3.2月季的花药培养(经典).ppt13.ppt
合集下载
3.2月季的花药培养ppt课件
染色体数无需加倍。 而花药培养技术取材为花药，培养的为单倍体幼 苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使 染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。
18
总结：
19
1.基因型为AaBb的水稻(２４条染色体)的花药通过无菌操
作，接入试管后，在一定条件下培养成试管苗。
(１)愈伤组织是花粉细胞分裂形成的不规则的细胞团，
的变化，因而需要鉴定和筛选。
【思考14】为什么通过愈伤组织形成的植株会发生 染色体倍性的变化？
有些是由花粉发育形成的单倍体植株， 有些是由花粉壁细胞发育形成的二倍体植株。
17
【思考15】植物组织培养技术与花药培养技术有何异同？ 相同点：二者均为离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,
再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。 不同点：植物组织培养技术所用的外植体为体细胞，
理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件 P1329
二、实验操作 （一）材料的选取 P39 1.选择花药时一般通过 镜检 确定花粉发育时期，
此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂 是 醋酸洋红 和焙花青－铬钒溶液，它们分别可以 将细胞核染成 红 色和 蓝黑 色。 2.在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用 卡诺氏固定液 处理20min。该试剂的配制方法 是将无水酒精和冰醋酸 按体积比为 3:1 的比例 混合均匀。
22
P38第二段 9
【思考5】什么是体细胞胚？ P38小字 在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为
与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦 与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。
【思考6】单倍体性细胞产生的花粉胚,也可发育成为 单倍体植株，这和植物的体细胞克隆有区别吗？
有区别。单倍体性细胞发育成的单倍体植株表现 为高度不育，植物的体细胞克隆的植株可育。
18
总结：
19
1.基因型为AaBb的水稻(２４条染色体)的花药通过无菌操
作，接入试管后，在一定条件下培养成试管苗。
(１)愈伤组织是花粉细胞分裂形成的不规则的细胞团，
的变化，因而需要鉴定和筛选。
【思考14】为什么通过愈伤组织形成的植株会发生 染色体倍性的变化？
有些是由花粉发育形成的单倍体植株， 有些是由花粉壁细胞发育形成的二倍体植株。
17
【思考15】植物组织培养技术与花药培养技术有何异同？ 相同点：二者均为离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,
再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。 不同点：植物组织培养技术所用的外植体为体细胞，
理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件 P1329
二、实验操作 （一）材料的选取 P39 1.选择花药时一般通过 镜检 确定花粉发育时期，
此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂 是 醋酸洋红 和焙花青－铬钒溶液，它们分别可以 将细胞核染成 红 色和 蓝黑 色。 2.在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用 卡诺氏固定液 处理20min。该试剂的配制方法 是将无水酒精和冰醋酸 按体积比为 3:1 的比例 混合均匀。
22
P38第二段 9
【思考5】什么是体细胞胚？ P38小字 在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为
与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦 与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。
【思考6】单倍体性细胞产生的花粉胚,也可发育成为 单倍体植株，这和植物的体细胞克隆有区别吗？
有区别。单倍体性细胞发育成的单倍体植株表现 为高度不育，植物的体细胞克隆的植株可育。
月季的花药培养MicrosoftPowerPoint幻灯片
3、其他因素：
亲本植株的生长条件、材料的低温预处理、接种 密度、培养的环境条件等对诱导的成功率都有一定的 影响。
三、 实验操作
（一） 材料的选取
