人巨细胞病毒pp65抗原检测共36页
流式细胞仪检测CMV-pp65抗原在婴儿巨细胞病毒感染诊断中的应用
流式细胞仪检测CMV-pp65抗原在婴儿巨细胞病毒感染诊断
中的应用
阮飞;郦建娣;俞小梅
【期刊名称】《浙江预防医学》
【年(卷),期】2008(020)006
【摘要】巨细胞病毒感染是由人巨细胞病毒(CMV)引起的先天性或后天获得的感染,通常年龄越小,易感性越高,症状也越重,严重者可致畸致死。
因此,建立一种早期、敏感的检测方法有助于及时进行抗病毒治疗。
本研究通过流式细胞技术(FCM)检测血CMV-pp65抗原,并与尿CMV-DNA-PCR定量测定和血CMV-IgM测定结果进行比较,探讨3种方法对婴儿CMV感染的早期诊断价值。
【总页数】2页(P51-52)
【作者】阮飞;郦建娣;俞小梅
【作者单位】诸暨市人民医院,浙江,诸暨,311800;诸暨市人民医院,浙江,诸
暨,311800;诸暨市人民医院,浙江,诸暨,311800
【正文语种】中文
【中图分类】R725.1
【相关文献】
1.尿液巨细胞病毒核酸检测结合全血细胞计数在小儿巨细胞病毒感染诊断中的应用[J], 黄峥;姜新华;吴小明
2.荧光定量PCR检测在人巨细胞病毒-IgM阴性婴儿巨细胞病毒感染诊断中的意义
[J], 谢利波;刘敏;王敏
3.母乳及婴儿尿液人巨细胞病毒DNA检测在婴儿人巨细胞病毒感染中的应用 [J], 谢而付;黄珮珺;陈丹;张丽霞;戎国栋;潘世扬
4.房水巨细胞病毒IgG抗体校正比值检测在青光眼睫状体炎综合征患者房水巨细胞病毒感染诊断中的应用 [J], 李莹
5.人巨细胞病毒DNA检测在小儿人巨细胞病毒感染诊断中的应用 [J], 朱艳;周灵玲;蓝俊伟;刘思宇;黄建胜;赵志钢
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习惯性流产孕妇巨细胞病毒pp65抗原检测的临床意义
习惯性流产孕妇巨细胞病毒pp65抗原检测的临床意义卢银平;董继华;刘朝;曹伟【期刊名称】《中国妇幼保健》【年(卷),期】2006(21)21【摘要】目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染与习惯性流产(RPL)的关系。
方法:采集习惯性流产孕妇和正常产前体检孕妇外周血,分离外周血单个核细胞(PBMCs)和血浆,分别用免疫荧光法和实时定量PCR检测HCMV pp65抗原和HCMV-DNA,并比较2种方法的一致性。
结果:46例RPL患者HCMV pp65抗原有14例阳性,阳性率30.4%,50例正常体检孕妇HCMV pp65抗原有4例阳性,阳性率8%,2组孕妇HCMV活动性感染率有显著性差异(2χ=6.76,P<0.01)。
孕妇HC-MV pp65抗原阳性率升高,孕妇流产几率增加(2χ=6.39,P<0.01)。
免疫荧光法和实时定量PCR有较好的一致性(93.5%)。
结论:习惯性流产孕妇HCMV活动性感染率显著高于正常孕妇,HCMV pp65抗原检测可作为RPL早期诊断指标之一。
【总页数】2页(P2987-2988)【关键词】习惯性流产;巨细胞病毒;pp65抗原;免疫荧光;定量PCR【作者】卢银平;董继华;刘朝;曹伟【作者单位】华中科技大学同济医学院附属协和医院病毒研究室;华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R714.21【相关文献】1.急性脱髓鞘脑病患者人巨细胞病毒pp65抗原血症检测的临床意义 [J], 姚建华;李芳;何俊瑛;付宝生;杨国峰;彭立威2.抗巨细胞病毒pp65抗原单克隆抗体的制备及临床初步比对检测 [J], 陈兰兰;崔京涛;倪安平;闫文娟3.应用间接免疫荧光技术检测人巨细胞病毒-PP65抗原的临床意义 [J], 李薇;谢闻悦;陈永强;刘俊;张璇4.巨细胞病毒早期抗原pp65和晚期抗原pp67-mRNA在移植术后活动性巨细胞病毒感染诊断中的价值 [J], 肖漓;石炳毅;蔡明;钱叶勇;周文强;白剑5.检测巨细胞病毒(CMV)DNA 及其即刻早期抗原、pp65和pp67在肾移植受者术后巨细胞病毒感染早期诊断中的价值 [J], 罗灿峤;莫木琼;钟觉民;吴国华;吴兴平因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
病毒抗原血症检测方法诊断活动性HCMV感染
病毒抗原血症检测方法诊断活动性HCMV感染
安菁
【期刊名称】《国外医学:儿科学分册》
【年(卷),期】1998(025)005
【摘要】人类巨细胞病毒(HCMV)常在免疫缺陷或免疫受抑制的病人中引起活动性感染,表现为多种临床疾病,具有较高的病死率。
