牛奶中微生物的检测
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制生牛奶中的微生物污染是一个常见的问题，主要包括细菌、真菌、酵母和寄生虫等微生物。
这些微生物会在奶牛乳汁采集、加工和贮存过程中引入牛奶中，给牛奶的品质和安全性带来潜在风险。
对生牛奶中的微生物进行检测和控制至关重要。
1. 细菌计数细菌计数是评价生牛奶卫生质量的重要指标。
常用的方法是平板计数法，即将取样的牛奶平铺在含有营养物质的琼脂平板上，培养一段时间后，通过计数菌落的数量来估算牛奶中的细菌数量。
2. 病原菌检测生牛奶中可能存在各种病原菌，如沙门氏菌、变形虫等。
常用的方法是聚合酶链反应（PCR）和酶联免疫吸附测定法（ELISA），通过检测目标基因和蛋白质来判断牛奶中是否存在病原菌的污染。
3. 酵母和真菌检测生牛奶中的酵母和真菌可能对牛奶品质造成影响，特别是发酵牛奶的生产。
常用的方法是培养法和PCR法，通过培养和检测特定基因来鉴定和计数酵母和真菌。
4. 蛋白质和乳酸菌菌种检测蛋白质和乳酸菌是生牛奶中的重要组分，其数量和菌种多样性直接影响乳品的质量。
常用的方法是电泳和PCR，通过分析蛋白质和菌种的特征来判断牛奶的质量。
为了控制生牛奶中微生物的污染，可以采取以下措施：1. 严格控制奶牛的健康状况，定期进行兽医检查和疫苗接种，防止病原菌的传播。
2. 保持牛奶采集和加工设备的清洁和消毒，避免微生物的交叉污染。
3. 控制牛奶的温度和pH值，不利于微生物的生长和繁殖。
4. 采用低温贮存和瞬时高温消毒等技术，杀灭牛奶中的微生物。
5. 引入先进的微生物检测技术，及时发现和处理牛奶中的微生物污染。
生牛奶中微生物的检测和控制是确保牛奶品质和安全的重要环节。
通过采用适当的检测方法和控制措施，可以有效预防和消除牛奶中的微生物污染，保证牛奶产品的质量和安全性。
牛奶中微生物的检测
牛奶中微生物的检测一．目的和原理本试验采用标准平板计菌法及显微镜下直接计菌法对不同品质的牛奶中细菌总数进行检测。
与此同时，还采用选择性很强的鉴别培养基去氧胆酸盐琼脂平板对牛奶中可能存在的粪便污染指示菌大肠菌群进行检测。
这种培养基可抑制绝大多数非大肠菌群细菌的生长，大肠菌群细菌还可发酵培养基中的乳糖产酸，在培养基内指示剂的作用下菌落呈红色，而不发酵乳糖的其它细菌则呈白色，因此很容易加以鉴别并作计数。
牛奶中的微生物，在贮存过程中可不断增殖，同时降低了溶解氧浓度，使氧化还原电位大大下降。
我们可用美蓝还原酶试验来检测这一变化，当牛奶因微生物大量增殖而处于厌氧还原环境时，氧化还原指示剂美蓝即被脱色。
通过测定牛奶样品中美蓝被还原脱色的速度，即可得知所测牛奶的质量。
二、材料与器皿(一)培养基肉膏蛋白胨琼脂培养基去氧胆酸盐琼脂培养基培养基配制1.去氧胆酸盐琼脂培养基蛋白胨10.0g 乳糖10.0g 去氧胆酸钠1.0gNaCl 5.0g K2HP04 2.0g 柠檬酸铁1.0g柠檬酸钠1.0 g 中性红(1％溶液3ml) 0.03g琼脂20.0g pH 7.32.肉膏蛋白胨琼脂培养基牛肉膏0.3g 蛋白胨1g 氯化钠0.5g琼脂2g 自来水100mLpH 7.0～7.2 灭菌1.05kg/cm2，22min(二)不同质量的生乳各10ml，(三)显微镜、试管架、水浴锅、铁丝架，(四)灭菌移液管、灭菌9ml稀释水试管、载玻片、血球计数移液管、载玻片、无菌带塞试管，(五)试剂-二甲苯、95％酒精、1：25，000美蓝溶液。
三、方法与步骤(一)牛奶巴斯德消毒法取生乳5ml装试管内，放在61.7℃的水浴锅内加热30分钟，水平面必须高于牛奶的平面。
注意处理时间必须准确，水浴温度要始终一致，并不时摇动试管，使管内牛奶均匀受热。
(二)标准平板计菌法1、取未经消毒的生奶，充分摇混，使样品呈均匀状态。
以十倍稀释法，将生奶稀释成10-1、10-2、lO-3、lO-4、10-5系列，2、从最大稀释度开始，各取lmll0-3、10-4、10-5的生奶稀释液，分别放入已标记好的培养皿内：将肉膏蛋白胨琼脂培养基融化，待冷至45℃左右时，在火焰旁倒入培养皿内，迅速盖好，放在桌面上轻轻摇转，使稀释的样品与培养基均匀混合，待平板冷却固化后，倒置，于30℃培养2天。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制生牛奶是一种营养丰富的食品，但同时也是微生物生长的理想环境。
为了保证牛奶的安全性和质量，需要对其进行微生物检测和控制。
本文将介绍生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制措施。
1. 菌落总数菌落总数是衡量生牛奶卫生状况的重要指标之一。
它反映了牛奶中的微生物总数，包括细菌、霉菌、酵母等。
菌落总数过高会导致牛奶变质，影响其口感和营养价值。
2. 大肠杆菌大肠杆菌是一种常见的致病菌，其存在表明牛奶可能被粪便污染。
大肠杆菌污染的牛奶会对人体健康造成严重威胁，引起肠胃炎、腹泻等疾病。
3. 乳酸菌乳酸菌是一种益生菌，它能够促进牛奶的发酵和保鲜，对人体有益。
如果乳酸菌数量过高，就会导致牛奶酸败。
1. 菌落总数检测方法菌落总数的检测方法主要采用平板计数法。
将生牛奶样品分别定量地接种在富营养培养基上，培养一定时间后，根据细菌、霉菌、酵母等生长形态的不同，进行计数。
根据不同国家和地区的标准，菌落总数的允许值有所不同。
2. 大肠杆菌检测方法大肠杆菌的检测方法主要采用MPN法和PCR法。
MPN法是通过将样品接种在大肠杆菌培养基中，根据菌落的数量进行估算。
PCR法则是利用多聚酶链反应技术，通过扩增大肠杆菌的DNA片段来检测其存在。
1. 规范生产环节生产环节是影响生牛奶微生物质量的重要因素。
需要在奶源管理、生产操作、设备清洁等方面严格按照规范操作，确保牛奶不受外界污染。
2. 严格控制储存条件牛奶的存储条件对微生物的生长有直接影响。
