肠道致病菌检验简述
肠道杆菌及检验
(四)抗原构造: 有O、H和 K三种
O 抗原是血清学分型的基础,约170种。
H 抗原大于56种
血清型的表示式:O:K:H ,
如: O111:K58:H2;
O157:H7
(五)抵抗力:
自然界水中存活数周或数月。
胆盐、煌绿可抑制其生长,
对氯霉素、链、庆大酶素敏感。
易产生耐药性:
出现了产超广谱β-内酰胺酶(Extended-Spectrum β-lactamase : ESBLs)菌株,则对第三代头孢菌素(头孢 噻肟、头孢他定、头孢哌酮、头孢曲松等)耐药。
氯化钠
5g
琼脂
20-25g
蒸馏水
1000ml
乳糖
10g
1%中性红水溶液
5ml
胆盐
5g (或牛胆
酸钠 4g与去氧胆酸钠1g)
中国蓝琼脂
肉膏汤琼脂(pH7.4) 乳糖 1%中国蓝水溶液(灭菌) 1%玫瑰红酸乙醇溶液
100ml 1g
0.5-1ml 1ml
[注]1.中国蓝与玫瑰红酸在酸碱溶液中的反应(见表);此培养基pH约为7.4,制好后应
第二节 埃希菌属
分布及种类:
埃希菌属
(Escherichia)
大肠埃希菌(E.coli) 蟑螂埃希菌(E.blattae) 格森埃希菌(E.fergusonii) 赫尔曼埃希菌(E.hermannii) 伤口埃希菌(E.vulneris)
一、生物学性状
(一)形态染色:革兰阴性短杆菌、大多有周鞭毛, 菌毛,少数有微荚膜。
肠毒素致大量分泌 液体、电解质
粘附、破坏上皮细胞
侵袭和破坏肠粘膜 上皮细胞
溶原性噬菌体编码SLTI或II中断肠黏膜上皮细 胞蛋白质合成
食品中大肠菌群的检验
6)大肠菌群最可能数(MPN)的报告
按5)确证的大肠菌群LST阳性管数 ,检索MPN表(见附录B),报告每g( mL)样品中大肠菌群的MPN值。
表B.1 大肠菌群最可能数(MPN)检索表
第二法:大肠菌群平板计数法
需要用到的培养基
(1)VRBA:结晶紫中性红胆盐琼脂
成分:蛋白胨7.0g,酵母膏3.0g,乳糖10.0g ,氯化钠5.0g,胆盐或3号胆盐1.5g,中性 红0.03g,结晶紫0.002g,琼脂15g~18g
产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠杆菌是人和温血动物肠道 内普遍存在的细菌,是粪便中 的主要菌种产。气一克般雷生白活氏在菌人大 肠中并不致病,但它侵入人体 一些部位时,可引起感染 。
总大肠菌群系指一 群在37℃培养24小 时能发酵乳糖、产 酸产气、需氧和兼 性厌氧的革兰氏阴 性无芽胞杆菌。
大肠菌群
耐热大肠菌群(粪大肠
肠出血性大肠杆菌,感染性腹泻 是近年来新发现的危害严重的肠 道传染病,已逐渐成为威胁人群 健康的重要公共卫生问题。
致病性大肠杆菌能引起食物 中毒。致病性菌株能侵入肠 粘膜上皮细胞,具有痢疾杆 菌样致病力。肠致病性大肠 杆菌(EPEC)、肠毒素性 大肠杆菌(ETEC)和肠侵 袭性大肠杆菌(EIEC)等。
粉溶液200mL,0.1%煌绿水溶液 13.3mL,蒸馏水800mL, pH7.2±0.1。 制法:略
抑菌剂的选择
大肠菌群检验中常用的抑菌剂有胆盐、十二烷 基硫酸钠、洗衣粉、煌绿、龙胆紫、孔雀绿等 。
抑菌剂的主要作用是抑制其它杂菌,特别是革 兰氏阳性菌的生长。国家标准中LST肉汤利用 十二烷基硫酸钠作为抑菌剂,BGLB肉汤利用 煌绿和胆盐作为抑菌剂。
其他项目
抗生素残留、beta-内酰胺酶、 商业无菌等
致病肠道杆菌实验报告
一、实验目的1. 掌握肠道杆菌的基本生物学特性。
2. 学习并实践肠道杆菌的分离、培养和鉴定方法。
3. 了解肠道杆菌与人类疾病的关系。
二、实验原理肠道杆菌是一类革兰氏阴性菌,广泛分布于人和动物的肠道中。
其中,部分肠道杆菌具有致病性,可引起人类和动物的各种疾病,如腹泻、尿路感染、败血症等。
本实验通过分离、培养和鉴定肠道杆菌,了解其生物学特性,并探讨其与人类疾病的关系。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:粪便标本、普通琼脂平板、伊红美蓝琼脂平板、麦康凯琼脂平板、双糖铁琼脂平板、生化试剂、血清等。
2. 实验仪器:高压灭菌锅、恒温培养箱、显微镜、接种环、酒精灯、无菌操作台等。
四、实验方法1. 标本采集与处理:取粪便标本,用无菌生理盐水稀释,制成均匀的悬液。
2. 分离培养:将稀释后的悬液接种于麦康凯琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板,置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
3. 菌落观察与挑选:观察菌落特征,挑选典型的菌落进行进一步鉴定。
