蔬菜枯萎病镰刀菌种类研究

蔬菜枯萎病镰刀菌种类研究

刘一景

（山西省植物保护植物检疫总站，山西太原

030000

）

为了明确蔬菜枯萎病镰刀菌种类，为检疫、病害防治、资源利用提供依据。本研究运用形态学鉴定的方法，对来源于4个主

要蔬菜种植区的5种蔬菜上分离纯化得到的13个镰刀菌单孢菌株进行菌落培养性状和形态特征研究。最后，从镰刀菌的致病性、产生及防治、培养基类型与菌株生长的关系、研究方法的改进4个方面进行了讨论和总结

。

枯萎病镰刀菌；鉴定；蔬菜；致病

径，并取其平均值。③菌落质地及颜色测定：观察转接

到PSA 培养基上培养1周后的菌落质地，即气生菌丝是否茂盛，是否为棉絮状、羊毛状、绒状或毡状等，菌丝颜色，基物表面颜色，基物颜色（培养基有无变色，菌株有无分泌色素）。在Bilai ’s 培养基上接菌的方法同PSA 培养基，培养条件相同，1周后观察菌落颜色,是否疏松。米饭培养基上每试管接入2块菌，重复4次，25℃条件下恒温培养20d 后，观察颜色。1.2.2形态特征试验方法。①分生孢子特征的测定：待PSA 培养基上的菌株培养2周后，制作临时玻片。在显微镜10×40倍数下进行检测。分别观察小型分生孢子和大型分生孢子的数量状况、形状、着生方式、有无分隔及分隔数，大、小型分生孢子各随机选取30个，测量其长和宽，最后进行显微摄影并记录。②产孢细胞特征的测定：判断产孢细胞是属于单瓶梗还是复瓶梗，并且观察其长度，最后进行显微摄影。1.2.3综合鉴定方法。根据上述的培养性状和形态特征测定结果按Booth （1971）、Nelson （1983）、Brayford （1993）和Leslie （2006）的分类系统,结合《常见镰刀菌鉴定指南》对镰刀菌菌株进行形态学鉴定[7]。首先利用镰刀菌组和种的检索表，初步查出供试菌株的分类地位，再和同一组中相类似的种类进行相对应项目的比较，最后根据综合性状鉴定出所得菌株的种名。

2结果与分析

2.1研究结果2.1.1菌株Fc01。①培养性状：平均生长速度为4.3cm 。在PSA 培养基上气生菌丝棉絮状，最初白色，后变浅驼色，基物表面浅黄色至驼色，基物不变色（A ）。在Bilai ’s 培养基上菌丝稀疏，白色。在米饭培养基上呈黄色（B ）。②形态特征：小型分生孢子多，椭圆形、肾形、瓜子形等，0~2隔，大小为5.8~20μm ×2.8~4μm （C ）。

蔬菜是人们生活中不可或缺的食物，目前我国蔬菜种植面积约2000万hm 2。枯萎病是影响蔬菜生产最

主要的病害之一[1]。特别是由于保护地的特殊环境条件和长期连作，土壤中的病原菌量积累越来越多，使枯萎病之类的土传病害发生逐年加重[2]。镰刀菌(Fusari-um)是引起枯萎病的病原菌，广泛分布于自然界中，可侵害多种农作物[3]。镰刀菌是植物维管束系统的寄生菌，在适宜的环境条件下，不但破坏作物的输导组织维管束，而且在菌体生长发育代谢过程中产生毒素危害作物，造成作物萎蔫死亡，严重时影响产量和品质[4]。

由于镰刀菌对人类的生产生活影响极大，许多科学家不断地对镰刀菌的形态、生理、致病性等多方面进行研究。因镰刀菌形态复杂，又易受到营养和外界环境影响而发生变异，所以给镰刀菌的分类鉴定造成了一定的困难，同时也给科学家提出了挑战，引起了人们的关注[5,6]。在我国，从谷类粮食、蔬菜中检测出镰刀菌的现象屡有报道，但对其有效防治和准确的鉴定还有欠缺，对镰刀菌种的研究还有待进一步的加强。因此，研究和明确一个地区的镰刀菌种类，对于检疫、病害防治、资源利用是一项基础性工作，具有重要的意义。本次研究对主要蔬菜枯萎病镰刀菌种类进行鉴定，了解镰刀菌种类资源状况，丰富真菌资源，为由镰刀菌引起的枯萎病的研究与防治提供依据。

1材料与方法

1.1试验材料

1.1.1供试菌株。镰刀菌（Fusarium ）菌株根据来源不同作物分别标记为，黄瓜（Fc01、Fc02、Fc03、Fc04、Fc05、Fc06、Fc07、Fc08），西瓜（Fw09），茄子（Fe10、Fe11），番茄（Ft12），油菜（Fr13）。1.1.2供试培养基。PDA 培养基，PSA 培养基，Bilai ’s 培养基，米饭培养基。1.2试验方法

1.2.1培养性状试验方法。①菌株的活化：从储存的菌株中挑取菌丝，转接到PDA 培养基上于25℃条件下培养5d 。②菌落生长速度测定：PSA 培养基上接菌，每皿2块，重复2次，于25℃下培养4d 后，测量菌落直

