肺炎克雷伯与痰液标本检查PPT精品课程课件讲义
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《痰标本检验》课件
《痰标本检验》ppt课 件
目 录
• 痰标本检验的基本知识 • 痰标本检验的方法 • 痰标本检验的临床应用 • 痰标本检验的注意事项 • 痰标本检验的发展趋势
01
痰标本检验的基本知识
痰标本的采集
痰标本采集前的准备
采集方法
确保患者了解采集过程，准备好必要 的用品，如纸巾、痰杯等。
采用自然咳痰法、诱导咳痰法或吸痰 法等，确保痰液收集充分、无唾液或 鼻咽分泌物污染。
免疫学检测法的缺点是需要特定的设备和试剂，操作相对复杂，且需要一定的时间才能得出 结果。
03
痰标本检验的临床应用
呼吸系统疾病的诊断
肺炎
通过痰培养可以确定引起肺炎的 病原体，为治疗提供依据。
肺结核
痰涂片和培养有助于诊断肺结核， 尤其对于不典型病例。
支气管扩张症
痰细菌学检查有助于诊断支气管扩 张症，并指导抗生素治疗。
直接涂片法是一种简单、快速的痰标本检验方法，通过将痰液直接涂在玻璃片上进 行显微镜检查，用于初步判断痰液中是否存在异常细胞、细菌等。
直接涂片法的优点是操作简便、快速，可以迅速得出结果，适用于初步筛查和诊断 。
直接涂片法的缺点是检查结果的准确度较低，容易受到操作人员的技术水平和经验 的影响。
染色法
染色法是一种通过染色技术将痰液中 的细胞或细菌染色，然后在显微镜下 观察的方法。常用的染色法有革兰染 色、抗酸染色等。
培养法的优点是能够准确地分离和鉴定病原菌，为临床治疗提供可靠的 依据。
培养法的缺点是需要较长时间才能得出结果，且操作相对复杂，需要专 业的实验室设备和技能。
免疫学检测法
免疫学检测法是一种通过抗原抗体反应检测痰液中病原体的方法。常用的免疫学检测法有酶 联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光技术等。
目 录
• 痰标本检验的基本知识 • 痰标本检验的方法 • 痰标本检验的临床应用 • 痰标本检验的注意事项 • 痰标本检验的发展趋势
01
痰标本检验的基本知识
痰标本的采集
痰标本采集前的准备
采集方法
确保患者了解采集过程，准备好必要 的用品，如纸巾、痰杯等。
采用自然咳痰法、诱导咳痰法或吸痰 法等，确保痰液收集充分、无唾液或 鼻咽分泌物污染。
免疫学检测法的缺点是需要特定的设备和试剂，操作相对复杂，且需要一定的时间才能得出 结果。
03
痰标本检验的临床应用
呼吸系统疾病的诊断
肺炎
通过痰培养可以确定引起肺炎的 病原体，为治疗提供依据。
肺结核
痰涂片和培养有助于诊断肺结核， 尤其对于不典型病例。
支气管扩张症
痰细菌学检查有助于诊断支气管扩 张症，并指导抗生素治疗。
直接涂片法是一种简单、快速的痰标本检验方法，通过将痰液直接涂在玻璃片上进 行显微镜检查，用于初步判断痰液中是否存在异常细胞、细菌等。
直接涂片法的优点是操作简便、快速，可以迅速得出结果，适用于初步筛查和诊断 。
直接涂片法的缺点是检查结果的准确度较低，容易受到操作人员的技术水平和经验 的影响。
染色法
染色法是一种通过染色技术将痰液中 的细胞或细菌染色，然后在显微镜下 观察的方法。常用的染色法有革兰染 色、抗酸染色等。
培养法的优点是能够准确地分离和鉴定病原菌，为临床治疗提供可靠的 依据。
培养法的缺点是需要较长时间才能得出结果，且操作相对复杂，需要专 业的实验室设备和技能。
免疫学检测法
免疫学检测法是一种通过抗原抗体反应检测痰液中病原体的方法。常用的免疫学检测法有酶 联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光技术等。
临床检验痰液检验PPT课件
（3）气管穿刺法和支气管镜抽取法 厌氧菌培养
质量保证2
已检测过的容器及标本―煮沸消毒30~40min
（四）痰液检查的质量保证
检测前：标本采集和处理
检测中：理学检查和显微镜检查
标本检测后处理
检测后：标本处理 不能煮沸的容器用5%苯酚消毒后再处理
容器为纸盒则直接烧毁
将脱落细胞保存在液体中并通过特殊 检测中（显微镜检查） 的设备将细胞均匀分散贴附在载玻 上制成涂片的技术 标本涂片：片 取有脓、有血等异常部分检查
观察区域：先低倍再高倍，至少观察10个以上高倍视野 提高阳性率：扩大检查视野，发现异常细胞时应进行染色
检验或采用液基细胞学技术
检验人员：强化责任意识，认真对待每一份标本，严格操
作
双重复核：对检查结果有疑问时请上级检验技师（医师）
验证，进行双重复核
审核报告：发报告前应仔细核对报告单与送检单是否一致，
诊断结果与临床资料等情况是否一致，复核无误后，才可 审核报告
质量控制3
请大家养 成良好的 生活习惯 ，为了他 人，也为 了您~~
谢谢， 再见
临床检验痰液检 验
正常情况下，支气管粘膜的腺体和杯状细胞分泌
少量粘液，使呼吸道粘膜保持湿润。
病理情况下
当呼吸道粘膜受到理化因素、感染等刺激时， 黏膜充血、水肿，浆液渗出，粘液分泌增多。
痰液的成分很复杂，由95%水分和5%的灰 尘、蛋白质等组成。
粘液、浆液。
各种蛋白质、酶、免疫球蛋白、补体和电解质。
Wright
Papanicolaou染色或H-E染色
银染色
涂片染色检查
铁染色
主要用于细胞学和病原生物学检查。
检查痰液中的含铁血黄素 常用的染色方法有以下几类。 主要用于细菌检查
质量保证2
已检测过的容器及标本―煮沸消毒30~40min
（四）痰液检查的质量保证
检测前：标本采集和处理
检测中：理学检查和显微镜检查
标本检测后处理
检测后：标本处理 不能煮沸的容器用5%苯酚消毒后再处理
容器为纸盒则直接烧毁
将脱落细胞保存在液体中并通过特殊 检测中（显微镜检查） 的设备将细胞均匀分散贴附在载玻 上制成涂片的技术 标本涂片：片 取有脓、有血等异常部分检查
观察区域：先低倍再高倍，至少观察10个以上高倍视野 提高阳性率：扩大检查视野，发现异常细胞时应进行染色
检验或采用液基细胞学技术
检验人员：强化责任意识，认真对待每一份标本，严格操
作
双重复核：对检查结果有疑问时请上级检验技师（医师）
验证，进行双重复核
审核报告：发报告前应仔细核对报告单与送检单是否一致，
诊断结果与临床资料等情况是否一致，复核无误后，才可 审核报告
质量控制3
请大家养 成良好的 生活习惯 ，为了他 人，也为 了您~~
谢谢， 再见
临床检验痰液检 验
正常情况下，支气管粘膜的腺体和杯状细胞分泌
少量粘液，使呼吸道粘膜保持湿润。
病理情况下
当呼吸道粘膜受到理化因素、感染等刺激时， 黏膜充血、水肿，浆液渗出，粘液分泌增多。
痰液的成分很复杂，由95%水分和5%的灰 尘、蛋白质等组成。
粘液、浆液。
各种蛋白质、酶、免疫球蛋白、补体和电解质。
Wright
Papanicolaou染色或H-E染色
银染色
涂片染色检查
铁染色
主要用于细胞学和病原生物学检查。