4. 生化鉴定:对挑选的菌落进行革兰氏染色、氧化酶试验、触酶试验、动力试验、发酵试验、尿素酶试验等生化试验。
5. 药敏试验:对分离得到的疑似致病菌进行药敏试验,了解其对抗生素的敏感性。
五、实验结果1. 菌落观察:麦康凯琼脂平板上出现红色菌落,伊红美蓝琼脂平板上出现黑色菌落。
2. 生化鉴定:革兰氏染色为阴性,氧化酶试验阴性,触酶试验阳性,动力试验阳性,发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖,不发酵蔗糖、乳糖,尿素酶试验阴性。
3. 药敏试验:对氨苄西林、头孢噻肟、庆大霉素等抗生素敏感。
六、实验结论根据实验结果,分离得到的菌落为革兰氏阴性菌,具有动力,发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖,不发酵蔗糖、乳糖,对氨苄西林、头孢噻肟、庆大霉素等抗生素敏感。
结合临床表现,推测该菌为肠道致病菌,可能引起人类腹泻等疾病。
七、实验讨论1. 肠道杆菌的分离与鉴定是诊断肠道感染的重要手段。
本实验通过分离、培养和鉴定肠道杆菌,掌握了其生物学特性,为临床诊断提供了依据。
肠道感染细菌概述
2 鞭毛、菌毛
鞭毛运动 有利于细菌穿过肠粘膜表面粘液层而接近肠壁上皮细胞
一般菌毛 是细菌定居于小肠所必须旳因子
所致疾病 霍 乱
烈性肠道传染病,为我国旳甲类法定传染病
传染源 患者及无症状感染者 传播途主径要是经过污染旳水源或食物经口摄入
临床体现 上吐下泻:剧烈腹泻和呕吐(米泔水样腹泻物), 大量水分和电解质丧失 低容量性休克和肾衰竭(死亡率高达60%)
肥达试验旳成果判断
• 考虑正常人群抗体水平
• 动态观察:恢复期效价增长≥4倍
• O IgM,出现早,维持时间短,特异性差 H IgG,出现迟,维持时间长,特异性强 – O高 H高 肠热症可能性大 – O低 H低 排除 – O高 H低 早期或有交叉反应旳其他沙门菌感染 – O低 H高 预防接种或曾患过伤寒
败血症 血
SS平板
双糖发酵等
生化反 应
血清学鉴定
玻片 凝集 试验
微生物学检验
血清学诊疗
1、肥达试验
原理:用已知伤寒沙门菌O、H抗原,以及引起副伤寒 旳甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌H抗原 旳诊疗菌液与受检血清作定量凝集试验,测定受检血清 中有无相应抗体及其效价旳试验。
用途:辅助诊疗伤寒,副伤寒
肠壁植物神经→肠蠕动失调、痉挛→腹痛、里急
后重
全 身
内毒素血症
外毒素(A群Ⅰ、Ⅱ型) 志贺毒素 ST(VT) 有3种毒性,与内毒素协同作用,加重局部和全身症状
所致疾病
急性细菌性痢疾 •急性经典:发烧、腹痛、脓血粘液便、里急后重 •急性非经典:易误诊,造成带菌和慢性 •中毒性痢疾:小儿
慢性细菌性痢疾:病程迁移两个月以上
耐药性变异 毒力性变异 生化反应性变异
肠道细菌的实验报告
肠道细菌的实验报告引言肠道细菌是人体消化道中存在的微生物,对人体健康和免疫功能具有重要作用。
本实验旨在通过培养和研究肠道细菌,了解其特性和影响因素,为进一步研究肠道健康提供科学依据。
实验方法实验材料1. 肠道细菌样本(人体粪便样本)2. 营养琼脂培养基3. 石蜡瓶4. 培养皿5. 无菌试管、噻唑蓝试剂6. 实验室标准设备和仪器实验步骤1. 用无菌试管采集肠道细菌样本,并在无菌条件下将其转移到石蜡瓶中。
2. 在培养皿中加入营养琼脂培养基,石蜡瓶中的肠道细菌样本均匀涂抹在培养皿上。
3. 将培养皿置于恒温培养箱中,以37摄氏度培养24小时。
4. 观察培养皿中的细菌生长情况,并记录结果。
实验结果经过24小时培养,我们观察到培养皿中出现了多种不同形态和颜色的细菌。
其中,主要观察到以下几种常见肠道细菌:1. 大肠杆菌(Escherichia coli):呈现圆形、鲜亮的橙红色菌落。
2. 肠球菌(Enterococcus faecalis):呈现小形或中形、呈黄色或乳白色菌落。
3. 梭状芽胞杆菌(Clostridium difficile):呈现长条形的白色菌落。
4. 腺病毒(Adenovirus):呈现透明的圆形菌落。
讨论与分析肠道细菌是人体肠道内的共生微生物,在人体的消化和免疫功能中起着重要作用。
此次实验观察到的肠道细菌具有多样性,这与人体消化道中存在的多种微生物种类相符。
其中,大肠杆菌和肠球菌是人体肠道中最常见的细菌,其在人体内的生存和繁殖与人体健康密切相关。
肠道细菌的种类和数量对人体健康有重要影响。
正常肠道菌群的稳定和平衡与人体的免疫功能、营养代谢和防病能力密切相关。
一些研究发现,肠道细菌的失调可能与多种疾病的发生和发展有关,如肠道炎症、肠道肿瘤和肠易激综合征等。