HCMV抗原血症检测方法具有准确性高、技术简便、可快速诊断并人有定量分析的特点,是目前临床诊断活动性HCMV感染的一种重要方法。
本文综述了对外周血白细胞应用单克隆抗体技术和免疫染色方法进行HCMV抗原检测以诊断活动性HCMV感染的方法和可能的质量监控手段。
【总页数】4页(P225-228)
【作者】安菁
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】R511.04
【相关文献】
1.监测HCMV活动性感染的一种新方法-HCMV PP65抗原血症检测 [J], 李敏;季育华
2.HCMV pp65抗原血症和UL83基因检测对肾移植术后HCMV感染的诊断价值[J], 谢栋栋;林政;施浩强;吴琼;王明丽;陈磊;唐亮;廖贵益;于德新
3.巨细胞病毒早期抗原pp65和晚期抗原pp67-mRNA在移植术后活动性巨细胞
病毒感染诊断中的价值 [J], 肖漓;石炳毅;蔡明;钱叶勇;周文强;白剑
4.HCMV抗原(pp65)血症检测技术诊断活动性HCMV感染 [J], 张长品
5.HCMVpp65抗原和IgM抗体检测诊断儿童HCMV活动性感染的比较 [J], 万颖蕾;彭奕冰;赵缜;樊建萌;季育华
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PP65抗原检测在预防肾移植术后巨细胞病毒感染中的价值
[1] SZC ZE PU R A A , W E STM O R E LA N D D , V IN O G R A D O V A Y , et al. E valuation of m olecular techniques in prediction and diagnosis of cytom egalovirus disease in im m unocom prom ised patients [J]. H ealth Technology A ssessm ent, 2006, 10(10): 6-7.
11/37) C M V - PP65 抗原阳性, 均给予更昔洛韦抗病毒治疗, 11 例患者中 3 例( 8.1% , 3/37) 发 展 成 巨 细 胞 病 毒
病 , 均 发 生 于 停 用 或 未 采 用 更 昔 洛 韦 时 ; 另 外 26 例 患 者( 70.3% , 26/37) PP65 抗 原 始 终 阴 性 , 随 访 3 个 月 无 巨
Hospital, Central South University, Changsha, Hunan 410011, P.R.China)
Abstr act: 【Objective】 To study the value of cytomegalovirus PP65 antigen detection in the prophylaxis and treatment of cytomegalovirus disease after renal transplantation. 【Methods】A study was conducted in 37 cases of renal allograft recipients. Patients received CMV- PP65 antigen detection regularly. 【Results】 Eleven patients (29.7%, 11/37) were CMV- PP65 antigen positive and had to receive anti- virus treatment with ganciclovir. Three pa- tients developed to CMV disease and all the 3 cases happened when ganciclovir were withdrawed. Other 26 patients (70.3%, 26/37) were CMV- PP65 antigen negative anytime and no CMV disease happened during 3 months′follow- up. 【Conclusion】Cytomegalovirus PP65 antigen detection in renal allograft recipients played an important role in the diagnosis, treatment and especially the prophylaxis of CMV disease.
