HPLC安捷伦高效液相使用维护常见问题
Agilent-HPLC使用过程中常见问题及解决方法
Agilent HPLC使用过程中常见问题及解决方法一、如何处理HPLC 中的盐带来的问题？很多问题是由于流动相含有盐成分造成的。
建议在清洗时将水加热后再冲洗，这样既可以将盐溶解的更好，也可以溶解一些脂溶性物质，会减少很多问题的发生,包括管路堵塞,盐析出，基线噪音……二、安捷伦1100及1200液相泵的日常维护泵是液相色谱的核心，泵将流动相从溶剂瓶输送到液相流路系统中，并要在高压下保持流量和压力的稳定。
泵的状态正常是液相色谱准确分析的基础，所以平日一定要重视对泵的维护。
下面就安捷伦1100/1200液相色谱泵的日常维护进行简要的介绍。
1.流动相的准备为了防止颗粒性物质对泵组件的磨损，流动相（特别是水相）应该新鲜配置并且过滤。
上机前对流动相进行适当的超声脱气，以保证更好的在线脱气和在线混合的效果。
2.比例阀溶剂通道的分配四元泵的比例阀有A、B、C、D四个通道，建议将盐溶液接在下面的通道（A或D），将有机溶剂接在上面的通道（B 或C）上,也就是有机通道最好在盐溶液通道的上面。
且建议用水定期冲洗所有比例阀通道除去可能在阀口析出的盐结晶。
3.过滤白头的维护过滤白头位于排气阀内，是一种聚四氟乙烯材质的微孔过滤芯，用于过滤流动相中的微粒，是经常需要维护的地方。
当系统压力有异常增高时，首先需要检查过滤白头是否阻塞了。
判断的方法是：打开排气阀，以纯水作流动相，将流速设为5mL/min，如果泵压超过10bar，则说明过滤白头需要更换了。
对过滤白头的预防性维护通常可以是1~2个月更换1次，更换时同时检查一下过滤白头前面的密封金垫，如果发现变形，也应及时更换。
如果过滤白头更换过于频繁，则需要认真检查一下流动相的品质，确保流动相上机前过滤，确保使用了合适的过滤膜。
如果流动相有长菌现象，除了配置新的溶剂，还应对相应的溶剂管线和脱气机通道进行彻底的清洗。
4.柱塞杆与柱塞密封圈的维护柱塞密封圈套在柱塞杆上用于隔离泵与外界，工作时，它和柱塞杆进行频繁的往复摩擦，使用一段时间后，会有一定的磨损，因而密封圈需要定期更换以保证系统的密封性。
安捷伦色谱仪使用过程中常见问题和排除
实验室精英前沿项目成果厂商动态行业活动国内国际食品安全生物医药能源环境材料行业数据其它AgilentHPLC使用过程中常见问题及解决方法2008-01-20 11:23原文出处：Agilent HPLC使用过程中常见问题及解决方法关键词：agilent安捷伦维护hplc液相色谱一、如何处理 HPLC 中的盐带来的问题？很多问题是由于流动相含有盐成分造成的。
建议在清洗时将水加热后再冲洗，这样既可以将盐溶解的更好，也可以溶解一些脂溶性物质，会减少很多问题的发生,包括管路堵塞,盐析出，基线噪音……二、安捷伦1100及1200液相泵的日常维护泵是液相色谱的核心，泵将流动相从溶剂瓶输送到液相流路系统中，并要在高压下保持流量和压力的稳定。
泵的状态正常是液相色谱准确分析的基础，所以平日一定要重视对泵的维护。
下面就安捷伦1100/1200液相色谱泵的日常维护进行简要的介绍。
1.流动相的准备为了防止颗粒性物质对泵组件的磨损，流动相（特别是水相）应该新鲜配置并且过滤。
上机前对流动相进行适当的超声脱气，以保证更好的在线脱气和在线混合的效果。
2.比例阀溶剂通道的分配四元泵的比例阀有A、B、C、D四个通道，建议将盐溶液接在下面的通道（A或D），将有机溶剂接在上面的通道（B 或C）上,也就是有机通道最好在盐溶液通道的上面。
且建议用水定期冲洗所有比例阀通道除去可能在阀口析出的盐结晶。
3.过滤白头的维护过滤白头位于排气阀内，是一种聚四氟乙烯材质的微孔过滤芯，用于过滤流动相中的微粒，是经常需要维护的地方。
当系统压力有异常增高时，首先需要检查过滤白头是否阻塞了。
判断的方法是：打开排气阀，以纯水作流动相，将流速设为5mL/min，如果泵压超过10bar，则说明过滤白头需要更换了。
对过滤白头的预防性维护通常可以是1~2个月更换1次，更换时同时检查一下过滤白头前面的密封金垫，如果发现变形，也应及时更换。
如果过滤白头更换过于频繁，则需要认真检查一下流动相的品质，确保流动相上机前过滤，确保使用了合适的过滤膜。
安捷伦1260-HPLC日常维护
紧固所有接头；更换破裂的毛细管；更换流通元件
《嵌入式技术基础与实践》
五、检测器日常维护及可能故障诊断
2、UV灯点不亮 在点亮紫外灯的一段时间里处理机会持续监测紫外灯的电流，如
果在2~5s内UV灯电流低于电流下限，则会出现故障提示。 可能原因：
UV灯电源没有接好；UV灯换了；电路或主板故障 建议采取措施：
一、在线脱气机日常维护及可能故障 诊断
溶剂过滤头的清洗方法： 取下过滤头，用纯水冲去残留溶剂后放入35%浓硝酸中浸泡1h；
用二次蒸馏水冲洗干净，玻璃滤头不可使用超声冲洗（易碎易损坏）； 建议定期清洗过滤头及溶剂瓶，至少3个月清洗一次
《嵌入式技术基础与实践》
二、四元泵日常维护及可能故障诊断
出口阀阀芯
《嵌入式技术基础与实践》
五、检测器日常维护及可能故障诊断
《嵌入式技术基础与实践》
五、检测器日常维护及可能故障诊断
1、检测器泄漏 检漏系统是利用两个传感器（泄漏传感器和温度补偿传感器）
进行泄漏运算，以此发出的信号来判断是否存在泄漏。当出现泄漏 时，泄漏传感器会被溶剂冷却，因而改变传感器的电阻，其信号被 主板上的的泄漏传感器电路获得。 泄漏的可能原因：
《嵌入式技术基础与实践》
二、四元泵日常维护及可能故障诊断
1、如何判断比例阀是否内漏？ 设定泵使用单通道（A），打开purge阀，流速为5mL/min,提起其他溶
剂瓶中的过滤头使之离开液面，观察（B/C/D）管路中的溶剂是否流动，正 常时均应不流动 2、何时应该更换purge阀内的过滤白头?