需要严格控制牛奶的温度、湿度等条件，防止微生物的滋生。
及时冷藏和避光是减少微生物污染的有效措施。
3. 采用适当的加工技术适当的加工技术能够有效地控制牛奶中微生物的数量。
过高温短时加热和超高温灭菌能够有效地杀灭绝大部分微生物。
也可以采用膜分离、超声波杀菌等新技术来控制微生物的数量。
4. 进行定期的微生物检测定期的微生物检测是保障生牛奶质量的重要手段。
通过检测菌落总数、大肠杆菌、乳酸菌等指标，能够及时了解牛奶中微生物的状况，从而及时采取控制措施，确保牛奶的质量和安全性。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制生牛奶是一种重要的食品，但同时也是微生物滋生的理想培养基。
微生物对于生牛奶的质量和安全性具有重要影响。
准确检测和控制生牛奶中的微生物是保证产品质量和食品安全的关键。
生牛奶中的主要微生物包括细菌、酵母菌和霉菌。
常见的检测方法可以分为传统的培养方法和现代的分子生物学方法。
传统的培养方法主要包括总菌数、大肠菌群、乳酸菌和耐热菌的检测。
总菌数是指生牛奶中的所有微生物的数量，通常用表面计数法和涂布计数法来进行测定。
表面计数法是将生牛奶在培养基上均匀涂布，然后数出生长的菌落数量。
涂布计数法是将生牛奶连续稀释后接种在琼脂培养基上，然后数出生长的菌落数量。
通过总菌数的测定可以初步了解生牛奶中的微生物负荷情况。
大肠菌群是使人类和动物发生肠道疾病的致病菌，也是衡量生牛奶卫生质量的重要指标。
常用的检测方法包括膜过滤法和MPN法。
膜过滤法是将生牛奶经过膜过滤后将膜放置在含有大肠菌群生长所需培养基的平板上，然后数出生长的菌落数量。
MPN法是通过稀释生牛奶后接种在含有大肠菌群生长所需培养基的管中，根据管内菌落的形成情况推测出大肠菌群的数量。
乳酸菌是对人体有益的菌群，对于生牛奶的质量和口感也有重要影响。
常用的检测方法包括平板计数法和数叶片法。
平板计数法是将生牛奶加入乳酸菌培养基中，然后数出生长的菌落数量。
数叶片法是将生牛奶加入乳酸菌培养基上的叶片上，然后数出叶片上的菌落数量。
耐热菌包括产芽孢革兰阳性菌和产芽孢革兰阴性菌，它们能够在高温下存活，对产品的热处理和保质期有重要影响。
耐热菌的检测方法主要包括涂布计数法和过滤培养基法。
除了传统的培养方法，现代的分子生物学方法也被广泛应用于生牛奶中微生物的检测。
这些方法包括聚合酶链式反应（PCR）、实时荧光定量PCR、基因芯片和高通量测序等。
这些方法具有高灵敏度、高特异性和高通量的优势，可以准确快速地检测和鉴定生牛奶中的微生物。
为了控制生牛奶中的微生物，可以采取一系列措施。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制摘要：生牛奶是一种易受微生物污染的食品，其中常见的细菌包括大肠埃希氏菌、沙门氏菌、乳酸菌等。
为了确保生牛奶的质量和安全，需要进行微生物检测并采取相应的控制措施。
本文将介绍几种常见的生牛奶微生物检测方法，以及控制生牛奶微生物污染的有效措施。
1．总生菌数测定法总生菌数是指生牛奶中所有的细菌数量，是一种评估生牛奶卫生质量的重要指标。
常用的总生菌数测定方法有平板计数法和膜过滤法。
平板计数法是将适量的生牛奶均匀涂布在琼脂平板上，经过一定的培养时间后，通过计数菌落形成单位面积的数量来估计总生菌数。
膜过滤法是将一定体积的生牛奶过滤到预先灭菌的膜上，然后将膜放置在富含营养物的琼脂平板上进行培养，最后通过染色或直接观察菌落数量来估计总生菌数。
2．大肠杆菌检测大肠杆菌是常见的肠道致病菌，其存在于生牛奶中可能表明有肠道污染。
一种常用的大肠杆菌检测方法是利用免疫学技术，例如PCR方法检测其特定基因的存在。
另一种方法是通过大肠杆菌培养基进行传统的培养和计数。
3．沙门氏菌检测沙门氏菌是常见的食源性致病菌，其存在于生牛奶中可能导致食物中毒。
沙门氏菌检测方法包括传统的培养和分离方法，以及PCR等分子生物学技术。
传统的培养方法是将生牛奶进行适当稀释，然后接种到沙门氏菌选择性培养基上进行培养，最后通过染色和形态学特点来鉴定沙门氏菌的存在。
PCR技术可以检测沙门氏菌的特定基因片段，从而达到高度准确和快速检测的目的。
二、控制生牛奶微生物污染的措施1．保持良好的生产卫生生产过程中要保持良好的卫生，包括对设备、材料、工作人员进行消毒和清洗，确保生产环境无细菌污染。
要对员工进行培训，掌握正确的操作技能和卫生意识。
2．采用高温短时间灭菌技术高温短时间灭菌技术可以有效地杀死细菌，同时尽量保留牛奶的营养成分和风味。
该技术一般将生牛奶在超高温下加热至70-90℃，然后迅速冷却，以达到灭菌的目的。
3．冷链运输和储存生牛奶在运输和储存过程中要注意冷链，保持低温，以减少细菌繁殖的机会。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制生牛奶是一种非常重要的食品，由于其营养丰富、易为人体消化吸收，因此广受人们喜爱。
但是，牛奶中可能含有多种微生物，包括细菌、真菌和病毒等，它们可能会对人体造成危害，因此生牛奶的微生物检测和控制显得相当重要。
本文将介绍生牛奶中的主要微生物检测方法以及其控制措施。
（一）细菌1、菌落计数方法：菌落计数是一种通过计算奶样中的微生物数量来判断其质量状况的方法。
这个方法能够检测出微生物的总数，包括有益菌和有害菌。
2、大肠菌群计数方法：大肠菌群计数是用来检测牛奶中大肠杆菌的数量的一种方法。
这种细菌是肠道中的微生物，如果过多存在于牛奶中，可能会对人体造成危害。
3、耐热菌计数方法：耐热菌是能够在高温条件下生存和繁殖的一种细菌，它们的存在表明牛奶可能在生产过程中没有得到很好的加热处理。
（二）真菌2、霉菌计数方法：霉菌可以导致牛奶变质和产生有毒物质。
检测霉菌数量的方法可以帮助鉴定牛奶是否存在霉菌。
（三）病毒1、脂质包裹病毒计数方法：这个方法主要用于检测牛奶中的乳病毒（BLV）和牛乳腺瘤病毒（BMTV）等脂质包裹病毒。