1．取材 (1)材料的选取：对绝大多数植物而言，适宜花粉培 养的时期是__花__期__早__期__。 (2)花药发育时期的确定：一般通过_镜__检__来确定花粉 是否处于适宜的发育期。 (3)镜检方法：最常用的是__醋__酸__洋__红___法。但某些植 物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青—铬矾法。 这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。
为什么花瓣松 动会给材料的消毒 带来困难？
花瓣松动后， 微生物就可能侵 入到花药，给材 料的消毒带来困 难。
2、培养基的组成：
花药培养所采用的培养基各成分中植物生长调节 剂的水平和配比起决定作用。 ⑴诱导愈伤组织或胚状体产生的培养基：广泛使用 2， 4-D、IAA； ⑵诱导分化的培养基常除去2，4-D而以IBA代之。
分 裂
胞
花粉 母细 胞
1个
小孢子 （小孢子四分体时期
4个
4个
单核居中期
4个
单核靠边期
4个
有丝
双核期）
分裂
花粉管细胞核 生殖细胞核
4个
营养细胞
生殖细胞
有分 丝裂
精子
8个
解释：花粉是由小孢子母细胞先经减数分裂后经 有丝分裂并依次经历了四分体时期、单核期和双 核期等阶段后产生的。单核期的细胞含浓厚的原 生质，核开始时位于细胞的中央。随着细胞不断 长大，核由中央移向细胞一侧，此时是花药组织 培养的最佳时期，并分裂成1个生殖细胞核和1个 花粉管细胞核，进而形成两个细胞，生殖细胞将 再分裂一次，形成两个精子。
（三）接种和培养
亲本植株的生长条件、材料的低温预处理、接种 密度、培养的环境条件等对诱导的成功率都有一定的 影响。
三、 实验操作
（一） 材料的选取
1．取材 (1)材料的选取：对绝大多数植物而言，适宜花粉培 养的时期是__花__期__早__期__。 (2)花药发育时期的确定：一般通过_镜__检__来确定花粉 是否处于适宜的发育期。 (3)镜检方法：最常用的是__醋__酸__洋__红___法。但某些植 物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青—铬矾法。 这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。
为什么花瓣松 动会给材料的消毒 带来困难？
花瓣松动后， 微生物就可能侵 入到花药，给材 料的消毒带来困 难。
2、培养基的组成：
花药培养所采用的培养基各成分中植物生长调节 剂的水平和配比起决定作用。 ⑴诱导愈伤组织或胚状体产生的培养基：广泛使用 2， 4-D、IAA； ⑵诱导分化的培养基常除去2，4-D而以IBA代之。
分 裂
胞
花粉 母细 胞
1个
小孢子 （小孢子四分体时期
4个
4个
单核居中期
4个
单核靠边期
4个
有丝
双核期）
分裂
花粉管细胞核 生殖细胞核
4个
营养细胞
生殖细胞
有分 丝裂
精子
8个
解释：花粉是由小孢子母细胞先经减数分裂后经 有丝分裂并依次经历了四分体时期、单核期和双 核期等阶段后产生的。单核期的细胞含浓厚的原 生质，核开始时位于细胞的中央。随着细胞不断 长大，核由中央移向细胞一侧，此时是花药组织 培养的最佳时期，并分裂成1个生殖细胞核和1个 花粉管细胞核，进而形成两个细胞，生殖细胞将 再分裂一次，形成两个精子。
（三）接种和培养
32月季花药培养(精品PPT)
③经历(jīnglì)时期： 四分体时期、 期、单核 期 双核
注：此处的四分体时期不同于减数分裂中的四分体。
： 思减考数色分单裂体中。四分体：联会后一对同源染色体中含有四个姐妹染
1、4两个个小连精孢在子子一和细起花胞的粉四单管分倍细体体胞期细核：胞花的粉基母因细型胞是经否减相数同分？裂形成的 2、每个精子中的染色体数和花粉母细胞中染色体数什么关 系？
②花粉胚 ：植物组织培养过程中，某些单倍体性细胞在形态 上转变为与合子发育成的胚非常相似(xiānɡ sì)的结构，称做花粉 胚或胚状体。
③胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把从胚状体 到从芽的过程称为 分化 ，而把从愈伤组织到从芽的过程称
为 再分化。
④花粉植株的特点：单倍体植株，植株弱小，高度不育。
菜的为小B麦5培的养为③基N6挑，选马铃单薯核、期月花季药(yuè方jì)的法为：MS应，油中选 择完全未开放的花蕾，微生物少，易
3、其他因素
消毒。
• 亲本植株生长条件、材料的低温预处理、接种
密度等
第十七页，共三十一页。
实验 操作 (shíyàn)
一、材料的选取(xuǎnqǔ) 二、材料的消毒 三、接种和培养
物的花药进行培养。 • 二、课题重点和难点： • 选取适宜(shìyí)的培养材料和培养基。
第五页，共三十一页。
花的结构
(jiégòu)
第六页，共三十一页。
花托
花萼
(huā è)
花瓣
雄蕊
(xióngruǐ)
雌蕊
花药
花丝 柱头 花柱
子房
一、根底知识
〔一〕被子植物(bèizǐ-zhíwù)的花粉发育
〔三〕影响(yǐngxiǎng)花药培养的因素
注：此处的四分体时期不同于减数分裂中的四分体。
： 思减考数色分单裂体中。四分体：联会后一对同源染色体中含有四个姐妹染
