实验四讲义(新城疫病鸡剖检及病毒学检查)

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鸡新城疫的诊断.pptx

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⑥结果判断和记录 “－”表示红细胞凝集抑制。高浓度的新城疫抗体能抑制新城疫病
毒对鸡红细胞的凝集作用，使反应孔中的红细胞呈圆点状沉淀于反应孔底端中央，而不出现血凝现象。 “＋”表示红细胞完全凝集。随着血清被稀释，它对病毒血凝作用的抑制减弱，反应孔中的病毒逐渐表现出血凝作用，而最终使红细胞完全凝集，沉于反应孔底层，边缘不整或呈锯齿状。 “±”表示不完全抑制。红细胞下沉情况介于“－”与“＋”之间。如果待检抗体被标准阳性血清所中和，则确诊为NDV。
振荡1min，置于室温30~40min，或置37℃温箱15~30 min
结果观察（血凝价）
凝不滑
不凝滑
12 50 弃 50
不凝滑
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HA视频
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（2）微量血凝抑制试验（HI）
用上述分离病毒制备4单位病毒，再用标准的阳性血清进行HI试验。 ①用微量移液器向1～12号孔中分别加入50μl生理盐水。 ②换一吸头取标准阳性血清50μl 置于第１孔中，挤压3～5次混匀，吸出
为接种材料。在这同时，应对接种材料作无菌检查如有细菌生长，
应将原始材料再作除菌处理，也可改用细菌滤器过滤除菌。
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（2）鸡胚接种用9～11日龄的SPF鸡胚（如果没有SPF鸡胚，也可用非免疫鸡
胚），将上述处理过的材料，取0.1～0.2ml接种于尿囊腔内。接种后以熔化的石蜡将卵壳上的接种孔封闭，继续置温箱内。每日上下午各照蛋一次，连续观察5d，接种24h内死亡的鸡胚，
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2．病毒的鉴定
（1）微量血凝试验（HA）（2）微量血凝抑制试验（HI）
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（1）微量血凝试验（HA）

鸡新城疫课件

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发病机理
新城疫病毒经过消化道、呼吸道，眼结膜，受伤的皮肤、泄殖腔粘膜侵入机体。病毒在24h 内很快在侵入部位繁殖
进入血液扩散到全身，引起败血症
NDV强毒感染破坏全身淋巴组织，胸腺、法氏囊和脾脏受损严重，造成严重免疫抑制。
自然感染的潜伏期一般为3-5天，人工感染2-5天。
病毒的鉴定
NDV在细胞培养中的鉴定方法
1、中和试验 2、蚀斑减数试验 3、血吸附抑制试验
流行病学
鸡、野鸡、火鸡、珍珠鸡、鹌鹑易感。其中以
鸡最易感，野鸡次之。幼雏和中雏易感性最高，两年以上的老鸡易感性较低。水禽如鸭、鹅等也能感染本病，并已从鸭、鹅、天鹅、塘鹅和鸬鹚中分离到病毒，但它们一般不能将病毒传给家禽。鸽、斑鸠、乌鸦、麻雀、八哥、老鹰、燕子以及其他自由飞翔的或笼养的鸟类，大部分也能自然感染本病或伴有临诊症状或呈隐性经过。
产蛋母鸡的卵泡和输卵管显著充血，卵泡膜极易破裂以致卵黄流入腹腔引起卵黄腹膜炎，肝、脾无特殊病变，肾多表现充血及水肿，输尿管内积有大量尿酸盐。脑膜充血或出血，而脑实质无眼观变化，仅于组织学检查时，见有明显的非化脓性脑炎病变。
病理变化与鸡群免疫状态有关，有部分免疫力鸡的症状、
死亡率和病理变化与易感鸡感染新城疫病毒有显著不同。用新城疫强毒株感染易感鸡时，可发生典型新城疫症状和病变，腺胃乳头和粘膜出血明显，肌胃有出血和溃疡，肠道粘膜和浆膜有明显出血，盲肠扁桃体出血和溃疡，而且死亡率很高。而有部分免疫力的鸡感染后，出现轻微临诊症状，主要表现为呼吸系统和神经症状，腺胃出血不明显，病变检出率低，往往以非典型出现。据国内报道，非典型新城疫的病例中，以直肠粘膜和盲肠扁桃体出血的比例增多，肠道粘膜和浆膜出血也比典型新城疫少。因此，在一个鸡场发生疫情时，怀疑为非典型新城疫时，尽可能多解剖几例病死鸡，总会发现有腺胃乳头和粘膜少量出血点，可作综合诊断的补充。（ /news/P1P210124I8772402.html ）