A

B

C D E

图1菌株Fc01形态学

特性

1

3〇

大型分生孢子纺锤形，或稍弯成镰刀状，2~6隔，多数3隔，大小为15~44.2μm ×3~6μm （D ）。产孢细胞复瓶梗，较长（E ）（图1）。2.1.2菌株Fc02。①培养性状：平均生长速度为3.9cm 。在PSA 培养基上气生菌丝绒状，米色、黄色、棕红，基物表面棕红、浅黄色，基物不变色，可形成桔黄色分生孢子座（A ）。在Bilai ’s 培养基上菌丝稀疏，白色。米饭培养基上粉红色（B ）。②形态特征：小型分生孢子多,卵形、椭圆形、肾形、纺锤形等，大小为6.2~17.3μm ×1.8~4.3μm （C ）。大型分生孢子哑铃形、纺锤形，或稍弯成镰刀状，大小为16~34.7μm ×2.4~6.5μm （D ）。产孢细胞单瓶梗和复瓶梗均有，较短（E ）（图2）。

色，后变浅驼色，可长橘黄色分生孢子座，基物表面橙黄色至淡褐色，基物不变色（A ）。Bilai ’s 培养基上气生

菌丝少，白色。米饭培养基上为浅咖啡色(B)。②形态特征：小型分生孢子极少。大型分生孢子镰刀形，弯曲，3~7隔，多数3~5隔，大小为16.5~42μm ×3~6μm （C 、D ）。产孢细胞单瓶梗，较长（E ）（图5）

。

A

B

C D E

图2菌株Fc02形态学特性

2.1.3菌株Fc03。①培养性状：平均生长速度为4.2cm 。在PSA 培养基上气生菌丝绒状，白色、粉白色，基物表面粉红，基物不变色（A ）。在Bilai ’s 培养基上菌丝少，白色。在米饭培养基上呈粉红色（B ）。②形态特征：小型分生孢子数量多，卵圆形或椭圆形，大小为5.2~12.3μm ×2.8~4.6μm （C ）。大型分生孢子月牙形，稍弯，多数3隔，大小为11.2~40μm ×2.8~5.4μm （D ）。产孢细胞单瓶梗，短（E ）（图3）

。

A

B

C D E

图3菌株Fc03形态学特性

2.1.4菌株Fc04。①培养性状：平均生长速度为

3.9cm 。在PSA 培养基上气生菌丝绒状，白色、粉白色、深红棕色，基物表面深红棕色、浅黄色，基物不变色（A ）。在Bilai ’s 培养基上菌丝少，白色。在米饭培养基上呈粉红色（B ）。②形态特征：小型分生孢子数量多，卵圆形、肾形或椭圆形，大小为5~10.7μm ×2.4~3.4μm （C ）。大型分生孢子美丽形、月牙形，稍弯，向两端比较均匀的逐渐变尖，多数3隔，大小为12~41μm ×2.7~

4.5μm （D ）。产孢细胞单瓶梗，短（E ）（图4）

。

A

B

C D E

图4菌株Fc04形态学特性

2.1.5菌株Fc05。①培养性状：平均生长速度为

3.8cm 。在PSA 培养基上气生菌丝棉絮状，培养初期白色至粉

A

B C D

E

图5菌株Fc05形态学特性

2.1.6菌株Fc06。①培养性状：平均生长速度为

3.9cm 。在PSA 培养基上气生菌丝绒状，米色、黄色、棕红色，基物表面紫红色，浅黄色，基物不变色（A ）。在Bilai ’s 培养基上菌丝稀疏，白色。米饭培养基上淡黄至紫色（B ）。②形态特征：小型分生孢子多，卵形、椭圆形、肾形等，串生和假头生并存，大小为

4.4~20μm ×2.1~3.7μm （C ）。大型分生孢子纺锤形，或稍弯成镰刀状，大小为16.8~33.7μm ×3.1~6.7μm （D ）。产孢细胞单瓶梗（E ）（图6）。

A B

C D

E

图6菌株Fc06形态学特性

2.1.7菌株Fc07。①培养性状：平均生长速度为

3.7cm 。在PSA 培养基上气生菌丝绒状，白色、粉白色，基物表面粉红色，基物不变色（A ）。在Bilai ’s 培养基上菌丝少，白色。在米饭培养基上呈粉红色（B ）。②形态特征：小型分生孢子数量多,卵圆形或肾形，大小为6.2~12.4μm ×2.8~

4.4μm （C ）。大型分生孢子美丽形，月牙形，稍弯，大小为15~47.2μm ×3~4.7μm （D ）。产孢细胞单瓶梗，短（E ）（图7）

。

A B C D

E

图7菌株Fc07形态学特性

2.1.8菌株Fc08。①培养性状：平均生长速度为

3.8cm 。在PSA 培养基上气生菌丝绒状，白色，有黄色分生孢子座，基物表面橙色、浅黄色，基物不变色（A ）。在Bi-lai ’s 培养基上菌丝稀疏，白色。米饭培养基上咖啡色（B ）。②形态特征：小型分生孢子多,卵形、肾形，大小为7.1~15.5μm ×3.1~

4.2μm （C ）。大型分生孢子马特形，顶胞稍尖，大小为1

5.1~35.2μm ×3.3~

6.4μm （D ）。产孢细胞单瓶梗，长短不一（E ）（图8）。

1

4〇