结论通过这次实验,我们成功培养出了肠道细菌样本,并观察到了不同菌种的生长情况。
肠道细菌的多样性和数量对人体健康具有重要影响,进一步研究肠道菌群的组成和功能,有助于理解人体免疫和消化系统的运作机制,为肠道健康的保护和促进提供科学依据。
肠道传染性致病菌的实验室检测
肠道传染性致病菌的实验室检测随着社会经济快速发展,人们的饮食结构开始变化,逐渐转变为多样化饮食,结合当下情况来看,饮食的多元化使得肠道传染性疾病事件频发。
近年来,各类集体食物中毒事件发生率上升,对传染病的控制提出了更高的要求,尤其在诊断和控制上,如何有效、快速的对肠道致病菌进行诊断,进一步实施控制,是当下关注的热点。
随着检验技术的进步,各类肠道传染性致病菌检测措施应用于临床,各种方式具有独特的优势,在传染性肠道疾病的诊断中发挥了显著的效果。
一、肠道传染性致病菌的检测方法介绍1.抗血清凝集技术近年来,抗体制备技术不断进步,特别是单克隆抗体的制备,有效加强了细菌凝集试验的特异性,并且更多的应用于细菌的分型和鉴定。
经过相关研究显示,肠道菌共同抗原(ECA)免疫兔制备兔抗ECA抗血清,辅助间接血凝实验,在大肠埃希氏菌、沙门氏菌以及志贺氏菌中均表现出了强特异性,在保证结果准确的同时,显著缩短了检验周期。
1.荧光抗体检测技术该方式可以实现快速检验,同时根据方式的差异也分为直接法和间接法。
前者是在样本上加入已知特异性荧光标记的抗血清,经过处理后通过显微镜的观察获取结果。
后者是在样本上加入已知的细菌特异性抗体,经过处理后,再加入荧光标记的第二抗体。
经过相关资料显示,荧光抗体检测技术在鱼类的致病菌检验中,较之其它血清诊断方式,速度更快,操作相对快捷。
1.酶联免疫技术这种方式在当下临床中更多的对病原微生物进行检验,在对李斯特菌的检验中,可以在短期内获取结果,并且可以分辨单增李斯特菌和非病原性李斯特菌。
在单抗夹心酶联免疫法辅助选择性增菌培养法中对大肠埃希氏菌进行检验,表现出了理想的敏感度。
1.免疫磁珠技术该方式是选择样本和具有抗目标微生物抗体的磁珠相结合,将微生物和免疫磁珠结合,使用磁场将微生物分离,将其置入鉴定培养基进行检测。
免疫磁珠技术省略了培养细菌的环节,其检测的敏感性受到了广泛的关注。
有实验证明,该方式在李斯特菌的检验中,具有更高的检出率,同时配合免疫电化学发光法,缩短了检验时间,敏感性理想。
化脓性球菌、粪便标本肠道致病菌鉴定流程
化脓性球菌、粪便标本肠道致病菌鉴定流程下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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肠道致病菌,常选3种检测法
肠道致病菌,常选3种检测法⊙上海嘉定区疾病预防控制中心 陈培超肠道致病菌是指排除大肠正常菌群,能够致病的菌种,其具有严重危害性,通常会引发感染性腹泻、痢疾等肠道传染病,或者可以借助水体、食物等的传播,引发流行性疾病,也可能污染人类食物造成食物中毒,甚至会威胁人们生命健康安全。
因此,全面了解和掌握肠道致病菌的各种类型很有必要。
沙门氏菌沙门氏菌是常见的主要食源性致病菌之一,感染沙门氏菌会引起肠炎和败血症,导致急性腹泻、腹痛、发烧和呕吐等症状。
其污染途径非常广泛,在畜禽肉、蛋类、蔬菜及水果中都有存在,其中畜禽产品中的沙门氏菌是人们感染该菌的主要来源。
沙门氏菌具有复杂的抗原结构,一般可分为菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面(Vi)抗原3种。
以不同菌体抗原结构为依据,可将其分为A、B、C、D、E、F、G、H、I等血清群,再以不同的鞭毛抗原为依据,分为各种血清型。
现阶段,已知沙门氏菌的血清类型达到两千多种,我国拥有的血清类型为322个,与人相关联的血清型属于A-E 中,其中只有少数几种类型可以导致人患病,常见的有鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌和猪霍乱沙门氏菌等。
志贺氏菌志贺氏菌又称为痢疾杆菌,是人类细菌性痢疾的病原菌,在人与人之间可以广泛的传染。
志贺氏菌属于革兰氏染色阴性杆菌,一般分为4类,分别是痢疾志贺菌、福氏志贺菌、鲍氏志贺菌以及宋内志贺菌等。
志贺氏菌感染非常常见,潜伏期一般是7天以内,出现的症状主要是发热、腹痛、腹泻、里急后重以及黏液脓血便等。
临床中一旦出现志贺氏菌阳性,应该立即应用相关的抗生素进行对症处置。
大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌属于埃希菌,主要特点是肠毒素和侵袭力,可以导致婴儿腹泻,严重者甚至会发生死亡。
