血脂检测方法及临床意义

载脂蛋白参考值
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ApoA1：1.00—1.5g/L ApoB ：0.8—1.00g/L
糖的来源与去路
葡萄糖的测定


葡萄糖氧化酶法（首选方法） 己糖激酶法 葡萄糖脱氢酶法
葡萄糖氧化酶法原理

葡萄糖氧化酶（GOD）将葡萄糖水解为葡 萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶 （POD）和色素原性氧受体存在下，将过 氧化氢分解为水和氧，同时使色素原性氧 受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色 醌类化合物，即Trider反应。其色泽深浅 在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。
糖耐量实验



口服葡萄糖耐量试验 适应症： 空腹血糖水平在临界值（6—7mmol/L）而又疑 为糖尿病患者 空腹或餐后血糖正常，但有发展为糖尿病可能的 人群 以前耐量试验异常的人群 妊娠性糖尿病的诊断 临床上出现肾病，神经病变，视网膜病无法给出 解释的
WHO标准化的OGTT


低脂蛋白血症表现

1、家族性低β-脂蛋白血症
（肝脏LDL受体上调， 伴胆汁酸过度合成，使血浆中VLDL在转化为LDL前已被 肝脏分解代谢。）

2、β-脂蛋白缺乏血症 （ApoB合成分泌缺 陷，使含ApoB的脂蛋白如CM、VLDL、 LDL合成代谢障碍，伴随脂肪吸收和代谢紊 乱，血浆TC也非常低）
血脂检测方法及临床意义
血清载脂蛋白测定


免疫散射比浊法 免疫透射比浊法
临床意义

ApoA1是HDL的主要结构蛋白，ApoB是 LDL的主要结构蛋白，因此，可以反映 HDL/LDL的含量。在某些病理情况下， ApoA1与HDL和ApoB与LDL并非成正相关， 同时测定载脂蛋白和脂蛋白对病理发生状 态的分析很有帮助。冠心病、肾病综合征、 糖尿病等都有ApoA1下降和ApoB升高。临 床上常将ApoA1和ApoB比值作为冠心病的 危险指标。
甘油三酯的参考范围


TG≤1.70mmol/L 升高：＞1.70mmol/L
血清脂蛋白测定


HDL-C测定 LDL-C测定
HDL-C测定方法及原理

HDL直接测定法分三类
1、聚乙二醇/抗体包裹法 2、酶修饰法 3、选择性抑制法（国内应用最多）



选择性抑制法原理

分两步：第一试剂用聚阴离子及分散型表 面活性剂（反应抑制剂），后者与LDL、 VLDL、CM表面的疏水基团有高度亲和力， 吸附在这些脂蛋白表面形成掩蔽层，但不 发生沉淀，能抑制这类脂蛋白中的胆固醇 与酶试剂反应。第二试剂含胆固醇测定酶 及具有对HDL表面的亲水基团有亲和力的 表面活性剂（反应促进剂），使酶与HDL 中的胆固醇起反应
血糖的临床意义



生理性或暂时性低血糖 饥饿和剧烈运动 等 病理性低血糖 可见于胰岛β细胞增生或肿 瘤引起的胰岛素分泌过多、严重肝病不能 调节血糖。 药物的影响①血糖升高的药物：口服避孕 药，儿茶酚胺，咖啡因，甲状腺素，肾上 腺素等②血糖降低的药物：降糖药，酒精， 普萘洛尔等
血糖参考值

成人：3.9—5.9mmol/L
作了评价和实验条件最适化）采用正己烷抽提，L-B显色

Abell法（血清加入醇溶性氢氧化钾，使胆固醇从脂蛋白中分离
出来，同时使胆固醇酯加水分解成游离胆固醇，加石油醚振摇、抽提， 使胆固醇移入石油醚层，分离并取一定量的石油醚层，蒸发至干，再 进行Liebermann-Burchard 显色反应，620nm比色定量。该法可 用于基本功训练及组织细胞胆固醇的提取定量。 ）
血清胆固醇参考范围



