对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法
保健食品在安全性和功能性以及毒理学技术审评和功能试验
保健食品试验项目选择原则
以普通食品（含药食两用品种、营养 强化剂）为原料，但服用量大于常量 的，进行急性毒性试验、三项致突变 试验和30天喂养试验，必要时作传统 致畸试验。
保健食品试验项目选择原则
以普通食品（含药食两用品种、营养强化剂） 为原料，使用新工艺生产的，应进行第一、 二阶段毒性试验。根据试验结果确定是否进 行下一步的毒性试验。
保健食品的特征
特征：特定保健功能、调节机体功能、 不治疗疾病、食品
营养素补充剂：补充维生素、矿物质
保健食品原料的安全性管理
普通食品可作为生产保健食品的原辅料。 申请注册的保健食品中涉及食品添加剂的
，应符合《食品添加剂使用卫生标准》的 规定，即所用品种为列入《食品添加剂使 用卫生标准》（GB2760）、《食品营养强 化剂使用卫生标准》（GB14880）或卫生部 公告名单中的食品添加剂新品种。
毒理学主要概念
半数致死剂量（LD50）：试验中，引起一 半动物死亡的剂量，用来表述受试物的毒 性大小。急性分级的依据。
末观察到有害作用剂量（NOAEL）：动物实 验中，敏感指标和敏感方法观察到的剂量， 是制定标准（安全限值）的依据。
毒理学主要概念
剂量－量反应关系：表示化学物质的剂 量与个体中发生的量反应强度之间的 关系。
首次使用的新资源除对产品进行毒性试验外， 还应对食品新资源进行毒性试验。
保健食品试验项目选择原则
产品配方中加入某一已批准用于食品的物质， 按本程序有关条款的规定设置试验剂量时， 如该物质的剂量达到已知的毒作用剂量，则 应去除该物质或降低该物质剂量（如降至最 大未观察到有害作用剂量，NOAEL），再就该 保健食品中其它成分的毒性作用及该物质与 其它成分的联合毒性作用作出评价。
佛手三七蒲公英颗粒对急性胃粘膜损伤的保护作用
佛手三七蒲公英颗粒对急性胃粘膜损伤的保护作用摘要：目的研究佛手三七蒲公英颗粒对无水乙醇诱导的急性胃粘膜损伤模型辅助保护作用。
方法将50只SD大鼠按体重随机分为空白对照组、模型对照组、受试物低、中、高剂量组，10只/组，连续灌胃30d。
末次给药后，无水乙醇造模，游标卡尺测量出血点或出血带的长度和宽度，计算积分，并进行病理组织学观察评分。
结果与空白对照组相比，模型对照组肉眼观察评分及组织病理学评分显著升高，有统计学差异(P＜0.01)；与模型对照组相比，受试物中、高剂量组组织病理学评分及肉眼观察评分降低(P＜0.05或P＜0.01)。
结论佛手三七蒲公英颗粒对无水乙醇诱导的急性胃粘膜损伤模型具有辅助保护作用。
关键词：佛手；三七；蒲公英；无水乙醇；急性胃粘膜损伤模型胃是人体重要的消化器官, 担负着储存、消化食物和吸收部分营养物质的功能。
胃部疾病，如消化性溃疡、急慢性胃炎、胃部肿瘤多是从胃粘膜病变开始的。
长期情绪紧张、不良的生活和饮食习惯等因素会导致胃粘膜的正常结构受到破坏，使胃壁将直接暴露于强酸环境下，反复刺激损伤和修复会形成慢性胃炎，最终可能会导致胃癌的发生[[[] 李丹，吴传城等.福建省仙游县335例胃癌环境危险因素的病理对照研究.现代预防医学，2017,44（2）]]，因此保护胃粘膜对预防胃部疾病具有重要的意义。
本实验研究佛手三七蒲公英颗粒对胃粘膜的辅助保护功能。
1 材料与方法1.1 样品本品由佛手提取物、蒲公英提取物、三七提取物为原料，辅以适当辅料，制成颗粒剂，3.0g/袋，每袋相当于含佛手1.8g、蒲公英6g、三七2g，每日推荐量为1袋。
1.2 动物材料SPF级SD大鼠(体重140～174g)，雄性，动物饲养于屏障级动物房，温度20～22 ℃, 相对湿度 50%～70%, 12h照明/12 h黑暗交替,动物自由摄食和饮水, 适应性喂养 1 周后进行试验。
1.3剂量选择与受试物给予方式人体推荐剂量为每人每日3g（按60kg计），设低、中、高三个剂量组即0.25、0.50、1.5g/kg.bw/d，分别相当于人体推荐剂量的5、10、 30 倍，另设0g/kg.bw/d（正常、模型）对照组以无菌水代替受试物。
《保健功能释义 (2022年版)》
附件5《保健功能释义（2022年版）》1. 有助于增强免疫力免疫力是人体对外防御和对内环境维持稳定的反应能力，受多种因素影响。
