酶解醇洗法制备棉籽浓缩蛋白

酶解醇洗法制备棉籽浓缩蛋白

■饲斟姿源开发及利用

酶解醇洗法制备棉籽浓缩蛋白

潘晶,陈思思,张晖,郭晓娜

(江南大学食品学院,江苏无锡214122)

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摘要:以预榨浸提棉籽粕为原料,先选用戊聚糖复合酶,糖化酶等植物水解酶对棉籽粕进行作用,再进一步用乙

醇溶液浸洗制备棉籽浓缩蛋白.结果表明:在添加糖化酶1600U/g,戊聚糖复合酶0.60fbg/g,料液比1:1O和

温度5OC条件下酶作用140min后,再以料液比1:7,体积分数70乙醇溶液和温度6O℃条件下醇洗2次,每次

45min,得到产品浓缩蛋白的蛋白质质量分数为64,蛋白质收率为78.

关键词:棉籽粕;棉籽浓缩蛋白;酶解;醇洗;戊聚糖复合酶;糖化酶;制备

中图分类号:S816.35:S816.3文献标志码:A文章编号:1003—6202(2011)09—0050—03 Preparationofcottonseedproteinconcentratebyenzymolysisandalcoholextraction Panjing,ChenSisi,ZhangHui,GuoXiaona (SchoolofFoodScienceandTechnology,JiangnanUniversitY,Wuxi214122,China) ABSTRACT:Thepre-pressedcottonseedmealasmaterialwasfirstlyhydrolyzedbypentosa ncompoundenzymeandglucoamylase,and

thenwashedbyethanoltopreparateproteinconcentrate.Theresultillustratedasthat:Underth econditionofaddingglucoamylase1

600U/g,pentosanenzyme0.60fbg/g,solvent/solidratioof1:10,temperature50℃,thecotton seedmealwashydrolyzedfOr140

rain,andthenwashedby70(v/v)ethanolat60℃dippedfor2times(oncefor45min),withsolvent/solidratioof1:7.Thepro teincontentofcottonseedproteinconcentratepreparedwas64,andtheyieldofproteinwas78. KEYWORDS:cottonseedmeal;proteinconcentrate;alcoholwash;pentosancompoundenz yme;glucoamylase;preparation

长期以来,棉籽粕的开发利用仅限于动物饲料

和肥料,造成了资源的极大浪费.棉籽蛋白中棉酚

含量低,蛋白质及氨基酸含量高,粗纤维含量低,应

用于畜禽饲料中,可提高饲用价值,缓解我国蛋白质

饲料资源紧缺状况[j].Swain,Gastrock曾分别用

空气分级法和水力旋转法制备浓缩蛋白l2,但其对

原料要求较高且操作困难.胡传荣用醇洗,酸洗处

理得到了蛋白质质量分数为7O的浓缩蛋白¨4;崔

志芹则以K.CO.液选法来制备.=].其中醇洗法产

品风味和色泽较好,且乙醇可通过蒸馏回收;但棉籽

粕中含有较多纤维,糖类等杂质.研究发现植物水

解酶可以作用于植物细胞壁,破坏纤维素,释放出碳

水化合物和蛋白质,提高糖化酶的作用效果l6].所

以本文先选用戊聚糖复合酶(ViscozymeL),糖化酶

等对棉籽粕进行酶解,再进一步醇洗来制备较高蛋

白质含量的浓缩蛋白.

1材料与方法

1.1材料与试剂

原料为预榨浸出棉籽粕,经粉碎过筛除去部分棉

壳棉绒后密封备用;戊聚糖复合酶(酶活100fbg/g),

糖化酶(酶活1O万U/g),其他化学试剂均为分析纯.

1.2主要仪器

DELTA320型pH计,DSHZ一300台式水浴恒

温振荡器,KDN一08消化炉,JZ7114型粉碎机,

TGL一16B高速离心机等.

1.3测定方法

粗蛋白质:GB/T5511—2008,其中氮转换系数

为5.3O;水分:GB/T5009.3—2003;灰分:GB/T

5505—2008;粗纤维:酸性洗涤剂法;游离棉酚:间苯

三酚比色法.

1.4浓缩蛋白质制备方法

准确称取经粉碎多级过筛的棉籽粕20g装入

500ml三角瓶中,加入一定比例去离子水,Hj

1.0mol/LHC1调节PH值为4.5,加入一定量的复

合酶,在恒温水浴摇床中反应一定时间,在转速

4000r/rain条件下离心20min,弃去上清液;在沉

淀物中加入一定量,一定浓度的乙醇溶液,在恒温水

浴摇床中浸洗一定时间,在转速4000r/min条件下

离心20min,重复洗两次,其沉淀物真空f燥即得

收稿Ft期:201009—25;修回日期:2011_O824

作者简介:潘晶(1985一),女,硕士研究生,主要从事植物蛋白方面的研究工作. 通讯作者:张晖(1966),女,教授,研究方向为谷物功能成分与健康食品.

潘晶等:酶解醇洗法制备棉籽浓缩蛋白/2011年舞9期

浓缩蛋白产品.

1.5响应面优化设计

影响酶解反应的条件的因素很多,其中糖化酶

添加量,戊聚糖复合酶添加量,酶解反应时间,料液

比影响较大,选择以上4个因素为研究对象,以蛋白

质含量为指标,对酶解反应条件进行Box—Behnken