TC≤5.20mmol/L 边缘升高：5.23—5.69mmol/L 升高：≥5.72mmol/L
临床意义


TC除了作为高胆固醇血症的诊断指标之外， 不能作为其他任何疾病的诊断指标，对于 动脉粥样硬化和冠心病而言，TC是一个明 确的危险因子，与冠心病的发病率呈正相 关。 影响TC水平的因素：1、年龄与性别，(上 升)2、长期高胆固醇、高饱和脂肪酸、高 热量的饮食3、遗传4、缺少运动，精神紧 张等
LDL临床意义

LDL-C增高是动脉粥样硬化发生发展的主 要脂类危险因素。由于TC水平同时也受 HDL-C水平影响，所以最好以LDL-C代替 TC作为冠心病危险因素指标。
LDL-C的参考范围



LDL-C≤3.12mmol/L 边缘升高：3.15—3.61mmol/L 升高：≥3.64mmol/L
葡萄糖+O2+H2O→葡萄糖酸内酯+H2O2 2H2O2+4-氨基安替比林+酚→红色醌类化合物

血糖的临床意义


生理性或暂时性增高：餐后，摄入高糖饮 食，情绪激动等 病理性高血糖：①糖尿病②甲亢，肾上腺 皮质功能亢进等③应激性高血糖，如颅脑 损伤，颅内压增高等④脱水引起的血液浓 缩，如呕吐、腹泻、高热等⑤严重的肝硬 化不能使糖转化为肝糖原储存⑥胰腺病变
参考值



1.空腹血糖＜6.1mmol/L 2.服糖后30-60分钟升高达峰值＜ 10mmol/L 3.服糖后2小时内恢复至空腹血糖水平 4.各时间的尿糖均为阴性。



总胆固醇(TC) 甘油三酯(TG) 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C) 低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C) 载脂蛋白A1(ApoA1) 载脂蛋白B(ApoB)
总胆固醇（TC）

化学测定法 L-B（ALBK）和Zak法 ALBK（美国CDC的脂类标准化实验室协同有关学术组织对Abell法

1.实验前三天，受试者每日食物中糖含量应不低 于150g，且维持正常活动。 2.影响药物应在三天前停用，空腹10-16小时。 3.坐位去血后5分钟内饮入250ml含75g无水葡 萄糖的糖水。（妊娠妇女为100g，儿童按 1.75g/kg体重给予，最大不超过75g） 4.服糖后，半小时取血一次，共四次 5.试验中不能吸烟，喝酒，喝茶或进食。 6.于采血同时，每隔一小时留取尿液作尿糖试验


TG+H2O→甘油+脂肪酸 甘油+ATP→G-3-P+ADP G-3-P+O2→磷酸二羟丙酮+H2O2
H202+4-AAP+4-氯酚→苯醌亚胺非那腙+H2O2
甘油三酯临床意义

原发性高TG血症多有遗传因素，包括家族 性高TG血症与家族性型高脂蛋白血症等。 继发性高TG血症见于糖尿病，糖原累积病， 甲减，肾病综合征，妊娠，口服避孕药， 酗酒等。富含TG的脂蛋白是冠心病的独立 的危险因子，TG增加表明患者存在代谢综 合征，需进行治疗。甘油三酯降低很少见， 甲亢，肾上腺皮质功能减退和肝功能严重 损伤时可以见到甘油三酯降低。
血脂及血浆脂蛋白测定

血脂是血浆中的中性脂肪（TG和TC）和类 脂（磷脂、糖脂、固醇、类固醇）的总称。
TG参与人体内能量代谢，而胆固醇主要用于合成细胞膜性物质、 类固醇激素和胆汁酸
血浆脂蛋白的分类



1、乳糜微粒 颗 粒 依 2、极低密度脂蛋白 次 变 小 3、低密度脂蛋白 4、高密度脂蛋白 在病理状态下，在VLDL和LDL之间出现中 间密度脂蛋白（IDL）。
相关疾病


高TC血症有原发和继发两类，原发的如家 族性高胆固醇血症，家族性apoB缺陷症， 多源性高TC，混合性高脂蛋白血症等，继 发的见于肾病综合征，甲减，糖尿病，妊 娠等。 低TC血症原发和继发，原发如家族性无β或 低β脂蛋白血症，继发如甲亢，营养不良， 慢性消耗性疾病等。
血清甘油三酯测定
血浆脂蛋白的组成与结构
载脂蛋白

