器官移植和HLA配型ppt课件

血清学分型技术 细胞分型技术 分子生物学分型
20世纪60 年代 20世纪70 年代 20世纪80 年代
一、血清学分型技术
1.原理
应用一系列已知HLA特异性的分 型血清与待测的淋巴细胞反应，通过 补体依赖的细胞毒性实验，来检测 HLA抗原特异性。
典型技术：定型板法（微量细胞毒实验）
反应
1.染料拒染法
直接识别
受者T细胞
受者T细胞直接识别的靶结构
同种异型抗原的直接识别及其效应
（二）间接识别
受者T细胞识别受者APC加工处理的供 者的MHC分子
在急性排斥反应中、晚期以及慢性排 斥反应中起重要作用。
识别方式
间接识别
同种异型抗原的间接识别
二、 同种异型移植排斥反应的类型 及效应机制
（一）宿主抗移植物反应
1、ABO血型抗原配型 2、HLA抗原配型
①供者与受者HLA-A、B相配的位点越多存活率 越高；
②上述的基础上，HLA-DR、DQ尽可能的匹配； ③ HLA-DR类型对存活率影响较大。
（二）使用免疫抑制药物
1、多为抑制T细胞药物 环孢菌素A（CsA）， FK-506、Rapamycin
2、去氧精胍菌素等抗生素类；阻断T细胞的生 长周期 3、激素 4、可溶性CK受体、抗CK抗体和抗粘附分子抗体
HLA-Ⅱ类分子
公元4世纪罗马教堂
同种同基因移植
移植物抗原刺激受者的免疫系统/受者组织抗原刺激移
植物中的免疫细胞诱发的免疫应答称为移植排斥反应
自体移植
同种异基因移植
异种同移种植 异型移 植排斥反应
第1节 MHC基因和遗传特点（复习）
MHC基因的构成
MHC基因的特性
MHC基因的意义
一、MHC基因的构成
意义：器官移植选择供体顺序
自身﹥同卵双生﹥兄弟姐妹﹥父母﹥亲属﹥无关人群
（一）HLA为高度多态性基因 （二）单体型和连锁不平衡性
1.单体型遗传 2.连锁不平衡性
第2节 HLA与器官移植
决定移植“成败”的抗原
主要组织相容性抗原 在三类HLA分子中，Ⅰ、Ⅱ类分子是触
发移植排斥反应的首要抗原。
次要组织相容性抗原 ABO血型抗原系统 其他组织特异性抗原
（host versus graft reaction,HVGR） 依据反应发生的时间及病理强度分为： 1、超急性排斥反应（术后开始至几个小时） 2、急性排斥反应（术后几天至几周） 3、慢性排斥反应（术后数月至数年）
超急性排斥反应发生示意图
（二）移植物抗宿主反应
（ graft versus host reaction,GVHR ） 更为严重的一种排斥反应
临床免疫学检验
吉林医药学院检验学院
器官移植与HLA分型检测技术
主要组织相容性复合体 / HLA复合体 major histocompatibility complex, MHC
人类白细胞抗原 / MHC分子 / MHC抗原 human leukocyte antigen, HLA
HLA的结构Байду номын сангаас
HLA-Ⅰ类分子
（一）定位 第6号染色体短臂（6p21.31） 全长3600kb，共有224个基因座位，
128个表达产物。 （二）基因区
经典Ⅰ类基因：B、C、A位点 经典Ⅱ类基因 ：DP、DQ、DR位点
q
着丝点
P
人6号染色体
HLA复合体 3600kb长度
A
Ⅰ类基因区
C
B
224基因座位
DR
Ⅱ类基因区 DQ
DP
MHC-Ⅰ类分子 MHC-Ⅱ类分子
原因： （1）受者与供者HLA不相匹配； （2）移植物中成熟的T细胞多； （3）受者处于免疫功能极度低下的状态
常见于：骨髓移植（造血干细胞移植）、胸 腺、脾移植及新生儿接受大量输血。
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2019/6/19
三、同种异体移植排斥反应的防治
（一）寻求与受者MHC相配的供者组织或器官 是目前最为有效多见的方法。
基因型别 等位基因数 抗原特异性
Ⅱ类基因
DPB DPA DQB DQA DRB DRA
126 23 81 24 559 3
6
9
24
Ⅰ类基因
B
CA
851 276 506
62 10 28
（二）单体型和连锁不平衡性
1.单体型遗传
父母与子女完全相同的几率： 0 父母与子女一半相同的几率：100% 子女间完全相同的几率： 25% 子女间一半相同的几率： 50% 子女间完全不同的几率： 25%
βα βα ββα DP DQ DR
αα α BC A
二、MHC基因遗传特点
（一）HLA为高度多态性基因 MHC基因复合体是由多个位
置相邻的基因座位组成，可以编码相同 或相似的MHC抗原。
MHC为共显性表达
Ⅱ类基因 βα βα βα
DP DQ DR
Ⅰ类基因 αα α BC A
基因型别 等位基因数 抗原特异性
Ⅱ类基因
DPB DPA DQB DQA DRB DRA
126 23 81 24 559 3
6
9
24
Ⅰ类基因
B
CA
851 276 506
62 10 28
人群之中所有基因座位等位基因都相同的几率： 1262381245593851276506≈11019 人群之中MHC抗原相同的几率： 6924621028≈1109
阻断协同刺激信号诱导T细胞失能
（三）诱导对移植抗原的特异性耐受
免疫抑制剂的毒副作用（致死性感染和 肿瘤）
理想方法是诱导特异性耐受。新方案：
①诱导凋亡；
②诱导T细胞无应答（anergy）包括输入 可溶性CTLA-4及CD40L-CD40、CD2-CD58等 信息传递阻断。
第3节 HLA分型检测技术
一、器官移植的类型
（1）自体移植（autograft） 皮肤，骨髓，软骨和骨
（2）同种同基因移植（syngraft） （3）同种异基因移植（allograft）
同种异型移植 （4）异种移植（xenograft）
一、同种异型排斥反应的识别机制 受者对T细胞对供者的MHC分子的直接与间
接识别。 （一）直接识别机制：
台盼蓝 伊红
2.流式细胞术
碘化丙啶 7-AAD
结果测定
染料拒染法的判定标准
死（着染）细胞（%） 0～10 11～20 21～50 51～80 >80
记分 1 2 4 6 8 0
结果判断 阴性
可疑阴性 弱阳性 阳性 强阳性
未试验或不能读数
2.血清学分型可检测的抗原 （SD 抗原）
HLA-Ⅰ类分子: B, C , A HLA-Ⅱ类分子: DR, DQ