肠道致病菌检验简述

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沙门氏H抗原有两种: 第 1 相 : 特 异 相 , 用 英 文 小 写 字 母 表 示 a 、 b 、 c……z
z155 第2相:非特异相,用阿拉伯数字表示1、2、3……其
中也有用小写字母a、n、x等表示。
4、表面抗原:
沙门氏菌有三种:、M、5抗原、K抗原
抗原位于菌体的最表层,包围了O抗原,可阻碍O抗原的血清学 凝集试验。破坏抗原:60℃ 30′,100 ℃ 5′
检样→处理→增菌培养→分离培养→ 生化试验→血清学鉴定→报告
思考题
1、肠道致病菌具有哪些生物学特性? 2、肠道致病菌具有哪些抗原?又称为什么?有
什么特点? 3、写出肠道致病菌检验的基本程序
第二节、沙门氏菌检验
一、概况 (一)沙门氏菌的发现与食物中毒 (二)沙门氏菌的命名
根据所致疾病命名 根据菌的发现地区命名 以发现者的名字命名 (三)沙门氏菌的抵抗力 60 ℃ 30′可杀死
含有 抗原的沙门氏菌: 伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌
三、沙门氏菌食物中毒
(一)、引起食物中毒最常见的沙门氏菌: 鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、猪霍乱沙
门氏菌
(二)、易引起沙门氏菌中毒的食品 肉、蛋、乳类食品
行业关注:美国两种花生酱含沙门氏菌
(三)、中毒原因
1、食用病畜禽的肉制品食品 2、病畜禽、带菌人和动物使食品受污染 3、用不洁净水外理食品
(四)沙门氏菌的分类地位及定义
1、地位:是肠杆菌科、埃希氏菌族、沙门氏 菌属中的细菌
2、定义 是肠杆菌科中形态和培养特征,生化反应及 抗原结构相似,被O1噬菌体裂解的一群革兰 氏阴性杆菌。
二、生物学特性
(一)、形态与染色: 革兰氏染色阴性,无荚膜,无芽胞,多数
有鞭毛,有动力,短小杆菌。 (二)、培养特性
(1)三糖铁培养的培养
典型沙门氏菌在三糖铁培养上的特征: 表面(-)粉红色、底层(+)黄色、 H2S (+)底层有黑色、有
动力。 在培养基中:表面(+)黄色、 H2S (-)的培养物可排除,其它
培养物均有可能是沙门氏菌。
(2)其余四项生化实验
靛基质 7.2尿素酶
赖氨酸脱羧酶 反应序号:A1、A2多见,B1少见
(四)、临床病状(所致病菌)
1、肠热病:伤寒与副伤寒病,为慢性发热的菌血病。 由伤寒与副伤寒菌引起,潜伏期7~20天
2、急性肠胃类:主要症状:头痛、发热、恶心、呕吐、 腹泻、出冷汗、及全身不适,病程2~3天
3、败血病:高烧、寒战、厌食、局部发炎、由猪霍乱沙 门氏菌等引起
四、微生物检验
(一)、基本步骤(程序) 检样→增菌(前增菌)→分离培养→生化试 验初步鉴定→血清学反应最后鉴定→报告
1、前增菌:用无选择性的培养基使处于濒死状态的M 恢复活力;
2、选择性增菌:使沙门氏菌优势繁殖,基它细菌变到 抑制;
3、选择性平板分离培养:分离出所需的细菌;
4、生化试验:鉴定分离出来的细菌是否符合所检项目 的细菌;
5、血清学鉴定:进一步鉴定。
(二)、检验操作关键点
1、增菌:使待检菌复壮,抑制杂菌生长,提高检出率。
前增菌:用于加工过的食品,37℃,4~8h 或18~24h,长有杂菌。 增菌培养基:增菌液一般用和两种,如可能是伤寒沙门氏菌用,
用42℃培养。
2、平板分离
选择性培养基:、、、、 中最好,、、很好,最差 一般要用:和两个平板,主要用于伤寒沙门氏
菌的分离
上的菌落
上的菌落
上的菌落
3、五项生化试验
H2S、靛基质 、 7.2尿素酶、 、 赖氨 酸脱羧酶
1 、 需 氧 或 兼 性 厌 氧 , 最 适 温 度 37℃ , 7.2~7.4。
(沙门氏菌(红色)侵入人体细胞
2、对营养要求不高,在普通培养基生长良好, 37 ℃,24h,能形成菌落中等大小,直径2~ 3,圆形或卵形,表面光滑湿润,无色半透 明,边缘整齐的菌落
3、在液体培养基中,呈均匀混浊性生长,无 菌膜。
O65~ O67
(3)沙门氏菌中的主要菌群及其群特异性抗原 A群2 B群4 C群6 C1群7、 C2群 O6 O8 、 C3群8 、 C4群6 O7 O14 D群9 F群11 E群3 E2群3、 O10族 E3群3、 O15 E4群1 、O3 、O19
3、H抗原(鞭毛抗原)
耐热性差:60℃15′或酒精处理可破坏
A、O抗原 B、H抗原 C、表面抗原(K抗原) D、菌毛抗原
2 、O抗原 (1) O抗原的表示方法 共有58种,用字母O和阿拉伯数字标记:O1 、
O2 、O3、 O4 如:
伤寒杆菌: O9 、O12
(2)沙门氏菌的分群及表示方法
用大写字母及相关符号表示: A、B、C、D、E、F ……Z、 O51 63、
第一节 概述
一、食品中常见的肠道致病菌 沙门氏菌 志贺氏菌 大肠艾希氏菌 变形杆菌 耶尔森菌
二、生物学特性
1、形态与染色 均为革兰氏阴性杆菌,中等大小,无芽胞,多数具有周身鞭毛
能运动,志贺氏菌属无鞭毛无动力。 2、培养和生化反应 (1)、需氧或兼性厌氧,菌落中等大小,表面光滑,液体培
养基混浊生长。 (2)、肠道致病菌一般不分解乳糖,而非致病菌多能分解乳
(三)、生化特性
1、发酵,甘露醇,山梨醇产酸产气(Biblioteka Baidu寒鸡伤寒沙 门氏菌少数不产气)
2、不发酵乳糖,蔗糖,侧金黄花醇 3、多数产生H2S(+),不产靛基质(-),不分解尿
素(-),不产生乙酰甲基甲醇(V—P)(-), 4、能还原硝酸盐为亚硝酸盐(+) 5、在培养基中生长(-),苯丙氨酸脱氨酸(-)
(四)、抗原结构 主要两种:
糖、葡萄糖产酸或产酸产气。 (3)、可还原硝酸盐为亚硝酸盐。
三、抗原类型
四、 致病性
(一)、致病物质 1、内毒素:能引起机体发热,白细胞减少,低血糖,血
压降低,严重者休克。 2、外毒素:对小肠粘膜细胞具有物殊毒害作用,引起腹
泻。
(二)、所致病疾 1、伤寒和副伤寒 2、食物中毒 3、细菌性痢疾
五、微生物检验的基本程序
(3)、典型沙门氏菌的五项生化反应及其检验的利用
A、典型五项生化反应:A1
H2S(+) 靛基质(-) 7.2尿素酶(-) (-) 赖氨酸脱羧E(+)
B、利用五项生化反应鉴定沙门氏菌的最简单方案
a、对于H2S阳性菌,利用五项生化反应试验可判别沙 门氏菌和柠檬酸杆菌。
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