JC-126 植物提取物中总黄酮(Total Flavones)含量测定方法

1. 仪器和试剂

1.1 UV-2450紫外-可见光分光光度计

1.2 分析天平：感量0.00001g

1.3 超声波清洗仪：功率250W，频率40KHz

1.4 芦丁对照品（99%）

1.5 槲皮素对照品（99%）

1.6 容量瓶（10mL、100 mL）

1.7 微量移液管（1 mL）

1.8 移液管（2 mL）

1.9 醋酸（分析级）

1.10 醋酸钠（分析级）

1.11 无水乙醇（分析级）

1.12 蒸馏水

1.13醋酸-醋酸钠缓冲液（PH4.5）：准确称取醋酸钠（分析纯）1.8g，加入醋酸（分析纯）0.98mL，加水溶解定容至100mL混匀即可。

1.14 0.1mol/L三氯化铝试液：准确称取三氯化铝（分析纯）

2.41g，加水溶解定容至100mL混匀即可。

2. 测定方法

2.1对照品溶液制备

精密称取102℃减压干燥的槲皮素（芦丁）对照品约20mg，于100mL容量瓶中，加70%乙醇溶液定容，即为对照样品溶液。

2.2 样品溶液制备

精密称取植物提取物适量，于100mL容量瓶中，加入80mL70%乙醇，超声

提取30min ，冷却至室温，加入70%乙醇稀释至刻度，摇匀，过滤。续滤液即为样品溶液。

2.3 标准曲线制作

精密称取槲皮素（芦丁）对照品0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL 于10mL 容量瓶中，加醋酸-醋酸钠缓冲液2mL ，0.1mol/L 三氯化铝试液2mL ，摇匀，加70%乙醇溶液稀释至刻度，在270nm 处以试剂为空白测定吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标做标准曲线。

3. 样品测定

取样品续滤液1mL 于10mL 容量瓶中，按工作曲线项下“加加醋酸-醋酸钠缓冲液起”，依法测定吸光度，从工作曲线上读出样品溶液中槲皮素（芦丁）的浓度。

4. 含量计算

100%11⨯⨯⨯=W

K V C ）总黄酮含量（﹪ 这是不是少了个百分号？ 式中：C 1---从标准曲线计算得的显色液总黄酮的浓度，mg/mL ；

V 1：显色液的体积，ml ；

K ：分取倍数；

W ：样品的重量，mg

样品含量结果取两个平行样品含量的平均值。

分取倍数：如100ML 盐酸溶液,稀释到1000ML 定容,然后再取25ML 进行测定.分取倍数就是1/40,相当于取原溶液2.5ML 进行测定.

按照你的方法，V1应该是10ML ，K 应该是100.

你这个应该叫稀释倍数吧。从100ML 里取1ML 分析，推回去就应该乘以100.