检查痰液中的含铁血黄素 常用的染色方法有以下几类。 主要用于细菌检查
痰液(呼吸道)标本细菌学检验.ppt
采集指征
痰液标本是临床微生物学检验最常见的标本， 有下列体征之一时应进行痰培养： ? 1、咳嗽：咳嗽咳痰是下呼吸道感染最常见的
症状； ? 2、咯血：包括泡沫血痰、痰中带血等； ? 3、呼吸困难：呼吸急促或哮喘，常伴有胸痛； ? 4、发热伴白细胞增高尤其是中性粒细胞或
CRP明显增高； ? 5、胸部影像学检查提示有感染可能。
? 痰培养为多种病原菌少量生长（＜+++）；
上呼吸道正常菌群
? 口腔常见菌群： 白色念球菌、链球菌（甲型或乙型）、肺炎球 菌、表皮葡萄球菌、奈瑟氏球菌、乳酸杆菌、 类白喉杆菌等；
? 鼻咽部常见菌群： 链球菌（甲型或乙型）、绿脓杆菌、大肠杆菌、 葡萄球菌、肺炎球菌、流感杆菌等。
? 下呼吸道则在机体免疫功能的作用下自始至终 保持基本无菌状态。
PS：下呼吸道包括气管、支气管及肺泡。
痰培养结果
? 20世纪50年代以肺炎链球菌为主； ? 80年代后以革兰氏阴性杆菌为主：
如鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、 肺炎克雷伯杆菌、阴沟肠杆菌等。
药物敏感试验
? 药敏报告为敏感（S）： 表示用常规剂量治疗可获得临床疗效。
? 药敏报告是中介度（I）： 表示加大剂量或药物浓缩部位可有疗效。
有临床意义的结果
? 合格痰标本培养优势菌中度以上生长，即结果 ＞+++；
? 合格痰标本少量生长，但与涂片镜检结果一致， 如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等；
? 3天内多次培养出相同细菌； ? 如果痰培养阴性，但革兰氏涂片查见典型肺炎
链球菌、流感嗜血杆菌等，同样有意义。
无临床意义的结果
? 痰培养有上呼吸道正常菌群如草绿色链球菌、 表皮葡萄球菌、非致病奈瑟菌等；；
微生物肺炎克雷伯讲义护理课件
特性
具有高度耐药性，对多种抗生素 产生抗药性，导致治疗困难。
微生物肺炎克雷伯的感染途径
空气传播
医院感染
通过患者咳嗽、打喷嚏或说话时产生 的飞沫传播。
在医院环境中，患者之间容易发生交 叉感染。
接触传播
通过直接接触患者或接触被污染的物 品表面，再触摸口、鼻或眼而传播。
微生物肺炎克雷伯的流行病学
流行情况
05
微生物肺炎克雷伯的案例分 享
成功治疗案例
患者情况
一位65岁男性，因咳嗽、发热和 呼吸困难入院，诊断为微生物肺
炎克雷伯。
治疗过程
经过痰培养和药敏试验，选用敏 感抗生素治疗，同时给予对症治
疗和护理。
治疗效果
经过2周治疗，患者症状明显缓 解，复查胸片炎症基本吸收，顺
利出院。
护理经验分享
护理要点
密切观察病情变化，遵医嘱治疗，保持呼吸道通 畅，预防并发症。
教育公众勤洗手、戴口罩、避免接触患者等 个人卫生习惯。
环境卫生改善
加强环境卫生管理，改善居住和工作环境的 空气质量和卫生状况。
控制策略
及时发现与隔离
对疑似病例进行快速诊断和隔离，防 止疾病传播。
规范治疗
根据指南和规范，对确诊患者进行科 学、有效的治疗。
接触者追踪
对患者的密切接触者进行追踪和管理 ，预防疾病扩散。
监测与预警
建立监测系统，及时发现疫情，发布 预警信息，采取应对措施。
公共卫生管理
制定防控预案
加强国际合作
制定针对肺炎克雷伯病的防控预案，明确 各部门职责和协调机制。
与国际组织和其他国家加强合作，共同应 对全球性挑战。
资源保障
监督与评估
合理配置人力、财力和物力资源，确保防 控工作的有效开展。
具有高度耐药性，对多种抗生素 产生抗药性，导致治疗困难。
微生物肺炎克雷伯的感染途径
空气传播
医院感染
通过患者咳嗽、打喷嚏或说话时产生 的飞沫传播。
在医院环境中，患者之间容易发生交 叉感染。
接触传播
通过直接接触患者或接触被污染的物 品表面，再触摸口、鼻或眼而传播。
微生物肺炎克雷伯的流行病学
流行情况
05
微生物肺炎克雷伯的案例分 享
成功治疗案例
患者情况
一位65岁男性，因咳嗽、发热和 呼吸困难入院，诊断为微生物肺
炎克雷伯。
治疗过程
经过痰培养和药敏试验，选用敏 感抗生素治疗，同时给予对症治
疗和护理。
治疗效果
经过2周治疗，患者症状明显缓 解，复查胸片炎症基本吸收，顺
利出院。
护理经验分享
护理要点
密切观察病情变化，遵医嘱治疗，保持呼吸道通 畅，预防并发症。
教育公众勤洗手、戴口罩、避免接触患者等 个人卫生习惯。
环境卫生改善
加强环境卫生管理，改善居住和工作环境的 空气质量和卫生状况。
控制策略
及时发现与隔离
对疑似病例进行快速诊断和隔离，防 止疾病传播。
规范治疗
根据指南和规范，对确诊患者进行科 学、有效的治疗。
接触者追踪
对患者的密切接触者进行追踪和管理 ，预防疾病扩散。
监测与预警
建立监测系统，及时发现疫情，发布 预警信息，采取应对措施。
公共卫生管理
制定防控预案
加强国际合作
制定针对肺炎克雷伯病的防控预案，明确 各部门职责和协调机制。
与国际组织和其他国家加强合作，共同应 对全球性挑战。
资源保障
监督与评估
合理配置人力、财力和物力资源，确保防 控工作的有效开展。
微生物学检验(第3版)2012肺炎克雷伯与痰液标本检查
培养前处理
巧克力平板 普通培养 35℃、18~24h 中国蓝平板 普通培养 35℃、18~24h
初步报告
菌落形态和涂片染色 生化反应、血清学鉴定 报告
17
痰液标本检验操作流程
1、肉眼观察：下呼吸道标本为痰液，选 取脓血性的痰液用于细菌学检验。异常恶 臭的脓性痰，常见于肺脓疡患者，而且可 能与厌氧菌有关。痰液中有颗粒状、菌块 和干酪样物质可能与放线菌病和曲霉菌感 染有关。
1
葡萄糖 赖 氨 酸 鸟 氨 酸
2
氨 基 酸 对 照
琥珀 硫 化 氢 靛 基 质
3
乳 糖 卫 茅 醇 紫 色 黄 色 苯 丙 氨 酸 无 色 绿 色
4
尿 素 枸 橼 酸 盐 淡 绿 蓝 色
产酸 原来 颜色 阳性 颜色 产气 产气
产气 琥珀 琥珀 紫色
无 无色 色 红 色
紫 色 黄 色
无 色 红 色
紫色 黄色 黑色
18
痰液标本检验操作流程
2、涂片检查：挑选痰液中脓、血性部分涂 片，干燥固定后，进行革兰染色镜检。 如发现形态典型、有特殊结构，初步可以 确定所属菌属或种的细菌，可直接报告。 如查见革兰阳性葡萄状排列的球菌，可报 告“痰液涂片查见革兰阳性球菌，形似葡萄 状”；
19
痰液标本检验操作流程
如查见革兰阳性双球菌、矛头状、有明显 荚膜时，可报告“痰液涂片查见革兰阳性双 球菌，形似肺炎球菌”。
如不能直接确定菌属或种的细菌，可报告 “痰液涂片查见革兰×性×菌”。如果痰片 中均为鳞状上皮细胞，则应视为不合格标本。
20
痰液标本检验操作流程
3、分离培养： 1）痰液标本的前处理 A. 均质化法：加入等量的PH 7.6 的1% 胰 酶溶液，放置35℃、90 min使痰液均质化；
微生物肺炎克雷伯讲义ppt课件