血PP65抗原检测在诊断巨细胞病毒感染上的应用
血PP65抗原检测在诊断巨细胞病毒感染上的应用摘要】目的探讨血PP65抗原、尿CMV-DNA和血IgM抗体检测对婴儿巨细胞病毒(CMV)活动性感染的诊断价值。
方法通过免疫荧光技术对142例CMV病毒性感染患儿进行血PP65抗原检测,同时用实时荧光定量PCR方法测定尿CMV-DNA,并用ELISA法检测血清CMV-IgM,比较三种方法的检测结果;对25例PP65阳性患儿进行短期随访,分析PP65的临床应用价值。
结果 142例CMV感染患儿中,PP65抗原阳性率89.4%(127/142),阳性细胞范围7-145/2×105个多形核白细胞。
PP65与尿CMV-DNA两种方法检测的结果差异无统计学意义(χ2=0.125,P>0.05),但PP65与血CMV-IgM检测结果差异有统计学意义(χ2=53.16,P<0.01)。
PP65抗原和尿PCR的阳性符合率98.4%(127/129),阴性符合率86.7%(13/15),与IgM抗体阳性符合率是51.2%(65/127),阴性符合率19.5%(15/77)。
PP65相对于PCR的敏感性为98.4%(127/129),特异性为97.6%(124/127);PP65抗原水平与CMV感染的病情程度有明显相关性,高水平PP65感染患儿多发全身性感染,低水平PP65抗原血症多为单脏器感染(χ2=49.03,P<0.005)。
在感染恢复期,PP65转为阴性或明显下降。
结论PP65抗原检测是诊断活动性CMV感染的快速、敏感、特异的有效方法,量化结果有助于监测病情,评价感染状态。
【关键词】巨细胞病毒 PP65抗原荧光定量PCR IgM抗体人巨细胞病毒(CMV)在人群中感染非常普遍,是小婴儿及免疫功能低下者较常见和严重的病原体之一。
在感染早期进行特异性的抗病毒治疗能够有效提高治愈率,减少并发症及死亡率。
大多数情况下CMV在临床上呈不显性或潜伏性感染,病毒可持续存在或终生在机体某些组织或器官中潜伏,此时病毒与机体处于相对平衡状态,一旦平衡被破坏,则可导致病毒复制被激活,病毒由不显性或潜伏感染转为显性或活动性感染。
骨髓巨细胞病毒晚期抗原pp65检测在动脉粥样硬化性缺血性脑血管疾病中的应用价值
病情 进 展 的 重要 原 因 。 粥 样 不 稳 定 斑 块 是 导 致 缺 血 性 脑 血 管 病的危险因素之一 , 巨细 胞 病 毒 潜 伏 感 染 再 激 活 引起 粥样 斑 块 不稳 定 , 急 性 缺 血 性 脑 血 管 事 件 有 密 切 关 系 。有 文 献 指 出 , 与 人感 染 巨 细胞 病 毒后 , 先 侵 袭 骨 髓 基 质 细 胞 和 造 血 干 细 胞 , 首
rm n离 心 7ri 心 半 径 8a 倒 掉 上 清 液 , 淀 物 加 入 少 /i n离 a m, 沉
许 T S液 , 荡 , 匀 制 成 1 5 O / 白细 胞 悬 液 , 片 , B 震 混 . ×1 L 涂 烘
干, 甲醛 固定 ( 可置 一4℃ 保存 )3 过 氧 化 氢 阻 断 内源 性 过 氧 , 化 物 酶 反 应 。一 抗 为丹 麦 DAK 公 司 生 产 的 鼠抗 人 巨 细 胞 病 0 毒 抗 原 p 6 单 克 隆抗 体 c0 cl 孵 育 4 i, B p5 1 /l , 0r n T S液 冲 洗 3 a 次 , 次 5ri; 每 n 二抗 为 上海 GeeT c itc n l yC mp n a n ehBoeh oo o a y g Lmi d 供 的羊 抗 鼠 免 疫 球 蛋 白 多 聚 体 分 子 , 育 3 n i t 提 e 孵 0mi, T S液 冲 洗 3次 , 次 5ri; B染 色 , 木 素 复 杂 , 酸 乙 B 每 n DA a 苏 盐 醇 分 化 。光 镜 下 观 察 ,p 5阳 性 细 胞 为 红 棕 色 , p6 阴性 细 胞 为 蓝 色 。 阳性 细 胞 数 大 于 1 / 0 个 50 0个 细 胞 判 为 阳性 结 果 。2 静 )