拧开排液阀，以水为流动相，流速为5ml/min,若压力大于10bar，建议 更换。 3、泵压不正常的可能原因?
安捷伦高效液相色谱仪的故障诊断及仪器维护
２３ ２Ｌ ａ 表示 该模 块 发生漏 液 ，此 时无 需关 机 ， ． ． ｅｋ 请检 查该 模块 的漏液 传感 器周 围是否 有液 体 。如 果 是 ，先 用滤 纸将之 吸干 后点击 ｓ ｓｅ ｏ 检查 液 ｙｔｍ ｎ再 体 从何 而来 。如果 不是 ，这种 情况 很可 能是仪器 内
该 仪器 在 未 准备 好 状 态 （ ｔｒａｙ 或 正 在 自检 。 Ｎｏ－ｅ ｄ ） 呈 绿色 ： 仪器 正在运 行 ， 该 采集数 据 （ｕ） Ｒ ｎ。无颜 色 ： 该 仪器 已准备 好等 待运行 （ｒ－ ｎ。呈红 色 ： Ｐｅｒ ） ｕ 该仪 器检 测 到有故 障 发生 ，仪 器在错 误状 态 （ｒｏ Ｅ ０。 通 常仪器在 开 机后状 态显示 ： 脱 气机 ： 无颜 色 。脱 气机 在开机 后 应很快 就能 达到 准备 好 的状 态 ，且 在正 常情 况 下 ，该 灯常 灭 。 显示 内部 真空 足够且 密封性 好 。 泵 ： 黄色 ，等待 开泵 。 显 自动进样 器 ： 自检正 常后 应无颜 色 ，等待进 样命 令 。 柱 温箱 ： 显黄 色 ，等待开 启控 温命 令 。 检 测器 ： ＶＷＤ ： 显黄色 ，等 待开 灯命令 。ＤＡ 与 Ｄ 之 相 同。Ｆ Ｄ ： 颜 色 ，因 为 荧 光 检 测 器 在 Ｌ 无 不 亮 灯 的情 况 下 可做 化 学 发光 检 测 ，记 住 要 做 荧 光检 测一定 要开 灯 。 ＲＩ ： Ｄ 显黄 色 ，等待 ｐ ｒｅ参 比池命令 ，Ｒ Ｄ 一定 ｕｇ Ｉ 要 冲洗 样 品池 和 参 比池 直 至 两者 光 强度 一 致 后 才能准备 好 。
选择检 测器 ） 。通常普 通氘灯能用 １０ ｈ 以上 ， ００ 或 而长寿命氘灯能用 ２ ０ｈ ０ ０ 或以上。（）灯连线未接 ２ ３ 是 否有 一遥控 线 （ 与标 有 ｒｍｏｅ的接 口连接 ） ｅ ｔ 。若 好 。 （ ）检 测器 的主 板和或 电源 损坏 。
安捷伦高效液相色谱仪的故障诊断及仪器维护
安捷伦高效液相色谱仪的故障诊断及仪器维护常见的错误信息及其解决方法一、仪器漏油造成漏液的主要原因：（1）色谱柱未拧紧，多数发生在更换柱后。
这时柱温箱会显示Leak。
注意，柱温箱的漏液传感器在两加热块之间的中间位置。
请用吸水纸确认，因为有时单用眼观察不易察觉。
（2）连接管路两端未拧紧，或连接管路断裂。
（3）进样阀漏液，如自动进样器转子垫圈磨损造成漏液。
（4）泵漏液，开泵后将手伸入泵底部，可感到漏液。
（5）冷凝水的形成，如果使用柱温箱的降温功能，可能会有冷凝水生成从而使柱温箱显示漏液。
这种情况下可取消柱温箱的检漏功能( 在工作站中的instrument 菜单下选择more column thermostat 然后选择取消柱温箱的检漏功能)。
（6）流动池漏液。
二、Lamp current 和UV lamp ignited failed (该项需让设备管理员检查)（1）灯已严重老化。
请在工作站中的diagnosis 界面中查看灯的使用累积时间(view ◊ diagnosis ◊ EMF ◊选择检测器)。
通常普通氘灯能用1000h 或以上，而长寿命氘灯能用2000h 或以上。
（2）灯连线未接好。
（3）检测器的主板和或电源损坏。
注意，更换灯后建议将灯的使用时间回零：在diagnosis 中单击检测器图标，然后选择showmodule details 再单击右边的带有扳手的图标选择maintenance logbook entry，在项目中选择lampreplace, 点ok 然后在随后的提示中回答yes 即可。
三、系统压力过高（1）首先拧开排液阀，以纯水作流动相并设流速为5mL/min 若压力超过10bar，应先更换排液阀的虑芯。
（2）若排液阀的虑芯没有堵塞，卸下色谱柱，然后用一两通代替色谱柱，以水作流动相设流速为1mL/min。
通常压力不会超过20bar, 否则系统可能有堵塞。
（3）若上述的压力超过20bar, 我们可按照从后到前的原则，也就是说先卸下进流动池的连接管接头，开泵后，若压力正常则流动池堵塞若仍不正常可将这段管另一端也卸下，开泵后再观察压力情况。
安捷伦液相色谱仪常见问题及相应的解决方法 液相色谱常见问题解决方法
安捷伦液相色谱仪常见问题及相应的解决方法液相色谱常见问题解决方法安捷伦液相色谱仪常见问题及相应的解决方法：一、安捷伦液相色谱仪常见问题柱压高原因分析以及解决方法：（1）缓冲液盐分如（乙酸铵等）沉积于柱内。
先用40～50℃的纯水，低速正向冲洗柱子，待柱压渐渐下降后，相应提高流速冲洗，柱压大幅度下降后，用常温纯水冲洗，之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟。
（2）样品污染沉积。
由样品的沉积引起污染的C18柱，和纯水反向冲洗柱子，换成甲醇冲洗，接着用甲醇+异丙醇（4+6）冲洗柱子，再用换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
二、安捷伦液相色谱仪常见问题不稳定原因分析以及解决方法：原因：系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物，使得两者不能密封。
解决方法：处理工作中注意察看流动相的量，保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底，避开吸入空气，流动相要充分脱气。
如为单向阀和阀座之间夹有异物，拆下单向阀，放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。