“雪亮工程"是以区（县）、乡（镇） 、村（ 社区） 三级综 治中心 为指挥 平台、 以综治 信息化 为支撑 、以网 格化管 理为基 础、以 公共安 全视频 监控联 网应用 为重点 的“群 众性治 安防控 工程” 。
1.染色：玻片置于玻片搁架上，加适量（以盖满菌 膜为度）草酸铵结晶紫（或石炭酸复红染液）于菌 膜部位，染色1-2min。 2.水洗：斜置载玻片，在自来水龙头（或洗瓶）下 用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为 止。 3.干燥：自然干燥或用吸水纸吸去涂片上的水，用 吸水纸时切勿将菌体擦掉。 4.镜检：用高倍镜和油镜观察并绘细菌形态并绘图 于记录表中。
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•O/F（氧化、发酵）不同细菌对不同的糖分解能力 及代谢产物不同，这种能力因是否有氧气的存在而 异。细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参 与的，称为氧化型，氧化型细菌在无氧环境中不能 分解葡萄糖。细菌在分解葡萄糖的过程中，可以进 行无氧降解的，称为发酵型，发酵型细菌在有氧或 无氧的环境中都能分解葡萄糖。不分解葡萄糖的细 菌称为产碱型。利用此实验可以区分细菌的代谢类 型。主要用于肠杆菌科细菌与非发酵菌的鉴别，前 者均为发酵型，而后者通常为氧化型或产碱型。
•镜下形态：G-杆菌，卵圆形或球杆状细菌，长 成双排列，有荚膜，无鞭毛。（如有需要，可 进行荚膜染色，染色后菌体呈卵圆形或球杆状， 成双排列，菌体外绕以明显的荚膜长较菌体宽 2-3倍。）
“雪亮工程"是以区（县）、乡（镇） 、村（ 社区） 三级综 治中心 为指挥 平台、 以综治 信息化 为支撑 、以网 格化管 理为基 础、以 公共安 全视频 监控联 网应用 为重点 的“群 众性治 安防控 工程” 。
痰培养采集及药敏结果判读PPT课件
儿童痰液收集法
用弯压舌板向后压舌，将 拭子伸入咽部，小儿经压 舌刺激咳痰，可喷出肺部 或气管分泌物粘在拭子上
03
药敏试验概述
药敏试验的目的和意义
指导临床用药
通过药敏试验可以了解病原菌对 药物的敏感性，为临床医生选择 有效的抗菌药物提供依据，提高
治疗效果。
监测耐药菌株
药敏试验可以及时发现耐药菌株， 为医院感染控制提供重要信息，防 止耐药菌株的传播和流行。
实验室处理
实验室接收标本后应立即进行处 理，包括涂片镜检、分离培养等 步骤；同时要注意实验室生物安 全，防止交叉污染和感染。
01
采集前准备
向患者解释采集目的和方法，取 得患者配合；指导患者用清水漱 口，以去除口腔内杂菌。
02
03
标本运送
标本采集后应立即送往实验室， 避免长时间放置导致细菌死亡或 污染。
药敏试验的注意事项
标本采集
采集标本时应遵循无菌操作原则，避免污染 ；同时应根据不同感染部位选择合适的标本
类型。
试验药物选择
药敏试验结果判读应遵循标准化操作程序， 结合患者临床表现和感染部位等因素进行综
合判断。
结果判读
应选择具有代表性的抗菌药物进行药敏试验 ，包括常用药物和新型药物。
质量控制
药敏试验过程中应严格进行质量控制，包括 试剂、培养基、药敏纸片等的选择和保存， 以及操作过程的规范化和标准化。
监测病情变化
通过连续多次的痰培养，可以监测病原菌的 变化情况，及时调整治疗方案。
痰培养采集的适应症和禁忌症
适应症
各种呼吸道感染性疾病，如肺炎 、支气管炎、肺结核等。
禁忌症
无绝对禁忌症，但严重咯血、昏 迷等情况下应谨慎操作。
重症肺炎克雷伯菌肺ppt课件
6
入院辅助检查
• 急诊检查： • 心电图：窦性心动过速、电轴右偏。 • 血分析：白细胞：2.72×10^9/L；红细胞：5.17 ×10^12/L；
血红蛋白：161g/L；红细胞压积：45.3%；血小板： 37×10^9/L；中性粒细胞比率：73.64%。 • 生化：肌红蛋白：188.1ng/ml；肌钙蛋白I：<0.01ng/ml；谷草 转氨酶：322.6 U/L；乳酸脱氢酶：441U/L；磷酸肌酸激酶： 334.9U/L；α-羟丁酸脱氢酶：297U/L，肌酐 186umol/L。 • 电解质：钾：2.57mmol/L；钠：130.4mmol/L；氯： 88.1mmol/L。 • 胸部DR片：右侧感染性病变可能性大。 • 血气分析（未吸氧）：酸碱度：7.52；二氧化碳分压：21 mmHg；氧分压：58mmHg；氧饱和度：93%；乳酸： 5.1mmHg。
3
血象为什么老高？
3.1 3.1 3.1 3.1 3.1 3.1 3.2 3.2 3.2 3.2 3.2 3.2 3.2 3.3 4.2 4.3 4.6 4.8 4.9 4.1
45678902367891
6
wb 2.7 4.5 5.8 10. 16. 16. 23. 17. 22. 22. 24. 22. 20. 22. 18. 21. 16. 16. 14. 16. c 2 3 3 01 96 84 11 86 72 06 84 68 34 59 68 82 89 32 85 47
4.53→5.83
23
12→6
82.84
90.54→89.14
3.8
3.0
3
94
去甲肾上腺素0.5mg/ml
痰涂片：大量阴性 杆菌
3.16
入院辅助检查
• 急诊检查： • 心电图：窦性心动过速、电轴右偏。 • 血分析：白细胞：2.72×10^9/L；红细胞：5.17 ×10^12/L；
血红蛋白：161g/L；红细胞压积：45.3%；血小板： 37×10^9/L；中性粒细胞比率：73.64%。 • 生化：肌红蛋白：188.1ng/ml；肌钙蛋白I：<0.01ng/ml；谷草 转氨酶：322.6 U/L；乳酸脱氢酶：441U/L；磷酸肌酸激酶： 334.9U/L；α-羟丁酸脱氢酶：297U/L，肌酐 186umol/L。 • 电解质：钾：2.57mmol/L；钠：130.4mmol/L；氯： 88.1mmol/L。 • 胸部DR片：右侧感染性病变可能性大。 • 血气分析（未吸氧）：酸碱度：7.52；二氧化碳分压：21 mmHg；氧分压：58mmHg；氧饱和度：93%；乳酸： 5.1mmHg。
3
血象为什么老高？
3.1 3.1 3.1 3.1 3.1 3.1 3.2 3.2 3.2 3.2 3.2 3.2 3.2 3.3 4.2 4.3 4.6 4.8 4.9 4.1
45678902367891
6
wb 2.7 4.5 5.8 10. 16. 16. 23. 17. 22. 22. 24. 22. 20. 22. 18. 21. 16. 16. 14. 16. c 2 3 3 01 96 84 11 86 72 06 84 68 34 59 68 82 89 32 85 47
4.53→5.83
23
12→6
82.84
90.54→89.14
3.8
3.0
3
94
去甲肾上腺素0.5mg/ml
痰涂片：大量阴性 杆菌