人巨细胞病毒pp65抗原血症检测方法的建立和初步临床应用
人巨细胞病毒pp65抗原血症检测方法的建立和初步临床应用赵缜;李敏;彭奕冰;支立明;潘宁;季育华【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2004(019)001【摘要】目的建立人巨细胞病毒抗原pp65(HCMVpp65)血症特异、灵敏和低成本的酶免组化和荧光免疫组化方法,以利于临床推广应用.方法以HCMV-AD169感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)爬片作阳性对照,选择试剂和材料组建试剂盒,并与商品化的同类试剂盒作比较,建立人外周血多形核白细胞(PMNLs)中HCMVpp65抗原阳性细胞的检测方法,然后再用荧光定量PCR(FQ-PCR)方法做相应考评.结果我们建立的HCMVpp65抗原血症检测法能成功地检出PMNLs中的pp65阳性细胞.其可检测限分别为102 pfu/ml的AD169攻击24 h后的HELF细胞爬片和3~5个pp65阳性细胞/2×105 PMNLs;用高相对分子质量(500 000)的葡聚糖能快速、有效地分离PMNLs;用4%中性多聚甲醛固定的细胞片,于-20 °C或以下可长期保存(≥6个月),而且pp65抗原性稳定.结论自建的试剂盒与同类进口试剂盒相比,检测pp65的结果差异无显著性,并与FQ-PCR的检测结果相一致,其检测特异、灵敏、操作简单、费用低廉,适宜临床实验室推广应用.【总页数】4页(P36-39)【作者】赵缜;李敏;彭奕冰;支立明;潘宁;季育华【作者单位】上海瑞金医院集团闵行医院检验科,上海,201100;上海第二医科大学附属瑞金医院检验科,上海,200025;上海第二医科大学附属瑞金医院检验科,上海,200025;上海第二医科大学附属瑞金医院检验科,上海,200025;上海第二医科大学附属瑞金医院检验科,上海,200025;上海第二医科大学附属瑞金医院检验科,上海,200025【正文语种】中文【中图分类】R373.9【相关文献】1.人巨细胞病毒pp65抗体检测方法的建立 [J], 钱春艳;吴晓玲;张玥;王升年;季育华2.人巨细胞病毒pp65抗体检测方法的建立 [J], 钱春艳;吴晓玲;张玥;王升年;季育华3.急性脱髓鞘脑病患者人巨细胞病毒pp65抗原血症检测的临床意义 [J], 姚建华;李芳;何俊瑛;付宝生;杨国峰;彭立威4.HCMV(pp65)抗原血症-肝、肾移植术后巨细胞病毒感染监测的分析 [J], 王政禄;印志琪;李卉;李林;史瑞;张淑英;沈中阳5.流式细胞术检测PP65抗原血症在巨细胞病毒性肝炎诊断中的意义 [J], 章国忠;涂芳芳;魏健;沈红强;金国信;潘继豹因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
HCMV-PP65抗原检测在小儿巨细胞病毒感染诊断中的应用价值
中国现代医药杂志2018年5月第20卷第5期 MMJC,May 2018,Vol 20,No.579DOI :10.3969/j.issn.1672-9463.2018.05.023HCMV-PP65抗原检测在小儿巨细胞病毒感染诊断中的应用价值于锰锰 李小芹作者单位:450000 河南郑州,郑州大学附属儿童医院消化内科人巨细胞病毒(HCMV )感染为儿科常见病、多发病,属于疱疹病毒科β属,是一种具有潜伏性的双链DNA 病毒,当免疫功能发育不全或者减弱后,HCMV 原发性或者潜伏-再激活感染就会使患者表现出黄疸、肝脾肿大、咳嗽、发热及贫血等临床症状,因上述临床症状不具备特异性,因此对患者开展早期HCMV 感染活性诊断意义重大。