这些病毒在牛奶中的浓度非常低，需要通过高灵敏度的检测方法才能检测出来。
为了控制生牛奶中的微生物，可以采取以下措施：1、在初始阶段对牛奶进行检测：在牛奶生成过程中，对其进行检测并及时排除有害微生物，对于控制后续污染是十分必要的。
2、制定卫生措施：加强动物的身体卫生，改善其环境卫生和营养结构，以减少动物身上和生产环境中的病原体数量。
3、正确处理生产过程中的污染源：从奶罐到机器设备，需要严格地控制生产过程中的污染源，比如定期清洗、消毒，增加过滤层等。
4、保证加热处理：在制作过程中对牛奶进行加热处理，既可以减少胃肠道病原菌的数量，也有助于阻断乳类嗜酸性细菌的生长。
综上所述，生牛奶中的微生物检测和控制对于防止食品安全问题具有非常重要的意义。
通过对牛奶中不同微生物的检测和控制措施的选择，可以确保生产出营养均衡、卫生安全的优质牛奶，保障人民的身体健康。
牛奶微生物检测标准我国乳制品的标准
牛奶微生物检测标准我国乳制品的标准
在中国，牛奶微生物检测的标准主要参考国家标准《食品安全国家标准牛奶及乳制品微生物检验方法》（GB 4789.5-2013）以及国家标准《食品安全国家标准牛奶及乳制品微生物限量》（GB 2715-2016）。
《食品安全国家标准牛奶及乳制品微生物检验方法》（GB 4789.5-2013）规定了牛奶及乳制品微生物检验的方法和程序，包括菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、霉菌和酵母菌等指标的检测方法。
《食品安全国家标准牛奶及乳制品微生物限量》（GB 2715-2016）规定了牛奶及乳制品中各种微生物的限量要求，以确保产品的卫生安全。
根据该标准，牛奶及乳制品中的各种微生物的限量要求如下：
1. 菌落总数：不超过1×10^5个/ml（牛奶），不超过1×10^6个/g（乳制品）；
2. 大肠菌群：不得检出；
3. 金黄色葡萄球菌：不得检出；
4. 沙门氏菌：不得检出；
5. 霉菌和酵母菌：不超过1×10^3个/ml（牛奶），不超过1×10^4个/g（乳制品）。
需要注意的是，这些标准只是基本要求，实际生产过程中，企业可以根据自身情况制定更为严格的内部标准，以确保产品质量和安全。
同时，不同地区和不同产品可能还有其他特定的标准和要求，所以在具体情况下，还需要参考相关地方性和行业性标准。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制随着饮食卫生和食品危害事故的不断增多，越来越多的消费者开始关注食品安全问题，特别是对于生牛奶这种易于滋生微生物的食品而言，消费者对其安全性更加关注。
为了确保生牛奶的安全性，需要对其中的微生物进行检测与控制。
生牛奶中的主要微生物包括乳酸菌、酵母菌、黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。
针对这些微生物的检测方法主要有以下几种：1.细菌计数法细菌计数法是检测生牛奶中微生物数量的常见方法之一。
其基本思路是通过对样品进行稀释，然后在特定环境下进行培养，最后根据培养出的菌落数量进行逆算，从而得出每毫升奶中的微生物数量。
这种方法可以快速、准确地检测出生牛奶中的微生物，并且操作简单。
2.酸度测定法酸度测定法是通过测定生牛奶中的酸度来判断其中是否存在微生物污染的方法。
由于微生物的生长会导致酸度的变化，因此当酸度超过一定程度时，就可以判断奶中存在微生物污染。
这种方法可以快速、简单地检测出是否存在微生物污染的问题。
3.快速检测法快速检测法是指利用现代生物技术手段，通过对生牛奶中微生物的DNA、RNA等进行检测，从而快速、敏感地判断奶中是否存在微生物污染。
这种方法相对于传统的培养法，不仅可以极大缩短检测时间，而且具有更高的准确度和敏感度，因此被广泛应用于生牛奶的微生物检测中。
1.在生产过程中加强卫生管理生产前要对生产场地、设备、人员等进行消毒，确保生产环境的卫生。
加强工人的卫生培训，建立健全的卫生管理制度，确保生产过程中的卫生与质量。
2.严格执行标准加工流程生产生牛奶时要严格执行标准的加工流程，确保生产过程中温度、时间、pH值等要素的稳定控制，避免微生物滋生与繁殖。
3.采用合适的保鲜方式生牛奶的保鲜方式也直接影响其微生物危害的程度。
采用低温冷藏或杀菌保鲜方法可以有效地限制微生物滋生与繁殖，从而保证其安全性。
综上所述，生牛奶中的微生物检测与控制是保证其安全性的关键环节，需要综合运用多种检测方法与控制措施，从而确保生产出的生牛奶符合消费者的健康需求。
生牛奶中的菌落总数的荧光定量法检测
生牛奶中的菌落总数的荧光定量法检测一、背景介绍生牛奶是一种非常受欢迎的饮品，有着丰富的营养价值。
然而，由于在生产、存储、运输等过程中存在许多微生物污染的风险，因此对牛奶中微生物的检测是非常必要的。
菌落总数是指在一定条件下，培养基上能够生长并形成菌落的微生物总数，是一种常见的检测指标。
传统的检测方法需要使用平板计数法，需要时间和技术精度较高，很容易出现误判，因此需要研究更加准确、快捷的方法。
二、荧光定量法的原理及优势荧光定量法是近年来新兴的微生物检测方法，其原理是利用微生物的代谢产物或菌落本身在一定条件下发出的荧光信号，通过荧光定量仪进行快速、准确的检测。
与传统的平板计数法相比，荧光定量法具有以下优势：（1）快速。
荧光定量法仅需要20-30分钟，而平板计数法需要72小时。
（2）准确。
荧光定量法利用微生物的代谢产物或菌落本身在一定条件下发出的荧光信号进行检测，不会受到其他微生物的影响，避免了平板计数法中可能出现的人为误判。
（3）自动化程度高。
荧光定量法需要使用荧光定量仪进行检测，仪器自带分析软件，可以自动计算并生成报告。
因此，荧光定量法成为了当前生牛奶中微生物检测领域的研究热点。
三、荧光定量法在生牛奶中的应用荧光定量法在生牛奶中的应用是通过检测生牛奶中菌落总数来进行的。
常见的操作步骤如下：（1）取样。