3.16
痰培养标本质量控制ppt课件
（一）标本采集与处理
理学检验-----清晨第一口痰标本最适宜 细胞学检验-----上午9~10时留痰最好 浓集结核杆菌-----应采集12~24h内的痰液 做细菌培养------无菌采集，并先用无菌水漱口
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
1.易受上呼吸道正常菌群污染，定植菌的干扰；难以判断定植或是感染；
2.引起下呼吸道感染的病原菌种类繁多，而能够在常规培养基（血平板、 麦康凯和巧克力平板）上生长的仅为部分需氧或兼性厌氧菌；
3.造成痰培养的局限性 ：虽然送检率高，但合格率低 。
4.结果判读标准不好统一。
5.规范标准操作留取痰标本的重要性：分析前实验室质控，分析前因素导 致的误差率为50%左右。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
一：痰液检查
LOGO
痰培养的送检指征：
（1）发热伴白细胞升高：白细胞总数和中性粒细胞比例明显增高，甚至 核左移；或CRP明显增高。
（2）咳嗽、咯血：咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性，可伴有胸痛、气急、 甚至呼吸困难，肺部可闻及湿罗音。
室内检验质量控制又称内部质量控制，它是由我们检验人员对检验质量 进行自我控制的过程，即过程控制。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的，应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失，增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
二、质量控制
LOGO
痰培养取标本时质量控制难度大：
肺炎克雷伯菌ppt课件
11klebsiellapneumoniaeintraabdnominalinfections12therapysupporttreatment13antibiotics14亚胺培南西司他丁的组织浓度15延长tmic时间可获得更好的疗效84的舒巴坦和25的头孢哌酮经肾脏代谢其余大部分经胆汁排泄17哌拉西林他唑巴坦哌拉西林和他唑巴坦在肠粘膜胆囊肺女性生殖器官子宫卵巢和输卵管组织间液和胆汁等组织和体液中的分布广泛平均组织浓度一般为血浆浓度的50100在脑膜无炎症者的脑脊液中分布较少
·
5
Hypervirulent K. pneumoniae
• 1986年台湾首次报道 • 免疫力正常或者异常均可感染 • 糖尿病患者易感 • 肝脓肿 • 侵袭性疾病 • 倾向于亚洲人群
李冬东, 沈定霞. 高毒力肺炎克雷伯菌的研究现状与展望. 中华 传染病杂志. 2014, 32:638-640.
·
independent predictor
Shin SU, Park CM, Lee Y, et al. Clinical and radiological features of invasive Klebsiella pneumoniae liver abscess syndrome. Acta Radiol. 2013, 54(5):557-63.
头孢哌酮/舒巴坦
• 84%的舒巴坦和25%的头孢哌酮经肾脏代 谢，其余大部分经胆汁排泄
• 头孢哌酮在胆汁中浓度高 • 可较好的分布在各个组织和体液 • 抗菌谱较广 • 需警惕凝血功能异常
·
16
哌拉西林他唑巴坦
• 哌拉西林对肺炎克雷伯菌作用优于其他青霉素。 • 抗菌谱较广。 • 哌拉西林和他唑巴坦在肠粘膜、胆囊、肺、女性生殖器官
·
5
Hypervirulent K. pneumoniae
• 1986年台湾首次报道 • 免疫力正常或者异常均可感染 • 糖尿病患者易感 • 肝脓肿 • 侵袭性疾病 • 倾向于亚洲人群
李冬东, 沈定霞. 高毒力肺炎克雷伯菌的研究现状与展望. 中华 传染病杂志. 2014, 32:638-640.
·
independent predictor
Shin SU, Park CM, Lee Y, et al. Clinical and radiological features of invasive Klebsiella pneumoniae liver abscess syndrome. Acta Radiol. 2013, 54(5):557-63.
头孢哌酮/舒巴坦
• 84%的舒巴坦和25%的头孢哌酮经肾脏代 谢，其余大部分经胆汁排泄
• 头孢哌酮在胆汁中浓度高 • 可较好的分布在各个组织和体液 • 抗菌谱较广 • 需警惕凝血功能异常
·
16
哌拉西林他唑巴坦
• 哌拉西林对肺炎克雷伯菌作用优于其他青霉素。 • 抗菌谱较广。 • 哌拉西林和他唑巴坦在肠粘膜、胆囊、肺、女性生殖器官
肺炎克雷伯与痰液标本检查ppt课件
24
特殊菌的培养
4. 白喉棒状杆菌培养：将标本接种于血清斜面或 鸡蛋培养基，35℃ 孵育8-10h观察； 5.流感嗜血杆菌培养：将标本接种于血平板和巧克 力平板，并在平板中央接种一直线金黄色葡萄球菌 （或四角点种），35℃、5%-10% CO2环境孵育1824h。 6.脑膜炎奈瑟菌培养：将鼻烟拭子接种于已保温在 350C的卵黄双抗平板上，35℃、5%-10% CO2环境孵 育18—24h。
培养前处理
巧克力平板 普通培养 35℃、18~24h 中国蓝平板 普通培养 35℃、18~24h
初步报告
菌落形态和涂片染色 生化反应、血清学鉴定 报告
17
痰液标本检验操作流程
1、肉眼观察：下呼吸道标本为痰液，选 取脓血性的痰液用于细菌学检验。异常恶 臭的脓性痰，常见于肺脓疡患者，而且可 能与厌氧菌有关。痰液中有颗粒状、菌块 和干酪样物质可能与放线菌病和曲霉菌感 染有关。
脑膜炎奈瑟菌、流感 嗜血杆菌、百日咳鲍 特菌、肺炎克雷伯菌、 大肠埃希菌、铜绿假 单胞菌 化脓性链球菌 、金黄色 脑膜炎奈瑟菌、流感 葡萄球菌、肺炎链球菌、 嗜血杆菌、肺炎克雷 白喉棒状杆菌、结核分 伯菌、大肠埃希菌、 枝杆菌、厌氧菌、放线 铜绿假单胞菌、产气 菌、奴卡菌 肠杆菌、嗜肺军团菌
15
检验程序
如不能直接确定菌属或种的细菌，可报告 “痰液涂片查见革兰×性×菌”。如果痰片 中均为鳞状上皮细胞，则应视为不合格标本。
20
痰液标本检验操作流程
3、分离培养： 1）痰液标本的前处理 A. 均质化法：加入等量的PH 7.6 的1% 胰 酶溶液，放置35℃、90 min使痰液均质化；
21
痰液标本检验操作流程
克雷白杆菌肺炎讲课PPT课件
咳嗽：咳嗽是肺炎克雷白杆菌感染 的主要症状，通常为干咳，有时伴 有少量痰液。
发热：感染肺炎克雷白杆菌后，患 者可能会出现发热，通常为高热， 有时甚至达到40℃以上。
呼吸困难：肺炎克雷白杆菌感染会导 致肺部炎症，使呼吸变得困难，患者 可能会出现呼吸急促、胸闷等症状。