营养不良、疲劳、体力活动不足、生活不规律等导致的免疫力降低，应注意调整和纠正这些因素。
有科学研究表明，补充适宜的物质有助于改善免疫力。
2. 有助于抗氧化氧化是人体利用氧过程中的一个环节，抗氧化是人体控制由于氧化过度而产生不利健康影响的过程，氧化和抗氧化保持平衡，有助于维持正常生命活动。
外源性抗氧化物质主要来源于食物。
有科学研充表明，补充适宜的抗氧化物质，有助于人体维持氧化与抗氧化过程的平衡。
3. 辅助改善记忆非病理性记忆减退是健康状态下，大脑对过往经验和事物的识记、保持和再现能力变弱的感觉。
人的记忆主要决定于先天禀赋和后天教育训练，并受年龄、精神、营养、社会环境等因素影响。
补充有关的物质，不能使人“过目不忘”，也不能改善病理性的记忆减退。
有科学研究表明，改善睡眠、压力和不良生活习惯基础上，补充适宜的物质有助于改善非病理性记忆减退。
4. 缓解视觉疲劳视觉疲劳是眼睛长时间调节屈光所致，表现为视物模糊、眼部酸胀、干涩、流泪等眼部不适感。
视觉疲劳与用眼距离、时间、照明、眼镜屈光度不当和户外活动少等有关。
有科学研究表明，补充适宜的物质有助于缓解视觉疲劳。
5. 清咽润喉饮水不足、用嗓过度、刺激性食物、吸烟等因素可以引起咽喉部不适感。
有科学研究表明，补充适宜的物质有助于滋润咽喉或产生清爽的感觉。
（二）功能学评价方法的衔接经过多轮专家论证，从保健功能评价原理、评价指标、适用范围等角度，充分研讨了《评价方法（2022年版）》与原食品药品监管局发布《关于印发抗氧化功能评价方法等9 个保健功能评价方法的通知》（国食药监保化〔2012） 107 号，以下简称《2012年版评价方法》）、原卫生部发布的《保健食品检验与评价技术规范（2003版）》（以下简称《评价方法（2003年版）》）、原卫生部发布《保健食品功能学评价程序和检验方法（1996版）》（以下简称《评价方法（1996 年版）》）在科学上的实质性异同。
国家食品药品监督管理局修订发布抗氧化等九个保健食品功能评价方.
国家食品药品监督管理局修订发布抗氧化等九个保健食品
功能评价方法
2012年05月10日发布
为贯彻落实《食品安全法》及其实施条例对保健食品实行严格监管的要求,严格保健食品准入管理,切实提高准入门槛,近期,国家食品药品监管局修订发布了抗氧化、缓解视疲劳、辅助降血糖、辅助降血脂、改善缺铁性贫血、促进排铅、对胃粘膜损伤有辅助保护功能、减肥、清咽九个保健食品功能评价方法。
新发布的功能评价方法主要提高了判断标准,完善了动物试验模型,细化了人体试食试验受试人群要求,优化了试验方法等,从而进一步提高了方法的科学性和可操作性。
自2012年5月1日起,保健食品注册检验机构对申请的保健食品注册检验,应当执行新修订的功能评价方法。
国家食品药品监管局还将陆续修订发布其他保健食品功能评价方法。
自2009年2月以来,为进一步加强保健食品监督管理,国家食品药品监管局从保障保健食品质量安全的高度,组织开展了保健食品功能评价方法提高工作。
先后组织召开了专家、企业研讨会,邀请了食品科学与工程、公共卫生与预防医学、临床医学、中医学、药学、中药学等相关领域的专家,以及部分国内具有代表性的保健食品生产企业和有关研发企业参加,就保健食品功能评价方法及相关指标、判断标准的科学性和可操作性等方面进行了深入研究,反复论证。
在此基础上,选择具有较高研究水平的保健食品注册检验机构,开展了功能评价方法验证提高工作,并面向社会广泛征求意见。
经国家食品药品监管局保健食品安全专家委员会审核,国家食品药品监管局修订发布了抗氧化等九个功能评价方法。
保健食品27种功能及试验检测项目
保健食品主要分为营养素补充剂和具有调节机体功能的功能性产品。
（1）营养素补充剂：指以补充一种或多种维生素、矿物质而不以提供能量为目的的产品。
其作用是补充膳食供给的不足，预防营养缺乏和降低发生某些慢性退行性疾病的危险性。
此类产品仅限于补充维生素和矿物质。
（2）国家食品药品监督管理局公布的保健食品的27种功能：（申请功能数量不受限制）
1、增强免疫力功能15、抗氧化功能★
2、改善睡眠功能16、辅助改善记忆功能★
3、对化学性肝损伤有辅助保护功能17、促进排铅功能★
4、增加骨密度功能18、清咽功能★
5、提高缺氧耐受力功能19、辅助降血压功能★
6、对辐射危害有辅助保护功能20、促进泌乳功能★
7、缓解体力疲劳功能◇ 21、减肥功能★◇
