农药残留检测技术(课件)分析
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农药残留检测技术概述PPT课件
10
3 添加回收率
空白样品中加入一定浓度农药（C1）后， 通过方法处理，样品中农药测定值 （C2 ）与
加入值的百分比（F）。 F=C2/C1*100%
添加回收率旨在衡量测定值与真值之间 的误差是制定农残分析方法准确度和可行性的
指标。
11
一般以最大残留限量值水平高一个数量级、 低一个数量级和同一个数量级三个浓度水平进行 添加，或者在1、5和10倍方法检出限水平添加， 测定添加回收率；添加回收率至少重复三次。
25
2 固相萃取法(SPE)
分析目的物在键合硅吸附剂与溶剂中 进行分配，而与干扰物分离。
适用范围广，各种不同结构类型的 SPE商品柱适用于各种结构类型的农药分析。
已成为农残分析主要前处理手段，代 替LLE。发达国家广泛应用，我国正在推广
（如NY/T761-2008）。
26
液液萃取法 （LLE）
固相萃取法(SPE)
8
（2）方法检出限 有样品基质存在，在与样品测定完全相同的 方法和仪器下，某种方法能够检出分析目标物的
最小量或最低浓度。
9
2 最大残留限量 在农畜产品中农药残留的法定最高允许浓 度，又称最高残留限量，以每千克农畜产品中 农药残留的毫克数（毫克/千克）表示。
在农残检测中，以最大残留限量值判断是否超 标（GB/T2763-2012）。
23
● GB/T5009.20 有机磷农药 50g样，加50ml水和100ml丙酮，匀浆1-
2min 。抽滤。 ● GB/T5009.103 甲胺磷，乙酰甲胺磷
10g样加无水硫酸钠研磨（脱水），加活 性炭0.2-0.4g（脱色），用80ml丙酮振荡30min。
抽滤。 ● GB/T5009.145 氨基甲酸酯农药 5g样，加水（样品含水量），加10ml丙酮，
3 添加回收率
空白样品中加入一定浓度农药（C1）后， 通过方法处理，样品中农药测定值 （C2 ）与
加入值的百分比（F）。 F=C2/C1*100%
添加回收率旨在衡量测定值与真值之间 的误差是制定农残分析方法准确度和可行性的
指标。
11
一般以最大残留限量值水平高一个数量级、 低一个数量级和同一个数量级三个浓度水平进行 添加，或者在1、5和10倍方法检出限水平添加， 测定添加回收率；添加回收率至少重复三次。
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2 固相萃取法(SPE)
分析目的物在键合硅吸附剂与溶剂中 进行分配，而与干扰物分离。
适用范围广，各种不同结构类型的 SPE商品柱适用于各种结构类型的农药分析。
已成为农残分析主要前处理手段，代 替LLE。发达国家广泛应用，我国正在推广
（如NY/T761-2008）。
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液液萃取法 （LLE）
固相萃取法(SPE)
8
（2）方法检出限 有样品基质存在，在与样品测定完全相同的 方法和仪器下，某种方法能够检出分析目标物的
最小量或最低浓度。
9
2 最大残留限量 在农畜产品中农药残留的法定最高允许浓 度，又称最高残留限量，以每千克农畜产品中 农药残留的毫克数（毫克/千克）表示。
在农残检测中，以最大残留限量值判断是否超 标（GB/T2763-2012）。
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● GB/T5009.20 有机磷农药 50g样，加50ml水和100ml丙酮，匀浆1-
2min 。抽滤。 ● GB/T5009.103 甲胺磷，乙酰甲胺磷
10g样加无水硫酸钠研磨（脱水），加活 性炭0.2-0.4g（脱色），用80ml丙酮振荡30min。
抽滤。 ● GB/T5009.145 氨基甲酸酯农药 5g样，加水（样品含水量），加10ml丙酮，
农药残留的速测技PPT课件
• 三、结果计算 结果以酶被抑制的程度（抑制率）表