从生牛奶样品中取出一定量的样品。
（2）培养。
将取出的样品加入适量的培养基中，在一定条件下（如温度、湿度、氧气含量等）孵育一定时间，使微生物形成菌落。
（3）荧光染色。
在孵育过程中，将样品中的微生物代谢产物荧光染色。
（4）荧光定量。
将荧光染色后的样品放入荧光定量仪中，将微生物发出的荧光信号进行检测和定量。
（5）结果分析。
通过荧光定量仪自带的分析软件，计算出生牛奶中微生物的数量，并生成检测报告。
四、总结荧光定量法是一种快速、准确、自动化程度高的微生物检测方法，在生牛奶中的应用具有重要的意义。
通过荧光定量法，可以准确地检测生牛奶中的微生物数目，为生鲜奶供应链的质量监管提供技术支持。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶是人们日常生活中常见的饮品之一，其主要营养成分包括蛋白质、脂肪、乳糖、无机盐等。
生牛奶可能会受到微生物的污染，其中一些微生物可能会对人体健康产生不良
影响。
为了确保生牛奶的安全和质量，需要进行主要微生物的检测及其控制。
生牛奶中的主要微生物包括菌落总数、大肠杆菌群、乳酸菌和酵母菌等。
下面将介绍
这些微生物的检测方法及其控制措施。
1. 菌落总数的检测方法及控制措施：
菌落总数是指生牛奶中能够生长形成菌落的微生物数量，是评价生牛奶卫生质量的重
要指标之一。
常用的菌落总数检测方法包括平板计数法和膜过滤法。
检测菌落总数的控制
措施主要包括牧场卫生管理、奶牛健康管理和以低温储藏等。
2. 大肠杆菌群的检测方法及控制措施：
大肠杆菌群是指属于大肠杆菌科的细菌，其存在于生牛奶中可能会导致食物中毒。
常
用的大肠杆菌群检测方法包括表面计数法和MPN法。
检测大肠杆菌群的控制措施主要包括
对奶源的严格筛选、牧场卫生管理和生产工艺的严格控制等。
3. 乳酸菌的检测方法及控制措施：
乳酸菌是生牛奶中的一类有益菌，能够产生乳酸和其他有益物质，对人体具有很多益处。
常用的乳酸菌检测方法包括平板计数法和MPN法。
控制乳酸菌的方法主要包括对发酵
工艺的控制和乳酸菌的添加等。
对生牛奶中的主要微生物进行检测及其控制是确保生牛奶安全和质量的重要措施。
只
有通过科学严格的检测和控制，才能保障生牛奶的卫生质量，为人们提供安全可靠的营养
饮品。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制生牛奶是一种重要的食品，其内含有丰富的营养物质，如蛋白质、脂肪、维生素和矿物质等。
由于牛奶为富含营养的生物性食品，容易受到微生物的污染，从而导致牛奶质量下降，甚至引发食物中毒。
生牛奶的微生物检测方法及其控制是非常重要的。
生牛奶中主要存在的微生物有细菌、真菌、酵母、病毒等。
这些微生物可能会引起牛奶腐败、变质，同时也对人体健康造成威胁。
对生牛奶中的微生物进行检测和控制是保证其质量安全和卫生的重要环节。
生牛奶微生物检测的方法有多种，下面将介绍几种常见的方法。
第一种是采样分析法。
采样分析法是最常用的牛奶微生物检测方法之一，通过采集生牛奶样品，将样品送到实验室进行分析。
分析方法包括总菌落数、耐热菌数、大肠菌群、产酸菌、霉菌和酵母菌等指标。
这些指标可以反映出牛奶中各类微生物污染的程度。
第二种是培养法。
培养法是通过培养微生物在营养基上生长并形成可见的菌落来进行检测。
培养法可以检测出生牛奶中的细菌、真菌和酵母等微生物。
典型的培养基有普通琼脂培养基、选择性琼脂培养基和富营养琼脂培养基等。
培养法可以对微生物进行快速检测，但检测结果需要一定的时间。
第三种是PCR法。
PCR法是通过引物对微生物基因进行特异性扩增来检测微生物的存在。
PCR法可以对微生物进行快速、高灵敏度和高特异性的检测，而且不需要对微生物进行培养。
PCR法在生牛奶微生物检测中已经得到广泛应用，可以检测出少量的微生物污染。
生牛奶微生物污染的控制主要包括以下几个方面。
第一，牧场卫生。
牧场要加强环境卫生管理，保持牛舍、采奶设备和牧场周围的卫生清洁，控制多种病原微生物的扩散。
第二，牛奶采集和运输的卫生管理。
在采集牛奶和运输过程中，要严格控制交叉污染，采用合适的包装材料和卫生措施，确保牛奶的卫生质量。
牛奶的处理和贮存。
在牛奶的处理和贮存过程中，要控制温度，避免细菌的繁殖和生长。
加强对牛奶的卫生监控，定期检测微生物指标，及时发现和处理问题。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制生牛奶是人们日常饮食中常见的一种饮品，其富含丰富的营养成分，具有很高的营养价值。
生牛奶中可能含有各种微生物，包括细菌、酵母菌和霉菌等。
这些微生物如果得不到有效控制，可能会对牛奶的品质和安全造成影响。
对生牛奶中的主要微生物进行检测，并采取相应的控制措施，对于确保生牛奶的品质和安全至关重要。
一、生牛奶中的主要微生物1. 细菌生牛奶中的主要细菌包括乳酸菌、致病菌和条件致病菌等。
乳酸菌是一类对牛奶具有益处的细菌，能够促进牛奶酸奶发酵，提高牛奶的口感和营养价值。
如果牛奶中的乳酸菌数量过多，就会导致牛奶变酸变质。
如果牛奶中存在致病菌，如沙门氏菌、大肠杆菌等，就会对消费者的健康构成威胁。
2.酵母菌酵母菌是一类单细胞真菌，它会在牛奶中发酵产生乳酸，改变牛奶的口感和气味。
适量的酵母菌对牛奶的品质有益，但是如果酵母菌数量过多，就会导致牛奶变酸变质。
3. 霉菌霉菌是一类真菌，它会在牛奶中产生霉菌毒素，对人体健康造成威胁。
控制牛奶中霉菌的数量对保障牛奶品质和消费者的健康非常重要。
（1）培养法培养法是一种常用的细菌检测方法，它利用培养基将样品中的细菌培养出来，然后通过观察菌落的形态和计数来确定细菌的数量。
这种方法简单易行，成本低廉，但需要较长的培养时间。
（2）PCR法PCR法是一种分子生物学技术，能够在较短的时间内准确检测样品中的细菌DNA，具有高灵敏度和高特异性。
PCR法已经被广泛应用于生牛奶中细菌的检测。