三、安捷伦液相色谱仪常见问题指示原因分析以及解决方法：（1）泵密封垫圈磨损。
更换密封垫圈（2）大量气泡进入泵体。
在泵作用的同时，用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮忙抽出空气。
四、安捷伦液相色谱仪常见问题重复性差原因分析以及解决方法：（1）进样阀漏液。
更换进样阀垫圈（2）加样针不到位。
保证加样针插到底，注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态，以保证进样量的精准。
（3）液量不足。
五、安捷伦液相色谱仪常见问题峰分叉原因分析以及解决方法：（1）色谱柱被污染。
先用纯水反向冲洗柱子，然后换成甲醇冲洗，接着用甲醇+异丙醇（4+6）冲洗柱子（冲洗时间的长短由样品污染的情况而定），再换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
（2）柱头填料塌陷。
拧开柱头，检查柱填料是否硬结或塌陷。
去除硬结部分（污染的填料），装入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧，再填平，滴甲醇，再压紧反复几次，直至装满填平。
安捷伦液相色谱仪故障分析及解决方法 液相色谱维护和修理保养
安捷伦液相色谱仪故障分析及解决方法液相色谱维护和修理保养安捷伦液相色谱仪是一种应用特别广泛的有机多组分化学分析仪器。
它具有分别效能高,分析速度快,样品用量少,可进行多组分测量等优点。
安捷伦液相色谱仪在石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面应用很广。
它除用于定量和定性分析外，还能测定样品在固定相上的调配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数。
一种对混合气体中各构成分进行分析检测的仪器。
但是由于人员素养样品的性质以及仪器本身等方面的原因,常常显现这样那样的分析故障严重影响了正常的生产分析。
所以把握一种精准、快速的排出仪器故障的方法特别紧要。
安捷伦液相色谱仪的故障分析：1、什么原因导致液相色谱仪压力过高？可能的原因：1.排气阀里面的 PTFE 滤蕊堵塞。
2.压力上限设置太低。
3.压力传感器堵塞。
安捷伦液相色谱仪建议的措施：1.打开排气阀。
假如压力仍旧很高，则更换排气阀内的 PTFE 滤芯。
2.查看软件的压力上限设置并确保设置值适于分析。
3.检查系统内的堵塞部位。
（如下所述）要检查是否堵塞，请接受隔离系统的方法来排出故障：将安装的色谱柱、预色谱柱和预色谱柱过滤器摘开。
①. 假如压力恢复到正常值，则在色谱柱的位置安装 ZDV 接头。
A 假如压力正常，则色谱柱、预色谱柱或过滤器是产生问题的原因。
请进行更换。
B 假如压力仍旧很高，则在色谱柱的另一端查找堵塞位置（例如：通入检测器或从其通出的管路）。
②. 假如取杰出谱柱后压力仍旧很高，则检查从排气阀到自动进样器的管路。
假如压力正常，则使用进样步骤命令将自动进样器的进样阀切换到旁路状态。
A 假如压力正常，则说明自动进样器堵塞。
请检查针、针座、针座毛细管和转子密封垫。
B 假如压力仍旧很高，则检查从进样六通阀到色谱柱入口之间的管线。
液相色谱柱日常使用和维护色谱柱的正确使用和维护特别紧要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。
在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。
高效液相色谱常见问题及维修保养
高效液相色谱常见问题及维修保养高效液相色谱常见问题1、液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？①筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。
②存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子③可能柱超载，减少进样量。
2、HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法是什么？①样品量不足，解决办法为增加样品量②样品未从柱子中流出。
可根据样品的化学性质改变流动相或柱子③样品与检测器不匹配。
根据样品化学性质调整波长或改换检测器④检测器衰减太多。
调整衰减即可。
⑤检测器时间常数太大。
解决办法为降低时间参数⑥检测器池窗污染。
解决办法为清洗池窗。
⑦检测池中有气泡。
解决办法为排气。
⑧记录仪测压范围不当。
调整电压范围即可。
⑨流动相流量不合适。
调整流速即可。
⑩检测器与记录仪超出校正曲线。
解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。
3、做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在？如何解决？①泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理；②比例阀失效，更换比例阀即可；③泵密封垫损坏，更换密封垫即可；④溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法；⑤系统检漏，找出漏点，密封即可；⑥梯度洗脱，这时压力波动是正常的。
4、我购买的HPLC柱验收测试时柱压过高，请问为什么？柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。
其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。
①拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；②把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；③将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动池）。
这时，如果柱压仍不下降，再检查；只用于使用过的柱子。
④更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。
安捷伦液相色谱仪常见问题解决方案 液相色谱解决方案
安捷伦液相色谱仪常见问题解决方案液相色谱解决方案1、基线波动的原因？基线波动有可能与试验室的温度及湿度变化有关系。
需确保室温及湿度稳定，将安捷伦液相色谱仪从通风橱中取出，并将色谱柱和毛细管进行隔热保温。
2、安捷伦液相色谱仪—什么原因导致基线毛刺？这很有可能是流动池内有气泡。
请先停泵来进行确认,假如毛剌消失，则很有可能是由于流动池内有气泡。
需要冲洗流动池。
假如毛剌仍旧存在，则需检查检测器本身的电噪音有关。
3、如何削减基线噪音？无规律噪音可能与污染有关。
请冲洗色谱柱，对样品做合适的前处理以避开污染，并使用HPLC级别的溶剂。
连续噪音有可能由检测器或泵造成。
要确定问题是否发生在检测器还是在泵，请先关泵停掉流量，监测基线。
假如此时基线平稳，则噪音可能与泵有关系。
使用ChemStation在线诊断或LC手持掌控器检查泵方面的故障。
假如停泵后噪音连续存在，则说明噪音与检测器有关。
首先，请尝试更换灯。
假如问题仍旧存在，则请厂家联系联系。
4、如何避开液相基线飘移？基线向上飘移表明系统中有污染。
请冲洗色谱柱，净化样品，然后使用新溶剂。
向下飘移通常是由于检测室或柱箱中的温度波动的原因。
减小室温变化，将仪器从通风橱中取出，并将色谱柱和毛细管保温隔热。
向下飘移也可能由于溶剂的纯度不是HPLC级别的溶剂而且此纯度低的溶剂在紫外有吸取。
5、如何排出流动相/流动池中的气泡？避开流动相中产生气泡的方式是将流动相经脱气装置进行脱气。
假如没有脱气装置，则可以在流动相溶剂瓶中通入氦气进行脱气。
也可以在检测器的出口端加一根细管线以调整流动池中的背压，但必需注意不要超过流动池的最大压力，否则会造成流动池漏液或流动池损坏。
假如流动池中显现气泡，则先摘下色谱柱，用一根管线直接将流动相接入检测器的入口。
将异丙醇以较大的流速注入流动池。
直到基线上看不到尖峰为止。
气泡就应当清除掉了。
液相色谱仪的原理就是利用待分别的各种物质在两相中的调配系数、吸附本领等亲和本领的不同来进行分别的。
【最新资料】安捷伦液相仪器的故障排除
1.系统（二元泵）进气系统进气会导致泵性能较差、检测器基线噪音、系统压力不稳定（压力波动），极端情况下会导致保留时间精度较差。
系统中出现空气可能是以下原因引起：溶剂过滤器堵塞（过滤器中得压力梯度导致流动相中出现气泡）未对流动相进行脱气微量泄漏（空气进入系统，但没有流动相泄漏的明显迹象）未对泵进行充分吹扫泵部件有缺陷波动值波动值以系统压力的百分比形式表示压力波动（峰-峰）。
波动值能够很好地反映泵性能。
通常，波动值大于1%表明系统中含有空气压力测试压力测试用于测试从泵头的出口球形阀到检测器入口的系统部件的密闭性。
泄漏测试失败表明系统中存在泄漏情况。
泄漏测试泄漏测试用于验证泵部件的运行是否正常，并排除导致问题的泵模块。
Pressure Test (binary pump)Leak Test (binary pump)1.系统（单元泵和四元泵）进气Pressure Test (isocratic and quaternary pumps)Leak Test (isocratic and quaternary pumps)2.校正错误(DAD/MWD)正确的波长校正取决于检测器的光学和电子部件的正确对齐。
校正不正确可能是以下原因引起的：新灯（建议在更换灯之后进行波长校正）灯安装不正确流通池安装不正确在先前的校正过程中，流通池未填满水（有气泡）波长校正波长校正测试检查使用氘灯的α (656.1 nm) 和β (486 nm) 发射线进行的校正。
如果测试表明校正不正确，则必须执行Wavelength Recalibration。
Wavelength Calibration Test2.校正错误（VWD）正确的波长校正取决于检测器的光学和电子部件的正确对齐。
校正不正确可能是以下原因引起的：新灯（建议在更换灯之后进行波长校正）灯安装不正确流通池安装不正确在先前的校正过程中，流通池未填满水（有气泡）光栅未对齐波长校正测试波长校正测试用于检查检测器的校正设置。
高效液相色谱仪的日常维护保养及常见故障排除
醚塾垒凰．高效液相色谱仪的日常维护保养及常见故障排除王甜1王志军：(1．新疆维吾尔自治区水产科学研究所，新疆乌鲁木齐830000；2．新疆中泰化学股份有限公司，新疆乌鲁木齐830000)脯要】本文介绍了(安捷伦H PLcl200)高效液相色谱仪的(在使用过程中的)日常维护保养方法和分析过程中遇到的常见疑难问题产生的原囱及辫狳方法。
法键词]高效液相色谱；日常维护；故障；排除方法高效液相色谱(H P LC)作为一种高灵敏度、高选择性的高效快速分离分析技术现今已被广泛应用于医药卫生、食品安全、环境化学等各个领域，随着高效液相色谱技术的推广，在仪器使用过程中难免会遇到各种各样的问题，从而影0柱常工作，如何保证仪器的正常运行，确保分析数据的准确可靠便成为广大分析工作者所观注的焦点。
仪器操作人员如能做好日常维护保养工作，清楚常见故障预防和排除方法，便能使仪器最大限度地发挥其性能。
本文将结合实际工作中所得经验和相关资料，对高效液相色谱仪的科学保养和故障排除作一简要介绍。