8、缓解视疲劳功能☆22、改善生长发育功能★◇
9、祛痤疮功能☆23、改善营养性贫血功能★
10、祛黄褐斑功能☆24、调节肠道菌群功能★
11、改善皮肤水份功能☆25、促进消化功能★
12、改善皮肤油份功能☆26、通便功能★
13、辅助降血脂功能★27、对胃黏膜损伤有辅助保护功能★
14、辅助降血糖功能★
注：标有★的功能，既需要进行动物功能试验又需要进行人体功能试验。
标有☆功能，只需进行人体功能试验，无需进行动物功能试验。
标有◇的项目需做兴奋剂检测。
拟申请的功能不在以上公布的27种范围内的，申请人应当自行进行动物试验和人体试食试验，并向确定的检验机构提供功能研发报告。
保健品对胃黏膜损伤的辅助保护作用方法学研究
Ｈｕ ａ ｄ ｎ ，Ｇｏ ｇＹｕ ｎ ｕ ｎ，Ｒｕ ｉｇ ａ ｇＹｕ ｎａ ａ Ｘｉｏ ｏ ｇ ｎ ａｙａ ｉ ｎ ，Ｔ ｎ ａ ｔｉ Ｊ
（Ｔａｊ ｕ ｉｉ ｌ ｎｔｕｅｆ ｒｇＣ ｎｒｌ Ｔａｊ ００ ０ ） ｉ ｉ Ｍ ｎ ｐ ｓｔｔ ｏ Ｄ ｕ ｏｔ ， ｉ ｉ ３０ ７ ｎｎ ｃ ａＩ ｉ ｒ ｏ ｎｎ
简称 《 范 》 ， 据保 健 品 的 使 用 对 象 ， 常选 规 ）根 通 由于市场上的产品质量 良莠不齐 ， 胃黏膜损伤 进行 （ 对 辅助 保护 类 保 健 品 的功 效 学 评 价 已成 为 一 个 重 要 问 择 乙醇诱 发 大 鼠急 性 胃黏 膜 损 伤 ； 乙酸 诱 发 大 鼠慢 性 题 ， 新 药 不 同 ， 类 保 健 品 的功 效 学 研 究 在 实 验 设 胃黏 膜损 伤 ； 炎痛 诱 发 大 鼠 胃黏 膜 损 伤 ３种 试 验 模 与 这 消 进 计、 动物模型建立方面都有一定的特点 ， 本实验对活谓 型 ， 行 试验 方法 学研 究 。在 建立 胃黏 膜损 伤模 型 时 ， 作 素胶囊 （ 主要 成 分 为碱 性 黏 多 糖 和硫 酸 酯 半 乳 聚 糖 ） 由于该 类 保健 品对 胃黏 膜 损 伤 均 为 辅 助保 护作 用 ， ， 用程度与药物 的治疗作用有一定的区别 ， 因此模型 的 进行功效学评价 ， 并对其研究特点进行介 绍， 以期为该 胃黏 膜损 伤程 度应 较 药 品试 验 的模 型 相对 较低 。 类 保健 品的评价 提供 一 些参 考 。
维普资讯
天津药学
Ｔａｊ Ｐ ａｍ ｃ ２ ０ ｉ ｉ ｈｒ ａｙ ０７年 ４月 ｎｎ
第１ ９卷第 ２期
７
保 健 品对 胃黏 膜 损伤 的 辅助 保 护 作 用方 法 学研 究
保健食品功能评价规范
保健食品功能评价规范第一部分功能学评价程序一、主题内容和适用范围1、本程序规定了评价食品保健作用的统一程序。
2、本程序适用于评价保健食品的增强免疫力功能，辅助降血脂功能功能，辅助降血糖功能，抗氧化功能，辅助改善记忆功能，缓解视疲劳功能，促进排铅功能，清咽功能，辅助降血压功能，改善睡眠功能，促进泌乳功能，缓解体力疲劳功能，提高缺氧耐受力功能，对辐射危害有辅助保护功能，减肥功能，改善生长发育功能，增加骨密度功能，改善营养性贫血功能，对化学性肝损伤有辅助保护功能，祛痤疮功能，祛黄褐斑功能，改善皮肤水份功能，改善皮肤油份功能，调节肠道菌群功能，促进消化功能，通便功能，对胃粘膜有辅助保护功能。
3、本程序规定了评价食品保健作用的人体试食试验规程。
二、保健食品功能评价的基本要求1 对受试样品的要求应提供受试样品的原料组成或/和尽可能提供受试样品的物理、化学性质(包括化学结构、纯度、稳定性等)有关资料。
受试样品必须是规格化的定型产品，即符合既定的配方、生产工艺及质量标准。
提供受试样品安全性毒理学评价的资料以及卫生学检验报告，受试样品必须是已经过食品安全性毒理学评价确认为安全的食品。
功能学评价的样品与毒理学评价、卫生学检验的样品必须为同一批次（安全性毒理学评价和功能学评价实验周期超过受试样品保质期的除外）。
应提供功效成分或特征成分、营养成分的名称及含量。
如需提供受试样品违禁药物检测报告时，应提交与功能学实验同一批次样品的违禁药物检测报告。
2 对实验动物的要求根据各项实验的具体要求，合理选择实验动物。
常用大鼠和小鼠，品系不限，推荐使用近交系动物。
动物的性别、年龄依实验需要进行选择。
实验动物的数量要求为小鼠每组10－15只（单一性别），大鼠每组8－12只（单一性别）。
动物应符合国家对实验动物的有关规定。