我国食物中毒事件中细菌性食物中毒的人数占据很大比例,约为42.8%,其中主要是由致泻性大肠埃希氏菌导致,在我国引发感染性腹泻的发病率中位居所有传染病首位。
国际上将其分为5种类型,分别是肠产毒性大肠埃希氏菌(ETEC)、致病性大肠埃希氏菌(EPEC)、肠出血性大肠埃希氏菌(EHEC)、肠侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)、黏附性大肠埃希氏菌(EAEC)。
试谈肠道致病菌的检验与鉴定
试谈肠道致病菌的检验与鉴定1. 背景介绍肠道致病菌是指寄生在人体肠道内能够引起疾病的细菌。
这些致病菌能够通过进食受污染的食物或水源进入人体,引发各种肠道感染和疾病,如腹泻、呕吐、腹痛等。
因此,对肠道致病菌进行准确的检验与鉴定对于控制肠道传染病的流行具有重要意义。
本文将介绍肠道致病菌的常见检验方法和鉴定技术。
2. 肠道致病菌的常见检验方法2.1 培养法培养法是目前最常用的肠道致病菌检验方法之一。
它基于菌落形态、生理生化特性和生长要求的差异来区分不同的细菌。
常用的培养基有MacConkey培养基、Eosin Methylene Blue (EMB) 培养基等。
通过将肠道样本划线接种于培养基上,利用菌落形态和生长特性,可以初步鉴定肠道细菌的种类。
2.2 免疫学检验法免疫学检验法基于肠道致病菌与人体免疫系统的相互作用,通过检测体液中特定的抗体或抗原来判断致病菌的存在。
常用的免疫学检验方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光法等。
这些方法具有操作简便、高灵敏度和高特异性的特点,因此在临床上得到广泛应用。
2.3 分子生物学检验法分子生物学检验法是近年来快速发展的肠道致病菌检验方法之一。
它通过检测肠道菌株的DNA或RNA序列来鉴定菌株的种类和特性。
常用的分子生物学检验方法包括聚合酶链反应(PCR)和DNA测序等。
这些方法具有高度的灵敏度和特异性,可以准确鉴定肠道致病菌的种类,对于快速诊断和追踪肠道感染具有重要意义。
3. 肠道致病菌的鉴定技术3.1 生物化学鉴定生物化学鉴定是一种基于菌落形态、氧要求、生理代谢等特性来鉴定肠道致病菌的技术。
通过对菌株进行一系列的生化试验,如某些酶的活性检测、糖和氨基酸的利用等,可以确定菌株的身份。
这种方法操作相对简单,但存在一定的误差和局限性。
3.2 分子生物学鉴定分子生物学鉴定是目前最常用的肠道致病菌鉴定技术之一。
通过检测菌株的基因组序列、DNA指纹图谱等,可以准确鉴定菌株的种类和亚型。
大肠菌群的检验方法
大肠菌群的检验方法
大肠菌群是指人体肠道内的一类细菌群落,对人体健康有着重要的影响。
检验大肠菌群的方法主要包括以下几种:
1. 粪便培养法,通过采集患者的粪便样本,将其培养在含有特定营养物质的培养基上,利用培养基的选择性和差异培养特性,可以筛选出大肠菌群中的细菌,并对其进行鉴定和计数。
2. 分子生物学方法,包括PCR(聚合酶链式反应)、16S rRNA 基因测序等技术,通过检测特定基因序列或者DNA指纹图谱来确定大肠菌群的成分和数量。
3. 生化检测法,通过测定粪便中的各种生化指标,如pH值、氨氮含量等,来间接反映大肠菌群的代谢活动和数量。
4. 荧光原位杂交技术(FISH),利用荧光探针对大肠菌群中的特定细菌进行染色和检测,可以直观地观察其在肠道内的分布和数量。
5. 免疫学检测法,通过检测粪便中的特定抗原或抗体水平,来
间接反映大肠菌群的情况,如检测肠道病原菌的抗原或特定免疫球蛋白的水平。
总的来说,不同的检测方法各有优势,可以综合应用以获得更全面和准确的大肠菌群信息。
这些方法可以帮助医生评估肠道菌群的健康状况,指导治疗和调整饮食,对于维护肠道健康和预防疾病具有重要意义。
简述幽门螺旋杆菌的检测方法
简述幽门螺旋杆菌的检测方法幽门螺旋杆菌(Helicobacterpylori)是一种潜伏在人体胃肠道的致病菌,它能引发胃炎、溃疡等消化系统疾病。
因此,幽门螺旋杆菌的检测对于预防和治疗消化系统疾病至关重要。
近年来,随着科学技术的发展,医学领域不断推出新的检测方法以诊断幽门螺旋杆菌感染。
一、采血检测法采血检测法是检测幽门螺旋杆菌感染最常用的方法之一,它以血清和血浆中抗原和抗体的水平来评价幽门螺旋杆菌感染的严重程度。
在采血检测中,首先采集患者血液,然后用特定的抗体去检测抗原水平,如果抗体水平过低,或者含有异常抗体,都代表患者存在幽门螺旋杆菌感染。
二、血凝检测法血凝检测法是检测幽门螺旋杆菌的一种快速、准确的方法,它的原理是检测血清中的抗原和抗体,并通过血凝技术检测抗体的含量来评估幽门螺旋杆菌感染的严重程度。
血凝检测法主要通过分析病人的血浆中的抗体含量,来判断其是否感染了幽门螺旋杆菌。
它的优势在于快速、准确、可重复,并且只需较少的抽血量。