鸡病解剖实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解鸡的内部解剖结构，熟悉鸡的器官系统及其功能。

2. 通过病理解剖，观察鸡内脏器官的病理变化，了解常见鸡病的病理特征。

3. 提高实验操作技能，培养科学思维和观察能力。

二、实验材料与工具1. 实验材料：一只已经处死的病鸡（疑似患有新城疫）。

2. 实验工具：解剖剪、解剖刀、镊子、解剖盘、解剖台、放大镜、显微镜等。

三、实验步骤1. 准备工作- 将病鸡解剖台擦拭干净，铺上解剖布。

- 将病鸡平放在解剖台上，用解剖剪沿颈部切开皮肤，暴露气管。

- 用解剖刀沿着气管剪开皮肤和肌肉，将气管与周围的器官分离。

2. 解剖气管- 观察气管内部是否有炎症、肿胀、出血等现象。

- 观察气管壁的厚度、颜色、弹性等。

3. 解剖心脏- 沿着心脏的侧面剪开皮肤和肌肉，暴露心脏。

- 观察心脏的大小、形状、颜色等。

- 检查心脏瓣膜是否正常，心腔内是否有血液凝固或血块。

4. 解剖肺脏- 沿着肺脏的侧面剪开皮肤和肌肉，暴露肺脏。

- 观察肺脏的大小、形状、颜色等。

- 检查肺脏是否有炎症、出血、水肿等现象。

5. 解剖肝脏- 沿着肝脏的侧面剪开皮肤和肌肉，暴露肝脏。

- 观察肝脏的大小、形状、颜色等。

- 检查肝脏是否有炎症、出血、肿瘤等现象。

6. 解剖脾脏- 沿着脾脏的侧面剪开皮肤和肌肉，暴露脾脏。

- 观察脾脏的大小、形状、颜色等。

- 检查脾脏是否有炎症、出血、肿瘤等现象。

7. 解剖肾脏- 沿着肾脏的侧面剪开皮肤和肌肉，暴露肾脏。

- 观察肾脏的大小、形状、颜色等。

- 检查肾脏是否有炎症、出血、结石等现象。

8. 解剖肠道- 沿着肠道的侧面剪开皮肤和肌肉，暴露肠道。

- 观察肠道的大小、形状、颜色等。

- 检查肠道是否有炎症、出血、粘连等现象。

9. 总结观察结果- 对各个器官的病理变化进行记录和分析，找出可能的病因。

- 对病鸡的死亡原因进行初步判断。

四、实验结果与分析1. 气管：气管内有炎症，气管壁增厚，颜色暗红。

2. 心脏：心脏大小正常，颜色暗红，心腔内有少量血液凝固。

鸡新城疫 ppt课件

• 病原：鸡新城疫病毒，为付粘病毒科、付粘病毒属病毒。
• 病毒能在鸡胚内及多种动物细胞组织上生长；存在于病鸡的所有组织、器官、体液、分泌物和排泄物中，以脑、脾、肺含毒量最高，而以骨髓含毒时间最长。
按毒力大小不同，可分为：
①嗜内脏速发性型（又称亚洲型）
②大嗜多神数经高速度发强型毒力株常是嗜内脏 ③速中发发型型，称强毒力嗜内脏型，引 ④起缓各发种型年龄鸡急性死亡，消化道本出病血毒性对病外变界是抵病抗力理不特强征，。煮沸、直射
德育目标：让学生养成团结合作，实事求是的科学态度。
教学重点：鸡新城疫的症状及病理变化。教学难点：鸡新城疫的正确诊断。
学习内容：
鸡新城疫又名亚洲鸡瘟（俗称鸡瘟），是由鸡新城疫病毒引起鸡的高度接触性传染病，对养鸡业危害极大。
本病的特征：呼吸困难、严重下痢、粘膜和浆膜出血，病程稍长出现神经症状。