2. 酵母菌和霉菌检测方法酵母菌和霉菌的检测方法主要包括显微镜法、培养法和生物传感技术。
显微镜法主要用于观察酵母菌和霉菌的形态特征，培养法则是培养样品中的酵母菌和霉菌，生物传感技术则是利用特定的生物传感器检测样品中的酵母菌和霉菌数量。
1. 严格控制原料质量生牛奶的微生物污染主要来自生产环节和外界环境，严格控制原料质量是控制微生物污染的关键。
要确保牛奶原料的新鲜度和卫生安全，避免微生物的污染。
乳制品测定实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握乳制品中常见微生物的检测方法。
2. 了解PCR技术在微生物检测中的应用。
3. 提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理本实验采用PCR技术检测乳制品中的沙门氏菌。
PCR（聚合酶链反应）是一种在体外条件下，模拟DNA复制过程的技术，通过扩增特定的DNA片段，实现对目标微生物的检测。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 乳制品样品- 沙门氏菌DNA提取试剂盒- PCR试剂- DNA模板2. 实验仪器：- PCR仪- 紫外可见分光光度计- 电泳仪- 凝胶成像系统四、实验方法1. 样品处理：- 取适量乳制品样品，加入无菌生理盐水，振荡混匀。
- 重复以上步骤，进行10倍梯度稀释。
2. DNA提取：- 按照试剂盒说明书提取乳制品样品中的DNA。
3. PCR反应：- 设计针对沙门氏菌特异性基因的引物。
- 将提取的DNA模板与PCR试剂混合，进行PCR反应。
4. 电泳检测：- 将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳。
- 观察电泳结果，分析目标微生物的存在情况。
五、实验结果与分析1. DNA提取：- 成功提取出乳制品样品中的DNA。
2. PCR反应：- 扩增出目标基因片段，大小约为500bp。
3. 电泳检测：- 在琼脂糖凝胶上观察到目标基因片段，与阳性对照一致。
六、实验结论本实验通过PCR技术成功检测出乳制品中的沙门氏菌。
结果表明，该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点，适用于乳制品中沙门氏菌的检测。
七、实验讨论1. 本实验采用PCR技术检测乳制品中的沙门氏菌，具有以下优点：- 灵敏度高：可检测到极低浓度的目标微生物。
- 特异性强：针对特定基因序列进行扩增，避免了假阳性的产生。
- 操作简便：实验步骤简单，易于掌握。
2. 实验过程中，需要注意以下几点：- 严格无菌操作，避免污染。
- 控制PCR反应条件，确保扩增效果。
- 电泳结果分析时，应结合阳性对照和阴性对照进行判断。
3. 未来研究方向：- 优化PCR反应条件，提高检测灵敏度。
牛奶国标微生物检验报告
牛奶国标微生物检验报告牛奶中微生物含量的国家标准与检测方案2000年,中国乳制品工业协会向联合国粮农组织建议,经征求其他国家的意见,联合国粮农组织倡导将每年的6月1日定为“世界牛奶日”。
因为含有丰富的优质蛋白和钙,牛奶已经被中国膳食指南推荐为每日营养来源。
新冠肺炎疫情期间,国家卫健委发布的《新型冠状病毒感染的肺炎防治营养膳食指导》中也建议一般人群食用奶及奶制品。
目前,我们市场上在售的牛奶主要包括四类:巴氏杀菌乳(鲜牛奶)、灭菌乳(纯牛奶)、发酵乳(酸乳、风味酸乳)、调制乳。
巴氏杀菌乳(鲜牛奶),是仅以生牛(羊)乳为原料,经巴氏杀菌等工序制得的液体产品。
灭菌乳(纯牛奶)分为超高温灭菌乳和保持灭菌乳。
超高温灭菌乳指以生牛乳为原料,添加或不添加复原乳,在连续流动的状态下,加热到至少132℃并保持很短时间(一般3-4秒)的灭菌,再经无菌灌装等工序制成的液体产品。
保持灭菌乳指以生牛乳为原料,添加或不添加复原乳,无论是否经过预热处理,在灌装并密封之后经灭菌等工序制成的液体产品。
发酵乳可分为酸乳及风味酸乳,指以生牛(羊)乳或乳粉为原料,经杀菌、发酵后制成的 pH 值降低的产品。
调制乳是以不低于80%的生牛(羊)乳或复原乳为主要原料,添加其他原料或食品添加剂或营养强化剂,采用适当的杀菌或灭菌等工艺制成的液体产品。
牛奶中微生物的含量是评价牛奶质量的一个重要指标。
如果乳品中微生物含量高,其中的致病菌会导致消费者中毒,因此需要对牛奶中的微生物进行检测。
常见的检测项目有沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠菌群等。
《GB 19645-2010 食品安全国家标准巴氏杀菌乳》《GB 19302-2010 食品安全国家标准发酵乳》《GB 25191-2010 食品安全国家标准调制乳》不同种类的奶执行的国家标准不同,具体的检测项目也有差异,但检测项目的检验方法均参照GB 4789中的相关标准参照执行,如沙门氏菌的检验方法为GB 4789.4,乳酸菌数的检验方法为GB 4789.35。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制生牛奶是人们日常饮食中常见的一种饮品，它不仅富含丰富的营养物质，还有益于人体健康。
生牛奶若受到微生物的污染，不仅会影响其品质和口感，甚至可能对人体健康造成危害。
检测和控制生牛奶中的主要微生物是非常重要的。
本文将介绍生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制措施。
生牛奶中的主要微生物通常包括细菌、酵母菌和霉菌。
这些微生物在一定程度上可以影响牛奶的新鲜度和品质，同时也会对人体健康构成一定的威胁。
通过科学的检测方法和控制措施来保证生牛奶的品质和安全非常重要。
我们来介绍一下生牛奶中细菌的检测方法及控制措施。
常见的细菌检测方法包括菌落计数、共生菌检测、大肠杆菌检测等。