胸痛：肺炎克雷白杆菌感染可能导 致胸膜炎症，使患者出现胸痛症状， 通常为深呼吸或咳嗽时加重。
医院感染：医院内环境、医疗 器械等可被肺炎克雷白杆菌污
染，导致医院感染
社区感染：社区环境中，肺炎 克雷白杆菌可污染水源、食物
等，引起社区感染
老年人：由于免疫功能下降，容易感染肺炎克雷白杆菌。
儿童：免疫系统尚未完全发育，容易感染肺炎克雷白杆菌。
身体虚弱的人来说，如身体虚弱的人来说，如身体虚弱的人来说，如身体虚弱的人来说，如身体虚 弱的人来说，如慢性疾病患者、糖尿病患者、长期使用抗生素者等，也容易感染肺炎克雷白杆菌。
医院内的患者和医护人员：医院内环境存在大量细菌，且患者和医护人员接触频繁，容易发生交 叉感染。
传染源：患者和带 菌者
传播途径：呼吸道、 消化道和皮肤损伤
易感人群：老年人 、儿童、身体虚弱 者和免疫功能低下 者
流行季节：四季均 可发病，但冬季和 春季更容易流行
PART FIVE
早期治疗：在感染初期，尽早开始治疗，以降低病情恶化的风险。 足量用药：使用足够的药物剂量，以保证治疗效果。 联合用药：采用多种药物联合治疗，以提高疗效并降低耐药性的发生。
抗生素治疗：根据药敏试验结果，选择敏感的抗生素进行治疗，以控制病情。
提高免疫力：加强营养，适当锻炼，提高自身免疫力，预防感染。
社区宣传：加强 健康教育，提高 居民对肺炎克雷 白杆菌感染的认 知和预防意识。
微生物学检验(第3版)2012肺炎克雷伯与痰液标本检查
➢ 如不能直接确定菌属或种的细菌，可报告 “痰液涂片查见革兰×性×菌”。如果痰片 中均为鳞状上皮细胞，则应视为不合格标本。
痰液标本检验操作流程
3、分离培养： 1）痰液标本的前处理
❖ A. 均质化法：加入等量的PH 7.6 的1% 胰 酶溶液，放置35℃、90 min使痰液均质化；
❖
痰液标本检验操作流程
革兰阴性细菌
除脑膜炎和淋病奈瑟 菌外的其他奈瑟菌、 其他嗜血杆菌
脑膜炎奈瑟菌、流感 嗜血杆菌、百日咳鲍 特菌、肺炎克雷伯菌、 大肠埃希菌、铜绿假 单胞菌
脑膜炎奈瑟菌、流感 嗜血杆菌、肺炎克雷 伯菌、大肠埃希菌、 铜绿假单胞菌、产气 肠杆菌、嗜肺军团菌
直接涂片染色检 查 革兰染色 异染颗粒
初步报告
检验程序
❖ 2.嗜肺军团菌培养：取气管分泌物接种于活性炭酵 母琼脂(CYE)或费-高(F-G)平板，35℃、2.5%CO2培 养，每天用肉眼观察，直至第14天；
❖ 3.百日咳鲍特菌的培养：将标本直接接种在鲍-金 培养基上，置有盖的玻璃缸（缸内加少量的水，并 在水中加少许硫酸铜，防止细菌及霉菌生长）中， 35℃ 孵育3—5天。
器材和试剂
❖ 1、标本：痰液标本 ❖ 2、菌种：肺炎克雷伯菌 ❖ 3、培养基：血平板、中国蓝平板、克氏
双糖斜面培养基、半固体培养基、微量生 化管等。
器材和试剂
❖ 4、试剂：氧化酶纸片、3%过氧化氢、革 兰染色液、无菌生理盐水及生化管配套试剂。
❖ 5、其它 ：显微镜、培养箱、小试管、载 玻片、接种针、接种环、酒精灯、火柴、非 发酵菌生化编码表等。
特殊菌的培养
❖ 4. 白喉棒状杆菌培养：将标本接种于血清斜面或 鸡蛋培养基，35℃ 孵育8-10h观察；
❖ 5.流感嗜血杆菌培养：将标本接种于血平板和巧克 力平板，并在平板中央接种一直线金黄色葡萄球菌 （或四角点种），35℃、5%-10% CO2环境孵育1824h。
痰液标本检验操作流程
3、分离培养： 1）痰液标本的前处理
❖ A. 均质化法：加入等量的PH 7.6 的1% 胰 酶溶液，放置35℃、90 min使痰液均质化；
❖
痰液标本检验操作流程
革兰阴性细菌
除脑膜炎和淋病奈瑟 菌外的其他奈瑟菌、 其他嗜血杆菌
脑膜炎奈瑟菌、流感 嗜血杆菌、百日咳鲍 特菌、肺炎克雷伯菌、 大肠埃希菌、铜绿假 单胞菌
脑膜炎奈瑟菌、流感 嗜血杆菌、肺炎克雷 伯菌、大肠埃希菌、 铜绿假单胞菌、产气 肠杆菌、嗜肺军团菌
直接涂片染色检 查 革兰染色 异染颗粒
初步报告
检验程序
❖ 2.嗜肺军团菌培养：取气管分泌物接种于活性炭酵 母琼脂(CYE)或费-高(F-G)平板，35℃、2.5%CO2培 养，每天用肉眼观察，直至第14天；
❖ 3.百日咳鲍特菌的培养：将标本直接接种在鲍-金 培养基上，置有盖的玻璃缸（缸内加少量的水，并 在水中加少许硫酸铜，防止细菌及霉菌生长）中， 35℃ 孵育3—5天。
器材和试剂
❖ 1、标本：痰液标本 ❖ 2、菌种：肺炎克雷伯菌 ❖ 3、培养基：血平板、中国蓝平板、克氏
双糖斜面培养基、半固体培养基、微量生 化管等。
器材和试剂
❖ 4、试剂：氧化酶纸片、3%过氧化氢、革 兰染色液、无菌生理盐水及生化管配套试剂。
❖ 5、其它 ：显微镜、培养箱、小试管、载 玻片、接种针、接种环、酒精灯、火柴、非 发酵菌生化编码表等。
特殊菌的培养
❖ 4. 白喉棒状杆菌培养：将标本接种于血清斜面或 鸡蛋培养基，35℃ 孵育8-10h观察；
❖ 5.流感嗜血杆菌培养：将标本接种于血平板和巧克 力平板，并在平板中央接种一直线金黄色葡萄球菌 （或四角点种），35℃、5%-10% CO2环境孵育1824h。
微生物肺炎克雷伯ppt课件
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
2020/7/11
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4
2020/7/11
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5
制片
1.载玻片准备：玻片先在95％乙醇中去除油污，再在火 焰上烧去粘附的乙醇，待冷，做好标记。 2.涂片：在洁净无油腻的玻片中央放一小滴蒸馏水（或 用接种环挑1-2滴水），用无菌的接种环挑取少量菌种与 水滴充分混匀，涂成极薄的菌膜，涂布面积约1cm2 。 3.干燥：涂片在室温下使其自然干燥，也可以小心地在 酒精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰 或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。 4.固定：手执玻片一端，有菌膜的一面朝上，通过微火 三次（手指触摸反面不烫手为宜），待玻片冷却后再进 行染色。
•荚膜染色
2020/7/11
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7
1.染色：玻片置于玻片搁架上，加适量（以盖满菌膜 为度）草酸铵结晶紫（或石炭酸复红染液）于菌膜部 位，染色1-2min。 2.水洗：斜置载玻片，在自来水龙头（或洗瓶）下用 小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为 止。 3.干燥：自然干燥或用吸水纸吸去涂片上的水，用吸 水纸时切勿将菌体擦掉。 4.镜检：用高倍镜和油镜观察并绘细菌形态并绘图于 记录表中。