三、内镜检测法内镜检测法是一种以胃镜或者空肠镜检查来检测幽门螺旋杆菌感染的方法。
通过胃镜或肠镜,能够直接观察到幽门螺旋杆菌的生活状态,从而准确地判断患者是否得了这种感染。
此外,原发性溃疡患者也可以通过内镜检测来评估病情变化。
内镜检测法一般认为是诊断和治疗幽门螺旋杆菌感染的最佳方法。
四、核酸检测法核酸检测法是以基因为目标,以DNA和RNA分子为检测标志物,直接检测幽门螺旋杆菌感染的方法。
它能从患者的血液、粪便、唾液和胃液中直接检测到幽门螺旋杆菌的DNA和RNA分子,从而准确地判断患者的感染状态。
近年来,核酸检测法已经被广泛用于检测幽门螺旋杆菌感染,为临床治疗提供了有效的技术支持。
总之,随着技术的进步,检测幽门螺旋杆菌感染的方法越来越多,其中采血检测法、血凝检测法、内镜检测法和核酸检测法都是我们常用的检测方法。
每种检测方法都有其优势和劣势,只有科学选择、正确使用,才能为临床提供准确、可靠的检测结果。
肠道门诊大便三线培养简述
形态和培养特性:
1、G-细长杆菌,有鞭毛和菌毛(除鸡沙门氏菌和雏沙门氏菌),一般无 荚膜,均无芽胞。 2、需氧或兼性厌氧,最适温度37℃,PH7.2~7.4,对营养要求不高, 在普通培养基生长良好,37 ℃,24h,能形成菌落中等大小,直径2~3mm, 圆形或卵形,表面光滑湿润,无色半透明,边缘整齐的菌落。 3、在液体培养基中,呈均匀混浊性生长,无菌膜。
*沙门菌*
生化特征:
1、发酵GLU,甘露醇,山梨醇产酸产气(伤寒鸡伤 寒沙门氏菌少数不产气)
2、不发酵乳糖,蔗糖,侧金黄花醇 3 、多数产生 H2S ( + ),不产靛基质( - ),不分解 尿素(-),不产生乙酰甲基甲醇(V—P)(-) 4、能还原硝酸盐为亚硝酸盐(+),动力阳性(+) 5 、在 KCN 培养基中生长( - ),苯丙氨酸脱羧酶( - )
*沙门菌*
*沙门菌*
抗原结构(血清型): 1、O (菌体)抗原
是细胞壁上的脂多糖(LPS),性质稳定,耐湿热100℃数小时,不被酒 精或0.1%石炭酸破坏,用阿拉伯数字1,2,3……表示,目前发现有58种。 将相同抗原组分的划归一组,称为群。
沙门氏菌中的主要菌群及其群特异性抗原 A群─ O2 C群─ O6 C1亚群─ O6、 O7 C2亚群─ O6、O8
*大肠埃希菌(O157:H7血清型)*
生物学特性和生化特点:
⑴ G-直短杆菌,无芽胞,多数有鞭毛,能运动; ⑵ 营养要求不高,兼性厌氧,普通琼脂上生长良好;液体培养基中混浊生长; 在血平板上产生β溶血菌落;在SS平板上由于发酵乳糖形成粉红色、光滑、 湿润菌落;
⑶ 吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验(IMVC)结果为+ + - -;KIA斜面高
简述食品中微生物的卫生检测指标及其食品卫生学意义。
简述食品中微生物的卫生检测指标及其食品卫生学意义食品中微生物的卫生检测指标是用来评估食品是否符合卫生标准的一系列微生物指标。
这些指标通常用于检测食品中的微生物污染程度,包括细菌、真菌和病毒等微生物。
常见的食品微生物卫生检测指标包括:1. 总大肠菌群:这是一类细菌,常用来评估食品中可能存在的粪便污染情况。
其检测结果能够提供食品是否符合卫生标准的重要信息。
2. 大肠杆菌:大肠杆菌是一类常见的肠道细菌,其存在于食品中可能表明潜在的粪便污染。
某些大肠杆菌的菌株还可以引起食源性疾病,因此对其进行检测具有重要的食品卫生学意义。
3. 沙门氏菌:沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌,存在于被污染的食品中。
检测沙门氏菌可以评估食品是否存在食源性疾病的潜在风险。
4. 霉菌:霉菌是一类真菌,某些霉菌产生的毒素可能对人体健康有害。
因此,在食品中检测霉菌的存在和毒素含量对食品卫生至关重要。
食品中微生物的卫生检测指标具有重要的食品卫生学意义,包括以下几个方面:1. 食品安全评估:微生物的卫生检测指标提供了评估食品是否安全和符合卫生标准的依据。
高水平的微生物污染可能导致食源性疾病的发生,因此检测指标的合格与否对食品安全至关重要。
2. 卫生管理与监管:食品生产和加工环节中的微生物污染控制是卫生管理和监管的重要内容。
通过检测微生物指标,可以及时发现和解决食品生产和加工过程中的污染问题,保证食品的卫生质量。
3. 食品质量保证:微生物指标检测也对食品的质量保证起着重要作用。
食品中的微生物污染可能导致食品的变质和质量下降,通过对微生物的检测,可以及时发现问题并采取相应的措施,保证食品的质量。
综上所述,食品中微生物的卫生检测指标是评估食品卫生质量的重要依据,它们对食品安全评估、卫生管理与监管以及食品质量保证起着重要作用。
