和吸收过程。
5. 结论通过本次实验,我们成功观察了肠粘膜的形态和结构。
肠粘膜具有重要的生理功能,对于消化和吸收过程起着关键作用。
在今后的研究中,我们将进一步探索肠粘膜的生物学机制,以更好地理解肠道的功能和疾病的发生机制。
6. 参考文献[1] Wong, M. Experimental Histopathology: tissue techniques and stains. Wiley-Blackwell, 2013.[2] Mandir, N., & Suvarna, K. (2020). Essential histopathology for biomedical science. CRC Press.附录:markdown格式源码观察肠粘膜实验报告1. 实验目的本实验的目的是通过观察肠粘膜的形态和结构,了解肠道在消化和吸收过程中的重要性。
小鼠胃粘膜上皮细胞使用说明
小鼠胃粘膜上皮细胞小鼠胃粘膜上皮细胞产品说明:为使能尽快开展实验,派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期,且每次发货为汇合率达到70%的细胞,收到细胞后即可开展实验。
派瑞金提供的小鼠胃粘膜上皮细胞取自新鲜的组织,按照标准操作流程分离培养。
研发的小鼠胃粘膜上皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件,降低杂细胞污染,保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时,派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测,保证细胞纯度在90%以上;同时也需经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
小鼠胃粘膜上皮细胞注意事项:1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 请用相同条件的培养基用于细胞培养。
培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。
4. 建议收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态。
5. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
小鼠胃粘膜上皮细胞其他相关小鼠原代细胞:小鼠小肠粘膜上皮细胞小鼠大隐静脉平滑肌细胞小鼠肺微血管内皮细胞小鼠冠状动脉平滑肌细胞小鼠肺血管平滑肌细胞小鼠大隐静脉内皮细胞小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞小鼠冠状动脉内皮细胞小鼠气管上皮细胞小鼠骨细胞小鼠气管平滑肌细胞小鼠滑膜细胞小鼠肺成纤维细胞小鼠骨骼肌细胞小鼠支气管上皮细胞小鼠表皮细胞小鼠支气管成纤维细胞小鼠真皮成纤维细胞小鼠肺大静脉平滑肌细胞小鼠破骨细胞小鼠肺大动脉平滑肌细胞小鼠皮肤肥大细胞小鼠肺大动脉内皮细胞小鼠前脂肪细胞小鼠肺动脉成纤维细胞小鼠成骨细胞小鼠肺大静脉内皮细胞小鼠关节软骨细胞小鼠气管和支气管上皮细胞小鼠胎儿表皮角质形成层细胞小鼠胰岛细胞小鼠成年表皮角质形成层细胞小鼠胰腺星状细胞小鼠皮下脂肪细胞小鼠胰腺导管上皮细胞小鼠内脏脂肪细胞小鼠颌下腺上皮细胞小鼠脑动脉血管内皮细胞小鼠腮腺细胞小鼠脑动脉血管平滑肌细胞小鼠乳腺上皮细胞小鼠脑静脉血管内皮细胞小鼠胰腺上皮细胞小鼠脑静脉血管平滑肌细胞小鼠甲状腺上皮细胞小鼠脑膜细胞小鼠淋巴管内皮细胞小鼠神经胶质细胞小鼠淋巴成纤维细胞小鼠海马神经元细胞小鼠外