脂蛋白的蛋白部分称为载脂蛋白，具有结 合与转运脂质及稳定脂蛋白结构的功能
血浆脂蛋白的代谢

甘油三酯的代谢途径
胆固醇代谢途径
胆固醇逆转运途径
高脂蛋白血症WHO分型
引起继发性高脂血症的病因

1 、糖尿病
常表现为IV型高脂蛋白血症。（胰岛素 的缺乏，不仅促使肝脏生成VLDL增加，而且因LPL活性 降低，导致VLDL清除减少，主要表现为血清TG、VLDL 水平升高，TG严重升高者有发生急性胰腺炎的危险性。）

酶法测定
磷酸甘油氧化酶法（灵敏度高，试剂稳定，线性范
围比较宽）


乳酸脱氢酶法（结果准确，灵敏度低，试剂不稳定） 甘油氧化酶法（直接测定甘油的方法）
磷酸甘油氧化酶法原理

用脂蛋白酯酶（LPL）使血清中TG水解成脂肪酸 和甘油，甘油激酶（GK）及三磷酸腺苷（ATP） 将甘油磷酸化，以磷酸甘油氧化酶（GPO）氧化 3-磷酸甘油（G-3-P）产生H2O2，最后以 Trinder反应显色，A500nm的值与TG浓度成正 比。

2、甲减 常表现为IIa或IIb型高脂蛋白血 症患者血TC水平升高可同时血TG水平升高 （LPL活力降低，IDL代谢障碍、LDL受体功能下降、血
浆LDL清除减慢等）

3、肾脏疾病
肾病综合征时的高脂蛋白血症由脂蛋 白降解障碍和合成过多双重机制引起。
高脂蛋白血症的因素


4、药物：降压药，利尿剂，β受体阻滞剂 可TG 和HDL 长期应用糖皮质激素治疗可 使TG、TC升高 5、其他：肝胆系统疾病、胰腺炎、长期过 量饮酒
HDL-C参考范围


HDL-C≥1.04mmol/L 减低：＜0.91mmol/L
LDL测定方法及原理


直接匀相法 一类是以α-环糊精、硫酸葡聚糖、聚氧乙烯 -聚氧丙烯封闭共聚多醚（POE-POP），抑 制非LDL脂蛋白以胆固醇酯酶和胆固醇氧化 酶的反应（选择性抑制），从而使LDL-C被 酶水解并测定。 另一类是以不同的表面活性剂的双试剂使非 LDL-C与LDL-C分两步水解，因先消除非 LDL-C而被称为消除法，（目前应用较广的）

酶法 CEH-COD-PAP法（优点：灵敏度，精确度，线性范围宽。
缺点：1.胆固醇酯酶对胆固醇酯水解不完全2.表面活性剂吐温-40干 扰酯酶的作用3.受还原性物质影响如尿酸，胆红素，VC）
CEH-COD-PAP法原理



用胆固醇酯酶水解胆固醇酯生成脂肪酸和 胆固醇，胆固醇被胆固醇氧化酶氧化生成 △4-胆淄烯酮和过氧化氢，然后在过氧化 物酶催化下，H2O2与4-氨基安替比林及酚 结合，生成红色醌亚胺。醌亚胺的最大吸 收峰在500nm左右，吸光度与标本中的胆 固醇含量成正比。反应方程式如下： CEH 胆固醇酯+H2O 胆固醇+游离脂肪酸 COD 胆固醇+O2→△4-胆甾烯酮+H2O2 POD 2H2O2+4-氨基安替比林+酚→醌亚胺
HDL临床意义


HDL-C与冠心病发病呈负相关，HDL-C低 于0.9mmol/L是冠心病危险因素。HDL-C 大于1.55mmol/L被认为是冠心病的“负” 危险因素。 HDL-C降低多见于脑血管病、糖尿病、肝 炎、肝硬化病人。高TG血症往往伴以低 HDL-C，肥胖者的HDL-C也多偏低。吸烟 减低，适量饮酒、长期体力劳动和运动会 使HDL-C升高。