新生儿溶血病检测的体会
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新生儿溶血病检测的体会
新生儿溶血病检测的体会
【关键词】新生儿;溶血病;检测
1材料与方法
1.1对象我院及市区各医院新生儿科送检母婴血型不合的黄疸患儿及母亲血样256例。1.2试剂单克隆抗-A、抗-B、抗-D定血型试剂,标准红细胞,酸放散液,低离子/抗人球蛋白卡、BYL离心机、孵育器由瑞士达亚美公司提供。
1.3方法
1.3.1母亲和婴儿ABO、RhD血型鉴定【1】。
1.3.2直接抗人球蛋白试验取新生儿红细胞,用0.9%生理盐水洗涤3次,配成0.8%的红细胞悬液,在低离子/抗人球蛋白卡中参加50ul上述红细胞悬液,离心10分钟,判读结果,记录。
1.3.3游离试验取新生儿血样本,离心,取血浆,在低离子/抗人球蛋白卡中分别参加50ul0.8%的“A〞或者“B〞和“O〞标准红细胞悬液,各孔均参加50ul新生儿血浆,37℃孵育15分钟,离心10分钟,判读结果,记录。
1.3.4放散试验用0.9%生理盐水洗涤新生儿红细胞4次,取压积红细胞1ml,参加放散液A 液800ul和B液200ul,充分混匀,常温下放置2分钟,离心1分钟,取上清液500ul,移入干净试管,再参加50ul中和液,混匀,离心,上清液便是用于检测的放散液了,在低离子/抗人球蛋白卡中分别参加50ul0.8%的“A〞或者“B〞和“O〞标准红细胞悬液,各孔均参加50ul 放散液,37℃孵育15分钟,离心10分钟,判读结果,记录。
1.3.5结果判读直接抗人球蛋白试验以出现凝集为阳性,无凝集为阴性;游离试验和放散试验均以检出和新生儿抗体反响为阳性,无反响为阴性。
2结果
单项放散试验阳性或其他合并放散试验阳性的结果为HDN阳性,其他阳性为可疑HDN。对256例母婴血型不合的黄疸患儿进行检测,共检出阳性例数130例,阳性率50.8%,见表1。3体会
新生儿溶血病见于胎儿和新生儿早期。多个人类红细胞血型系统可致新生儿溶血病,我国以ABO血型不合溶血病发生率最高【2】。ABOHDN多发生于母亲血型为O型,患儿血型为A型或B型。因为O型母亲其抗A或抗B除了IgM型的天然抗体外,同时还有IgG型的免疫抗体,而A型或B型母亲血清中主要含抗BIgM,免疫性抗体IgG含量极少。由于胎儿红细胞上的A位点较B位点多,故发生A型婴儿的HDN比B型婴儿多【3】。与文献报道相符。目前采用的溶血“三项试验〞:直接抗人球蛋白试验、抗体放散试验、游离抗体测定。抗体放散试验阳性或“三项〞试验中有二项或三项均阳性,可诊断为新生儿溶血病【4】。直接抗人球蛋白试验用于检测新生儿红细胞是否受到IgG抗A所所致敏,结果显示阳性率较低,仅为6.2%,可能是由于ABOHDN患儿红细胞上抗体结合得较少,因此直接抗人球蛋白试验常出现阴性结果。游离抗体测定是检测新生儿血清中有无来自母亲的IgG抗A,结果显示阳性率也较低,为15.6%。这与母体IgG进入胎儿体内的量有关。假设有游离抗体存在,提示病
情较严重。抗体放散试验检测新生儿红细胞上是否存在IgG抗A,结果显示阳性率为50.8%。本文确诊ABO新生儿溶血病的130例患儿,其抗体放散试验均为阳性。由此可见,抗体放散试验是早期诊断ABO新生儿溶血病最敏感,最有效的方法。母婴血型鉴定、直接抗人球蛋白试验、游离抗体测定也作为辅助诊断的方法。
参考文献
【1】叶应妩,主编.全国临床检验操作规程[M]第三版.南京东南大学出版社,2006:246-247,265.
【2】伍曼仪,黄绍良,主编.现代小儿血液病学,福建科学技术出版社,2003:140-141. 【3】全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司,2006:266.
【4】袁学敏,魏胜男,田方.ABO新生儿溶血病的血清学检查.医学检验与临床,2021,5:1050-1052.