高中生物第1章发酵工程第2节第2课时微生物的选择培养和计数教案选择性3

第2课时微生物的选择培养和计数

课标内容要求核心素养对接

1.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。

2．概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。1。生命观念：各类微生物都能适应其生活环境。

2．科学思维:根据微生物的代谢类型配制选择培养基。

3．科学探究:讨论土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的方法。

一、选择培养基

1．水生栖热菌的筛选：水生栖热菌能在70～80 ℃的高温条件下生存,而绝大多数微生物在此条件下不能生存。

2．选择培养基：在微生物学中，允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。

二、微生物的选择培养

1．分解尿素的细菌的分离

分解尿素的细菌能合成脲酶,该酶能催化尿素分解产生NH3，以此作为细菌生长的氮源.要将土壤稀释液中能分解尿素的细菌

分离出来,培养基的配方设计思路是培养基中除含有细菌必需的碳源、水、无机盐外，只含有尿素一种氮源.

2．稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌

土壤中细菌的数量庞大，要想得到能分解尿素的细菌的纯培养物，必须要对土样进行充分稀释，然后再将菌液涂布到制备好的选择培养基上,操作过程如下：

采集土样→将10 g土样加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀.取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中，依次等比稀释→取0。1 mL菌液,滴加到培养基表面→将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中→将涂布器放在火焰上灼烧,待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布→用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀→涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30~37 ℃的恒温箱中培养1～2 d。

三、微生物的数量测定

1．稀释涂布平板法

（1)原理:当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确,一般选择菌落数为30～300的平板进行计数。

（2)注意问题：统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

2．显微镜直接计数法

(1）方法：利用特定的细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下观察、计数。

（2）注意问题：统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和。

判断对错(正确的打“√”，错误的打“×”）

1．选择分解尿素的细菌的培养基为液体培养基.

提示:选择分解尿素的细菌的培养基为固体培养基，固体培养基具有分离、鉴定作用.

2．用平板划线法培养计数，应选择菌落数在10～100的平板。（×)

提示：微生物计数采用稀释涂布平板法，为保证结果准确，应选择菌落数在30～300的平板。

3．统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数目。

提示：由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目少.

4．统计菌落数目的理论依据是一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。(√）

5．分解尿素的细菌在分解尿素时,可以将尿素转化为氨，使得培养基的pH降低。(×）

提示：尿素分解菌将尿素转化为氨，使培养基的pH升高。

6．在用涂布器涂布平板时，为了操作方便可完全打开培养皿盖。(×）

提示：为了防止杂菌污染，不能完全打开皿盖.

选择培养基

1．目的：从众多的微生物中分离所需要的微生物.

2．三种筛选方法的特点及举例

方法特点举例

利用微生物的营养特点进行选择培养通过控制培养基的营养

成分，使某种微生物能生

长，其他微生物不能生长

利用只含有尿素一

种氮源的培养基，可

筛选出分解尿素的

细菌

利用某种化学物质进行的选在完全培养基中加入某

些化学物质，利用加入的

加入青霉素可以分

离出酵母菌和霉菌

择培养化学物质对微生物产生

的影响，抑制某些微生

物，同时选择所需的微生

物

利用培养条件

进行的选择培养改变微生物的培养条件

将培养基放在高温

环境中培养可以得

到耐高温的微生物

合作探究：(1）如何从大豆田土壤中分离出固氮微生物？

提示：从大豆田土壤取土样，利用缺乏氮源的培养基可分离出固氮微生物。

（2)要分离出分解纤维素的微生物,应在什么样的环境中取土样？应配制什么样的培养基?

提示：应从富含纤维素的培养基中取土样，如树林中多年落叶形成的腐殖土。应配制以纤维素为唯一碳源的培养基。

(3)根据选择培养基的原理，如何筛选出耐酸菌?

提示:可将培养基的pH调至酸性，再接种培养。

1．原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈.

为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关实验。下列有关实验的叙述，不正确的是() A．应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用

B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基

C．将土壤稀释液灭菌后接种到选择培养基上

D．在选择培养基上能形成分解圈的即为所需菌种

C[为了筛选、获取能利用多环芳烃为碳源的菌种，首先是取材，应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用,A项正确；其次配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基,B项正确；然后进行接种，在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培养基上，在适宜的条件下进行培养，若将土壤稀释液进行灭菌，就不能筛选出能高效降解原油的菌株,C项错误；在选择培养基上形成的菌落，若该菌落周围有分解圈，即为所需菌种，D项正确。]

2．从自然菌样中筛选较理想生产菌种的一般步骤：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。请回答下列问题：（1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化.培养嗜盐菌的菌样应从________(填“高盐”或“低盐")环境采集，培