1高效液相色谱仪的日常维护高效液相色谱1义主要由贮蔽器、泵、进样器、色谱柱、检测器、工作站等几部分组成，因此，日常维护工作即可从这几个主要部件展开。
1．1贮液器1)保持贮液瓶清洁，定期清洗或更换；2)尽量使用H PL C级溶剂和试剂：3)(含有缓冲盐和)非H PLC级的流动相一定要过滤；4)含有缓；中盐的流动相应现用现配，防止微生物生长和组分改变。
12泵泵的密封圈和柱塞许是最容易磨损的部件，因此在使用过程中要注意：1)仪器使用完毕，需将泵中的缓冲盐冲洗干净，防止盐沉积：2)用H PL C级试剂：3)定期清洗过滤筛板，用1m ol／L的硝酸浸泡1h，再用纯水清洗干净(切勿超声)。
13进样器1)样品进样前要过滤：2)手动进样器，要用液相专用的平头针，而不能用气相色谱用的尖头针代替以免损伤转子，进样针和进样阀使用完毕后用有机溶剂冲洗干净。
1．4色谱柱1)在使用新柱之前，最好用适宜溶剂在低流量下(Q2一03 m U m i n)冲洗30m i n，长时间未用的分析柱也要同样处理；2)定期使用强溶剂冲洗柱子：3)使用缓；中盐时，要先用水冲洗，再用有机溶剂冲洗：4)卸下保存时，要盖上盖子，避免固定相干枯；5)使用保护柱；6)避免流动相组成及极性的剧烈变化；7)避免压力脉冲的剧烈变化。
高效液相色谱仪的日常维护保养及常见故障处理方法
高效液相色谱仪的日常维护保养及常见故障处理方法摘要：高效液相色谱是以高压液体为流动相，采用经典液相色谱法的色谱过程。
高效液相色谱作为一种高灵敏度、高选择性的快速分离色谱，在医疗保健、食品安全、环境化学等领域得到了广泛的应用。
仪器在使用过程中不可避免地会遇到一系列问题，影响仪器的正常工作。
保证仪器的正常运行，保证分析人员能够准确可靠地分析数据。
仪器操作人员如果能够按时进行日常维护工作，了解常见故障的预防和排除方法，就能最大限度地发挥仪器的性能。
根据实践经验和有关资料，本文简要介绍了高效液相色谱仪的科学维护和故障排除。
关键词：高效液相色谱；故障诊断；排除；方法1、高效液相色谱概述高效液相色谱是19世纪60年代末发展起来的一种分析方法。
近年来被广泛应用于活性成分、营养强化剂和保健食品中。
高效液相色谱法可用于分析世界上大约80%的有机物。
高效液相色谱由输液系统(含储液罐、高压泵等)、分离系统(含采样器、高压泵等)、色谱柱、检测系统(含试验等)、采集系统(含馏分采集器、，自动采集装置）等，这些系统就象人的脉络一样相互依赖，每个环节的故障都会影响检测结果的可靠性和真实性。
因此，液相色谱仪的故障排除和日常维护对延长色谱仪的使用寿命至关重要。
2、高效液相色谱仪常见故障及处理方法2.1输液泵常见故障及处理2.1.1止回阀的故障及处理球阀和阀座的密封不严密，即使球阀和阀座粘在一起，也会导致液体回流和压力不稳定。
处理方式，应当立即打开排气阀，用高流速溶液冲洗泵，直到排放呈线性。
如果泵进口处有气泡，也可以排出泵头上的气泡，具体方法是:用扳手握住进气泡的泵头，松开出口管的压力盖，用手泵送液体，然后将看到气泡从孔中挤出，直到气泡流出并拧紧压力盖。
如果压力仍然不稳定，可以认为止回阀磨损，球体不光滑，需要更换零件。
2.1.2泵垫圈故障泵密封的常见问题是系统密封泄漏和污染。
严禁采用强酸和强碱溶液进行冲洗，溶液的pH值一般调整为中性。
安捷伦液相常见问题
1。
常见色谱故障——压力波动可能原因：溶剂进口过滤芯堵塞；溶剂未脱气;泵的密封垫老化;出口单向阀失效；主动阀失效。
最常见原因:泵内有气泡2.常见色谱故障——压力过低可能原因：溶剂进口过滤芯堵塞；连接管路泄漏或其它备件(泵头密封垫)；溶剂或流速改变；主动阀失灵；四元比例阀失灵；单向出口阀失灵；色谱柱失效（固定相流失)。
3.常见色谱故障—-压力过高可能原因：柱子进口过滤芯被污染;PURGE(排气）阀过滤芯被污染；色谱柱被污染;连接管路，尤其是针座毛细管堵塞；进样器旋转密封阀被堵塞;进样针或针座被阻塞4.常见色谱故障——基线噪音是—检测器？基线噪音——停泵-—噪音是否依然存在—-—否-泵或流动相?其它要考虑的问题：是否改变了流动相的组成?是否改变了检测波长？在你的仪器上使用的最后的流动相是什么？流动相是否相溶？流动相是否干净？如何排除流动相中的气泡？如何排出流动池中的气泡？避免流动相中产生气泡的最佳方式是将流动相经脱气装置进行脱气。
如果没有脱气装置，则可以在流动相溶剂瓶中通入氦气进行脱气。
也可以在检测器的出口端加一根细管线以调节流动池中的背压，但必须注意不要超过流动池的最大压力，否则会造成流动池漏液或流动池损坏。
如果流动池中出现气泡,则先摘下色谱柱，用一根管线直接将流动相接入检测器的入口。
将异丙醇以较大的流速注入流动池。
直到基线上看不到毛刺为止。
气泡就应该清除掉了.如何减少基线噪音?无规律噪音可能与污染有关。
请冲洗色谱柱，对样品做合适的前处理以避免污染，并使用HPLC 级别的溶剂。
连续噪音有可能由检测器或泵造成。
要确定问题是否发生在检测器还是在泵，请先关泵停掉流量，监测基线。
如果此时基线平稳，则噪音可能与泵有关系。
使用ChemStation 在线诊断或LC 手持控制器检查泵方面的故障。
如果停泵后噪音继续存在，则说明噪音与检测器有关。
首先,请尝试更换灯。
如果问题依然存在，则请与安捷伦科技公司联系.在中国,请拨打800 820 3278.什么原因导致基线毛刺？这很有可能是流动池内有气泡。
安捷伦液相色谱仪使用问题与解决方法 液相色谱常见问题解决方法
安捷伦液相色谱仪使用问题与解决方法液相色谱常见问题解决方法Agilent液相色谱仪是一种应用特别广泛的有机多组分化学分析仪器。
它具有分别效能高,分析速度快,样品用量少,可进行多组分测量等优点。
Agilent液相色谱仪在石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面应用很广。