②急性型：体温升高达44℃，嗜眠，昏睡，鸡冠、肉髯发绀，呼吸紊乱，咳嗽、罗音、喘气、呼吸困难，嗉囊、口积液，甩头发出咯咯声，常从口腔内流出灰黄色恶臭粘液，常见严重下痢、淡绿色甚至血染稀便。少数幸存者后期见神经症状，阵发性痉挛，角弓反张，肌肉震颤，翅腿麻痹，死亡率达90~100%。
③亚急性或慢性型：多由嗜神经速发型新城疫病毒引起。病初症状与急性相似，发病1—2周后，出现神经症状较为明显，腿翅麻痹，跛行或卧地。部分肌肉抽搐，动作失调，头颈扭转，有的作转圈运动，出现半瘫痪或完全瘫痪。病程可长达4周或以上。死亡率较低。
④非典型新城疫：主要发生于免疫鸡群，其特征是发病缓慢，症状、病变不典型、不明显，死亡率低，但发病率可能很高。产蛋鸡产蛋下降，无色壳蛋、畸型蛋。
• 病理变化：主要在消化道和呼吸道

禽疫病的检疫-鸡新城疫

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禽疫病的检疫-鸡新城疫
3. 检疫后的处理
1．确诊为新城疫后应及时报告当地政府，采取隔离、封锁，禁止转场或出售。
2．假定健康鸡全群隔离饲养，并进行紧急免疫接种，如在接种观察期间出现可疑鸡只，亦应进行无害化处理。
3．发生过新城疫的鸡场在半年之内，其鸡只不准出售、外运。
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谢谢观看！ Thank you for watching 11
禽疫病的检疫-鸡新城然宿主鸡和火鸡等，各种年龄均可发病、以雏鸡和中鸡较多。
（2）临床症状
①最急性型:头夜不异常，凌晨已死亡，不见特征症状。
②急性型：体温升高达44℃，嗜眠，昏睡，鸡冠、肉髯发绀，呼吸紊乱，咳
嗽、罗音、喘气、呼吸困难，嗉囊、口积液，常见严重下痢等，死亡率达
脏等。
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禽疫病的检疫-鸡新城疫
特征型病变：腺胃乳头出血肠道淋巴结出血、坏死
出血性肠炎
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慢性型：十二指肠岛屿状坏死
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禽疫病的检疫-鸡新城疫
2.实验室检疫
病毒分离与鉴定；HA、HI试验。血清学诊断：全血平板凝集试验、血清中和试验（SN）、空斑中和试验（PN）、琼脂扩散试验（AGPT）、荧光抗体技术、酶联免疫吸附试验（ELISA）、核酸探针、聚合酶链式反应（PCR）等
《动物检验检疫》
禽疫病的检疫-鸡新城疫
目录 Contents
1 临诊检疫 2 实验室检疫 3 检疫后的处理
禽疫病的检疫-鸡新城疫
鸡新城疫(ND)是由付粘病毒科、付粘病毒属的鸡新城疫病毒所引起的恶性传染病疾病。
临床特征：主要危害呼吸系统和消化系统，引起呼吸困难、严重下痢、粘膜和浆膜出血，病程
稍长出现神经症状。 34

鸡新城疫(课堂PPT)