示。 抑制率（%）=[ （DA0-DAt）/ DA0]×100 1 当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50% 时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲 酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性 结果的样品需要重复检验2次以上。 2 对阳性结果的样品，可用其它方法进 一步确定具体农药品种和含量。
土，剪成 1cm左右见方碎片，取 5g 放入 带盖瓶中，加入 10mL 纯净水，震摇 50 次，静置 2min 以上。 • 2.取一片农药残留检测卡，用白色药片沾 取提取液，放置 10min 以上进行预反应， 预反应后的药片表面必须保持湿润。 • 3.将农药残留检测卡对折，用手捏 3min， 使红色药片与白色药片叠合发生反应。 • 4.每批农药残留检测应设一个纯净水的空 白对照卡。
农药残留的速测技术
• 农药残留是指农药使用后残存于环境、生 物体和食品中的农药母体衍生物、代谢物、 降解物和杂质的总称。造成蔬菜农药残留 量超标的主要是一些国家禁止在蔬菜生产 中使用的有机磷农药和氨基甲酸酯类农药， 如甲胺磷、氧化乐果、甲拌磷、对硫磷、 甲基对硫磷等。食用含有大量高毒、剧毒 农药残留引起的食物会导致人、畜急性中 毒事故。长期食用农药残留超标的农副产 品，虽然不会导致急性中毒，但可能引起 人和动物的慢性中毒，导致疾病的发生， 诱发癌症，甚至影响到下一代。
• 农残检测必要性
• 随着农业产业化的发展，农产品的生产越 来越依赖于农药、抗生素和激素等外源物 质。我国农药在粮食、蔬菜、水果、茶叶 上的用量居高不下，而这些物质的不合理 使用必将导致农产品中的农药残留超标， 影响消费者食用安全，严重时会造成消费 者致病、发育不正常，甚至直接导致中毒 死亡。农药残留超标也会影响农产品的贸 易。
农药残留检测技术(课件)分析
底物+胆碱酯酶---水解→胆碱
胆碱+显色剂 →→→黄色溶液
（二）抑制率计算方法
通过测定果蔬中的残留农药使乙酰胆碱酯酶活性变化 的程度来测定样品果蔬中的此类残留农药毒性，仪器 测定的残留农药大小用“抑制率”来表示。抑制率是 农药对酶抑制程度的显示指标，其计算方式为:
I = ((A0-At)/A0)×100％
6、避免交叉污染，每次取不同的样品，清洗采样器具。
7、先做对照检测，再做样品检测。对照样品吸光度值 △AC应该在如下区间：实验室温度在25 °C以上时在 0.3－0.8之间；实验室温度在10 °C以下时在0.2－0.8 之间）。空白的作用除了对照作用之外，还可以判断 试剂是否失效，如果加入底物的时候比色皿中液体立 刻变成深黄，或者加入底物之后试剂不变黄，说明试 剂已经失效。
I ——— 抑制率 A0 ——— 对照的吸光度值 At ——— 样品溶液的吸光度值
（三） GB/T 5009.199-2003方法介绍
1、配试剂 缓冲液、酶试剂、显色剂、底物均按照仪器自带
的使用说明书的要求配制而成（所用水为蒸馏水或纯 净水）。除缓冲溶液可常温放置，其他试剂配置后必 须0-4℃避光保存，使用前冷却至室温，保存期不宜
泉水，天然饮用水。 4、酶液、显色剂与底物切忌长时间室温下放置，用后应
立即放入冷藏室内（0-4℃）。 5、提取液可以放置常温下保存。（从冰箱中拿出的酶液
要等他恢复到室温才能使用，不然会导致酶的活性不 够，酶的活性最适温度37摄氏度）。
5、韭菜、生姜、葱、蒜、辣椒等刺激性气味蔬菜中，含 有对酶活性有影响的物质，容易产生假阳性。处理这 类样品时，可采取整株蔬菜浸泡。
2、酶抑制率法（分光光度法）
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯 酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正 相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰 胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物 质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变 化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中 是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