3 对给受试样品剂量及时间的要求各种动物实验至少应设3个剂量组，另设空白对照组，必要时可设阳性对照组。
剂量选择应合理，尽可能找出最低有效剂量。
保健食品各功能需要做的动物及人体试验
保健食品各功能需要做的动物及人体试验功效成分或标志性成分检测、卫生学试验、稳定性试验、复核检验（一）只要求动物实验的项目有：1. 增强免疫力功能检验方法主要指标：细胞免疫功能体液免疫功能单核－巨噬细胞功能NK细胞活性测定判定：四项指标中任两项结果阳性。
注意事项：不认可增强单项免疫力功能。
2. 改善睡眠功能检验方法主要指标：戊巴比妥纳睡眠时间实验巴比妥钠睡眠潜伏期实验戊巴比妥钠（或巴比妥钠）阈下剂量催眠实验判定：3项实验中任2项阳性，且直接睡眠作用。
注意事项：对动物进行直接睡眠实验时，也要同样注意进行30天灌胃。
3. 缓解体力疲劳检验方法主要指标：血乳酸血清尿素肝糖原/肌糖原动物负重游泳实验判定：负重游泳实验结果阳性，血乳酸曲线下面积、血清尿素、肝糖/肌糖原3项生化指标中任2项指标阳性。
注意事项：（1）对同批受试样品进行违禁药物的检测。
（2）在负重游泳实验时，酒类样品测试当天可以不灌胃。
4. 提高缺氧耐受力功能检验方法主要指标：常压耐缺氧实验亚硝酸钠中毒存活实验急性脑缺血性缺氧实验判定：三项试验中任二项实验结果阳性。
注意事项：每批实验动物的体重尽量保持一致。
5. 对辐射危害有辅助保护功能检验方法主要指标：外周血白细胞计数骨髓细胞DNA含量或骨髓有核细胞数小鼠骨髓细胞微核实验血/组织中SOD活性实验血清溶血素含量实验判定：以上5项实验中任3选项进行实验，3项实验中任何2项实验结果阳性。
注意事项：选用小鼠，受试样品于照射前给予14～30天，照射后仍然给予受试物，必要时可延至45天。
6. 增加骨密度功能检验方法根据受试样品作用的原理不同，分为方案一（补钙为主的受试物）和方案二（不含钙或不以补钙为主的受试物）两种。
主要指标：体重骨钙含量骨密度判定：（方案一）骨钙含量/骨密度显著高于低钙对照组且不低于相应剂量的碳酸钙对照组，钙的吸收率不低于碳酸钙对照组。
（方案二）①不含钙的产品：骨钙含量/骨密度较模型对照组明显增加，其它指标（体重除外）不显著低于卵巢切除＋溶剂组。
保健食品功能评价方法
• 眼部症状 • 明视持久度 • 远视力
• 随机、双盲分组，视力水 平均衡
• 对照组用安慰剂
• 症状总积分、明视持久度 和总有效率明显改善
• 平均明视持久度提高大于 等于10%
• 可判定该受试样品具有缓 解视疲劳的作用
促进排铅作用动物实验
• 体重 • 血铅 • 骨铅 • 肝组织铅
• 动物模型成立
• 实验组与模型对照组比较， 肝组织铅或骨铅含量明显下 降
保健功能
• 特定保健功能声称 • 特定人群食用 • 调节机体功能、抵御环境有害
因素、补充营养、缓解某些病 理状况 • 不以治疗疾病为目的
1. 增加免疫力* 12. 缓解体力疲劳* 21.祛黄褐斑
2. 辅助降血脂 13. 提高缺氧耐受力* 22.改善皮肤水份
3. 辅助降血糖 14. 对辐射危害有辅 23.改善皮肤油份
增加免疫力试验项目
体重 脏器/体重比值：胸腺/体重，脾脏/体重 • 细胞免疫功能测定：小鼠脾淋巴细胞转化实验，迟发型
变态反应实验 • 体液免疫功能测定：抗体生成细胞检测，血清溶血素测
定 • 单核—巨噬细胞功能测定：小鼠碳廓清实验，小鼠腹
腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验 • NK细胞活性测定
增加免疫力结果判定
径受试样品的给予量 • 测量每日饲料消耗量/饮水量，计算食物利用率
对实验动物的要求
• 各种实验的具体要求，合理选择实验动物 • 动物的性别、年龄依实验需要进行选择 • 动物的数量要求为小鼠每组10－15只（单一性别），大
鼠每组8－12只（单一性别） • 动物应达到清洁级实验动物的要求 • 动物合格证
满足上述两个条件
餐后2h血糖 ①试验组自身比较，差异显 著，且试验后平均血糖下降 ≥10％ ②试食组与对照组比较，血 糖值下降或血糖下降百分率 差异显著
谷氨酰胺、姜黄素组方对酒精性胃粘膜损伤的保护作用