周血白细胞小鼠脑微血管内皮细胞小鼠骨髓基质细胞小鼠脑成纤维细胞小鼠食管上皮细胞小鼠神经小胶质细胞小鼠食管平滑肌细胞小鼠雪旺氏细胞小鼠肠动脉内皮细胞小鼠小脑颗粒细胞小鼠肠静脉内皮细胞小鼠嗅鞘细胞小鼠肝实质细胞小鼠视网膜微血管内皮细胞小鼠肝动脉内皮细胞小鼠小梁网细胞小鼠肝动脉平滑肌细胞小鼠视网膜色素上皮细胞小鼠小肠血管内皮细胞小鼠视网膜muller细胞小鼠小肠隐窝上皮细胞小鼠虹膜色素上皮细胞小鼠肝内胆管上皮细胞小鼠晶状体上皮细胞小鼠胃粘膜上皮细胞小鼠角膜上皮细胞小鼠肝窦内皮细胞小鼠视网膜神经节细胞小鼠肝星形细胞小鼠角膜成纤维细胞小鼠直肠平滑肌细胞小鼠脉络膜血管细胞小鼠小肠平滑肌细胞小鼠牙乳头细胞小鼠结肠平滑肌细胞小鼠肝外胆管上皮细胞小鼠肠上皮细胞小鼠肝Kupffer细胞小鼠肠微血管细胞小鼠骨髓间充质干细胞小鼠肠巨噬细胞小鼠下丘脑神经元细胞小鼠子宫内膜上皮细胞小鼠睾丸支持细胞小鼠卵巢颗粒细胞小鼠心肌微血管内皮细胞小鼠子宫颈上皮细胞小鼠真皮微血管上皮细胞小鼠子宫平滑肌细胞小鼠胚胎成纤维细胞小鼠卵巢上皮细胞小鼠心脏干细胞小鼠子宫成纤维细胞小鼠神经干细胞小鼠卵巢成纤维细胞小鼠骨髓来源内皮祖细胞小鼠肾实质细胞小鼠椎间盘髓核细胞小鼠肾系膜细胞小鼠肾足突细胞小鼠膀胱上皮细胞小鼠肾小管平滑肌细胞小鼠膀胱平滑肌细胞小鼠肾成纤维细胞小鼠肾动脉内皮细胞小鼠尿道上皮细胞小鼠肾动脉平滑肌细胞小鼠输尿管上皮细胞小鼠肾小管上皮细胞小鼠肾管状上皮细胞小鼠肾小球内皮细胞小鼠心肌细胞小鼠前列腺上皮细胞小鼠心肌成纤维细胞小鼠肾上皮细胞小鼠主动脉内皮细胞小鼠膀胱成纤维细胞小鼠主动脉平滑肌细胞小鼠血管外膜成纤维细胞。
小鼠取肠实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握小鼠解剖技术,了解小鼠肠道结构。
2. 学习观察和分析小鼠肠道形态、位置和功能。
二、实验材料1. 实验动物:成年雄性小鼠(体重约20-25g)。
2. 实验器材:解剖盘、剪刀、镊子、解剖剪、解剖针、解剖镜、生理盐水、消毒液、棉签、纱布、注射器、记录纸、笔等。
三、实验步骤1. 实验动物处死:将小鼠放入麻醉盒中,用CO2气体麻醉至小鼠呼吸停止,然后将小鼠放入解剖盘中。
2. 解剖准备:用剪刀剪开小鼠颈部皮肤,暴露气管,用注射器注入少量生理盐水,使气管扩张,便于观察。
3. 解剖腹部:剪开小鼠腹部皮肤,暴露腹腔,观察腹腔内脏器官的位置和形态。
4. 分离小肠:用镊子轻轻提起小肠,沿小肠方向剪开,分离出小肠。
5. 观察小肠:将小肠平铺在解剖盘上,用解剖镜观察小肠的形态、颜色、皱襞等特征。
6. 测量小肠长度:用尺子测量小肠的长度。
7. 小肠功能观察:向小肠内注入少量生理盐水,观察小肠蠕动情况。
8. 解剖回收:将小肠回收,进行清洗、消毒,备用。
9. 实验记录:详细记录实验过程,包括小鼠性别、体重、解剖过程、小肠形态、长度、蠕动情况等。
四、实验结果与分析1. 实验结果:(1)小鼠性别:雄性。
(2)小鼠体重:22g。
(3)小肠形态:呈长管状,表面有皱襞,颜色为粉红色。
(4)小肠长度:约20cm。
(5)小肠蠕动情况:注入生理盐水后,小肠出现明显的蠕动现象。
2. 结果分析:(1)小鼠小肠形态、颜色、长度等特征符合正常小鼠肠道结构。
(2)实验过程中,小鼠小肠蠕动情况良好,说明肠道功能正常。
五、实验结论通过本次实验,我们掌握了小鼠解剖技术,了解了小鼠肠道结构,观察了小肠形态、位置和功能,为后续相关实验奠定了基础。
六、实验注意事项1. 实验过程中,应严格遵守实验操作规程,确保实验安全。
2. 实验动物处死时,要确保小鼠麻醉充分,避免动物痛苦。
3. 解剖过程中,注意观察各器官的位置和形态,以免误伤。
4. 实验记录要详细,包括实验时间、实验过程、结果分析等。