胆碱+显色剂 →→→黄色溶液
（二）抑制率计算方法
通过测定果蔬中的残留农药使乙酰胆碱酯酶活性变化 的程度来测定样品果蔬中的此类残留农药毒性，仪器 测定的残留农药大小用“抑制率”来表示。抑制率是 农药对酶抑制程度的显示指标，其计算方式为:
I = ((A0-At)/A0)×100％
6、避免交叉污染，每次取不同的样品，清洗采样器具。
7、先做对照检测，再做样品检测。对照样品吸光度值 △AC应该在如下区间：实验室温度在25 °C以上时在 0.3－0.8之间；实验室温度在10 °C以下时在0.2－0.8 之间）。空白的作用除了对照作用之外，还可以判断 试剂是否失效，如果加入底物的时候比色皿中液体立 刻变成深黄，或者加入底物之后试剂不变黄，说明试 剂已经失效。
I ——— 抑制率 A0 ——— 对照的吸光度值 At ——— 样品溶液的吸光度值
（三） GB/T 5009.199-2003方法介绍
1、配试剂 缓冲液、酶试剂、显色剂、底物均按照仪器自带
的使用说明书的要求配制而成（所用水为蒸馏水或纯 净水）。除缓冲溶液可常温放置，其他试剂配置后必 须0-4℃避光保存，使用前冷却至室温，保存期不宜
泉水，天然饮用水。 4、酶液、显色剂与底物切忌长时间室温下放置，用后应
立即放入冷藏室内（0-4℃）。 5、提取液可以放置常温下保存。（从冰箱中拿出的酶液
要等他恢复到室温才能使用，不然会导致酶的活性不 够，酶的活性最适温度37摄氏度）。
5、韭菜、生姜、葱、蒜、辣椒等刺激性气味蔬菜中，含 有对酶活性有影响的物质，容易产生假阳性。处理这 类样品时，可采取整株蔬菜浸泡。
2、酶抑制率法（分光光度法）
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯 酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正 相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰 胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物 质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变 化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中 是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
《农药残留测定方法》课件
总结词
快速、简便
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ详细描述
酶联免疫法利用抗原与抗体的特异性结合，通过酶催化底物显色反应对待测组 分进行定量分析。该方法具有快速、简便、低成本的特点。
生物测定法
总结词：高选择性
详细描述：生物测定法利用生物体或生物体的某些组成部分 对待测组分的反应进行测定，具有高选择性的特点。该方法 适用于测定低浓度农药残留，但需要较长的实验时间。
《农药残留测定方法》PPT 课件
contents
目录
• 农药残留概述 • 农药残留测定方法 • 农药残留测定标准 • 农药残留测定技术的发展趋势 • 实际应用案例
01 农药残留概述
农药残留定义
农药残留
指农药使用后残存于生物体、农 副产品和环境中的微量农药原体 、有毒代谢物、降解物和杂质的
总称。
03 农药残留测定标 准
国际标准
世界卫生组织（WHO）农药残留限量标准
该标准由WHO制定，旨在确保食品中农药残留量不会对人类健康造成危害。该标准对 各种农药在不同食品中的限量进行了规定。
联合国粮食及农业组织（FAO）农药残留限量标准
该标准由FAO制定，旨在确保食品中农药残留量不会对人类健康造成危害。该标准对各 种农药在不同食品中的限量进行了规定。
问题，保障公众健康。
多残留检测技术
要点一
总结词
多残留检测技术是农药残留测定的另一重要发展方向，能 够同时检测多种农药残留物。
要点二
详细描述