陆海霞，徐莹，潘美辰，等. 谷氨酰胺、姜黄素组方对酒精性胃粘膜损伤的保护作用[J]. 食品工业科技，2024，45（4）：299−304. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2023030217LU Haixia, XU Ying, PAN Meichen, et al. Protective Effect of a Combined Glutamine and Curcumin Formulation on Alcoholic Gastric Mucosal Damage[J]. Science and Technology of Food Industry, 2024, 45(4): 299−304. (in Chinese with English abstract). doi:10.13386/j.issn1002-0306.2023030217· 营养与保健 ·谷氨酰胺、姜黄素组方对酒精性胃粘膜损伤的保护作用陆海霞，徐 莹，潘美辰，唐天培，赵建云，葛 磊*（杭州娃哈哈集团有限公司，浙江省食品生物工程重点实验室，浙江杭州 310018）摘 要：目的：旨在探讨谷氨酰胺、姜黄素组方对乙醇致大鼠胃粘膜损伤的保护作用及机制。
方法：将50只SPF 级健康SD 雄性大鼠随机分为空白组、模型对照组、西米替丁组、高剂量组、低剂量组5组。
连续30 d 口服灌胃给药后，除空白组外，其余各组均在无水乙醇造模后处死。
通过H&E 染色观察胃粘膜组织病理学变化情况，采用试剂盒测定血清丙二醛（malondialdehyde ，MDA ）、一氧化氮（NO ）含量和谷胱甘肽过氧化物酶（Glu-tathioneperoxidase ，GSH-Px ）活性，并测定组织中前列腺素E 2（PGE 2）含量水平和血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）、NADPH 醌氧化还原酶（NADPH Quinone Oxidoreductase 1，NQO1）、抗氧化相关基因核因子-E 2相关因子2（Nuclear factor-E 2 related factor 2，Nrf2）、丝氨酸蛋白激酶-3β（Glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β）的表达情况。
国家食品药品监督管理局“关于印发抗氧化功能评价方法等9个保健功能评价方法的通知”
关于印发抗氧化功能评价方法等9个保健功能评价方法的通知国食药监保化[2012]107号各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局（药品监督管理局），有关单位：为贯彻落实《食品安全法》及其实施条例对保健食品实行严格监管的要求，加强保健食品准入管理，切实提高准入门槛，国家食品药品监督管理局组织修订了抗氧化等9个功能的评价方法，已经保健食品安全专家委员会审议通过，现予印发。
自2012年5月1日起，对受理的申报注册保健食品的相关产品检验申请，保健食品注册检验机构应当按照新发布的9个功能评价方法开展产品功能评价试验等各项工作。
附件：1．抗氧化功能评价方法2．对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法3．辅助降血糖功能评价方法4．缓解视疲劳功能评价方法5．改善缺铁性贫血功能评价方法6．辅助降血脂功能评价方法7．促进排铅功能评价方法8．减肥功能评价方法9．清咽功能评价方法国家食品药品监督管理局二○一二年四月二十三日/WS01/CL0847/71257.html国家食品药品监督管理局印发抗氧化功能评价方法等9个保健功能评价方法2012年05月02日为贯彻落实《食品安全法》及其实施条例对保健食品实行严格监管的要求，加强保健食品准入管理，切实提高准入门槛，国家食品药品监督管理局组织修订了抗氧化等9个功能的评价方法，已经保健食品安全专家委员会审议通过，并于日前印发。
自2012年5月1日起，对受理的申报注册保健食品的相关产品检验申请，保健食品注册检验机构应当按照新发布的9个功能评价方法开展产品功能评价试验等各项工作。
9个功能评价方法包括：抗氧化功能评价方法、对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法、辅助降血糖功能评价方法、缓解视疲劳功能评价方法、改善缺铁性贫血功能评价方法、辅助降血脂功能评价方法、促进排铅功能评价方法、减肥功能评价方法和.清咽功能评价方法。