小鼠气管上皮细胞使用说明
小鼠气管上皮细胞小鼠气管上皮细胞产品说明:为使能尽快开展实验,派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期,且每次发货为汇合率达到70%的细胞,收到细胞后即可开展实验。
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4. 建议收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态。
5. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
小鼠气管上皮细胞产品简介:1、产品名称:小鼠气管上皮细胞2、组织来源:小鼠气管组织3、产品规格:5×105cells / 25cm2培养瓶小鼠气管上皮细胞简介:小鼠气管上皮细胞分离自小鼠气管组织,分布于小鼠气管内表面,细胞贴壁生长,呈铺路鹅卵石状镶嵌排列,胞体肥厚、透明,呈菱形或多角形,形成多个小岛样克隆。
气管上皮是气道与外界环境接触的第一道防线,不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞,还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及免疫反应。
体外培养的原代气管上皮细胞因与体内原组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性,在基础及临床研究中极为重要。
小鼠气管上皮细胞培养基信息:1)培养基类型:DMEM2)添加因子:FBS、Insulin、EGF、Transferrin、Penicillin、Streptomycin 等小鼠气管上皮细胞使用方法:1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO细胞培2养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
小鼠肠道细胞类型
小鼠肠道细胞类型
摘要:
1.引言
2.小鼠肠道细胞的分类
3.小鼠肠道细胞的功能
4.小鼠肠道细胞的研究意义
5.结论
正文:
【引言】
肠道是人体最重要的消化器官之一,它承载着人体的消化和吸收功能。
小鼠作为生物医学研究中最常用的实验模型之一,其肠道细胞的研究对于理解人类肠道疾病的发生机制具有重要意义。
本文将对小鼠肠道细胞类型及其功能进行介绍。
【小鼠肠道细胞的分类】
小鼠肠道细胞可以分为上皮细胞、免疫细胞、内分泌细胞和神经细胞等。
其中,上皮细胞主要包括肠上皮细胞和杯状细胞,它们分别负责肠道的消化和吸收功能。
免疫细胞主要包括巨噬细胞、T 细胞和B 细胞等,它们参与肠道的免疫防御。
内分泌细胞主要包括肠神经内分泌细胞,它们负责调节肠道的神经功能。
神经细胞主要分布在肠道壁内,参与肠道的蠕动和分泌等功能。
【小鼠肠道细胞的功能】
肠上皮细胞具有吸收水分、电解质和营养物质的功能,同时还能分泌黏液
以保护肠道免受病原菌的侵害。
杯状细胞则负责分泌黏液,以保护肠上皮细胞。
巨噬细胞和T 细胞等免疫细胞参与肠道的免疫防御,抵抗病原菌的入侵。
肠神经内分泌细胞则通过分泌神经递质调节肠道的神经功能,影响肠道的运动和分泌。
【小鼠肠道细胞的研究意义】
研究小鼠肠道细胞有助于我们深入了解肠道细胞的生理功能和调控机制,为理解肠道疾病的发生提供理论依据。
同时,小鼠肠道细胞也可作为药物筛选和疾病治疗研究的模型,为新药研发和临床治疗提供实验依据。
【结论】
小鼠肠道细胞在消化、吸收、免疫和神经功能等方面发挥着重要作用。