由于农业生产中使用的农药种类繁多，传统的单残留检测 方法已经无法满足需求。多残留检测技术能够同时检测多 种农药残留物，大大提高了检测效率，并且能够更全面地 了解农产品中农药残留的情况。这种技术的发展对于保障 食品安全和公众健康具有重要意义。
快速、简便
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ详细描述
酶联免疫法利用抗原与抗体的特异性结合，通过酶催化底物显色反应对待测组 分进行定量分析。该方法具有快速、简便、低成本的特点。
生物测定法
总结词：高选择性
详细描述：生物测定法利用生物体或生物体的某些组成部分 对待测组分的反应进行测定，具有高选择性的特点。该方法 适用于测定低浓度农药残留，但需要较长的实验时间。
《农药残留测定方法》PPT 课件
contents
目录
• 农药残留概述 • 农药残留测定方法 • 农药残留测定标准 • 农药残留测定技术的发展趋势 • 实际应用案例
01 农药残留概述
农药残留定义
农药残留
指农药使用后残存于生物体、农 副产品和环境中的微量农药原体 、有毒代谢物、降解物和杂质的
总称。
03 农药残留测定标 准
国际标准
世界卫生组织（WHO）农药残留限量标准
该标准由WHO制定，旨在确保食品中农药残留量不会对人类健康造成危害。该标准对 各种农药在不同食品中的限量进行了规定。
联合国粮食及农业组织（FAO）农药残留限量标准
该标准由FAO制定，旨在确保食品中农药残留量不会对人类健康造成危害。该标准对各 种农药在不同食品中的限量进行了规定。
问题，保障公众健康。
多残留检测技术
要点一
总结词
多残留检测技术是农药残留测定的另一重要发展方向，能 够同时检测多种农药残留物。
要点二
详细描述
由于农业生产中使用的农药种类繁多，传统的单残留检测 方法已经无法满足需求。多残留检测技术能够同时检测多 种农药残留物，大大提高了检测效率，并且能够更全面地 了解农产品中农药残留的情况。这种技术的发展对于保障 食品安全和公众健康具有重要意义。
食品农药残留快速检测PPt(PPT56页)
酶片法 速测卡法 检测箱法 酸碱指示剂法 试剂盒法
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农药残留快检方法：
• 2、免疫分析法 ：高等动物都有免疫功能，当细菌、 病毒和有害物等病原入侵时，能产生抵御外来物的 抗体，这就是动物的免疫反应。
• 致病的外来物被称为抗原。免疫是机体识别和排除 进入体内的抗原性异物的保护性反应。
• 免疫反应，即抗原抗体反应，不仅发生在生物体内， 在体外亦能进行，而且反应是高度特异(即对特定结 构的农药具选择性)，高度灵敏(可达pg/kg-mg/kg 水平)。
为乙酸和靛酚(蓝色），由于有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的 活性有强烈的抑制作用，因此，根据显色的不同，即可判断样品中含有 机磷或氨基甲酸酯类农药的残留情况。 • 样品处理 分为整体测定法（浸提法）和表面测定法（粗筛法）
27
• 目的要求 对照仪器操作说明书，能够熟练操作， 并能举一反三应用类似的快速检测仪。
21
光学生物传感器
• 主要由光纤和生物敏感膜组成。
传感器中
复杂样品中
敏感膜中 生物活 性成分
+ 待测组分
分子识别 生物量 （生物学信号）
换 能 反 应
光信号（荧光、磷光等）
放 大
• 显示或记录
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其他生物传感器
•农药残留检测的还有电晶体、半导体生物传感器等。
• 石英晶体微量天平(QCM)半导体生物传感器，检 测到低于1mg/L的西维因和敌敌畏。
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实验室快速检测
实验室快速 检测方法
色谱法
气相色谱法（GC) 高效液相色谱法（HPLC)
薄层色谱法（TLC） 色谱-质谱联用法
毛细管电泳（CE）
红外光谱法
光谱法
荧光光谱法
最新农药及残留成分分析PPT课件
性、环境友好、超临界条件温和
4. 微波辅助萃取技术(MAE) 物质的介电常数的绝对值越大，吸收
微波的能力越强。从而导致了不同的化学 物质吸收微波的能力不同
微波萃取时要求溶剂具有一定的极性、 对待测组分有较强的溶解能力、对后续测 定的干扰小