通过对这些指标的检测,可以确保食品的卫生安全,保护公众健康。
大肠菌群、粪大肠、大肠埃希氏菌检验的相关知识总结
大肠菌群、粪大肠、大肠埃希氏菌检验的相关知识总结1、大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌检验方法(1)大肠菌群(colifoms)在36°C培养48h可发酵乳糖产酸产气、需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
该菌主要来源自人畜粪便,作为粪便污染指标评价食品的卫生状况,推断食品中肠道致病菌污染的可能。
(2)粪大肠菌群(Fecal colifoms)也称耐热大肠菌群。
指大肠菌群中能在44.5℃生长、发酵乳糖产生气体的一群细菌。
与大肠菌群一样,并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某-一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的-组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。
食品卫生学意义:作为粪便污染食品的指标菌,MPN值愈低则说明食品受粪便污染程度及对人体健康危害程度愈低。
作为肠道致病菌污染食品的指针,大肠菌群数量越多则肠道致病菌存在的可能性就越高,但两者之间并不总是呈平行关系。
(3)大肠埃希氏菌(Escherichia coli)分类学概念:肠杆菌科、埃希氏菌属。
是人和温血动物肠道内普遍存在的细菌,是粪便中的主要菌种。
一般生活在人大肠中并不致病,但它侵入人体一些部位时,可引起感染。
主要有:O抗原(菌体抗原,150个);K抗原(荚膜抗原,90个);H抗原( 鞭毛抗原,50个)(4)致泻性大肠埃希氏菌能侵入肠粘膜上皮细胞,引起食物中毒的大肠埃希氏菌。
产毒性大肠埃希氏菌(ETEC)-肠胃炎、旅行性腹泻。
致病性大肠埃希氏菌(EPEC)-婴儿腹泻;肠出血性大肠埃希氏菌(EHEC)--出血性结肠炎;(O157:H7;O104:H4;O111;O126等)侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)—杆菌性痢疾;粘附性大肠埃希氏菌(EAEC)—急慢性腹泻。
2、大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌的关系3、相关检验方法标准GB4789.3-2016食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数GB 4789.38-2012食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数GB 4789.39- -2013食品安全国家标准食品微生物学检验粪大肠菌群计数GB4789.6- 2016 食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验GB4789.36-2016食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏O157:H7/NM检验。
肠道致病菌鉴定实验室比对结果与分析
肠道致病菌鉴定实验室比对结果与分析发表时间:2016-02-24T10:36:55.580Z 来源:《解放军预防医学杂志》2015年第11期供稿作者:孙顺爱[导读] 南宁铁路局疾病预防控制中心微生物检验是疾病预防控制工作重要组成部分之一,检验结果的准确性直接关系到一个单位的实验室工作技术能力水平.(南宁铁路局疾病预防控制中心广西南宁 530003)摘要:目的提高实验室微生物检验能力及水平,保证检测结果准确、可靠。
方法本实验室参加了广西壮族自治区组织的微生物实验室比对,依据现行有效的微生物检验规范和相关传染病诊断标准进行分离鉴定,同时评价相应的检测能力。
结果检出仙台沙门氏菌。
结论比对样品取得满意结果。
关键词:肠道致病菌实验室比对中图分类号: R117 文献标识码:A微生物检验是疾病预防控制工作重要组成部分之一,检验结果的准确性直接关系到一个单位的实验室工作技术能力水平[1],《利用实验室间比对的能力验证》[2]有助于检验机构及时发现问题,提高检验技术水平,同时也增强了客户对检验机构的信心。
本文结合笔者亲自参加自治区疾病预防控制中心组织的实验室比对经历,总结比对样品中肠道致病菌的分离与鉴定过程,旨在为同行进行肠道致病菌检验提供参考。
1.材料与方法:1.1 试验材料1.1.1 比对样品比对样品为肠道致病菌培养物,冻干半固体细菌保存管装。