它除用于定量和定性分析外，还能测定样品在固定相上的调配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数。
一种对混合气体中各构成分进行分析检测的仪器。
但是由于人员素养样品的性质以及仪器本身等方面的原因,常常显现这样那样的分析故障严重影响了正常的生产分析。
所以把握一种精准、快速的排出Agilent液相色谱仪故障的方法特别紧要。
安捷伦液相色谱仪12601 、如何成为真正的液相高手（1）、确定要珍惜仪器厂商供应的各种培训，由于他们的培训很有针对性，而且很专业。
（2）、要多做，液相是一个比较多而杂的系统，在做样的过程中，总会碰到各种问题，通过本身的大脑解决问题，渐渐积累就会穴道很多东西。
其次要敢于动手，不要总挂念会把仪器弄坏，拆仪器的时候细心一点就好了，记着各个部件的次序，连接方式。
动手次数多了，成功的机会就多了，也就更有信念了。
（3）、要看一些相关理论的书籍，要了解一些关于液相的分别原理，如何优化色谱系统和峰形，能够本身解决一些分别的问题。
这样才是一个液相高手。
假如只是会很娴熟的使用工作站和维护和修理仪器，排出故障，我觉得这只是一个操作高手，而不是一个真正的液相高手。
2、新装82341 GPIB 板，如何与ChemStation 通讯？在 LC ChemStation CD—ROM 中有安装说明，还包括驱动程序安装信息。
请在Windows Explorer 中查看子目录：ManualsInstallationLC Systems。
您在此处可找到《安装手册》，其中包含有关如何安装 GPIB 板以及如何调用驱动程序的渐渐操作说明。
3、为什么进样后在工作站在线图谱上看不到红色开始线？ChemStation 软件有一个“在线图谱”窗口，在此窗口中可显示从所连接的检测器接收到的全部信号。
安捷伦1100液相色谱的维护及故障排除
1．判断仪器脱气机是否正常：打开purge阀，流速设为2ml/min，然后提起过滤头，让体系进一些空气，再放下过滤头，看气泡是否会减少来判断脱气机是否起作用；2．溶剂过滤头不可超声清洗，可用35%硝酸浸泡1小时后再用溶剂清洗；3．EDTA、乙二胺四乙酸等会对液相柱的不朽钢产生腐蚀；四氯化碳与2-异丙醇、四氢呋喃不可混合使用，但可单独使用；4．溶剂的使用：每两天更换或重新过滤溶剂（尤其是水，需要每天更换）；流动相过滤是为了去除微生物，一般水要放在棕色瓶中；5．判断purge阀的滤芯是否需更换：用水作流动相时，流速为5ml/min时，正常泵压应为0bar（若打开purge阀时，泵压超过10bar时需更换滤芯）；6．若用非极性溶剂作流动相，则需更换泵中起密封作用的“黑草帽”（适合反相的材料为石墨+聚四氟乙烯，而适合正相的为），而且必须一对同时更换，否则损坏更快；7．密封垫的冲洗：当流动相中盐的浓度>0.01M时，可减少密封垫的磨损；用1%异丙醇溶液冲洗活塞杆中析出的盐（加异丙醇是为了防止细菌生长），流速设为3-5滴/min；泵开着，洗盐装置也须开着；8．泵头不可用超声清洗（可用乙醇、水清洗）、宝石杆不可超声，石英窗可用超声清洗；9．缓冲盐的通道放在比例阀的下面，只有两相的话，只用一边（盐在下面，有机相在上面）；10．双元泵为泵后混合方式（为高压混合方式，不易进气泡），而四元泵为低压混合方式；11．出口球型阀（outlet ball valve）可用超声清洗；12．双元泵有一个筛网（sieve）可控制低流速；13．流动相使用了缓冲盐，则必为反相柱（不可长时间用水冲），一般可冲20-30min，然后加入有机相（如甲醇），浓度逐步加大，直至100%甲醇；14．反相和正相转换时，一般要做溶剂过渡（最佳为异丙醇），因为粘度大，流速不可设太大，不要超过1ml/min（完全置换原来溶剂所需溶剂体积=体系体积（柱体积+1.5ml）×5）；15．比例阀内漏：抬起有嫌疑的通路，看管内流动相体积是否减少（抬起时同时打开purge 阀）；16．泵压力不正常可能原因：气泡、主动阀故障、出口阀故障、密封垫或柱塞杆磨损，渗漏或堵塞、比例阀故障、传感器故障、使用比例阀混合时盐浓度太高；17．自动进样：旁路状态、主路状态；手动进样：load状态至inject状态（最好满刻度进样，建议吸3倍以上进样体积），小体积进样则以小于1/2进样阀体积为佳；平时进样阀最好保持在inject状态（最右边状态）；18．进样流程：插针——inject状态——load状态——进样（缓慢）——inject状态——拔出针（进样阀后有两根废液管）；19．VWD（可变波长）检测器：检测器后out废液管不可太短，否则流通池容易进气泡，也不可太长，否则易压碎流通池；20．DAD检测器（优势为优化条件方便）：最大波长选择——要选择溶剂没有吸收的位置（避开约20nm）；VWD检测器的灵敏度略高于DAD检测器；滤光片中钬玻璃用于校准波长；若要检测器的灵敏度提高则要开大狭缝（二极管阵列前狭缝默认为4nm）；21．DAD检测器的氘灯可用于VWD检测器，但反之则不行；钨灯、氙灯寿命长，可随开随用，但“氘灯需要预热（10几分钟）（寿命为1000小时），1-2小时不用，不用关，还是开着更好，氘灯放时间长容易衰变”，灯可进行测试；22．测定条件设定：reference wave（流动相中溶剂的吸收）可以不设，梯度洗脱时参考波长要设，否则会导致基线漂移，DAD可选一个样品没吸收的波长作为参考光；band width （VWD设为光谱的半谱带宽度，而DAD检测器则不用设）（此范围内作色谱图可降低噪音，信噪比更好，但信号会降低）；参考波长选择原则：样品没有吸收，但靠近样品最大吸收的位置；参考光波长带宽必须大于或等于测量光波长带宽；DAD选条件时要存所有光谱图（spectrum）；氘灯（190-800nm），但有效范围为190-600nm，钨灯（470-950nm），若用470-800nm时两灯同开则强度加大；23．基线噪音大原因：泵压不稳、有气泡、柱污染24．清洗在线脱气机及比例阀（尤其是长期使用水相或缓冲盐的通路）：先用水冲洗，再用甲醇冲洗，可以打开purge阀，使用5ml/min的流速，也可用IPA清洗：A、Buffer B、MeoH C、Water D、CH3CN 分析：A:B:D=20:25．流动相pH>9.5或<2.3时，进样阀应更换tefzel转子密封，可耐受压：VWD(40bar)，MWD(120bar), FLD(20bar), RID(56bar)；RID,FLD永远是最后一个检测器。