常用萃取剂：甲醇、乙醇、丙酮、乙酸、 甲苯、二氯乙烷、乙腈
5. 压力液体萃取(PLE)和亚临界水萃取(SWE) 6. 二者都是从固体基体中萃取有机污染物的
有机磷农药标准混合液：用丙酮或二氯甲烷 将标准储备液稀释成两组标准混合液，第一组 敌敌畏、乐果、对硫磷、马拉硫磷、甲拌磷含 量1.0μg/mL，第二组稻瘟净、倍硫磷、杀螟硫 磷及虫蜗硫磷含量2.0μg/mL
有机磷农药系列标准混合溶液：分别吸取 两组有机磷农药混合液0.00、0.20、0.40、 0.60、0.80、1.00mL于两组6个10mL容量瓶
7. 原子荧光光谱法 原子蒸气受具有特征波长的光照射后，其中 一些自由原子被激发跃迁到较高能态，然后活化回 到某一较低能态而发射出特征光谱的物理现象
当激发辐射的波长与产生的荧光波长相同时， 成为共振荧光，它是各种原子都有的特定的原子荧 光光谱，根据原子荧光强度的高低可测试样中元素 含量
8. 紫外-可见分光光度法 用可见光源（400-760nm）测定有色物质的方法 和用紫外光（200-400nm）源测定无色物质的 方法合并在一个仪器中的检测法 9. 免疫法
技
7. 术，又称作加速溶剂萃取 6. 凝胶渗透色谱(GPC) 7. 溶质(被分离物质)相对分子质量的不同通
过
8. 具有分子筛性质的凝胶，溶质中小分子物质 就
9. 会进入凝胶微孔中，而大分子物质则直接通
7. 加速溶剂萃取(ASE) 8. 加速溶剂萃取或加压液体萃取是在较高
4. 微波辅助萃取技术(MAE) 物质的介电常数的绝对值越大，吸收
微波的能力越强。从而导致了不同的化学 物质吸收微波的能力不同
微波萃取时要求溶剂具有一定的极性、 对待测组分有较强的溶解能力、对后续测 定的干扰小
常用萃取剂：甲醇、乙醇、丙酮、乙酸、 甲苯、二氯乙烷、乙腈
5. 压力液体萃取(PLE)和亚临界水萃取(SWE) 6. 二者都是从固体基体中萃取有机污染物的
有机磷农药标准混合液：用丙酮或二氯甲烷 将标准储备液稀释成两组标准混合液，第一组 敌敌畏、乐果、对硫磷、马拉硫磷、甲拌磷含 量1.0μg/mL，第二组稻瘟净、倍硫磷、杀螟硫 磷及虫蜗硫磷含量2.0μg/mL
有机磷农药系列标准混合溶液：分别吸取 两组有机磷农药混合液0.00、0.20、0.40、 0.60、0.80、1.00mL于两组6个10mL容量瓶
7. 原子荧光光谱法 原子蒸气受具有特征波长的光照射后，其中 一些自由原子被激发跃迁到较高能态，然后活化回 到某一较低能态而发射出特征光谱的物理现象
当激发辐射的波长与产生的荧光波长相同时， 成为共振荧光，它是各种原子都有的特定的原子荧 光光谱，根据原子荧光强度的高低可测试样中元素 含量
8. 紫外-可见分光光度法 用可见光源（400-760nm）测定有色物质的方法 和用紫外光（200-400nm）源测定无色物质的 方法合并在一个仪器中的检测法 9. 免疫法
技
7. 术，又称作加速溶剂萃取 6. 凝胶渗透色谱(GPC) 7. 溶质(被分离物质)相对分子质量的不同通
过
8. 具有分子筛性质的凝胶，溶质中小分子物质 就
9. 会进入凝胶微孔中，而大分子物质则直接通
7. 加速溶剂萃取(ASE) 8. 加速溶剂萃取或加压液体萃取是在较高
农药残留快速检测技术ppt课件
，对于叶菜（如韭菜、韭黄、大葱等）样品，将 叶片部分切成2cm左右长的小段；对于辣椒、生 姜等样品，将可食部分切成1cm左右见方碎片， 对于大蒜，将蒜扒皮后整瓣提取。
三、方法介绍
（2）样品提取
用电子台秤称取2.0g样品于提取瓶中，用移液器加 入10.0ml农残试剂一，用搅拌棒将样品压入页面下。然 后将提取瓶放入超声提取仪中提取3min（在超声提取仪 中预先加入500ml蒸馏水）。用移液器移取1.00ml样品 提取液于比色瓶中，至于多功能固定架上备用。
技术成熟，灵敏度高，FAO推荐方法，美国 USAD、EPA、AOAC制定了评定标准，但经 认证的有限，经EPA认证的免疫试剂盒约有4 个厂家的26种试剂盒；EPA方法4010、EPA 方法 4015 EPA方法3030等
处于研究阶段
电导型生物传感器、光寻址电位型传感器、 安培型传感器，处于研究和应用阶段，并未 广泛推广使用
一、国内农残快速检测的现状及意义
（二）快速检测实施的必要性
农残超标的主要原因： 一是生产者不严格按农药安全使用准则的要求进行