1.1.2培养基和试剂本次比对所用的培养基由北京陆桥技术有限责任公司生产;微量生化鉴定管由杭州滨和微生物试剂有限公司生产;显色培养基由上海欣中生物工程有限公司生产;沙门氏、志贺氏、致泻大肠埃希氏菌诊断血清由成都生物制品研究所生产;所有培养基和试剂均在有效期内。
1.2 检验方法按照作业指导书要求,依据现行有效的微生物检验规范和相关传染病诊断标准进行检验。
1.3 结果评价方法及依据实验室比对是能力验证的一种方式,既要重视结果,也要重视检验过程。
评价结论分为:满意、基本满意和不满意三种。
经典:肠道致病菌检验技术
(四)沙门氏菌的分类地位及定义
1、地位:是肠杆菌科、埃希氏菌族、沙门氏 菌属中的细菌
2、定义 是肠杆菌科中形态和培养特征,生化反应及 抗原结构相似,被O1噬菌体裂解的一群革兰 氏阴性杆菌。
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二、生物学特性
(一)、形态与染色: 革兰氏染色阴性,无荚膜,无芽胞,多数
有鞭毛,有动力,短小杆菌。 (二)、培养特性
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(三)、生化特性 1、发酵GLU,甘露醇,山梨醇产酸产气(伤寒鸡伤
寒沙门氏菌少数不产气) 2、不发酵乳糖,蔗糖,侧金黄花醇 3、多数产生H2S(+),不产靛基质(-),不分解尿
素(-),不产生乙酰甲基甲醇(V—P)(-), 4、能还原硝酸盐为亚硝酸盐(+) 5、在KCN培养基中生长(-),苯丙氨酸脱氨酸(-)
3、败血病:高烧、寒战、厌食、局部发炎、由猪霍乱沙 门氏菌等引起
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四、微生物检验
(一)、基本步骤(程序) 检样→增菌(前增菌)→分离培养→生化
试验初步鉴定→血清学反应最后鉴定→报告
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1、前增菌:用无选择性的培养基使处于濒死状态的M 恢复活力;
2、选择性增菌:使沙门氏菌优势繁殖,基它细菌变到 抑制;
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思考题
1、肠道致病菌具有哪些生物学特性? 2、肠道致病菌具有哪些抗原?又称为什么?有
什么特点? 3、写出肠道致病菌检验的基本程序
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第二节、沙门氏菌检验
一、概况 (一)沙门氏菌的发现与食物中毒 (二)沙门氏菌的命名
根据所致疾病命名 根据菌的发现地区命名 以发现者的名字命名 (三)沙门氏菌的抵抗力 60 ℃ 30′可杀死
氏菌用TTB,用42℃培养。
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2、平板分离
选择性培养基:BS、DHL、HE、WS、SS BS中最好,DHL、HE、WS很好,SS最差 一般要用:BS和WS/SS两个平板,BS主要用
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一、食品中常见的肠道致病菌 沙门氏菌 志贺氏菌 大肠艾希氏菌 变形杆菌 耶尔森菌
二、生物学特性
1、形态与染色 均为革兰氏阴性杆菌,中等大小,无芽胞,多数具有周身鞭毛
能运动,志贺氏菌属无鞭毛无动力。 2、培养和生化反应 (1)、需氧或兼性厌氧,菌落中等大小,表面光滑,液体培
养基混浊生长。 (2)、肠道致病菌一般不分解乳糖,而非致病菌多能分解乳
前增菌:用于加工过的食品,37℃,4~8h 或18~24h,长有杂菌。 增菌培养基:增菌液一般用和两种,如可能是伤寒沙门氏菌用,
用42℃培养。
2、平板分离
选择性培养基:、、、、 中最好,、、很好,最差 一般要用:和两个平板,主要用于伤寒沙门氏
菌的分离
上的菌落
上的菌落
上的菌落
3、五项生化试验
H2S、靛基质 、 7.2尿素酶、 、 赖氨 酸脱羧酶
(四)沙门氏菌的分类地位及定义
1、地位:是肠杆菌科、埃希氏菌族、沙门氏 菌属中的细菌
2、定义 是肠杆菌科中形态和培养特征,生化反应及 抗原结构相似,被O1噬菌体裂解的一群革兰 氏阴性杆菌。
二、生物学特性
(一)、形态与染色: 革兰氏染色阴性,无荚膜,无芽胞,多数
有鞭毛,有动力,短小杆菌。 (二)、培养特性
(三)、生化特性
1、发酵,甘露醇,山梨醇产酸产气(伤寒鸡伤寒沙 门氏菌少数不产气)
2、不发酵乳糖,蔗糖,侧金黄花醇 3、多数产生H2S(+),不产靛基质(-),不分解尿