（2）呼吸系统症状不同程度的呼吸困难，即患鸡张口伸颈，呼吸困难，有喘鸣声，咳嗽，口含粘液，有摇头和吞咽动作。
（3）生殖系统症状产蛋鸡产蛋率下降，产软壳蛋、沙皮蛋，颜色变淡。
病程10～20d。
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病理变化
主要病理变化是全身粘膜和浆膜出血，淋巴系统肿胀、出血和坏死，尤其以消化道和呼吸道病变明显。
生防疫制度，地面、用具应定期消毒，防止一切带毒动物（特别是鸟类）和污染物品进入鸡群，进出的人员和车辆应该消毒，饲料来源要安全，不从疫区引进种蛋和鸡苗等。
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2.做好预防接种，增强特异免疫力（1）疫苗
1）灭活疫苗常用油苗，不散病毒。 2）活疫苗包括：弱毒疫苗包括Ⅱ（B1株）、Ⅲ（F 株）、Ⅳ（Lasota株）系苗，一般没有致病力、偶尔有轻微呼吸道或其他反应，可用于雏鸡，但Ⅳ系苗毒力较强，一般不用于4周龄以下的鸡。中等毒力苗 Ⅰ系苗，一般肌肉注射，作加强免疫，但不用于8周龄以下鸡。
病程2~5d。
口腔流出酸臭黏液
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拉稀黄绿便
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神经症状
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扭颈，呈观星状
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扭颈，转圈
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产软皮蛋，蛋壳变白
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3.亚急性或慢性型（或非典型新城疫）多发生在流行后期，主要表现在三个方面：
（1）神经系统症状病初症状似急性，后渐减轻，且出现神经症状，如翅膀下垂，腿麻痹，破行或站立不稳，向后倒退，头颈向后或向一侧扭转，常伏地旋转，反复发作。不发作时貌似健康，受惊扰或抢食时又突然发作，头颈屈仰，全身抽搐旋转，数分钟后又恢复正常，最后瘫痪死亡。极少数耐过鸡留下神经症状的后遗症。
诊断
1.现场诊断根据流行病学、临床症状、病理变化等综合诊断。

鸡新城疫的流行病学临床症状检测方法与防控措施

鸡新城疫的流行病学临床症状检测方法与防控措施鸡新城疫（Newcastle disease）是由新城疫病毒感染引起的一种高度传染性的禽流行病。

它在家禽中广泛传播，并且能够引起严重的经济损失。

以下是关于鸡新城疫的流行病学、临床症状、检测方法和防控措施的详细介绍。

流行病学：鸡新城疫主要通过直接接触感染的家禽传播。

它也可以通过带有病毒的饲料、水源、空气和其他介质传播。

人类很少感染鸡新城疫病毒，但已报道了少数病例。

鸡新城疫在全球范围内广泛存在，尤其在养鸡密集的地区易发生疫情。

临床症状：鸡新城疫的临床症状因感染程度和鸡的抗病能力而有所不同。

感染程度轻的鸡可能没有明显的症状，而感染程度重的鸡则可能表现出以下症状：急性发病、呼吸困难、咳嗽、喘息、流清鼻涕、眼睛发红、咽喉通红、食欲减退、腹泻、神经症状（如瘫痪、抽搐）等。