生产,使用违禁农药或使用量和安全期掌握不好。 二是施药器具喷洒的均匀性欠佳,易导致局部给药
超量所致。 由于高毒、高残留的有机磷农药如：对硫磷、甲基
对硫磷、乐果、氧乐果、敌敌畏及甲胺磷等占据了杀虫剂 产量的70％以上，并且其中70％以上的中毒事故都是由有 机磷农药引起的。
匀，放入第一通道中，计时3分钟（手动）按向上键。
★ 加入试剂（四）50µl， 倒计时3分钟（自动） ， 仪器显示△A值，空白测量完毕。
★ 要求△A大于0.100。若小于则增加（二）用量或者增加显 色时间。
三、方法介绍
3、样品处理 ★ 样品提取瓶+2.0克待测样品+10.0ml（一）。 ★ 超声提取3分钟，取出。
三、方法介绍
（2）样品提取
用电子台秤称取2.0g样品于提取瓶中，用移液器加 入10.0ml农残试剂一，用搅拌棒将样品压入页面下。然 后将提取瓶放入超声提取仪中提取3min（在超声提取仪 中预先加入500ml蒸馏水）。用移液器移取1.00ml样品 提取液于比色瓶中，至于多功能固定架上备用。
技术成熟，灵敏度高，FAO推荐方法，美国 USAD、EPA、AOAC制定了评定标准，但经 认证的有限，经EPA认证的免疫试剂盒约有4 个厂家的26种试剂盒；EPA方法4010、EPA 方法 4015 EPA方法3030等
处于研究阶段
电导型生物传感器、光寻址电位型传感器、 安培型传感器，处于研究和应用阶段，并未 广泛推广使用
一、国内农残快速检测的现状及意义
（二）快速检测实施的必要性
农残超标的主要原因： 一是生产者不严格按农药安全使用准则的要求进行
生产,使用违禁农药或使用量和安全期掌握不好。 二是施药器具喷洒的均匀性欠佳,易导致局部给药
超量所致。 由于高毒、高残留的有机磷农药如：对硫磷、甲基
对硫磷、乐果、氧乐果、敌敌畏及甲胺磷等占据了杀虫剂 产量的70％以上，并且其中70％以上的中毒事故都是由有 机磷农药引起的。
匀，放入第一通道中，计时3分钟（手动）按向上键。
★ 加入试剂（四）50µl， 倒计时3分钟（自动） ， 仪器显示△A值，空白测量完毕。
★ 要求△A大于0.100。若小于则增加（二）用量或者增加显 色时间。
三、方法介绍
3、样品处理 ★ 样品提取瓶+2.0克待测样品+10.0ml（一）。 ★ 超声提取3分钟，取出。
农药残留检测技术课件ppt
3min后记录空白样的△AC值。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
样品样的操作步骤及要求：
取样步骤及要求： ①称取菜样1g〔要求一种菜样要从不同植株取样，从叶片
部位取（果实蔬菜用刀顺皮削下），剪成1cm左右见方碎 片，混匀后用镊子称取1g（记录），放入烧杯或提取瓶中 （编号）〕。 ②取5ml缓冲溶液加入编好号的样品瓶中（记录）。 ③用手或借助仪器振荡1-2min（计时）。 ④振荡完成后静置3-5min（计时）。
上海博纳CL-BIII八通道残留农药测定仪 等 特点： 精确度高、稳定性强 易于操作
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
三、农残速测仪介绍
（一）原理
农药对胆碱酯酶（检测试剂）的活性有抑制作用，这样 就抑制了胆碱酯酶催化显色剂水解发生显色反应，通过 对显色反应的测定来实现农药残留量的测量。由此可判 定果品蔬菜样品中的残留农药的含量。 正常情况：
放入仪器中，按样品检测键，3min后记录实验结果。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
3、结果的判定
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，样品为阳
2、实验操作
空白样操作步骤及要求： ①取2.5ml缓冲溶液加入试管中（记录）。 ②分别加入0.1ml酶液（记录），0.1ml显色剂（记录）
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
样品样的操作步骤及要求：
取样步骤及要求： ①称取菜样1g〔要求一种菜样要从不同植株取样，从叶片