1、4两个个小连精孢在子子一和细起花胞的粉四单管分倍细体体胞期细核：胞花的粉基母因细型胞是经否减相数同分？裂形成的 2、每个精子中的染色体数和花粉母细胞中染色体数什么关 系？
②花粉胚 ：植物组织培养过程中，某些单倍体性细胞在形态 上转变为与合子发育成的胚非常相似(xiānɡ sì)的结构，称做花粉 胚或胚状体。
③胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把从胚状体 到从芽的过程称为 分化 ，而把从愈伤组织到从芽的过程称
为 再分化。
④花粉植株的特点：单倍体植株，植株弱小，高度不育。
菜的为小B麦5培的养为③基N6挑，选马铃单薯核、期月花季药(yuè方jì)的法为：MS应，油中选 择完全未开放的花蕾，微生物少，易
3、其他因素
消毒。
• 亲本植株生长条件、材料的低温预处理、接种
密度等
第十七页，共三十一页。
实验 操作 (shíyàn)
一、材料的选取(xuǎnqǔ) 二、材料的消毒 三、接种和培养
物的花药进行培养。 • 二、课题重点和难点： • 选取适宜(shìyí)的培养材料和培养基。
第五页，共三十一页。
花的结构
(jiégòu)
第六页，共三十一页。
花托
花萼
(huā è)
花瓣
雄蕊
(xióngruǐ)
雌蕊
花药
花丝 柱头 花柱
子房
一、根底知识
〔一〕被子植物(bèizǐ-zhíwù)的花粉发育
〔三〕影响(yǐngxiǎng)花药培养的因素
2015-2016学年 3.2《月季的花药培养》课件
注：花粉母细胞经减数分裂形成4个单核花粉粒，每个花粉粒的 细胞核进行一次有丝分裂形成1个花粉管细胞核和1个生殖细胞 核，每个生殖细胞核再进行一次有丝分裂生成2个精子。
（二）产生花粉植株的两种途径
...
丛芽
诱导
花药中 ① 的花粉
花药中 ② 的花粉
脱分化
分化
胚状体
再分化
脱分化
愈伤组织
丛芽 生根
移栽 原因：培养基中的激素种类及浓度配比
胚状体发育途径
烟草花药培养
.Байду номын сангаас.
①
②
③
④
部分花药通过胚状体途径形成小植株
愈伤组织发育途径
水稻花药培养
...
接种在平板上的水稻花药
部分花药产生愈伤组织
愈伤组织转接种到再生培养基
愈伤组织分化形成再生植株
(三)、影响花药培养的主要因素
...
1、材料的选择 不同植物的诱导成功率不同 . 注意：选择最合适的花粉发育时期 :单核靠边期 同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有直接的影响 . ①不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩， （一般选月季的初花期） 容易破碎； 合适的花粉发育期 （单核居中期与靠边期之间） ②不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动， 2、培养基的组成（ MS培养基+不同比例的植物生长调节 给材料消毒带来困难； 激素）
（二）材料的消毒
...
讨论：
为什么花瓣松动会给
为什么花瓣松动会给材 材料的消毒带来困难？ 料的消毒带来困难？ 答：花瓣松动后，微生 物就可能侵入到花药，给材料 的消毒带来困难。
... 1 灭菌后花蕾，要在 无菌条件下除去萼片和花瓣， 并立即将花药接种到培养基上。 2 在剥离花药时，要尽量 不损伤花药 （否则接种后， 容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻 底 去除花丝 ，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或 主要原因是 胚状体的形成。 花粉管核和 25℃ 3 通常每瓶接种花药 7-10个 ，温度控制在 左 生殖核融合 不需要光照 右， 。幼小植株形成后才 需要光照 造成的 。
（二）产生花粉植株的两种途径
...
丛芽
诱导
花药中 ① 的花粉
花药中 ② 的花粉
脱分化
分化
胚状体
再分化
脱分化
愈伤组织
丛芽 生根
移栽 原因：培养基中的激素种类及浓度配比
胚状体发育途径
烟草花药培养
.Байду номын сангаас.
①
②
③
④
部分花药通过胚状体途径形成小植株
愈伤组织发育途径
水稻花药培养
...
接种在平板上的水稻花药
部分花药产生愈伤组织
愈伤组织转接种到再生培养基
愈伤组织分化形成再生植株
(三)、影响花药培养的主要因素
...
1、材料的选择 不同植物的诱导成功率不同 . 注意：选择最合适的花粉发育时期 :单核靠边期 同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有直接的影响 . ①不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩， （一般选月季的初花期） 容易破碎； 合适的花粉发育期 （单核居中期与靠边期之间） ②不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动， 2、培养基的组成（ MS培养基+不同比例的植物生长调节 给材料消毒带来困难； 激素）
（二）材料的消毒
...