安捷伦液相色谱仪的维护和修理与保养 液相色谱维护和修理保养
安捷伦液相色谱仪的维护和修理与保养液相色谱维护和修理保养安捷伦液相色谱仪的维护和修理与保养1、安捷伦液相色谱仪用不同批号的色谱柱后如何对分析方法进行测试并确认可用此柱？首先，在色谱柱包装盒的外面找到它的批号。
批号的字体比较小，通常在条形码的下面。
批号通常以字母“B”开头，后面是 5 位阿拉伯数字。
例如，下面示例中的色谱柱批号为 B99091、假如找不到包装盒，则查看色谱柱标签上的序列号。
要从序列号来确定批号，请安捷伦科技公司 HPLC色谱柱的。
他们会请公司生产部门来查询批号，同时确定其它哪些批号的色谱柱可用。
获得所需的批号或知道您的批号后，可使用以下步骤进行订购：从安捷伦科技公司。
使用特别的部件号 899999—888, 该号码表示此订单是专用色谱柱。
说明要订购的色谱柱的类型、尺寸和填料粒度大小，包括通用部件号。
指出您希望色谱柱是哪个批号，或者哪个批号的色谱柱不能用。
示例说明: 部件号 899999—888 EclipseXDB—C18 分析色谱柱，4.6mm x 250mm，（963967—902）除了批号为 B99091 和B99079 的专用色谱柱用于方法确认目的的色谱柱2、安捷伦液相色谱仪—如何避开峰拖尾和峰分叉？与色谱柱相关的原因及处理方法1色谱柱污染；处理方法:清洗或更换色谱柱2色谱柱填料有问题；处理方法:反冲色谱柱或更换柱头过滤片3色谱柱中心显现间断；处理方法:更换色谱柱或填充空隙4保护柱失效；处理方法:更换保护柱5样品分布差；处理方法:改进色谱柱进口的设计6与色谱柱无关的原因：柱外体积大、样品过量、流动相组分（添加剂、pH值、缓冲液浓度）更改。
3、什么原因导致安捷伦液相色谱仪显现神秘峰”？与色谱柱相关的原因：1色谱柱污染；处理方法:清洗或更换色谱柱2保护柱失效；处理方法:更换保护柱3与色谱柱无关的原因：流动相溶不纯、样品里有其他成分、系统里有气泡、电路问题。
更多关于安捷伦液相色谱仪与色谱柱的产品相关信息，可访问我公司或致电销售工程师。
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护高效液相色谱仪（HPLC）是一种广泛应用于化学、生物和制药等领域的分析仪器，其高灵敏度和高分辨率使其成为科研和产业界不可或缺的工具。
为了确保HPLC仪器的性能稳定和长期使用，对其进行定期的保养和维护是非常重要的。
本文将从HPLC仪器的常见故障及解决方法、保养细节和维护技巧等方面进行探讨，以期能为HPLC用户提供一些有益的参考。
一、HPLC仪器常见故障及解决方法1. 柱压力异常当HPLC仪器柱压力异常时，可能是因为柱堵塞、柱温度过高或流动相不洁净等原因所致。
解决方法包括检查柱是否需要更换、适当降低柱温度或更换洁净的流动相。
2. 噪声干扰HPLC仪器运行时出现噪声干扰通常是由于流动相中含有气泡或杂质所致。
解决方法是排除气泡或杂质，确保流动相的纯净度。
3. 泵压力不稳定泵压力不稳定可能是由于柱端堵塞、流动相泵气体混入或泵头密封损坏等原因所致。
解决方法包括清洗柱端、检查流动相泵气泡排出系统或更换泵头密封等。
4. 峰形异常在HPLC分析中，峰形异常可能是由于进样管堵塞、进样器污染或柱温度不稳定等原因所致。
解决方法包括清洗进样管、更换进样器或稳定柱温度等。
5. 检测器故障检测器故障可能是由于光源老化、检测器灵敏度不稳定或检测器电路故障等原因所致。
解决方法包括更换光源、重新校准检测器或修复电路故障等。
以上仅为HPLC仪器常见故障及解决方法的一些例子，实际情况可能更为复杂。
在遇到HPLC仪器故障时，用户应及时联系售后服务中心或专业维修人员进行处理，切勿擅自拆卸或修理。
二、HPLC仪器保养细节为了延长HPLC仪器的使用寿命并保持其良好的性能,定期的保养十分必要。
以下是一些常见的HPLC仪器保养细节：1. 定期清洗仪器外壳HPLC仪器外壳上积聚了灰尘和化学物质可能会对仪器性能产生影响，因此定期清洗仪器外壳是非常必要的。
2. 定期更换各种滤芯HPLC仪器中的各种滤芯（如进样器滤芯、保护柱滤芯等）一旦堵塞或老化都会影响仪器性能，因此应定期更换。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
流动相的调节
为了得到较好的分离效果，可以在流动相中加入一些少量的有机 溶剂，如三乙胺来调节峰形变“瘦”，减少拖尾现象。 加入缓冲盐，调节流动相的pH值或离子强度，以改变组分的保留 时间达到分离效果等。 一般情况下，大家如要建立色谱条件，应先去查询《中国药典》 及文献资料，再进行适当的修改。
流动相的处理
过滤：0.45um或更小孔径滤膜 目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色谱柱，尤其是使用无机盐配制 的缓冲液。 注意：不同的试剂分别过滤，过滤后再混合；滤膜的选择，不要混用；要 现用现处理，尤其是水和缓冲液 脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡 气泡对测定的影响： 泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积 柱中气泡使流动相绕流，峰变形 检测器中的气泡产生基线波动
