超滤管的使用事项
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超滤管使用的注意事项
超滤管分为0.5ml、4ml、15ml三种上样体积,并有3kd、10kd、30kd、50kd、100kd五种截留分子量。可用于生物样品纯化、蛋白质浓缩、脱盐和缓冲液更换等。具体操作使用的时候一定要注意几个点。
1、首先,要选择合适的超滤管,主要是选择多大的截留分子量。这个要根据自己的实际情况,通常没有特别需要的话,截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3。比如,目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、一般情况下,刚买来的超滤管是干燥的,在使用前要进行一定的预冷。先要加入水量过膜的MilliQ水,冰浴或冰箱里预冷几分钟。操作的时候动作要轻。
3、不同离心机的转速有所不同,注意转速和加速度不要太快,否则直接对超滤膜就有损坏,在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
4、对超滤管要进行有序的处理,以实现重复利用的效果。以下是简单的步骤:倒出超滤管里的水,用milliQ水轻轻润洗几次。然后在室温情况下,平衡超滤管加入0.2M的NaOH溶液。离心10min,倒出残留的NaOH溶液,将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时,不断稀释NaOH浓度。一般来说,按照上述步骤和注意事项,每根管用三四年不会坏。