血液制品

血液制品的定义
• 血液制品：由健康人的血浆或特异免疫人 血浆分离，提纯或由重组DNA技术制成的 血浆蛋白组分或血细胞组分制品，如人血 白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子（天 然或重组的）、红细胞浓缩物等，用于诊 断、治疗或被动免疫预防。 • 血液制品属于生物制品范围，主要指以健 康人血液为原料，采用生物学血液制品工 艺或分离纯化技术制备的生物活性制剂。
• 在病毒检测方面，近年来欧美和日本已开 始推广和执行核酸扩增技术（NAT）对原 料血浆的病毒检测。快速发展的生物芯片 技术，也使血浆中病毒的快速检测成为可 能，虽然尚有很多问题需解决。
血液制品的安全性
• 制备血液制品的原料是人的血浆，因而通 过血液传播的病原体，特别是某些病毒， 如乙肝病毒（HBV）、丙肝病毒（HCV）、 艾滋病病毒（HIV）等对血液制剂的污染， 是影响血液制剂安全性的主要原因。 • 因目前检测手段及病毒灭活有限，只能采 用综合防范系统最大限度的减少这种危险 性。
下面主要介绍一下N-K法分离免疫球蛋 白的工艺流程：
N-K法的沉淀II+III
乙醇：12%，PH：4.8 0°C，I：0.05，N：0.8%
上清液III （废弃）
沉淀III
乙醇：25%，PH：7.2 -7°C，I：0.03，N：0.5%
上清液II （废弃）
免疫球蛋白
N-K法分离免疫球蛋白的工艺流程 I 表示离子强度 ，N 表示蛋白质浓 度
（三）是对最终产品的质量控制和对临 床使用的信息源自文库馈。
• 大量经S/D法灭活的血液制品通过长期临床 应用，已证明其安全可靠，因此被广泛采 用。 • 为了最大限度地灭活和去除原料血浆中可 能污染的致病病毒，WHO和国内外专家建 议和要求在血液制品生产过程中，必须至 少采用一种灭活和去除病毒技术，以保证 血液制品的安全。
• 沉淀得到的白蛋白粗品中含有乙醇，精制 时必须除去。去乙醇的方法有多种，如透 析、冻干及超滤等。超滤可以一次完成脱 醇、脱盐和浓缩工作，因此，血液制品企 业目前普遍采用超滤技术来完成人血白蛋 白的乙醇去除工作，一般采用8000或 10000的超滤膜。
（2）免疫球蛋白
免疫球蛋白的制备过程与人血白蛋白很 相似，也是用乙醇作为沉淀剂进行分离纯 化。制备免疫球蛋白是从血浆制备人血白 蛋白的一个分支。比较常见的低温乙醇法 制备免疫球蛋白的工艺有Cohn6和N-K法。
• 将目的外源基因直接注入动物受精卵或早期胚 胎内，然后植入假孕的母体动物，所生子代动 物既能表达外源基因，又可遗传给下一代，成 为转基因动物。
转基因蚊子
• 另外，也利用基因重组技术将编码抗原决 定簇或功能蛋白的外源基因插入植物病毒 基因组中，用以感染植物，使其在植物体 内复制和装配，成为转基因植物，从而高 效表达所需抗原或蛋白。
血液制品
什么是血液？
• 简称血。人或高等动物体内循环系统中的 液体组织，暗赤或鲜红色，有腥气，对维 持生命起重要作用。
水：91-92% 血 浆 （55%） 固体成分：8-9% 血液 白细胞 血细胞 红细胞 （45%） 血小板 各种蛋白质、 无机盐、脂类、 内分泌激素、 维生素等
血液的功能
• 红细胞：携带O2和CO2。 • 白细胞：防御功能（杀灭病原体，排斥外 来异物）。 • 血小板：血液凝固功能（止血作用）。 • 血 浆：运送营养物质和代谢物，参加调 节体温和维持酸碱平衡。
血液制品的生产工艺
（1）人血白蛋白
• 人血白蛋白是血浆中含量最高的蛋白，占 血浆蛋白的60%左右。目前国际上主要采 用低温乙醇法分离血浆蛋白。此法最初由 Cohn教授于1946年开发成功，当时称 Cohn6法。此后许多学者提出了多种改良 方法，最有价值的是Nitschman等提出的 经改良的低温乙醇分离血浆的方法，简称 N-K法。
血液制品的发展趋势
• 近十年来，层析技术在血液制品的纯化、 分离方面也得到广泛的应用，但昂贵的操 作成本使其在大规模生产中的应用受到很 大的限制。 • 从理论上来说，现在人类可利用基因工程 技术从非人源途径无限量获得各种血浆蛋 白。该技术的优点是可以不用人血资源， 并从根本上防止经血液传播的疾病对人类 的感染。
• 原料：血浆
水：92% - 93%；蛋白质：7% - 8%，
血液制品就是从这部分蛋白质分离提纯制 成的。 • 现有种类：人血白蛋白，人胎盘血白蛋白， 静脉注射用的免疫球蛋白等13种制品。
• 就我国目前的血液制品而言，还是以血浆 中提纯的血浆蛋白制剂为主。
血液制品的优点
• 血液制品是在临床输血的基础上发展起来 的，它通过将血浆中的有效组分分离出来 并用于治疗，较好地解决了全血不易运输 和大量长期贮存中的问题。
• 人体内的血液量大约是体重的7～8％，如 体重60公斤，则血液量约4200～4800毫升。 各种原因引起的血管破裂都可导致出血， 如果失血量较少，不超过总血量的10％， 则通过身体的自我调节，可以很快恢复； 如果失血量较大，达总血量的20％时，则 出现脉搏加快，血压下降等症状；如果在 短时间内丧失的血液达全身血液的30%或 更多，就可能危及生命。
该系统必须从三个环节严格控制： 一、原料血浆的控制。 二、生产过程的病毒灭活/去除处理； 三、对最终产品的质量控制和对临床使用的 反馈。
（一）原料血浆的控制
• 主要从严格执行相关的原料血浆管 理政策法规以及对已采集的血液进 行严格的化验等措施来实施。
（二）病毒灭活/去除处理
• 对血液制品进行灭活和去除病毒处理，是 保证输血安全的重要环节。 • 目前，被公认有效的、广泛用于工业化生 产的灭活病毒的方法有巴斯德消毒法、有 机溶剂/表面活性剂法（S/D法）和干热灭 活法等。 • 去除病毒的方法有低温乙醇血浆蛋白组分 分离法、各种层析法和膜过滤法。
血浆
乙醇：8%，PH：7.2 3℃，N：5.0%
上清液Ⅰ
乙醇：19%，PH：5.8 –5℃，N：4.5%
沉淀Ⅰ
上清液Ⅱ+Ⅲ
沉淀Ⅱ+Ⅲ（用于分离免疫球蛋白）
乙醇：40%，PH：5.8 –7℃，N：2.5%
上清液 沉淀Ⅳ 乙醇：40%，PH：4.8 Ⅳ
–8℃，N：2.0%
血蛋白制品
上清液（废弃）
N–K法分离人血白蛋白的工艺（N表示蛋白质浓度）