对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法
对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1 试验项目1.1 动物实验1.1.1 体重1.1.2 胃粘膜大体损伤状况1.1.3 胃粘膜病理损伤积分1.2 人体试食试验1.2.1 临床症状1.2.2 体征1.2.3胃镜观察2 试验原则2.1 动物实验与人体试食试验所列指标均为必做项目。
2.2 无水乙醇、消炎痛致急性胃粘膜损伤模型或者冰醋酸致慢性胃粘膜损伤模型任选其一进行动物实验。
2.3 在进行人体试食试验时，应对受试样品的安全性作进一步的观察。
3 结果判定3.1 动物实验：实验组与模型参照组比较，大体观察评分与病理组织学检查评分结果均说明胃粘膜损伤明显改善，可判定该受试样品动物实验结果为阳性。
3.2 人体试食试验：试食组与参照组比较，临床症状、体征积分明显减少，胃镜复查结果有改善，可判定该受试样品对胃粘膜有辅助保护功能。
对胃粘膜损伤有辅助保护功能检验方法Method for the Assessment of Protectionof Gastric Mucosa Function1 动物实验1.1 原理在一定时间内给予一定量的受试样品，用对胃粘膜有损伤作用的物质造成急性胃粘膜损伤模型，观察各剂量组胃粘膜的损伤程度；或者用对胃粘膜有损伤作用的物质造成慢性胃溃疡模型，在一定时间内给予一定量的受试样品，观察各剂量组胃溃疡的面积与体积，反映受试样品对胃粘膜的保护作用。
1.2 实验动物选用SD或者Wistar 健康大鼠，单一性别，180－220克，每组8－12只。
1.3 实验设计及剂量分组受试物设三个剂量组，其中一个应为人体推荐量的5倍剂量组，并同时设置正常参照组。
不一致的损伤模型，还应设置相应的模型参照组。
慢性溃疡模型应先造模，手术次日再分组。
受试样品给予时间通常为14—30天，必要时能够延长至45天。
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对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法（征求意见稿）保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment辅助降血糖功能1 试验项目1.1 动物实验1.1.1 体重1.1.2 胃粘膜大体损伤状况1.1.3 胃粘膜病理损伤积分1.2 人体试食试验1.2.1 临床症状1.2.2 体征1.2.3胃镜观察2 试验原则2.1 动物实验和人体试食试验所列指标均为必做项目。
2.2 无水乙醇、消炎痛致急性胃粘膜损伤模型或冰醋酸致慢性胃粘膜损伤模型任选其一进行动物实验。
2.3 在进行人体试食试验时，应对受试样品的安全性作进一步的观察。
3 结果判定3.1 动物实验：实验组与模型对照组比较，大体观察评分与病理组织学检查评分结果均表明胃粘膜损伤明显改善，可判定该受试样品动物实验结果为阳性。
3.2 人体试食试验：试食组与对照组比较，临床症状、体征积分明显减少，胃镜复查结果有改善，可判定该受试样品对胃粘膜有辅助保护功能。
对胃粘膜损伤有辅助保护功能检验方法Method for the Assessment of Protectionof Gastric Mucosa Function1 动物实验1.1 原理在一定时间内给予一定量的受试样品，用对胃粘膜有损伤作用的物质造成急性胃粘膜损伤模型，观察各剂量组胃粘膜的损伤程度；或用对胃粘膜有损伤作用的物质造成慢性胃溃疡模型，在一定时间内给予一定量的受试样品，观察各剂量组胃溃疡的面积和体积，反映受试样品对胃粘膜的保护作用。
1.2 实验动物选用Wistar或SD健康大鼠，单一性别，160－180克，每组8－12只。
1.3 实验设计及剂量分组受试物设三个剂量组，其中一个应为人体推荐量的5倍剂量组，并同时设置正常对照组。
不同的损伤模型，还应设置相应的模型对照组。
慢性溃疡模型应先造模，手术次日再分组。
受试样品给予时间一般为14—30天，必要时可以延长至45天。
1.4 胃粘膜损伤模型1.4.1 急性胃粘膜损伤酒精模型1.4.1.1 实验动物：选用Wistar或SD健康大鼠，单一性别。