•编码鉴定
•血清学鉴定
2020/7/11
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12
•氧化酶试验：氧化酶（细胞色素氧化酶）是 细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。具有氧化 酶的细菌，首先使细胞色素C氧化，再由氧化 型细胞色素C将盐酸二甲基对苯二胺或盐酸四 甲基对苯二胺氧化成红色或蓝色的醌类化合物。 主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别，前 者为阴性，后者为阳性。奈瑟菌属、莫拉菌属 细菌也呈阳性反应。
•直接涂片，镜下观察。
•接种：在镜下观察细菌的大致形态及其数 量，直接将标本用接种环蘸取后接种在血平 板、MAC（EMB、SS、XLD）上，进行培养。
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5
制片
1.载玻片准备：玻片先在95％乙醇中去除油污，再在火 焰上烧去粘附的乙醇，待冷，做好标记。 2.涂片：在洁净无油腻的玻片中央放一小滴蒸馏水（或 用接种环挑1-2滴水），用无菌的接种环挑取少量菌种与 水滴充分混匀，涂成极薄的菌膜，涂布面积约1cm2 。 3.干燥：涂片在室温下使其自然干燥，也可以小心地在 酒精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰 或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。 4.固定：手执玻片一端，有菌膜的一面朝上，通过微火 三次（手指触摸反面不烫手为宜），待玻片冷却后再进 行染色。
•荚膜染色
2020/7/11
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7
1.染色：玻片置于玻片搁架上，加适量（以盖满菌膜 为度）草酸铵结晶紫（或石炭酸复红染液）于菌膜部 位，染色1-2min。 2.水洗：斜置载玻片，在自来水龙头（或洗瓶）下用 小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为 止。 3.干燥：自然干燥或用吸水纸吸去涂片上的水，用吸 水纸时切勿将菌体擦掉。 4.镜检：用高倍镜和油镜观察并绘细菌形态并绘图于 记录表中。
•编码鉴定
•血清学鉴定
2020/7/11
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12
•氧化酶试验：氧化酶（细胞色素氧化酶）是 细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。具有氧化 酶的细菌，首先使细胞色素C氧化，再由氧化 型细胞色素C将盐酸二甲基对苯二胺或盐酸四 甲基对苯二胺氧化成红色或蓝色的醌类化合物。 主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别，前 者为阴性，后者为阳性。奈瑟菌属、莫拉菌属 细菌也呈阳性反应。
•直接涂片，镜下观察。
•接种：在镜下观察细菌的大致形态及其数 量，直接将标本用接种环蘸取后接种在血平 板、MAC（EMB、SS、XLD）上，进行培养。
肺炎克雷白杆菌肺炎PPT课件
7
写在最后
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
8
Thank You
在别人的演说中思考，在自己的故事里成长
色痰、痰带血、咯血
4
临床表现
急性病容、发绀、休克、黄疸 肺部啰音 肺实变体征
5
辅助检查
血白细胞和中性粒细胞增多、核左移 痰培养 胸部X线：肺大叶实变、小叶浸润、脓
肿形成，可累及多个肺叶 大叶实变位于右上叶时，叶间裂呈弧
形下坠
6
诊断
临床表现缺乏特异性 砖红色痰少 细菌学检查是唯一的依据
Thinking In Other People‘S Speeches，Growing Up In Your Own Story 讲师：XXXXXX XX年XX月XX日
9
肺炎克雷白杆菌肺炎 （klebsiella pneumonia)
又称肺炎杆菌肺炎
是由肺炎克雷白杆菌引起的急性肺部 炎症
多见于老年、营养不良、慢性酒精中 毒、慢性支气管肺疾病及全身衰竭的 患者
院内获得性肺炎的主要致病菌 产生超广谱酶菌 革兰染色阴性杆菌、兼性厌氧、有荚
膜 是人体呼吸道及肠道的定植菌 为条件致病菌 吸入口咽部带菌分泌物感染
2
病理
病灶中渗出液粘稠而重、常使叶间裂 下坠。
肺泡壁破坏和纤维组织增生 肺组织坏死、空洞、脓肿形成 胸膜或心包腔内有渗出或脓性积液
3
临床表现
起病急、高热、全身衰竭甚休克 咳嗽、咳痰、胸痛、呼吸困难 痰由血液和粘液混合成砖红色、铁锈
写在最后
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
8
Thank You
在别人的演说中思考，在自己的故事里成长
色痰、痰带血、咯血
4
临床表现
急性病容、发绀、休克、黄疸 肺部啰音 肺实变体征
5
辅助检查
血白细胞和中性粒细胞增多、核左移 痰培养 胸部X线：肺大叶实变、小叶浸润、脓
肿形成，可累及多个肺叶 大叶实变位于右上叶时，叶间裂呈弧
形下坠
6
诊断
临床表现缺乏特异性 砖红色痰少 细菌学检查是唯一的依据
Thinking In Other People‘S Speeches，Growing Up In Your Own Story 讲师：XXXXXX XX年XX月XX日
9
肺炎克雷白杆菌肺炎 （klebsiella pneumonia)
又称肺炎杆菌肺炎
是由肺炎克雷白杆菌引起的急性肺部 炎症
多见于老年、营养不良、慢性酒精中 毒、慢性支气管肺疾病及全身衰竭的 患者
院内获得性肺炎的主要致病菌 产生超广谱酶菌 革兰染色阴性杆菌、兼性厌氧、有荚
膜 是人体呼吸道及肠道的定植菌 为条件致病菌 吸入口咽部带菌分泌物感染
2
病理
病灶中渗出液粘稠而重、常使叶间裂 下坠。
肺泡壁破坏和纤维组织增生 肺组织坏死、空洞、脓肿形成 胸膜或心包腔内有渗出或脓性积液
3
临床表现
起病急、高热、全身衰竭甚休克 咳嗽、咳痰、胸痛、呼吸困难 痰由血液和粘液混合成砖红色、铁锈
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特殊菌的培养
• 4. 白喉棒状杆菌培养：将标本接种于血清斜面或鸡蛋培
养基，35℃ 孵育8-10h观察；
• 5.流感嗜血杆菌培养：将标本接种于血平板和巧克力平 板，并在平板中央接种一直线金黄色葡萄球菌（或四角 点种），35℃、5%-10% CO2环境孵育18-24h。 • 6.脑膜炎奈瑟菌培养：将鼻烟拭子接种于已保温在 350C