在重症病例中，死亡率高达90%。

检测方法：鸡新城疫的检测方法主要包括病毒分离、血清学检测和分子生物学检测。

1. 病毒分离：将可能携带病毒的样品（如血液、组织）接种到鸡胚或细胞培养物中，观察病变和病毒复制情况，以确认病毒的存在。

2. 血清学检测：通过血清学试验，如血凝试验和补体结合试验，检测鸡血清中抗体的存在与水平，判断是否感染鸡新城疫病毒。

3. 分子生物学检测：主要使用聚合酶链式反应（PCR）技术，检测鸡体内病毒的核酸，以快速准确地诊断新城疫。

防控措施：鸡新城疫的防控措施非常重要，以减少病毒的传播和流行。

1. 预防接种：采取规定的疫苗接种措施，确保鸡群的免疫力。

在疫苗接种前后需要严格的隔离和检测措施。

2. 管理措施：优化饲养环境，保持饲料和水源的卫生，并采取必要的卫生措施，如定期清洗和消毒鸡舍和设备。

3. 传染控制：及时发现和隔离感染鸡只，避免病毒通过直接接触或粪便等途径传播。

做好病毒带菌禽的无害化处理。

4. 动态监测：定期监测鸡群的健康状况和病原体情况，及时发现疑似病例并采取控制措施。

总结：鸡新城疫是一种高度传染性的禽流行病，对养禽业造成了严重的经济损失。

鸡新城疫ppt课件

32嗉囔内充满酸臭黏液倒提病鸡可从口腔中流出33呼吸困难张口呼吸咳嗽发出呼噜声35有时可见神经麻痹瘫痪37未受刺激时较为正常一旦受到惊吓便出现头颈扭曲38平衡失调倒地挣扎41产蛋鸡发病时产蛋量大度下降软壳蛋42腺胃乳头出血是本病的特征性病变44肠道淋巴集结出血坏死45盲肠扁桃体出血溃疡及坏死荧光定量pcr鉴定ndv强弱毒株8株ndv强毒检测结果nd临床病例的快速诊断检测结果图
鸡新城疫Ⅱ系活疫苗
毒力弱,通常只用于雏鸡首免,安全性好, 但产生免疫力较慢较弱。用法为滴眼/滴鼻, 不耐饮水。
鸡新城疫活疫苗 (Lasota株)
是新城疫Ⅳ系活疫苗，为国内外广泛应用的优良低毒力苗,其毒力与免疫性能高于 Ⅱ系苗,安全性良好。7日龄以上酌健康雏鸡、青年鸡、产蛋鸡均可使用。用法可滴眼、滴鼻、饮水或肌注,雏鸡首免应滴眼/滴鼻。
是用热带新城疫病毒自然弱毒株克隆的一种低毒力苗,可用于各日龄鸡。安全性好,较耐热,耐饮水:用法可滴眼、滴鼻、饮水或肌注,角于雏鸡首免应滴眼/滴鼻。
鸡新城疫疫苗VH株
是以色列用新城疫病毒自然弱毒株制成的一种低毒力苗,毒力温和而稳定,主要遘于雏鸡首免。通常应用的是该苗与传支、肾传支联苗,即VH+H120+28/86,用法应滴眼/ 滴鼻,砉稀释为每只鸡1滴时应滴眼。
鸡新城疫
鸡新城疫爆发的控制本病无特效疗法，鸡群一旦发病，应立即用La系、克隆30或V4点眼或饮水，两月龄以上鸡群也可用Ⅰ系紧急接种。同时配合使用抗菌素和多种维生素，以预防细菌继发染，促进机体恢复。
鸡新城疫
我国鸡新城疫难以控制的原因
1、鸡场生物安全措施不力鸡群过分密集、半开放式饲养、不同年龄鸡群同场饲养等。 2、母源抗体的影响母源抗体可抑制相应的弱毒株在幼雏体内复制，从而影响弱毒疫苗的免疫。

鸡新城疫的实验室诊断及鉴别

鸡新城疫的实验室诊断及鉴别鸡新城疫又被称为亚洲鸡瘟，其病原为新城疫病毒，该病传染性很强，具有很高的发病率以及死亡率。

鸡只患病后，常常出现无法正常呼吸、严重下痢以及神经症状，对其进行剖检，可以看到病鸡消化道内存在呈弥漫性的溃疡或者点状出血。

当前，主要结合临床症状以及病理变化对该病进行初步诊断，要想对该病进行确诊，还需依靠实验室诊断工作。

1 实验室诊断1.1病毒分离病鸡表现出相关临床症状以后，其绝大多数器官以及分泌物中已经存在大量的病毒。

病鸡脑、肺、脾以及呼吸道分泌物均可作为病毒分离的材料。

如果死鸡已经发生了腐败，应当从骨髓分离病毒。

在实际诊断过程中，最好采用接种孵化9-10天的鸡胚来分离病毒。

在无菌条件下提取病料，采用生理盐水将病料稀释10倍或者20倍制为悬浮液，采用离心机离心后取上清液，加入300-500IU/ml的青霉素或者100-300μg/ml的链霉素，接着在0-4℃的环境中放置4h或者在37℃的环境中放置1h。

提取0.1ml上述清液并将其接种于鸡胚尿囊腔中。

如果病毒为强毒株，仅仅2-3天即可将鸡胚杀死；如果病毒为弱毒株，通常需要4-6天来杀死鸡胚。

每天需要对鸡胚进行检查，在此过程中一旦发现死亡，需要立即收集尿囊液以开展细菌检查、血凝试验以及血凝抑制试验。

为了加快诊断的速度，也可以在鸡胚死亡之前，采用注射器将尿液吸出以开展检查工作，接着将鸡胚放入温箱进行孵化，通常接种36h后即可检测出血凝素。

1.2 血凝抑制试验如果抗鸡新城疫血清能够对可疑病毒对红细胞所产生的凝集作用进行有效抑制，即可将该病毒判定为鸡新城疫病毒[1]。

另外，可以通过鸡新城疫病毒判断病愈鸡血清内是否存在能够对红细胞凝集进行抑制的抗体，从而诊断出病鸡是否感染了新城疫。

如果可疑病鸡其血清能够对新城疫病毒对血红细胞的凝集作用进行有效抑制，即可确定该鸡曾经患有新城疫。

通常情况下，对于急性病鸡，在其死亡之前血液中往往不存在抗体，如果病程能够达到5-6天，病鸡血液中级存在血凝抑制抗体；如果病程超过了10天，其抗体效价甚至可以达到1：1280。