菌落计数是通过将牛奶样品分装到琼脂平板上，培养出菌落，然后统计菌落数量来评估样品中的细菌总数。
共生菌检测则是针对特定的病原菌进行检测，如金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等。
而大肠杆菌检测则是主要用于评估牛奶样品中是否受到了粪便污染。
一旦检测结果显示细菌超标，就需要立即采取相应的控制措施，如对生产环境进行消毒、加强员工卫生意识培训等。
生牛奶中酵母菌和霉菌的检测方法及控制措施也是非常重要的。
酵母菌和霉菌的检测方法通常包括菌落计数、种类鉴定等。
菌落计数用于评估样品中酵母菌和霉菌的总数，而种类鉴定则是针对特定的酵母菌和霉菌种类进行鉴定。
一旦检测结果显示酵母菌和霉菌超标，就需要采取相应的控制措施，如调整存储温度、湿度等环境条件，及时清洁和消毒设备等。
除了对生牛奶进行微生物检测外，采取一些控制措施也是非常重要的。
对生产环境进行定期的清洁和消毒是非常重要的，这可以有效地减少微生物的传播和污染。
加强员工的卫生意识培训也是必不可少的，只有在员工具有良好的卫生习惯的情况下，才能有效地控制微生物对生牛奶的污染。
对于生产设备和包装材料的选择也是非常重要的，要选择符合卫生标准的设备和材料，以减少微生物污染的可能。
对生牛奶中的主要微生物进行检测和控制是非常重要的。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制生牛奶是一种常见的乳制品，用于饮用和制作其他乳制品。
因为它是动物来源的食品，所以可能存在致病微生物，如大肠杆菌、沙门氏菌和脑膜炎球菌等。
为了确保生牛奶的安全性和质量，需要对其中的微生物进行检测和控制。
1. 总菌落计数（TTC）：这是一种常用的质量参数，用于评估牛奶中总菌落的数量。
在这种方法中，将生牛奶样品分别进行适当稀释，然后培养在含有富营养的琼脂平板上。
在培养一定时间后，将可见的菌落计数，并根据结果评估生牛奶的卫生状况。
2. 基于PCR的快速检测方法：PCR是一种能够快速检测特定DNA序列的技术。
对于生牛奶中可能存在的特定致病菌，可以设计特定的引物和探针，通过PCR检测其存在与否。
这种方法具有高灵敏度和特异性，能够在较短的时间内快速检测出致病菌。
3. 流式细胞术：这种方法通过利用细胞在流式细胞仪中通过激光的散射和荧光特性来区分和计数。
对于生牛奶中的微生物，可以利用区分细胞的大小、形态和荧光染色来进行快速检测。
控制生牛奶中的微生物也是确保其安全性和质量的关键环节。
1. 从源头控制微生物：通过控制奶牛的饲养环境、饲料和个体健康状况，可以减少微生物的输入。
保持奶牛栏舍的清洁和湿度，提供优质的饲料和水源，并定期检测奶牛的健康状况，可预防微生物的污染。
2. 采取适当的加工措施：将生牛奶进行适当的加热和消毒处理，可以有效地杀灭其中的微生物。
常用的加工方法包括高温瞬时灭菌（HTST）和超高温灭菌（UHT）等。
在加工过程中，还应注意防止交叉污染，如使用清洁的设备和容器，并定期进行设备清洁和消毒。
3. 严格控制储存和运输条件：生牛奶的储存和运输应在适当的低温下进行，以减少微生物的生长和繁殖。
储存和运输设施应保持干净，并定期进行清洁和消毒。
生牛奶中的主要微生物检测方法包括总菌落计数、基于PCR的快速检测方法和流式细胞术等。
为了控制生牛奶中的微生物，应从源头控制微生物、采取适当的加工措施和严格控制储存和运输条件。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制生牛奶是一种常见的食品，在我们的日常生活中被广泛使用。
由于其易腐性以及微生物的存在，生牛奶也是一种潜在的健康危险来源。
因此，为了保证生牛奶的安全性和品质，需要采用一系列的微生物检测方法来监测生牛奶中的微生物。
1.总菌落计数法总菌落计数法是一种基本的微生物检测方法，可以用于分析生牛奶中总的细菌数量。
具体操作是将一定量的生牛奶样品，在增菌培养基上进行培养，培养一定的时间后，通过计数细菌在增菌培养基上形成的菌落数量，从而计算出生牛奶样品中的总菌落数。
控制方法：控制生牛奶中的总菌落数需要采取一系列的控制措施，如严格监控和控制生产工艺和操作流程，避免交叉感染和污染，保证生产环境的清洁卫生以及对员工进行规范的健康检查等。
2.大肠菌群检测法3.乳酸菌检测法乳酸菌检测法是一种检测生牛奶中益生菌的方法。
益生菌是指对人体健康有益的菌群，如乳酸杆菌、双歧杆菌等。
这些菌群对促进肠道健康、增强身体免疫力等方面具有较为重要的作用。
具体实验操作是将一定量的生牛奶样品，在特定的培养基上进行培养，培养一定的时间后，观察菌落的形态和颜色，从而可以判断样品中是否存在乳酸菌。
控制方法：选用从安全可靠的渠道采购的高品质乳酸菌菌株，控制生产过程中的操作规范，确保生产环境清洁卫生、健康检查等。
综上所述，对于生牛奶的微生物检测和控制，需要确保生产环境的清洁卫生、操作规范、监测与检测流程的严格执行，从而达到保证生牛奶安全性和品质方面的目标。
同时，在日常饮食中也要注意选择正规渠道的牛奶及相关食品，避免因为安全风险而给健康带来潜在的威胁。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制【摘要】生牛奶中微生物的检测和控制至关重要。
本文首先介绍了生牛奶中常见的主要微生物，包括细菌、霉菌和酵母菌等。
随后详细讨论了微生物检测方法，包括传统培养法、分子生物学方法和快速检测技术。
还探讨了微生物的控制方法，如适当的储存温度和消毒处理等。
本文强调了生牛奶微生物检测的重要性，指出了未经控制的微生物可能对消费者健康造成危害。
也分析了生牛奶微生物控制所面临的挑战，包括原料质量和生产环境的影响。
文章提出了加强监管和控制措施的建议，并展望了未来的发展方向，希望通过对微生物的更好检测和控制，保障生牛奶质量和消费者健康。
