兽医生物制品(黄淑坚).

绪论

一、生物制品与兽医生物制品

1、生物制品：利用微生物及其代谢产物、寄生虫及其代谢产物、动物毒素→抗毒素、人或动物的组织、血液等经过加工处理制成用于人或动物相关疾病的诊断、预防、治疗的制剂。

2、兽医生物制品：专用于动物相关疾病的诊断、预防、治疗的制剂。

二、生物制品的发展史

三、生物制品在生产中的应用

1、诊断；

2、预防；3治疗

第一章常用兽医生物制品的种类

（一）预防用兽医生物制品

1、灭活苗（灭能苗）：利用物理或化学方法将病原微生物灭活使其丧失致病性和毒性加入佐剂制成；

2、弱毒苗：利用物理、化学或微生物方法处理或传代微生物，使其失去致病性或仅造成隐性感染，大量繁殖后加入冻干保护剂制成；

3、类毒素：细菌的外毒素经甲醛处理脱毒后免疫原性基本保持不变，加入佐剂制成（例：破伤风明矾沉降类毒素）；

4、亚单位疫苗：通过物理、化学方法提取病原微生物表面保护性抗原，加入佐剂制成；

5、合成肽疫苗：根据病原性微生物表面保护性Ag的氨基酸排列顺序，体外合成后加入佐剂制成；

6、抗独特型抗体疫苗：根据免疫网络学说原理，利用第一抗体分子中的独特抗原决定簇（抗原表位）所制备的具有抗原的“内影像”结构的第二抗体。该抗体具有模拟抗原的特性，故称之为抗独特型疫苗；

7、基因工程苗：包括基因缺失苗（伪狂犬基因缺失苗）、基因表达疫苗；

8、多联苗：利用多种微生物制成疫苗；

9、多价苗：利用一种微生物多种血清型（或者血清亚型）制成疫苗；

10、同源疫苗：一种微生物制成疫苗免疫动物后，用于预防该微生物强毒的感染与攻击，这种疫苗称为同源疫苗；

11、异源疫苗：①用不同种微生物的菌（毒）株制备的疫苗，接种动物后能使其获得对疫苗中并未含有的病原体产生抵抗力；②用同一种中一种型（生物型或动物源型）微生物的菌（毒）株制备的疫苗，接种动物后能使其获得对异型病原体的抵抗力。例：NDIV→PEG流行性腹泻;HTV→MDV鸡马立克病毒；猪瘟兔化弱毒苗→牛病毒性腹泻；

备注：FMDV口蹄疫、SFV猪瘟用乙烯亚胺类衍生物（结晶紫）制灭活苗

其它细菌大都用0.3％甲醛灭活

病毒0.5％甲醛灭活

毒素0.4～0.7％甲醛灭活

大多数细菌置于37℃培养灭活

佐剂的运用：1、油乳佐剂（病毒疫苗）；2、Al(OH)3胶（细菌疫苗）；3、蜂胶（细菌）

灭活剂：1、甲醛；2、结晶紫（猪瘟）；3、乙烯亚胺类衍生物

（二）治疗用兽医生物制品

1、抗病血清：Ag3~5次→动物→产生Ab，Ab主要存在于血液的血清中→提取血清→加入抗菌药物、防霉剂

2、抗毒素：类毒素3~5次→动物→产生Ab→提取血清→加入抗菌药物、防霉剂

3、高免卵黄液：Ag3~5次→母禽→产生Ab→移行至母禽产下蛋的蛋黄中→提取蛋黄→加入1～2倍生理盐水（含有抗菌药物、防霉剂）

（三）诊断用兽医生物制品

1、标准Ag

2、标准Ab

第二章兽医生物制品的发展趋势

1、GMP（生产与管理）

2、从第一代疫苗（灭、弱、亚、类）→第二代疫苗（基因工程）→第三代疫苗（合成肽苗、抗独特型抗体疫苗）

3、更加注重诊断用兽医生物制品

4、向更浓缩、纯度更高方向发展

5、更加注重免疫佐剂、灭活剂的研究

6、更加注重产品的质量与冷链过程

第三章免疫佐剂

一、免疫佐剂的概念

本身没有免疫原性，但与Ag联合使用，能大大提高Ag的免疫原性或改变免疫应答类型，这种物质为免疫佐剂

二、免疫佐剂的要求

1、安全、无毒副作用

2、化学纯以上的试剂

3、吸附能力强

4、容易吸收

5、稳定性强、能保存1~2年

三、常用免疫佐剂的制备

（一）不溶性铝盐胶体的佐剂

1、Al（OH）3

AlCl3（无水）+NaOH→Al（OH）3胶↓（滴定法）

明矾+NH3▪H2O→Al（OH）3胶

使用注意事项：①灭活菌液：Al（OH）3胶=4：1

②Al（OH）3经126℃高压，30min灭菌后使用

③Al（OH）3能诱导老年痴呆症

④配制好的疫苗应摇匀后使用

2、明矾佐剂（例：破伤风明矾沉降类毒素）

制备：明矾10g+dH2O→10％明矾溶液（明矾佐剂）

使用：500ml灭活菌液加10ml10％明矾佐剂（溶液）

（二）油乳佐剂

1、弗氏不完全佐剂（FIA）

制备：液体石蜡油3份+无水羊毛脂1份+PH7.2PBS 4份→混合，116℃30min

使用：FIA：Ag=1：1

2、弗式完全佐剂（FCA）

制备：FIA加入牛结核分支杆菌（冻干粉）10mg／ml混匀

使用：FCA：Ag=1：1 △FIA和FCA为免疫佐剂（实验用）

3、白矿油佐剂（用于病毒疫苗）

油相：①320ml 10号白矿油（杭州杭联化工有限公司）

②7g硬脂酸铝

③22~24ml 司本-80（span-80）

④6ml 吐温-80（Tween-80）

把②加入①煮溶，冷却后，再加③、④

水相：灭活病毒液150ml+6ml吐温-80

制备油相：水相=7：3或6：4（高速搅拌，3min）

（三）蜂胶佐剂

30g蜂胶（研磨成粉）+500ml95％酒精→浸泡一周→4层纱布过滤→过滤液（佐剂）

使用：500ml灭活菌液加15ml蜂胶佐剂

特点：①没有什么毒副作用

②吸收快

③产生Ab快（7天产生保护性抗体）

④抗体维持时间不长，不超过两个月

第四章真快冷冻干燥技术（冻干）

一、真空冷冻干燥技术

将含有大量水分的生物活性物质冻结成固体，在真快条件下，利用减压升华原理，达到水分去除的目的。

二、共熔点及其测定方法

1、共熔点：使溶液或悬浊液完全凝固的瞬间温度

2、测定方法：不同的生物制品有不同的共熔点，是依制品中组成成分而异。我们在进行冷冻干燥前，必须对其熔点进行测定，其熔点测定是根据导电溶液的电阻与温度相关关系的原理来测定，当温度降低时，电阻增大，当降到共熔点时电阻即出现突然增大的现象，此时的温度为该物质的共熔点。下面是一些保护剂的共熔点。