对痰量少或无痰等咳痰困难者，可雾化吸入45℃
左右的10%氯化钠水溶液，使痰容易排出。对于 幼儿，可轻轻压迫胸骨上部气管，使其咳嗽而取 之。
15
标本的采集
（2）气管镜采集法：用气管镜在肺部内病灶处直接 吸取标本，或用气管刷采取标本。 （3）气管或环甲膜穿刺法：主要用于厌氧菌培养。
16
痰液标本常见的分离菌
上呼吸道 常见致 病菌 下呼吸道 常见致 病菌
检验程序
鼻咽拭子 直接涂片染色检 查 革兰染色 异染颗粒 常规培养 血平板 巧克力平板 中国蓝平板
白喉棒状杆菌培养
血清斜面培养基 鸡蛋培养基 菌落形态、涂片染色 初步报告
百日咳杆菌培养 鲍-金培养基
初步报告
亚碲酸钾血平板纯培养
菌落形态、涂片染色
18 生化反应、血清学鉴定
皮细胞，则应视为不合格标本。
22
痰液标本检验操作流程
3、分离培养：
1）痰液标本的前处理
• A. 均质化法：加入等量的PH 7.6 的1%
胰酶溶液，放置35℃、90 min使痰液均质
化；
23
痰液标本检验操作流程
• B. 洗涤法：取无菌平皿4个，加入无菌生理盐水 20ml ，将痰液标本放入第1个平皿中，用接种环用 力震摇，将脓痰分散为小块悬浮于盐水内，将小块 脓痰取出依次放入第2、3、4个平皿中重复以上操 作。最后在第4个平皿收集脓痰小块，接种于平皿。
的卵黄双抗平板上，35℃、5%-10% CO2环境孵育18—24h。
检验程序
痰液标本 肉眼观察 涂片染色观察 血平板 普通培养 35℃、18~24h
培养前处理 巧克力平板 普通培养 35℃、18~24h 中国蓝平板 普通培养 35℃、18~24h
初步报告
菌落形态和涂片染色 生化反应、血清学鉴定
报告
19
痰液标本检验操作流程
1、肉眼观察：下呼吸道标本为痰液，选取脓血
肺炎克雷伯菌KIA（A A＋＋ ）、MIU（－－＋）
目的要求
• • 掌握呼吸道标本的细菌学检验和报告方法 掌握肺炎克雷伯菌的培养特征、主要微生物 特性及鉴定方法。 • 了解呼吸道标本的采集方法。
10
器材和试剂
• 1、标本：痰液标本 • 2、菌种：肺炎克雷伯菌 • 3、培养基：血平板、中国蓝平板、克 氏双糖斜面培养基、半固体培养基、微 量生化管等。
性的痰液用于细菌学检验。异常恶臭的脓性痰， 常见于肺脓疡患者，而且可能与厌氧菌有关。痰 液中有颗粒状、菌块和干酪样物质可能与放线菌 病和曲霉菌感染有关。
20
痰液标本检验操作流程
2、涂片检查：挑选痰液中脓、血性部分涂片，干 燥固定后，进行革兰染色镜检。
如发现形态典型、有特殊结构，初步可以确定所
同时接种未经洗涤的痰液标本，作为对照。
24
痰液标本检验操作流程
• 2）取经过前处理的痰液标本分别接种血平板、
巧克力平板和中国蓝平板。巧克力平板置5%— 10% CO2 环境培养，其他平板于普通环境35℃孵 育18—24h 。根据菌落形态，细菌染色观察，进 一步进行鉴定。
25
特殊菌的培养
• 1.结核分枝杆菌培养：无菌吸管加前处理标本2-3滴于罗-琴 培养基35℃孵育至8周，每周观察一次； • 2.嗜肺军团菌培养：取气管分泌物接种于活性炭酵母琼脂 (CYE)或费-高(F-G)平板，35℃、2.5%CO2培养，每天用肉眼 观察，直至第14天； • 3.百日咳鲍特菌的培养：将标本直接接种在鲍-金培养基上， 置有盖的玻璃缸（缸内加少量的水，并在水中加少许硫酸铜， 防止细菌及霉菌生长）中，35℃ 孵育3—5天。
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器材和试剂
• 4、试剂：氧化酶纸片、3%过氧化氢、革兰染 色液、无菌生理盐水及生化管配套试剂。 • 5、其它 ：显微镜、培养箱、小试管、载玻 片、接种针、接种环、酒精灯、火柴、非发酵 菌生化编码表等。
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标本的采集
1. 鼻咽拭子 采集时，患者用清水漱口，对光而坐，头向上仰张大口，
用压舌板轻压舌根，取无菌鼻咽拭子绕过悬雍垂，在鼻咽腔、
属菌属或种的细菌，可直接报告。
如查见革兰阳性葡萄状排列的球菌，可报告“痰
液涂片查见革兰阳性球菌，形似葡萄状”；
21
痰液标本检验操作流程
如查见革兰阳性双球菌、矛头状、有明显荚膜时， 可报告“痰液涂片查见革兰阳性双球菌，形似肺炎
球菌”。
如不能直接确定菌属或种的细菌，可报告“痰液
涂片查见革兰×性×菌”。如果痰片中均为鳞状上
悬雍垂后侧反复涂抹数次小心取出，避免接触口腔部其他组织。 2．咽拭子
将拭子用无菌生理盐水湿润，用压舌板轻压舌根，暴露整个
口咽部。先用拭子轻擦扁桃体表面后弃去，再取1支湿润的拭 子轻压扁桃体，擦取挤压出的分泌物，或擦取伪膜等病变部位。
13
14
标本的采集
3. 痰液标本
（1）自然咳痰法：受检者用清水溯口数次后， 用力咳嗽自气管深部将痰咳出吐至无菌容器中。
PPT内容可自行编辑
肺炎克雷ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ与痰液标本检查
主讲：XX XX
凡大医治病，必当安神
定志，无欲无求，先发大慈恻 隐之心，誓愿普救含灵之苦。
- - 孙思邈
PPT内容可自行编辑
开始上课！
肺炎克雷伯菌革兰染色
肺炎克雷伯菌荚膜染色
肺炎克雷伯菌的菌落特征（血琼脂平板）
肺炎克雷伯菌的菌落特征（MAC）
肺炎克雷伯菌粘丝试验
正常菌群 革兰阳性细菌 α和γ链球菌、微球菌、 表皮葡萄球菌、四联球 菌、白喉以外的棒状杆 菌、乳杆菌 化脓性链球菌、金黄色葡 萄球菌、白喉棒状杆菌、 结核分枝杆菌、白色念 珠菌 化脓性链球菌 、金黄色葡 萄球菌、肺炎链球菌、 白喉棒状杆菌、结核分 枝杆菌、厌氧菌、放线 菌、奴卡菌 革兰阴性细菌 除脑膜炎和淋病奈瑟 菌外的其他奈瑟菌、 其他嗜血杆菌 脑膜炎奈瑟菌、流感 嗜血杆菌、百日咳鲍 特菌、肺炎克雷伯菌、 大肠埃希菌、铜绿假 单胞菌 脑膜炎奈瑟菌、流感 嗜血杆菌、肺炎克雷 伯菌、大肠埃希菌、 铜绿假单胞菌、产气 肠杆菌、嗜肺军团菌 17
特殊菌的培养
• 4. 白喉棒状杆菌培养：将标本接种于血清斜面或鸡蛋培
养基，35℃ 孵育8-10h观察；
• 5.流感嗜血杆菌培养：将标本接种于血平板和巧克力平 板，并在平板中央接种一直线金黄色葡萄球菌（或四角 点种），35℃、5%-10% CO2环境孵育18-24h。 • 6.脑膜炎奈瑟菌培养：将鼻烟拭子接种于已保温在 350C
对痰量少或无痰等咳痰困难者，可雾化吸入45℃
左右的10%氯化钠水溶液，使痰容易排出。对于 幼儿，可轻轻压迫胸骨上部气管，使其咳嗽而取 之。
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标本的采集
（2）气管镜采集法：用气管镜在肺部内病灶处直接 吸取标本，或用气管刷采取标本。 （3）气管或环甲膜穿刺法：主要用于厌氧菌培养。