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小鼠小肠粘膜上皮细胞
小鼠小肠粘膜上皮细胞产品介绍:
为使能尽快开展实验,派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期,且每次发货为汇合率达到70%的细胞,收到细胞后即可开展实验。
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同时,派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测,保证细胞纯度在90%以上;同时也需经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
小鼠小肠粘膜上皮细胞注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 请用相同条件的培养基用于细胞培养。
培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。
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小鼠小肠粘膜上皮细胞其他相关小鼠原代细胞:
小鼠小肠粘膜上皮细胞小鼠大隐静脉平滑肌细胞
小鼠肺微血管内皮细胞小鼠冠状动脉平滑肌细胞
小鼠肺血管平滑肌细胞小鼠大隐静脉内皮细胞
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞小鼠冠状动脉内皮细胞
小鼠气管上皮细胞小鼠骨细胞
小鼠气管平滑肌细胞小鼠滑膜细胞
小鼠肺成纤维细胞小鼠骨骼肌细胞
小鼠支气管上皮细胞小鼠表皮细胞
小鼠支气管成纤维细胞小鼠真皮成纤维细胞
小鼠肺大静脉平滑肌细胞小鼠破骨细胞
小鼠肺大动脉平滑肌细胞小鼠皮肤肥大细胞
小鼠肺大动脉内皮细胞小鼠前脂肪细胞
小鼠肺动脉成纤维细胞小鼠成骨细胞
小鼠肺大静脉内皮细胞小鼠关节软骨细胞
小鼠气管和支气管上皮细胞小鼠胎儿表皮角质形成层细胞小鼠胰岛细胞小鼠成年表皮角质形成层细胞小鼠胰腺星状细胞小鼠皮下脂肪细胞
小鼠胰腺导管上皮细胞小鼠内脏脂肪细胞
小鼠颌下腺上皮细胞小鼠脑动脉血管内皮细胞
小鼠腮腺细胞小鼠脑动脉血管平滑肌细胞小鼠乳腺上皮细胞小鼠脑静脉血管内皮细胞
小鼠胰腺上皮细胞小鼠脑静脉血管平滑肌细胞小鼠甲状腺上皮细胞小鼠脑膜细胞
小鼠淋巴管内皮细胞小鼠神经胶质细胞
小鼠淋巴成纤维细胞小鼠海马神经元细胞
小鼠外周血白细胞小鼠脑微血管内皮细胞
小鼠骨髓基质细胞小鼠脑成纤维细胞
小鼠食管上皮细胞小鼠神经小胶质细胞
小鼠食管平滑肌细胞小鼠雪旺氏细胞
小鼠肠动脉内皮细胞小鼠小脑颗粒细胞
小鼠肠静脉内皮细胞小鼠嗅鞘细胞
小鼠肝实质细胞小鼠视网膜微血管内皮细胞小鼠肝动脉内皮细胞小鼠小梁网细胞
小鼠肝动脉平滑肌细胞小鼠视网膜色素上皮细胞
小鼠小肠血管内皮细胞小鼠视网膜muller细胞
小鼠小肠隐窝上皮细胞小鼠虹膜色素上皮细胞
小鼠肝内胆管上皮细胞小鼠晶状体上皮细胞
小鼠胃粘膜上皮细胞小鼠角膜上皮细胞
小鼠肝窦内皮细胞小鼠视网膜神经节细胞
小鼠肝星形细胞小鼠角膜成纤维细胞
小鼠直肠平滑肌细胞小鼠脉络膜血管细胞
小鼠小肠平滑肌细胞小鼠牙乳头细胞
小鼠结肠平滑肌细胞小鼠肝外胆管上皮细胞
小鼠肠上皮细胞小鼠肝Kupffer细胞
小鼠肠微血管细胞小鼠骨髓间充质干细胞
小鼠肠巨噬细胞小鼠下丘脑神经元细胞
小鼠子宫内膜上皮细胞小鼠睾丸支持细胞
小鼠卵巢颗粒细胞小鼠心肌微血管内皮细胞
小鼠子宫颈上皮细胞小鼠真皮微血管上皮细胞
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