【关键词】生牛奶、微生物、检测方法、控制方法、监管、挑战、重要性、发展方向1. 引言1.1 研究背景生牛奶是人们日常生活中常见的饮品之一，是一种富含营养的食品。
生牛奶中可能存在一些微生物，其中包括细菌、霉菌等等。
这些微生物如果未经有效控制可能会导致牛奶变质，甚至对人体健康造成危害。
对生牛奶中的微生物进行检测并且采取相应的控制措施是非常重要的。
通过对生牛奶中的微生物检测，可以及时发现潜在的食品安全隐患，保障消费者的健康。
为了提高生牛奶的品质和安全性，加强对微生物检测方法的研究和控制措施的实施显得尤为重要。
1.2 研究目的生牛奶中的微生物检测一直是食品安全领域的重要研究课题。
通过对生牛奶中微生物的检测，可以及时发现和控制可能存在的微生物污染问题，确保消费者的健康和食品的质量安全。
本文旨在探讨生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制，旨在为生产者和监管部门提供参考和指导。
1. 分析生牛奶中常见的主要微生物种类及其数量分布，为后续微生物检测和控制提供基础数据支持；2. 探讨不同的微生物检测方法的优缺点，比较其在生牛奶中的适用性和准确性，为生产者选择合适的检测方法提供建议；3. 总结生牛奶微生物控制的关键技术和措施，提出改进建议，为生产企业提供更有效的微生物控制方案；4. 探讨生牛奶微生物检测的重要性，强调制定严格的监管标准和规范的生产流程对于保障食品安全的重要性。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制生牛奶是人们日常生活中常见的一种饮品，不仅味道鲜美，而且富含营养物质。
生牛奶中含有大量的微生物，其中包括有益微生物和有害微生物。
为了保证生牛奶的品质和安全，必须对其中的主要微生物进行检测，并采取相应的控制措施。
一、生牛奶中的主要微生物1. 有益微生物生牛奶中的有益微生物主要包括乳酸菌和酵母菌。
乳酸菌可以促进牛奶的酸化过程，使其更加浓稠，并且能够产生多种有益物质，如维生素和酶类物质，对人体有益。
酵母菌则可以帮助生牛奶进行醇化，并在其中产生一些有益的风味物质。
2. 有害微生物生牛奶中的有害微生物主要包括大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等。
这些微生物如果超出一定数量，则可能对人体健康造成危害，甚至引发食物中毒等疾病。
1. 有益微生物检测方法（1）培养法：将样品加入适当的培养基中，放置在适宜的温度下，观察一段时间后，根据菌落形态和数量来判断有益微生物的含量。
（2）PCRDNA：利用聚合酶链式反应的技术，通过扩增目标微生物的DNA序列来进行检测，该方法准确且灵敏度高。
2. 有害微生物检测方法（1）色谱法：利用色谱仪来分离和检测牛奶样品中的微生物成分，可以快速准确地检测出有害微生物的含量。
（2）荧光定量PCR法：通过PCR技术检测目标微生物的DNA序列，并通过荧光信号进行定量分析，该方法即迅速又灵敏。
1. 有益微生物的控制（1）优化生产工艺：控制发酵条件，使有益微生物能够充分发挥作用，提高生牛奶的品质。
（2）加入益生菌：在生产过程中适当添加乳酸菌和酵母菌等有益微生物，增加其数量，促进牛奶的发酵和醇化。
2. 有害微生物的控制（1）严格消毒：加强生产车间及设备的清洁和消毒工作，避免有害微生物的交叉污染。
（2）控制温度：对生产过程中的温度进行控制，避免有害微生物的生长繁殖。
四、结语通过对生牛奶中主要微生物的检测和控制，可以保证生牛奶的品质和安全。
有益微生物的有效利用和有害微生物的合理控制，不仅可以提高生牛奶的营养价值，还可以保证其安全食用。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制一、生牛奶中的主要微生物1. 大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌是一种可以导致食物中毒的致病性微生物。
其存在于动物的肠道中，可能通过粪便污染牛奶而进入。
摄入含有大肠埃希氏菌的牛奶可能导致腹泻、胃肠道感染等症状，严重时甚至危及生命。
3. 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌是一种可以在低温下生长的细菌，在生鲜牛奶中较为常见。
由于其生长速度快，易在牛奶中繁殖，可能影响牛奶的品质和安全。
4. 酵母菌和霉菌酵母菌和霉菌是一类真菌性微生物，它们在适宜的温度和湿度下可以在牛奶中生长繁殖。
大量酵母菌和霉菌的存在可能导致牛奶发酵变质，产生异味和有害物质。
二、生牛奶中微生物的检测方法1. 培养法培养法是一种常用的微生物检测方法，通过将牛奶样品接种到适宜的培养基上，利用微生物在培养基上生长的特点来检测和计数微生物。
常用的培养基包括普通营养琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂等。
通过观察培养基上的菌落形态、颜色等特征，可以初步判断出牛奶中的微生物种类和数量。
2. 干涂片法干涂片法是一种快速简便的微生物检测方法，适用于快速筛查和初步判断牛奶中的微生物。
将牛奶样品涂敷在干涂片上，然后进行染色、固定和观察。
通过显微镜下观察牛奶中微生物的形态、结构等特征，可以初步判断牛奶中是否存在致病性微生物。
3. PCR法PCR法是一种分子生物学技术，可以对牛奶中微生物的DNA进行扩增和检测。
通过提取牛奶样品中的微生物DNA，利用PCR技术进行扩增和检测，可以快速、敏感地检测出牛奶中的微生物种类和数量。
三、生牛奶中微生物的控制措斀1. 规范生产在生牛奶的生产过程中，应严格遵守卫生规范，保持生产设施和设备的清洁卫生。
避免牛奶受到外源性污染，减少微生物污染的可能。
2. 严格检测对生牛奶进行定期的微生物检测，及时发现和排除受污染的牛奶，保障牛奶的品质和安全。
3. 适当冷藏将生鲜牛奶储存在适宜的低温下，可以有效抑制微生物的繁殖和生长。