1.4.1.2 实验器材及试剂：解剖器械，游标卡尺，酒精或醋酸，病理制片系统，生物显微镜等。
1.4.1.3 实验方法：动物随机分正常对照组、模型组和受试样品三个剂量组。
各剂量组灌胃样品30天后，全部动物严格禁食24小时（不禁水），此期间亦禁止给予受试物。
除空白对照外，所有试验组动物给予无水乙醇1.0ml/只，1小时后处死动物，暴露完整胃，结扎幽门，灌注适量10%甲醛溶液，固定20min，然后沿胃大弯剪开，洗净胃内容物，展开胃粘膜，在体视解剖显微镜下或肉眼下用游标卡尺测量出血点或出血带的长度和宽度。
因宽度所代表损伤的严重性远较长度大，故双倍积分。
其评分标准见表1。
表1 急性酒精损伤肉眼观查评分标准损伤程度1分2分3分4分出血点1个- - -出血带长度1~5mm 6~10mm 10~15mm >15mm出血带宽度1~2mm >2mm总积分= 出血点分值+长度分值+（宽度分值⨯2）观察指标：各实验组胃粘膜损伤程度以损伤发生率（%）、损伤积分指数和损伤抑制率表示。
损伤发生率（%）= 某组出现出血或溃疡的大鼠数量／该组大鼠数量×100%；损伤积分指数= 组损伤评分总和／组动物数量；损伤抑制率（%）= (A-B) /A⨯100%（A、B分别为模型组与试验组的损伤积分）。
病理组织学观察及评分：大体检查完毕，将每只动物胃粘膜损伤最严重的部位切下，固定于10%甲醛溶液，常规制片，HE染色，镜下观察。
注意选择胃粘膜正横切面，包括粘膜全层的区域观察。
评分方法：以充血、出血、粘膜细胞变性坏死在整个粘膜上皮层的累及程度分为5级。
充血权重为1，出血权重为2，上皮细胞变性坏死权重为3，评分标准及病变总积分公式见表2。
表2 急性胃粘膜损伤镜下评分标准病变1分2分3分4分5分充血＜1/5 1/5 ~ 2/5 2/5 ~ 3/5 3/5~ 4/5 上皮全层出血＜1/5 1/5 ~ 2/5 2/5 ~ 3/5 3/5~ 4/5 上皮全层上皮细胞变性坏死＜1/5 1/5 ~ 2/5 2/5 ~ 3/5 3/5~ 4/5 上皮全层病变总积分= 充血积分+出血积分⨯2+上皮细胞变性坏死积分⨯31.4.2急性胃粘膜损伤消炎痛模型1.4.2.1 实验动物：选用Wistar或SD健康大鼠，单一性别。
1.4.2.2 实验器材及试剂：解剖器械或游标卡尺，病理制片系统；消炎痛，甲醛等。
1.4.2.3 实验方法：动物随机分正常对照组、模型组和受试样品三个剂量组，灌胃给予动物受试物30天后，禁食不禁水24h，模型组和剂量组给予消炎痛40mg/kg一次性腹腔注射。
5h后处死动物，剖腹将胃取出，结扎幽门和贲门，从十二指肠与幽门部结合处注入10%甲醛溶液5 ml，固定20 min后，沿胃大弯剪开，洗净胃内容物，展开胃粘膜，用纸吸干，观察胃粘膜损伤程度。
用游标卡尺测量胃出血或溃疡的最大长度及宽度，以出血或溃疡的最大长宽径作为损伤指标评分。
消炎痛所致胃粘膜损伤的溃疡一般较小，肉眼观查以点状多见，其评分标准见表3。
表3 急性胃粘膜损伤消炎痛模型评分标准损伤形态1分2分3分4分出血点1个- -出血带长度1~2mm 2~4mm 4~6mm >6mm出血带宽度1~2mm >2mm总积分= 出血点分值+长度分值+（宽度分值⨯2）注：长度和宽度均以最大径计。
观察指标：各实验组胃粘膜损伤程度以损伤发生率（%）、损伤指数和损伤抑制率表示。
损伤发生率（%）= 某组出现出血或溃疡的大鼠数量／该组大鼠数量×100%；损伤指数= 组损伤评分总和／组动物数量；损伤抑制率（%）=(A-B)/A⨯100%（A、B分别为模型组与试验组的损伤积分）病理组织学观察及评分：同急性胃粘膜损伤酒精模型。
1.4.3 慢性胃溃疡模型1.4.3.1 动物：选用Wistar或SD健康大鼠，单一性别。
1.4.3.2 实验器材及试剂：带标尺的解剖镜、微量注射器，醋酸、半胱氨酸等1.4.3.3 实验方法：1.4.3.3.1 醋酸注射法：将动物禁食不禁水40h，乙醚或1%巴比妥钠麻醉后实施剖腹手术，消毒腹部，于剑突下切开腹腔，将胃轻拉出腹腔外，用微量注射器于胃幽门处浆膜下注射20—30μl的30%冰醋酸，缝合切口，术后正常喂食和水。
第二天将手术后状态良好的动物按体重随机分为模型组和受试样品三个剂量组。
各剂量组按相应剂量灌胃，连续14天。
模型组灌胃蒸馏水或溶剂。