禽病学讲义-第二章家禽的病毒性传染病(2-鸡新城疫)

禽病学（Avian Medicine）讲义第二章家禽的病毒性传染病第二节鸡新城疫（Newcastle Disease, ND）一、概述：鸡新城疫又称亚洲鸡瘟，是由禽副粘病毒科的新城疫病毒（NDV）引起的一种主要侵害鸡、火鸡、野禽及观赏鸟类的高度接触传染性，致死性疾病。

家禽发病后的主要特征是呼吸困难（咳嗽），下痢，伴有神经症状（扭头、转圈），成鸡严重产蛋下降，黏膜和浆膜出血，感染率和致死率高。

（注：AI也叫欧洲鸡瘟）二、病原学（1）NDV属于副粘病毒科，禽腮腺炎病毒属／副粘病毒属，核算为单股负链RNA。

成熟的病毒粒子呈球形，直径为120-300nm。

病毒表面有刺激宿主产生血凝抑制和病毒中和抗体的抗原成分（主要为HN蛋白和F蛋白）。

（2）血清型：1个（ILTV也是只有1个血清型）（3）NDV血凝素可以凝集鸡和人等多种动物的红细胞（注：每一个红细胞表面可以结合许多病毒粒子，这些病毒粒子又可以集合旁边的红细胞，最后形成一个大网，即红细胞凝集试验；没有NDV红细胞在生理盐水中会沉淀，变成一个红点，倾斜V形板会移动，即红细胞沉淀试验；加抗体后，病毒和抗体先作用，再和红细胞加在一起后不能凝集，即血凝抑制试验）。

溶血素可溶解鸡和人等的红细胞。

在感染发生时，病毒吸附（结合较紧密，只有神经氨酸酶才能切割开）和穿入（病毒进入到宿主细胞内，才能生长繁殖，使宿主发病，最后造成死亡）时两个关键阶段。

鸡是NDV最适的试验动物和自然宿主。

（4）NDV在室温条件下可存活一周左右，在56˚C存活30～90min（即高温容易灭活），4˚C可存活一年，－20˚C可存活十年以上，（故新城疫往往在冬春季节发生，而炎热的夏天疾病相对较少）一般消毒药均对NDV有杀灭作用。