避免牛奶长时间暴露在室温下，减少微生物污染的可能。
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牛奶中微生物的检测
一、目的和原理
牛奶中微生物的含量是评价牛奶质量的一个重要指标，对于所有乳制品来说，微生物含量对最终产品质量也是十分重要的。
牛奶含碳水化合物、蛋白质、脂肪、无机盐和维生素，pH约为6.8，因此牛奶极易被微生物利用和分解。
生奶中正常存在着少量的乳酸杆菌、微杆菌、微球菌和链球菌等类细菌。
如果在采奶或运输装罐等过程中不重视严格消毒，则很快会被微生物污染，细菌数量大大增加，甚至被病原菌所污染。
细菌总数高，其中的致病菌就容易产生非常耐热的毒素，这些毒素经过超高温处理后仍有少量残留，消费者饮用后会导致中毒；而且大量的细菌繁殖会加速产酸，从而引起牛奶酸度增加，蛋白质热稳定性下降。
生奶经巴斯德法消毒处理后，可杀死所有的病原微生物，并使其它细菌也大大减少，从而保证了饮用的卫生和安全。
本试验采用标准平板计菌法及显微镜下直接计菌法对不同品质的牛奶中细菌总数进行检测。
与此同时，还采用选择性很强的鉴别培养基去氧胆酸盐琼脂平板对牛奶中可能存在的粪便污染指示菌大肠菌群进行检测。
这种培养基可抑制绝大多数非大肠菌群细菌的生长，大肠菌群细菌还可发酵培养基中的乳糖产酸，在培养基内指示剂的作用下菌落呈红色，而不发酵乳糖的其它细菌则呈白色，因此很容易加以鉴别并作计数。
牛奶中的微生物，在贮存过程中可不断增殖，同时降低了溶解氧浓度，使氧化还原电位大大下降。
我们可用美蓝还原酶试验来检测这一变化，当牛奶因微生物大量增殖而处于厌氧还原环境时，氧化还原指示剂美蓝即被脱色。
通过测定牛奶样品中美蓝被还原脱色的速度，即可得知所测牛奶的质量。
二、材料与器皿
(一)培养基
肉膏蛋白胨琼脂培养基去氧胆酸盐琼脂培养基
(二)不同质量的生乳各10ml，
(三)显微镜、试管架、水浴锅、铁丝架，
(四)灭菌移液管、灭菌9ml稀释水试管、载玻片、血球计数移液管、载玻
片、无菌带塞试管，
(五)试剂-二甲苯、95％酒精、1：25，000美蓝溶液。
三、方法与步骤
(一)牛奶巴斯德消毒法
取生乳5ml装试管内，放在61.7℃的水浴锅内加热30分钟，水平面必须高于牛奶的平面。
注意处理时间必须准确，水浴温度要始终一致，并不时摇动试管，使管内牛奶均匀受热。
(二)标准平板计菌法
1、取未经消毒的生奶，充分摇混，使样品呈均匀状态。
以十倍稀释法，将生奶稀释成10-1、10-
2、lO-
3、lO-
4、10-5系列，
2、从最大稀释度开始，各取lmll0-
3、10-
4、10-5的生奶稀释液，分别放入已标记好的培养皿内：将肉膏蛋白胨琼脂培养基融化，待冷至45℃左右时，在火焰旁倒入培养皿内，迅速盖好，放在桌面上轻轻摇转，使稀释的样品与培养基均匀混合，待平板冷却固化后，倒置，于30℃培养2天，
3、同上方法，吸取lml10-1、10-2、10-3样品稀释液至灭菌培养皿中，分别倾入加热融化并冷至45℃的去氧胆酸盐琼脂培养基，冷凝后倒置，30℃培养2天，
4、对经巴斯德法消毒的牛奶作同样的检测，其中细菌总数检测可取10-2、10-3样品稀释液，大肠菌群检测可取10-1、10-2样品稀释液，
5、所有平板在30℃培养2天后，选择每皿出现30～300个菌落的稀释度为准，计算出每ml牛奶中含细菌总数；根据在去氧胆酸盐琼脂平板上呈红色的菌落数，算出牛奶中大肠菌群细菌数。
(三)显微镜下直接计菌法
1、取洁净载玻片一块，在其上刻好lcm2面积数块，或用白纸画好lcm2的面
积，将载片放于其上，载片上写好待测样品名称，
2、用无菌的血球计数移液管，准确吸取0.01ml待测样品，方法为用嘴吸取样品至0.01ml刻度线略为超过一些，然后用吸水滤纸接触吸管的管尖，借助于毛细管作用，吸去多余样品液，使之准确地到达0.01ml刻度线处，然后慢慢将样品液吹至载玻片lcm2面积的中央，
3、用接种针，将样品均匀地涂布在lcm2的面积内，气干，将载片放在铁丝架上，铁丝架置于沸水锅内，用蒸气加热固定5分钟，
4、将已固定的样品载片放入二甲苯缸内1分钟以除去牛奶中的脂肪，然后将载片取出，再放至95％乙醇缸内除去二甲苯，最后将载片放在蒸馏水内除去酒精，
5、用1：25000美蓝溶液染色2分钟，
6、用水缓慢冲洗样品载片，置空气中干燥后在显微镜(油镜)下计数，
7、计算30个视野中细菌的数目，求出每个视野中平均细菌数，乘以常数500，000即为每础样品所含细菌数的近似埴。
一般显微镜油浸物镜每个视野的直径为0．16mm，每个视野的面积为0.0002cm2(0.02mm2)，lcm2中的视野数=1．0÷0．0002=5,000，由于我们以0.01ml样品均匀涂布在lcm2面积内，每个视野所复盖的样品量为1／100×l／5000，亦1／500，000ml牛奶，因此视野每个细菌代表着每ml牛奶中可有500,000个细菌。
(四)美蓝还原酶测定法
l、分别用10ml无菌移液管从已混匀的待测样品中吸取10ml牛奶，放入带塞的无菌试管中(体积15m1)，不同样品各用1支试管，每种样品同用1支移液管，用记号笔编号，
2、每个样品试管内各加l：25，000美蓝溶液lml，塞上瓶塞后充分摇匀，置于37℃的水浴内，记录培养时间，
3、每隔半小时观察一次，记录各管美蓝脱色时间，根据表1，判断待测牛奶的质量等级。
美蓝脱色时间与牛奶质量等级（表1）
四、结果与分析
五、培养基配制
(一)去氧胆酸盐琼脂培养基
蛋白胨10.0g
乳糖10.0g
去氧胆酸钠 1.0g
NaCl 5.0g
K2HP04 2.0g
柠檬酸铁 1.0g
柠檬酸钠 1.0 g
中性红(1％溶液3ml) 0.03g
琼脂20.0g
pH 7.3 （二）肉膏蛋白胨琼脂培养基
牛肉膏0.3g
蛋白胨1g
氯化钠0.5g
琼脂2g
自来水100mL
pH 7.0～7.2
灭菌 1.05kg/cm2，22min。