有文献指出,HCMV-PP65抗原检测在小儿巨细胞病毒感染中有明显价值[1]。
现选择2014年7月~2017年7月在我院就诊的疑似HCMV 感染患儿为研究对象,探讨HCMV-PP65抗原检测对其诊断价值,报道如下。
1 材料与方法1.1一般资料 选择2014年7月~2017年7月于我院就诊的疑似HCMV感染患儿为研究对象,共200例。
男116例,女84例。
年龄2.5月~5.14岁。
按照卫计委颁布的关于HCMV 感染诊断方案,最终确诊为感染者共计104例。
排除其余类型感染。
分别使用HCMV-PP65抗原检验、化学发光法、FQ-RCR 法对200例患儿进行检测。
1.2设备与试剂 化学发光仪,荧光定量PCR 仪,荧光显微镜。
HCMV-PP65抗原检验试剂盒,DNA 提取试剂盒,化学发光免疫分析试剂盒,FQ-PCR 检验试剂盒。
1.3样本收集及检测 在患儿监护人知情同意前提下,收集受试者空腹静脉血5.0ml 进行检验,均分为2份。
其中1份进行3.0ml ED-TA-K2抗凝,开展PP65检测。
样本收集完成后6h 内对PMNLs 细胞进行分离。
另取1份2.0ml 促凝,以3 000r/min 离心,分离血清和血浆。
人巨细胞病毒 pp65基因片段的原核表达及鉴定
连接 , 转化 B I 2 1 , 筛选 。 对 重 组 质 粒 进 行 诱 导 表 达 , 采用E L I S A 间接 法 鉴 定 纯 化 的 GS T/ p p 6 5融 合 蛋 白 的 抗 原 性 进 住 鉴 定 。 结 果 目的 蛋 白 经诱 导后 表 达 于上 清液 中 , 经鉴 定 目的蛋 白具 有 预 期 的 抗 原 活 性 。 结 论 关键词 : 人 巨 细胞 病 毒 ; p G E X 一 4 T 1质粒 ; 表达 ; 鉴 定
D OI : l 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 6 7 3 — 4 1 3 0 . 2 O 1 5 . 1 6 . 0 2 2 文献 标 识 码 : A 文章编号 : 1 6 7 3 4 1 3 0 ( 2 0 1 5 ) 1 6 — 2 3 4 4 — 0 3
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2 3 44 ・
国际检验 医学 杂志 2 0 1 5年 8 月第3 6 卷第 1 6期
I n t J I . a b Me d , A u g u s t 2 0 1 5 , Vo 1 . 3 6 , N o . 1 6
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论
著 ・
人 巨细胞 病 毒 p p 6 5基 因片段 的原 核表 达及 鉴 定
i d e n t i f y i n g t he ex pr e s s e d Pr ot e i n. Me t ho d s Ac c o r di n g t o t he g e ne s e q ue nc e o f H CM V PP6 5 on Ge n e ba n k a n d t he ge n e s e qu e nc e
CMV PP65抗原检测及临床意义
巨细胞病毒(Cytomegalovirus, CMV)