（5）病原学特征：病毒存在于病鸡的所有组织器官、体液、分泌物和排泄物中，以脑、脾、肺含量最高（故可引起神经症状和呼吸道症状），以骨髓保毒时间最长。

NDV可分为三类：速发型（强毒株）、中发型（中等毒力毒株）和缓发型（弱毒株），其中速发型又有嗜神经型和嗜肠道型之分。

鸡新城疫的检疫及处理

新城疫的临诊检疫要点及处理
新城疫的临诊检疫要点
1、主要侵害鸡。不同品种、年龄、性别的鸡都易感，但幼龄鸡更易感。秋、冬季多发。感染率、病死率都很高。呈暴发或地方流行性。 2、在少数突然发病，迅速死亡之后，出现多数体温升高，缩颈闭眼，冠暗紫，离群独处。口鼻流出多量黏液，甩头、吞咽，呼吸困难，病鸡群中“咯咯”喘鸣此起彼伏。便稀黄绿，混有血丝。肢体麻痹，昏迷死亡。病程2-5天。5天以上不死者，神经症状明显，歪头斜颈，旋转运动，后退倒地，共济失调，受刺激时发作加剧。温和型成鸡产蛋率急剧下降，间有拉稀，病程较长。 3、特征性病变全身浆膜、黏膜出血，尤其消化道、呼吸道最明显。腺胃乳头和肌胃角质层下出血，盲肠扁桃体肿大、出血、坏死，肠黏膜出血、纤维素性坏死，形成伪膜及溃疡。
观察
弃去50
振荡1min，37℃静置20min，每5 min观察一次，观察1h
新城疫-HA试验结果判定
“+”表示红细胞完全凝集后沉于孔底，呈颗粒状பைடு நூலகம்边缘不整齐或呈锯齿状，液体中无悬浮的红细胞。
“-”表示红细胞未凝集，反应孔底部的红细胞沉淀成小圆点，位于小孔最底端，边缘水平。
“±”表示可疑。红细胞下沉情况介于“+“与”-”之间。新城疫病毒液能凝集鸡的红细胞，但随着病毒液被稀释，其凝集红细胞的作用逐渐变弱。当稀释到一定倍数时，就不能使红细胞出现明显的凝集，从而出现可疑或阴性结果。能使红细胞发生完全凝集的病毒的最大稀释倍数为该病毒的血凝滴度或称凝集价。
12 盐水对照
50 / /
观察
振荡1min，37℃静置20min
弃去50
0.5%红细胞 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50
50

鸡新城疫的诊断(整理).ppt

50μl放入第二孔中，然后依次倍比稀释至第10孔，并将第10 孔的液体混匀后取50μl弃去。第11孔为病毒对照，第12孔为盐水对照。 ③用微量移液器吸取稀释好的4个血凝单位的病毒抗原，向1～11孔中分别加50μl。然后，振荡1min，将反应板置室温下作用20min，或在 37℃恒温培养箱中作用5～10min。 ④取出血凝板，用微量移液器向每一孔中各加入1％红细胞悬液50μl，再将反应板置于微型振荡器上振荡15～30s，混和均匀。 ⑤将反应板置37℃ 温箱中作用15～30min 后取出，观察并记录结果。
接种后以熔化的石蜡将卵壳上的接种孔封闭，继续置温箱内。
每日上下午各照蛋一次，连续观察5d，接种24h内死亡的鸡胚，废弃不用，于24h后死亡的鸡胚，立即取出置4℃冰箱冷4h以上（气室向上）。
然后用无菌操作吸取尿囊液，并做无菌检查，尿囊液浑浊应废弃。留下无菌的尿囊液置低温冰箱保存，供作进一步鉴定。
最新.
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方法步骤
（一）ND的临床诊断（二）ND的实验室诊断
最新.
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（一）ND的临床诊断
1．按家禽尸体剖检程序，首先检查鸡的体表组织，然后检查皮下组织，最后打开体腔，暴露整个胸腔和腹腔器官，检查内部组织器官。鸡新城疫主要检查消化道病变。
2．将剖检所见填写于病理剖检记录表内。 3．根据剖检记录，归纳分析进行初步诊断。
最新.
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⑤结果判定及记录
“＋”表示红细胞完全凝集。红细胞凝集后完全沉于反应孔底层，呈颗粒状，边缘不整或锯齿状，而上层液体中无悬浮的红细胞。
“－”表示红细胞未凝集。反应孔底部的红细胞没有凝集成一层，而是全部沉淀成小圆点，位于小孔最底端，边缘水平。
“±”表示部分凝集。红细胞下沉情况介于“＋”与“－”之间。