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痰液标本常见的分离菌
上呼吸道 常见致 病菌 下呼吸道 常见致 病菌
检验程序
鼻咽拭子 直接涂片染色检 查 革兰染色 异染颗粒 常规培养 血平板 巧克力平板 中国蓝平板
白喉棒状杆菌培养
血清斜面培养基 鸡蛋培养基 菌落形态、涂片染色 初步报告
百日咳杆菌培养 鲍-金培养基
初步报告
亚碲酸钾血平板纯培养
菌落形态、涂片染色
18 生化反应、血清学鉴定
皮细胞，则应视为不合格标本。
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痰液标本检验操作流程
3、分离培养：
1）痰液标本的前处理
• A. 均质化法：加入等量的PH 7.6 的1%
胰酶溶液，放置35℃、90 min使痰液均质
化；
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痰液标本检验操作流程
• B. 洗涤法：取无菌平皿4个，加入无菌生理盐水 20ml ，将痰液标本放入第1个平皿中，用接种环用 力震摇，将脓痰分散为小块悬浮于盐水内，将小块 脓痰取出依次放入第2、3、4个平皿中重复以上操 作。最后在第4个平皿收集脓痰小块，接种于平皿。
的卵黄双抗平板上，35℃、5%-10% CO2环境孵育18—24h。
检验程序
痰液标本 肉眼观察 涂片染色观察 血平板 普通培养 35℃、18~24h
培养前处理 巧克力平板 普通培养 35℃、18~24h 中国蓝平板 普通培养 35℃、18~24h
初步报告
菌落形态和涂片染色 生化反应、血清学鉴定
报告
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痰液标本检验操作流程
1、肉眼观察：下呼吸道标本为痰液，选取脓血
肺炎克雷伯菌KIA（A A＋＋ ）、MIU（－－＋）
目的要求
• • 掌握呼吸道标本的细菌学检验和报告方法 掌握肺炎克雷伯菌的培养特征、主要微生物 特性及鉴定方法。 • 了解呼吸道标本的采集方法。
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器材和试剂
• 1、标本：痰液标本 • 2、菌种：肺炎克雷伯菌 • 3、培养基：血平板、中国蓝平板、克 氏双糖斜面培养基、半固体培养基、微 量生化管等。
性的痰液用于细菌学检验。异常恶臭的脓性痰， 常见于肺脓疡患者，而且可能与厌氧菌有关。痰 液中有颗粒状、菌块和干酪样物质可能与放线菌 病和曲霉菌感染有关。
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痰液标本检验操作流程
2、涂片检查：挑选痰液中脓、血性部分涂片，干 燥固定后，进行革兰染色镜检。
如发现形态典型、有特殊结构，初步可以确定所
同时接种未经洗涤的痰液标本，作为对照。
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痰液标本检验操作流程
• 2）取经过前处理的痰液标本分别接种血平板、
巧克力平板和中国蓝平板。巧克力平板置5%— 10% CO2 环境培养，其他平板于普通环境35℃孵 育18—24h 。根据菌落形态，细菌染色观察，进 一步进行鉴定。
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特殊菌的培养
• 1.结核分枝杆菌培养：无菌吸管加前处理标本2-3滴于罗-琴 培养基35℃孵育至8周，每周观察一次； • 2.嗜肺军团菌培养：取气管分泌物接种于活性炭酵母琼脂 (CYE)或费-高(F-G)平板，35℃、2.5%CO2培养，每天用肉眼 观察，直至第14天； • 3.百日咳鲍特菌的培养：将标本直接接种在鲍-金培养基上， 置有盖的玻璃缸（缸内加少量的水，并在水中加少许硫酸铜， 防止细菌及霉菌生长）中，35℃ 孵育3—5天。
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器材和试剂
• 4、试剂：氧化酶纸片、3%过氧化氢、革兰染 色液、无菌生理盐水及生化管配套试剂。 • 5、其它 ：显微镜、培养箱、小试管、载玻 片、接种针、接种环、酒精灯、火柴、非发酵 菌生化编码表等。
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标本的采集
1. 鼻咽拭子 采集时，患者用清水漱口，对光而坐，头向上仰张大口，
用压舌板轻压舌根，取无菌鼻咽拭子绕过悬雍垂，在鼻咽腔、
属菌属或种的细菌，可直接报告。
如查见革兰阳性葡萄状排列的球菌，可报告“痰
液涂片查见革兰阳性球菌，形似葡萄状”；
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痰液标本检验操作流程
如查见革兰阳性双球菌、矛头状、有明显荚膜时， 可报告“痰液涂片查见革兰阳性双球菌，形似肺炎
球菌”。
如不能直接确定菌属或种的细菌，可报告“痰液
涂片查见革兰×性×菌”。如果痰片中均为鳞状上
悬雍垂后侧反复涂抹数次小心取出，避免接触口腔部其他组织。 2．咽拭子
将拭子用无菌生理盐水湿润，用压舌板轻压舌根，暴露整个
口咽部。先用拭子轻擦扁桃体表面后弃去，再取1支湿润的拭 子轻压扁桃体，擦取挤压出的分泌物，或擦取伪膜等病变部位。
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标本的采集
3. 痰液标本
（1）自然咳痰法：受检者用清水溯口数次后， 用力咳嗽自气管深部将痰咳出吐至无菌容器中。
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肺炎克雷ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ与痰液标本检查
主讲：XX XX
凡大医治病，必当安神
定志，无欲无求，先发大慈恻 隐之心，誓愿普救含灵之苦。
- - 孙思邈
PPT内容可自行编辑
开始上课！
肺炎克雷伯菌革兰染色
肺炎克雷伯菌荚膜染色
肺炎克雷伯菌的菌落特征（血琼脂平板）
肺炎克雷伯菌的菌落特征（MAC）
肺炎克雷伯菌粘丝试验
正常菌群 革兰阳性细菌 α和γ链球菌、微球菌、 表皮葡萄球菌、四联球 菌、白喉以外的棒状杆 菌、乳杆菌 化脓性链球菌、金黄色葡 萄球菌、白喉棒状杆菌、 结核分枝杆菌、白色念 珠菌 化脓性链球菌 、金黄色葡 萄球菌、肺炎链球菌、 白喉棒状杆菌、结核分 枝杆菌、厌氧菌、放线 菌、奴卡菌 革兰阴性细菌 除脑膜炎和淋病奈瑟 菌外的其他奈瑟菌、 其他嗜血杆菌 脑膜炎奈瑟菌、流感 嗜血杆菌、百日咳鲍 特菌、肺炎克雷伯菌、 大肠埃希菌、铜绿假 单胞菌 脑膜炎奈瑟菌、流感 嗜血杆菌、肺炎克雷 伯菌、大肠埃希菌、 铜绿假单胞菌、产气 肠杆菌、嗜肺军团菌 17