CMV是疱疹病毒家族(EB病毒,HSV-1型和2型, VZV,人类疱疹病毒6、7、8型)成员之一。系 双链DNA病毒。 CMV CMV感染方式包括三种,即产前(先天性的), ( ) 产时和产后感染。 发达国家成人CMV感染率40-90%,视社会经 济地位不同有差异,中国90%以上。
CMVPP65阳性
CMV PP65阳性意义
CMV活动性感染,并可在出现临床症状 前检测到。 做为疗效观察的指标。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
CMV PP65阳性治疗
更昔洛韦,ganciclovir
标本的采集
EDTA-K3抗凝的静脉血2-5ml(白细胞过 低患者,如< 200个/mm3,需要采集5- 10ml抗凝的静脉血。 时间:周1或周4送标本(检验科病毒室, 新楼3段2层)。
CMV感染的最重要的形式
CMV先天性感染。 在免疫抑制患者的感染,包括艾滋病、 肿瘤化疗患者(尤其是白血病和淋巴瘤)以 及器官移植受者。
巨细胞病毒抗原血症(CMVpp65)检测的操 巨细胞病毒抗原血症 检测的操 作步骤(CMV BriteKit,MCA 作步骤 Development, The Netherlands)
基本原理是检测分子量65KD的基质磷蛋白 (pp65),该蛋白位于外周血白细胞的核仁内。 分离白细胞(EDTA-K3抗凝的静脉血2-5ml) 细胞计数即浓度调整,3.0×106/ml 细胞离心涂片及固定。 染色,IIF法,第一抗体是抗CMVpp65单抗, 第二抗体是羊抗鼠免疫球蛋白荧光抗体。 读片及结果判断
读片及结果判断cmvpp65阳性125台湾地区的认证要求台湾标准检验局bsmi为了岛内电子电机产品的电磁辐射干扰于1995年5月公布商品电磁兼容性管理办法并于1996年7月正式公告自1997年1月1日起管制复印机等产品的电磁兼容性能之后陆续管制信息周边产品家电与广播音响产品
CMV_PP65抗原检测及临床意义
CMVPP65阳性
CMV PP65阳性意义
• CMV活动性感染,并可在出现临床症状 前检测到。 • 做为疗效观察的指标。
CMV PP65阳性治疗
• 更昔洛韦,ganciclovir
ห้องสมุดไป่ตู้
标本的采集
• EDTA-K3抗凝的静脉血2-5ml(白细胞过 低患者,如 200个/mm3,需要采集5- 10ml抗凝的静脉血。 • 时间:周1或周4送标本(检验科病毒室, 新楼3段2层)。
cmvpp65抗原检测及临床意义c反应蛋白的临床意义ca125的临床意义ca199的临床意义d二聚体临床意义肿瘤标志物的临床意义肌钙蛋白临床意义ca724的临床意义降钙素原的临床意义肌红蛋白临床意义
CMV PP65抗原检测及临床意义
巨细胞病毒(Cytomegalovirus, CMV)
• CMV是疱疹病毒家族(EB病毒,HSV-1型和2型, VZV,人类疱疹病毒6、7、8型)成员之一。系 双链DNA病毒。 • CMV感染方式包括三种,即产前(先天性的), 产时和产后感染。 • 发达国家成人 CMV 感染率 40-90% ,视社会经 济地位不同有差异,中国90%以上。
CMV感染的最重要的形式
• CMV先天性感染。 • 在免疫抑制患者的感染,包括艾滋病、 肿瘤化疗患者(尤其是白血病和淋巴瘤)以 及器官移植受者。
巨细胞病毒抗原血症(CMVpp65)检测的操 作步骤(CMV BriteKit,MCA Development, The Netherlands)
• 基本原理是检测分子量65KD的基质磷蛋白 (pp65),该蛋白位于外周血白细胞的核仁内。 • 分离白细胞(EDTA-K3抗凝的静脉血2-5ml) • 细胞计数即浓度调整,3.0106/ml • 细胞离心涂片及固定。 • 染色,IIF法,第一抗体是抗CMVpp65单抗, 第二抗体是羊抗鼠免疫球蛋白荧光抗体。 • 读片及结果判断