最新lmna基因突变致家族性扩张型心肌病

IV:10 IV:11 IV:12IV:13 IV:14IV:15
系谱图：先证者为Ⅲ5。该家系共四代，目前存活的共30人， 有27人参与了调查，其中男性14人，女性13人；年龄0.5~72 岁，平均年龄23.5±7.5岁。
临床特点
所有患者均有四肢肌无力和肌萎缩，以肩胛带和骨盆带明 显，病程长者较病程短者萎缩更为明显；所有患者无关节 挛缩，无腓肠肌假性肥大。
显子-内含子交界区设计引物，进行聚合酶链（PCR）扩增。
PCR扩增
反应体系：PCR Buffer3μL、4种dNTP各20 mmol/L、 MgCl2 1.6 mmol/L，上游和下游引物各0.17 μmol/L、Taq DNA聚合酶1.2 U，加ddH20至30μL。
扩增程序：反应条件为：94 ℃预变性3 min； 94 ℃变性 30 s、54℃退火45 s、72 ℃延伸45 s、共35个循环；最 后72 ℃延伸10 min。反应在Geneamp 9700 PCR仪上完 成。
CTnT(ug/L)
0.08
Ⅲ11 Ⅲ15
Ⅳ1
正常值
22
24
343
83
160
118
25
10
56
48
0.44
4Leabharlann Baidu40
0.06
0.1
20
5－40
274
26－306
195
108－252
24
0－24
70
15－65
0.23
0－3.0
0.08
0.01－0.1
表3 超声心动图结果
病人/项目
Ⅲ5
Ⅲ11
Ⅲ15
Ⅳ1
左房直径(mm)
所有成员行心电图、超声心动图检查 肌肉活检 ：4位患者及一个表型正常者 病理学方法：苏木素-伊红染色（HE 染色）、免疫组化
Dystrophin染色
异常基因检测
家系中患者临床特点符合LGMD-1B的表现。 根据分子生物学的研究提示，LGMD-1B与位于1q21
上的核纤层蛋白LaminA/C编码基因突变相关。 以核纤层蛋白LaminA/C作为候选基因作突变的筛选，
Ⅲ11、Ⅲ15及Ⅳ1有心悸
患者 年龄（岁） 肌萎缩 心肌酶 肌钙蛋白T 病理
心电图
超声心动图
Ⅲ5
Ⅲ11
Ⅲ15
43
37
28
是
是
是
无明显异常 无明显异常 无明显异常
正常
正常
正常
Dystrophin( Dystrophin(+) 未做 +)
房颤,
Ⅰ°AVB，房 快速房颤
Ⅲ°AVB， 早
室早
心脏增大 心脏增大
先证者为43岁男性 患者有胸闷、心悸、活动后气促等病史一年余，经心电图
证实为心房颤动并Ⅲ°房室传导阻滞、室性早搏；行心脏 彩超示心脏扩大。 给予安置VVI起搏器。
临床特点
先证者的大姐 （ Ⅲ 2） 和二姐（ Ⅲ 3）均有肌营养 不良病史，均已发生猝死，其中二姐在医院死亡时经 心电图证实为窦性停搏。
测序
程序：PCR产物经ExcolⅠ 和SAP预反应，以去除多余的 引物和dNTP，然后以BigDye按标准程序进行正反双向测 序（98℃2分钟，96℃10秒，50℃5秒，60℃4分钟，30 次循环；4℃恒温保存。）
产物经纯化以清除多余的原料和非特异性产物；最后在 ABI 3100测序仪上进行分析。
lmna基因突变致家族性扩张型 心肌病
前言—FDC的遗传方式
常染色体显性遗传(autosomal dominant，AD)，目前 至少16个基因被发现可引起FDC； 占FDC90％以上
X染色体伴性遗传（X-linked ）：主要见于 DMD/BMD(肌营养不良)；
常染色体隐性遗传(autosomal recessive，AR)：很少 最常见的是编码β-肌球蛋白重链的MYH7基因以及编
码 lamin A/C蛋白的LMNA基因
前言
■ 2005年3月发现一名扩张型心肌病合并心房纤颤及Ⅲ度房室 传导阻滞的患者，其伴有肢带型肌营养不良（LGMD）；
■家族中有多名类似的肌病患者，合并心脏损害， 是一个家族 性扩张型心肌病的家系。
■展开家系调查；并以LMNA基因作为候选基因进行突变的筛 选检测，以阐述其分子遗传学机制。
以发现其遗传规律
材料和方法
标本样品：家系所有成员抽取外周血置于EDTA抗凝管5ml×2管， 混匀后置于-80℃冰箱中保存。
正常对照取自中山大学遗传学教研室采集的正常志愿者血样本。 外周血基因组DNA的提取：采用QIAamp DNA kit抽提DNA，按照
试剂盒附带的说明书进行。 LMNA基因的聚合酶链扩增：对LMNA基因的全部12个外显子、外
未见异常
Ⅳ1 22 是
无明显异常
正常
Dystrophin (弱+)
窦性心动 过速
未见异常
表1 患者临床情况总结
表2 患者心肌酶及肌钙蛋白T结果
病人/项目
Ⅲ5
AST（U/L）
28
CK （U/L）
322
LDH （U/L） 175
CK-MB （U/L） 22
LDH-1 （U/L） 59
Hs-CRP （mg/L） 1.04
Ⅲ15：快速房颤
Ⅳ1：窦性心动过速
正常对照HE染色（×200）
肌营养不良HE染色（×200）, 可见肌肉萎缩、肌裂、核内移
正常对照Dystrophin免疫组化染 色（＋）（×200）
资料与方法：
该家系共30人 4代共9名患者，目前存活的患者共5人，病史在
15~38年间。 临床表现：缓慢进展的四肢无力、肌肉萎缩、肌张力
减退，以肩带及盆带部明显，走路呈“鸭步”，无腓 肠肌假性肥大。
实验方法
血清：心肌酶（谷草转氨酶、肌酸磷酸激酶、肌酸磷酸激 酶-同功酶MB、乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶-同功酶1）、C反 应蛋白及肌钙蛋白T。
38
33
29
24
室间隔厚度
9.9
7.0
7.0
7.0
(mm)
左室后壁厚度
9.3
7.6
7.6
6.5
(mm)
左室舒张末径
63.4
59.0
42.7
41.6
(mm)
右房径(mm)
45
31
26
26
右室径(mm)
41
35
24
25
射血分数％
45
55
68
74
左图：Ⅲ5：房颤、起搏心律、室性早搏
右图：Ⅲ11：Ⅰ度AVB
结果
I
I:1
I:2
II
II:1
II:2
II:3
III
III:1 III:2 III:3 III:4 III:5 III:6 III:7 III:8 III:9 III:10 III:11 III:12 III:13 III:14 III:15
IV
IV:1 IV:2 IV:3
IV:4
?
IV:5 IV:6 IV:7 IV:8 IV:9