部位取（果实蔬菜用刀顺皮削下），剪成1cm左右见方碎 片，混匀后用镊子称取1g（记录），放入烧杯或提取瓶中 （编号）〕。 ②取5ml缓冲溶液加入编好号的样品瓶中（记录）。 ③用手或借助仪器振荡1-2min（计时）。 ④振荡完成后静置3-5min（计时）。
上海博纳CL-BIII八通道残留农药测定仪 等 特点： 精确度高、稳定性强 易于操作
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
三、农残速测仪介绍
（一）原理
农药对胆碱酯酶（检测试剂）的活性有抑制作用，这样 就抑制了胆碱酯酶催化显色剂水解发生显色反应，通过 对显色反应的测定来实现农药残留量的测量。由此可判 定果品蔬菜样品中的残留农药的含量。 正常情况：
放入仪器中，按样品检测键，3min后记录实验结果。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
3、结果的判定
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，样品为阳
2、实验操作
空白样操作步骤及要求： ①取2.5ml缓冲溶液加入试管中（记录）。 ②分别加入0.1ml酶液（记录），0.1ml显色剂（记录）
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2、实验操作
空白样操作步骤及要求：
①取2.5ml缓冲溶液加入试管中（记录）。 ②分别加入0.1ml酶液（记录），0.1ml显色剂（记录） 至试管中。 ③摇匀后于37℃放置15min（计时）。 ④加入0.1ml底物（记录）至试管中摇匀，此时检液起 显色反应，应立即放入仪器比色池中检测。 ⑤注意比色皿光面毛面的放置方向。按对照检测键， 3min后记录空白样的△AC值。
有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由 此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类 农药的存在。
2、酶抑制率法（分光光度法）
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆 碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度 呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物 （乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生 黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间 的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样 品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
农药残留快速测定技术
江阴市农产品质量检测中心 2013年5月
滥用“神农丹”种姜
2012年
2011年
2010年Βιβλιοθήκη 残快速测定方法及仪器介绍
一、农药残留简述
二、快速检测方法及相关仪器 三、农残速测仪介绍
一、农药残留简述
1、农药残留相关名词
农药分类
无机化合物（目前使用
较多的品种有硫悬浮剂、 波尔多液等。）
5、韭菜、生姜、葱、蒜、辣椒等刺激性气味蔬菜中，含 有对酶活性有影响的物质，容易产生假阳性。处理这 类样品时，可采取整株蔬菜浸泡。
6、避免交叉污染，每次取不同的样品，清洗采样器具。 7、先做对照检测，再做样品检测。对照样品吸光度值 △AC应该在如下区间：实验室温度在25 °C以上时在 0.3－0.8之间；实验室温度在10 °C以下时在0.2－ 0.8之间）。空白的作用除了对照作用之外，还可以判 断试剂是否失效，如果加入底物的时候比色皿中液体 立刻变成深黄，或者加入底物之后试剂不变黄，说明 试剂已经失效。
祝 工作愉快
身体健康
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3、结果的判定
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，样品为 阳性结果农药残留超标。抑制率在50%左右为可疑样品， 超标样品、可疑样品需要重复检验2次以上。