素(-),不产生乙酰甲基甲醇(V—P)(-), 4、能还原硝酸盐为亚硝酸盐(+) 5、在培养基中生长(-),苯丙氨酸脱氨酸(-)
(四)、抗原结构 主要两种:
(3)、典型沙门氏菌的五项生化反应及其检验的利用
A、典型五项生化反应:A1
H2S(+) 靛基质(-) 7.2尿素酶(-) (-) 赖氨酸脱羧E(+)
B、利用五项生化反应鉴定沙门氏菌的最简单方案
a、对于H2S阳性菌,利用五项生化反应试验可判别沙 门氏菌和柠檬酸杆菌。
(1)三糖铁培养的培养
典型沙门氏菌在三糖铁培养上的特征: 表面(-)粉红色、底层(+)黄色、 H2S (+)底层有黑色、有
动力。 在培养基中:表面(+)黄色、 H2S (-)的培养物可排除,其它
培养物均有可能是沙门氏菌。
(2)其余四项生化实验
靛基质 7.2尿素酶
赖氨酸脱羧酶 反应序号:A1、A2多见,B1少见
含有 抗原的沙门氏菌: 伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌
三、沙门氏菌食物中毒
(一)、引起食物中毒最常见的沙门氏菌: 鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、猪霍乱沙
门氏菌
(二)、易引起沙门氏菌中毒的食品 肉、蛋、乳类食品
行业关注:美国两种花生酱含沙门氏菌
(三)、中毒原因
1、食用病畜禽的肉制品食品 2、病畜禽、带菌人和动物使食品受污染 3、用不洁净水外理食品
O65~ O67
(3)沙门氏菌中的主要菌群及其群特异性抗原 A群2 B群4 C群6 C1群7、 C2群 O6 O8 、 C3群8 、 C4群6 O7 O14 D群9 F群11 E群3 E2群3、 O10族 E3群3、 O15 E4群1 、O3 、O19
3、H抗原(鞭毛抗原)
耐热性差:60℃15′或酒精处理可破坏
(四)、临床病状(所致病菌)
1、肠热病:伤寒与副伤寒病,为慢性发热的菌血病。 由伤寒与副伤寒菌引起,潜伏期7~20天
2、急性肠胃类:主要症状:头痛、发热、恶心、呕吐、 腹泻、出冷汗、及全身不适,病程2~3天
3、败血病:高烧、寒战、厌食、局部发炎、由猪霍乱沙 门氏菌等引起
四、微生物检验
(一)、基本步骤(程序) 检样→增菌(前增菌)→分离培养→生化试 验初步鉴定→血清学反应最后鉴定→报告
检样→处理→增菌培养→分离培养→ 生化试验→血清学鉴定→报告
思考题
1、肠道致病菌具有哪些生物学特性? 2、肠道致病菌具有哪些抗原?又称为什么?有
什么特点? 3、写出肠道致病菌检验的基本程序
第二节、沙门氏菌检验
一、概况 (一)沙门氏菌的发现与食物中毒 (二)沙门氏菌的命名
根据所致疾病命名 根据菌的发现地区命名 以发现者的名字命名 (三)沙门氏菌的抵抗力 60 ℃ 30′可杀死
沙门氏H抗原有两种: 第 1 相 : 特 异 相 , 用 英 文 小 写 字 母 表 示 a 、 b 、 c……z
z155 第2相:非特异相,用阿拉伯数字表示1、2、3……其
中也有用小写字母a、n、x等表示。
4、表面抗原:
沙门氏菌有三种:、M、5抗原、K抗原
抗原位于菌体的最表层,包围了O抗原,可阻碍O抗原的血清学 凝集试验。破坏抗原:60℃ 30′,100 ℃ 5′
1 、 需 氧 或 兼 性 厌 氧 , 最 适 温 度 37℃ , 7.2~7.4。
(沙门氏菌(红色)侵入人体细胞
2、对营养要求不高,在普通培养基生长良好, 37 ℃,24h,能形成菌落中等大小,直径2~ 3,圆形或卵形,表面光滑湿润,无色半透 明,边缘整齐的菌落
3、在液体培养基中,呈均匀混浊性生长,无 菌膜。
糖、葡萄糖产酸或产酸产气。 (3)、可还原硝酸盐为亚硝酸盐。
三、抗原类型
四、 致病性
(一)、致病物质 1、内毒素:能引起机体发热,白细胞减少,低血糖,血
压降低,严重者休克。 2、外毒素:对小肠粘膜细胞具有物殊毒害作用,引起腹
泻。Байду номын сангаас
(二)、所致病疾 1、伤寒和副伤寒 2、食物中毒 3、细菌性痢疾
五、微生物检验的基本程序
1、前增菌:用无选择性的培养基使处于濒死状态的M 恢复活力;
2、选择性增菌:使沙门氏菌优势繁殖,基它细菌变到 抑制;
3、选择性平板分离培养:分离出所需的细菌;
4、生化试验:鉴定分离出来的细菌是否符合所检项目 的细菌;
5、血清学鉴定:进一步鉴定。
(二)、检验操作关键点
1、增菌:使待检菌复壮,抑制杂菌生长,提高检出率。
A、O抗原 B、H抗原 C、表面抗原(K抗原) D、菌毛抗原
2 、O抗原 (1) O抗原的表示方法 共有58种,用字母O和阿拉伯数字标记:O1 、
O2 、O3、 O4 如:
伤寒杆菌: O9 、O12
(2)沙门氏菌的分群及表示方法
用大写字母及相关符号表示: A、B、C、D、E、F ……Z、 O51 63、