HPLC基本原理和特点
液相色谱仪器部件
实验操作与应用 日常维护 方法学的建立
1
基本原理和特点
基本原理：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定
相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附，分 配，离子吸引，排阻，亲和)的大小，强弱不同，在固定相中 滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。
流动相的选择
甲醇
质子化溶剂 [氢键供给者] 洗脱能力较乙腈弱 粘度较乙腈高 低紫外波长下有吸收
乙腈
非质子化溶剂 [氢键接受者] 洗脱能力较甲醇强 粘度较甲醇低 低紫外波长下透光性好
流动相的选择
常用溶剂的极性及截止波长
溶剂 极性常数 截止波长 水
1.00 170
甲醇
0.95 210
乙醇
0.88 210
异丙醇
0.82 210
乙腈
0.65 190
四氢呋喃
0.57 210
反相液相色谱，若希望出峰时间早，可以增加流动相中有机相的 比例；若希望出峰时间晚，可以增加流动相中水相比例（有机相 一般不低于5%）。
80%甲醇冲系 统基线不平
甲醇的极限波长为210 nm ，因此，检测波长较小时，应该选用乙 腈而非甲醇；样品稀释最好选用流动相，可以避免溶剂峰的干扰。
特点：分离效率高、分析速度快、应用范围广、操作自动化。
HPLC的分类
按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法(NPC)和反相 色谱法(RPC)。 正相色谱法：采用极性固定相（如聚乙二醇、氨基与腈基键 合相）；流动相为相对非极性的疏水性溶剂（如正已烷）， 常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃等以调节组分的保留时间。 常用于分离中等极性和极性较强的化合物。 反相色谱法：一般用非极性固定相（如C18、C8）；流动相 为水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋 喃等与水互溶的有机溶剂，极性物质先出。
柱压应小于10bar，如若过大， 应更换溶剂出口过滤白头
打开排气阀，将流速调至5ml/min，排气5min；待流速降为0，拧紧排气阀。
启动液相色谱仪器的流程
流动相冲洗系统
水相走A、D泵，有机 相走B、C泵，可防止 缓冲盐析出
流动相配制后，先使用过滤装置过滤，然后超声15min，排除气泡干扰。流速 1ml/min，使用流动相冲洗系统至少30min，待基线平稳即可进行下一步操作。
使用80%的甲醇溶液冲洗系统至少30min，流速为1ml/min，待基线平稳，将流 速降为0，即可进行下一步操作。 注意：若流动相中含有离子，先使用10%甲醇冲洗系统至少30min，后使用80% 甲醇冲洗系统。
关闭系统 点击工作站右下角“关闭”按钮，待仪器显示未就绪，关闭1260（联机），关 闭电脑，关闭液相各模块电源。拔掉总电源即结束。
启动液相色谱仪器的流程
开启HPLC系统各个设备的电源
打开泵、自动进样器、检测器电源，打开计算机启动 “1260联机工作站”，待 工作站图形颜色为绿色—表明仪器已就绪。 排气泡 80%甲醇（过滤、超声15min）冲洗系统 使用80%的甲醇溶液冲洗系统至少30min，流速为1ml/min，待基线平稳即可进 行下一步操作。 注意：观察柱压是否稳定，若不稳定出现大幅度柱压下降现象，很有可能是系 统发生漏液，优先排查色谱柱的连接处是否漏液，其次是排气阀处，最后是观 察其他管道连接处；若流动相中含有离子，80%甲醇冲洗系统之后，使用10% 甲醇继续冲洗系统至少30min。否则，会有离子析出，堵塞管路。
高效液相色谱仪组成
输液系统 进样系统 分离系统 检测系统 数据记录处理系统
液相色谱流程图
HPLC色谱柱
数据处理系统
溶剂 自动进样器 流动相
脱气装置
四元泵
样品盘 柱温箱 检测器
溶剂
棕色玻璃瓶会避免藻类的生长。 经常过滤溶剂以免其中微粒永久性阻塞毛细管。
进样测定
具体操作如下：点击“序列”-“序列表”-输入相关信息确定（样品瓶、样品 名称、方法名称-TEST、进样次数、进样量）-“开始序列”。待进样结束后，
进行下一步操作。
注意：在进样前，最好用100%甲醇进行洗针，以防进样针中残留的其它样品 影响实验结果。
启动液相色谱仪器的流 程
80%甲醇冲洗系统
强保留成分不易残留在柱上
缺点：会引起基线漂移 有时重现性差 故需严格控制梯度洗脱的实验条件。
维护流程图
线路过滤器
单向阀 柱塞密封圈 进样器
检测器
吸滤头
日常维护
检查溶剂过滤器 －查看过滤器是否变色 －临时取下过滤器，检查柱前压力是否正常 清洁溶剂过滤器
将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。先用水冲洗残留之溶剂然后将过 滤器放在装有浓硝酸 （35％）的烧杯里浸一小时，不要使用超声波清洗
流动相的保存
有机溶剂流动相： 室温下密封，避光保存 缓冲盐流动相： 当日现配现用：
低温下密封保存，一般不超过3天
防止微生物生长 有机溶剂与水（缓冲盐）混配的流动相： 低温密封保存 防止有机相的挥发
梯度洗脱
梯度洗脱是指在一个分析周期中，按一定的程序连续改变流动相 中溶剂的组成（如溶剂的极性、离子强度、pH值等）和配比，使 样品中的各个组分都能在适宜的条件下得到分离。是分析复杂混 合物特别是分离保留性能相差较大的混合物的极为重要的手段。 优点：改善峰形，提高柱效 缩短分析时间 能等度洗脱绝不 选择梯度洗脱