4、注意事项
1、仪器开机之后最好预热10分钟以上。开机、关机之间 间隔1分钟以上。 2、配试剂需按照说明进行操作。 3、实验要求的蒸馏水可以用纯净水代替，但是不能用矿 泉水，天然饮用水。 4、酶液、显色剂与底物切忌长时间室温下放置，用后应 立即放入冷藏室内（0-4℃）。 5、提取液可以放置常温下保存。（从冰箱中拿出的酶液 要等他恢复到室温才能使用，不然会导致酶的活性不 够，酶的活性最适温度37摄氏度）。
I ——— 抑制率 A0 ——— 对照的吸光度值 At ——— 样品溶液的吸光度值
（三） GB/T 5009.199-2003方法介绍
1、配试剂 缓冲液、酶试剂、显色剂、底物均按照仪器自带 的使用说明书的要求配制而成（所用水为蒸馏水或纯 净水）。除缓冲溶液可常温放置，其他试剂配置后必 须0-4℃避光保存，使用前冷却至室温，保存期不宜过 长，一般现配先用。
样品样的操作步骤及要求：
取样步骤及要求： ①称取菜样1g〔要求一种菜样要从不同植株取样，从叶片 部位取（果实蔬菜用刀顺皮削下），剪成1cm左右见方碎 片，混匀后用镊子称取1g（记录），放入烧杯或提取瓶中 （编号）〕。
②取5ml缓冲溶液加入编好号的样品瓶中（记录）。
③用手或借助仪器振荡1-2min（计时）。
目前使用的快速检测仪器
仪器原理：酶抑制率法（分光光度法）
使用此方法的仪器有： 深圳安鑫宝WT系列农药残留速仪 长春吉大· 小天鹅GDYN-110SB农残速测仪 上海博纳CL-BIII八通道残留农药测定仪 等 特点：
精确度高、稳定性强
易于操作
三、农残速测仪介绍
（一）原理
农药对胆碱酯酶（检测试剂）的活性有抑制作用，这样 就抑制了胆碱酯酶催化显色剂水解发生显色反应，通过 对显色反应的测定来实现农药残留量的测量。由此可判 定果品蔬菜样品中的残留农药的含量。 正常情况：
有机氯类 有机磷类
矿物源农药
拟除虫菊酯类
氨基甲酸酯类 杂环类化合物
化学合成农药
有机合成化合物
动物源农药（如动物毒素、 昆虫性引诱剂等）
生物源农药
植物源农药（如植物内源激 素、植物源昆虫激素等 ） 微生物源农药（井冈霉素、 白僵菌、苏云金杆菌等）
其它（苯氧羧 酸类、脲类化 合物）
农药残留：农药使用后残存在生物体、农副产品 和环境中的微量农药原体、有毒代谢物、降解物 和杂质的总称。以mg/kg、ug/kg、ng/kg表示。 农药残留的危害：农药若大量残留在农副产品表 面会引起人的神经传导阻碍、神经麻痹甚至引起 死亡。 最大残留限量：在农副产品中农药残留的法定最 高允许浓度，又称最高残留限量，以每千克农副 产品中农药残留的毫克数（毫克/千克）表示。 我国违禁农药：666DDT、毒鼠强、甲胺磷、甲基 对硫磷、对硫磷、久效磷、磷胺等高毒农药全面 禁止使用
2、国家农药残留速测检测标准
NY/T 448-2001 蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类 农药残毒快速检测方法 GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲 酸酯类农药残留量的快速检测
二、快速检测方法及相关仪器
1、速测卡法（纸片法）
胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸与
靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱酯酶
底物+胆碱酯酶---水解→胆碱
胆碱+显色剂 →→→黄色溶液
（二）抑制率计算方法
通过测定果蔬中的残留农药使乙酰胆碱酯酶活性 变化的程度来测定样品果蔬中的此类残留农药毒性， 仪器测定的残留农药大小用“抑制率”来表示。抑制 率是农药对酶抑制程度的显示指标，其计算方式为:
I = ((A0-At)/A0)×100％
④振荡完成后静置3-5min（计时）。
⑤试管中加入2.5ml样品提取液。 ⑥再分别加入0.1ml（100ul）酶液，0.1ml显色剂至 各样品样的试管中。
⑦摇匀后于37℃放置15min（计时）。
⑧各样品样中加入0.1ml底物摇匀。 ⑨最后将每个试管中的样品液倒入比色皿中，迅速 放入仪器中，按样品检测键，3min后记录实验结果。