禁食24h后处死，取出整个胃浸泡于10%的甲醛内，浸泡20分钟后沿胃大弯剪开，洗净内容物，取腺胃区展开平铺于玻璃板上，用纸吸干溃疡内的水分，测量其面积和体积。
溃疡面积和体积测量法：于带标尺的解剖显微镜下计数溃疡所占的方格数，换算成面积。
然后用微量注射器将有色墨水注入溃疡内，将溃疡填满与周边平齐，读取微量注射器上刻度即为溃疡的体积。
1.4.3.3.2 冰醋酸浸渍法：将动物禁食不禁水40h，乙醚或1%巴比妥钠麻醉后实施剖腹手术，消毒腹部，于剑突下切开腹腔，将内径5mm、长30mm的玻璃管垂直放置胃体部粘膜上，向管腔加入冰醋酸0.2ml，1.5分钟后用棉签蘸出冰醋酸，缝合手术切口，术后正常喂食和水，第二天将手术后状态良好的动物按体重随机分组、给药，动物处置和测量等操作同上。
1.5 数据处理和结果判定数据可用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值< F0.05，结论：各组均数间差异无显著性。
F值≥F0.05，即P≤0.05，用多个实验组和对照组间均数的两两比较方法进行统计。
对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计。
若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
受试物一个或一个以上剂量组与模型对照组进行比较，大体观察评分与病理组织学检查评分结果均表明胃粘膜损伤明显改善，可判定该受试样品动物实验结果为阳性。
1.6 注意事项动物禁食应完全，应严格控制动物禁食期间食粪便、皮毛、垫料等。
2 人体试食试验2.1 受试者的选择标准2.1.1 纳入受试者标准：符合慢性浅表性胃炎诊断标准且经胃镜筛选确诊为胃粘膜损伤的自愿受试者。
2.1.2 慢性浅表性胃炎诊断标准：病程迁延，有不同程度的消化不良、上腹痛、烧心、嗳气、反酸、腹胀等临床症状，可有上腹部轻度压痛。
符合慢性浅表性胃炎纤维胃镜诊断标准及活体组织检查诊断标准。
排除胃溃疡患者。
2.1.3 排除受试者标准：2.1.3.1 年龄在18岁以下或65岁以上，妊娠或哺乳期妇女，过敏体质及对本样品过敏者。
2.1.3.2 继发性慢性胃炎。
2.1.3.3 合并有心血管、脑血管、肝、肾和造血系统严重疾病，精神病患者。
2.1.3.4 经常用药、嗜酒、吸烟，4周内参加过其它实验。
2.1.3.5 3个月内用过已知对胃肠功能有损害的药物。
2.1.3.6 症状、体征分级为重症者。
2.1.3.7 有严重消化系统溃疡的病人。
2.1.3.8 正在服用其它治疗药物或接受其它治疗者。
2.1.3.9 未按规定服用样品，无法判断功效，或资料不全等影响功效或安全性判断者。
2.2试验设计及服样期限采用组间和自身两种对照设计。
按受试者的症状轻重随机分为试食组和对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如年龄、性别、病程等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。
每组受试者不少于50例。
2.3 受试样品的剂量和使用方法试食组按推荐服用方法、服用量服用受试产品，在试验期间停用其它用于慢性胃病的物品，对照组服有相同作用的阳性物。
按双盲法进行试食试验。
观察时间不少于30天，必要时可延长至45天。
试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。
2.4 观察指标2.4.1 安全性指标2.4.1.1 一般状况：包括精神、睡眠、饮食、大小便、血压等2.4.1.2血、尿、便常规检查2.4.1.3肝、肾功能检查2.4.1.4胸透、心电图、腹部B超检查（仅在试验开始前检查一次）2.4.2 功效指标2.4.2.1 症状观察胃痛、嗳气、反酸、腹胀、食欲不振、少食等临床症状。
体征观察剑突下压痛程度。
按症状轻重统计积分（重症3分，中度2分，轻度1分），见表4。
表4 人体试食试验症状轻重分级表2.4.2.2 胃镜检查与体征观察剑突下压痛程度检查，根据疼痛程度分为轻（1分）、中（2分）、重（3分）。
轻度：用力时才出现疼痛，压痛轻微 1分中度：用力即出现疼痛，但疼痛尚能忍受，压痛明显 2分重症：稍微用力即出现疼痛，疼痛不能忍受，压痛剧烈 3分随机选择试食组和对照组各15例受试者进行胃镜检查，比较试食试验前后的改变。