讨论：
为什么花瓣松动会给
为什么花瓣松动会给材 材料的消毒带来困难？ 料的消毒带来困难？ 答：花瓣松动后，微生 物就可能侵入到花药，给材料 的消毒带来困难。
... 1 灭菌后花蕾，要在 无菌条件下除去萼片和花瓣， 并立即将花药接种到培养基上。 2 在剥离花药时，要尽量 不损伤花药 （否则接种后， 容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻 底 去除花丝 ，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或 主要原因是 胚状体的形成。 花粉管核和 25℃ 3 通常每瓶接种花药 7-10个 ，温度控制在 左 生殖核融合 不需要光照 右， 。幼小植株形成后才 需要光照 造成的 。
高二生物月季的花药培养PPT课件
17
三、被子植物胚囊的形成 1、雌蕊的组成
柱头、花柱、子房 2、子房的结构
18
花粉管 精子
珠被 极核 卵细胞
子房壁
珠孔
被子植物子房的结构
胚珠的结构
19
3、卵细胞的形成
胚珠的外层是珠被，里面是胚囊。胚囊是由胚珠
内的胚囊母细胞（大孢子母细胞）发育而成。胚
囊母细胞经过减数分裂，产生四个细胞，称为大
孢子，每个大孢子内的染色体数目都比胚囊母细
31
⑤单核期花药的挑选
为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开 放的花蕾。盛开的或略微开放的花，都不宜选 作实验材料。
⑥选择完全未开放花蕾的原因
完全未开放的花蕾，可挑选到单核期的花 药，菌少、易消毒 ⑦花药培养时间
一般月季的花药培养时间选在五月初到五月的中 旬，即月季的初花期。初花期的花蕾营养状态及 生理状态会比较好，可能提高花粉的诱导成功率32
②培养：一般经过20-30天培养后，会发现花药 开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体 长出愈伤组织则将愈伤组织及时转移到分化培养 基上，以便进一步分化出再生植株
③注意：如果花药开裂释放出胚状体，则一个 花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开 裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培 养基上，否则这些植株将很难分开。
胞减少一半。这4个细胞排成一行，其中靠近珠
孔的3个细胞退化，最里面的发育为胚囊细胞，
胚囊细胞的核连续进行三次有丝分裂，但是每次
核分裂后，并不接着进行细胞质分裂，就形成了
8个细胞核的胚囊。开始，这 8个细胞核分别位于
胚囊的两端，每端4个，接着，每端各有1个细胞
核移到胚囊的中央，这就是极核，所以再胚囊中
4个生殖细胞核 有分
三、被子植物胚囊的形成 1、雌蕊的组成
柱头、花柱、子房 2、子房的结构
18
花粉管 精子
珠被 极核 卵细胞
子房壁
珠孔
被子植物子房的结构
胚珠的结构
19
3、卵细胞的形成
胚珠的外层是珠被，里面是胚囊。胚囊是由胚珠
内的胚囊母细胞（大孢子母细胞）发育而成。胚
囊母细胞经过减数分裂，产生四个细胞，称为大
孢子，每个大孢子内的染色体数目都比胚囊母细
31
⑤单核期花药的挑选
为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开 放的花蕾。盛开的或略微开放的花，都不宜选 作实验材料。
⑥选择完全未开放花蕾的原因
完全未开放的花蕾，可挑选到单核期的花 药，菌少、易消毒 ⑦花药培养时间
一般月季的花药培养时间选在五月初到五月的中 旬，即月季的初花期。初花期的花蕾营养状态及 生理状态会比较好，可能提高花粉的诱导成功率32
②培养：一般经过20-30天培养后，会发现花药 开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体 长出愈伤组织则将愈伤组织及时转移到分化培养 基上，以便进一步分化出再生植株
③注意：如果花药开裂释放出胚状体，则一个 花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开 裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培 养基上，否则这些植株将很难分开。
胞减少一半。这4个细胞排成一行，其中靠近珠
孔的3个细胞退化，最里面的发育为胚囊细胞，
胚囊细胞的核连续进行三次有丝分裂，但是每次
核分裂后，并不接着进行细胞质分裂，就形成了
8个细胞核的胚囊。开始，这 8个细胞核分别位于
胚囊的两端，每端4个，接着，每端各有1个细胞
核移到胚囊的中央，这就是极核，所以再胚囊中
4个生殖细胞核 有分