实验四鸡新城疫的实验室诊断及免疫效果的评价

取鸡免疫血清或者取高免卵黄抗体。
【病毒血凝抑制试验的操作方法（单位：L）】
弃50
以100％抑制凝集（完全不凝集）的被检血清最大稀释度为该血清的血凝抑制效价，即HI效价。
【结果判定】
• 以100％抑制凝集（完全不凝集）的被检血清最大稀释度为该血清的血凝抑制效价，即HI效价。凡被已知新城疫阳性血清抑制血凝者，该病毒为新城疫病毒。
暗而明，暮则自明而暗，或暗或明，变化不一，这是山间早晚的景色。野花开放，有一股清幽的香味，好的树木枝叶繁茂，形成浓郁的绿荫。天高气爽，霜色洁白，泉水浅了，石底露出水面，这是山中四季
的景色。意译法：太阳升起，山林里雾气开始消散，烟云聚拢，山谷又开始显得昏暗，清晨自暗而明，薄暮又自明而暗，如此暗明变化的，就是山中的朝暮。春天野花绽开并散发出阵阵幽香，夏日佳树繁茂
琴一张，有棋一局，而常置酒一壶。”客曰：“是为五一尔，奈何？”居士曰：“以吾一翁，老于此五物之间，岂不为六一乎？”写作背景：宋仁宗庆历五年(1045年)，参知政事范仲淹等人遭谗离职，欧阳
修上书替他们分辩，被贬到滁州做了两年知州。到任以后，他内心抑郁，但还能发挥“宽简而不扰”的作风，取得了某些政绩。《醉翁亭记》就是在这个时期写就的。目标导学二：朗读文章，通文顺字
鸡新城疫的实验室诊断及免疫效果的评价
目的
1、掌握鸡新城疫的临诊要点。 2、了解和掌握鸡新城疫的实验室诊断和免疫监测技
术。
内容：
1、鸡新城疫的临诊要点。 2、鸡新城疫的实验室诊断。 3、鸡新城疫的免疫效果评价。
血凝试验（HA）和血凝抑制试验 (HI)
HA和HI的原理
⒈HA试验：许多病毒表面有血凝素，能与各种动物的红细胞表面受体结合，而出现红细胞凝集现象，简称为病毒的血凝现象。

鸡新城疫的现场检疫和实验室检验

鸡新城疫又称为“伪鸡瘟”“亚洲鸡瘟”，其病原体为副黏病毒，其主要临诊特征为神经紊乱、呼吸困难、腹泻、黏膜或浆膜出血。

现场检疫包括流行病学调查、活体检疫、肉尸检疫。

鸡新城疫检疫的常见检验方法有病毒分离鉴定、血凝抑制试验。

前者用于新城疫的诊断；后者用于新城疫的免疫抗体测定和免疫监测。

1现场检疫（1）流行病学。

鸡对本病易感性最高，各种品种、年龄的鸡均有易感性，幼雏和中雏的易感性比成年鸡更高。

近年来国内已有鹌鹑、鸽及观赏鸟发病的报道。

本病的主要传染源是病鸡以及流行间歇期的带毒鸟类，经呼吸道和消化道向外大量排出病毒而传播。

本病一年四季均可发生，但以冬春两季较多。

免疫鸡群也可能发生新城疫，出现非典型症状，但雏鸡和成年鸡的发病率和病死率不高。

（2）活体检疫。

①最急性型：发病突然，无显著症状而快速死亡。

②急性型和慢性型：病鸡表现为明显的咳嗽，流涕，呼吸困难，张口呼吸，并发出“咯咯”的叫声。

口中有黏液，常见摇头和吞咽动作，企图将黏液甩出。

嗉囊有液态黏稠物，倒提即从口内流出。

粪便常呈黄绿或黄白色，偶见带血的粪便。

病程稍长的病鸡出现脚、翅麻痹、歪头扭颈、站立不稳等神经症状。

③非典型新城疫：主要发生于免疫鸡群，由于免疫水平偏低或免疫力不整齐，幼鸡和育成鸡出现轻微的呼吸道症状。

成年鸡产蛋量下降，持续性的零星死亡。

（3）肉尸检疫。

主要病变是淋巴系统肿胀、出血或坏死，全身黏膜和/或浆膜有出血点、出血斑。

典型病变：①腺胃黏膜乳头及其周围出血、溃疡或坏死，肌胃角质层下也常见有出血点或出血带；②盲肠、扁桃体肿大、出血或坏死。

肠黏膜有大小不等的出血点以及纤维素性渗出物。

病程较长者有的形成假膜，假膜脱落后即成“枣核状”溃疡。

气管黏膜增生，并有渗出物。

若鸡群已进行了免疫处理，则发生新城疫时仅见黏膜呈卡他性炎症，直肠黏膜和盲肠扁桃体出血，病变相对较轻，其他病变不典型。

2实验室检验（1）病毒分离鉴定。

①样品采集及处理：取病死禽的脑或心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、气囊等组织，用生理盐水研成1 5乳液，加入青霉素（至终浓度为100IU·mL-1）、链霉素（使终浓度为1000μg·mL-1）。