薄荷油与薄荷醇促进中药成分经皮吸收的对比讨论

薄荷油与薄荷醇促进中药成分经皮吸收的对比讨论本文从网络收集而来，上传到平台为了帮到更多的人，如果您需要使用本文档，请点击下载按钮下载本文档（有偿下载），另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意！薄荷为唇形科多年生草本植物薄荷Menthahaplocalyx Briq. 的茎叶，在中药外用制剂中应用广泛，多利用其“芳香走窜”特性而发挥“率领群药、直达病所”之功，具有类似现代经皮促透剂的作用。

薄荷的有效部位主要为其挥发油成分，因此，薄荷油作为促透剂成为目前研究的热点，文献研究也显示，薄荷油作为促透剂可促进某些成分的经皮吸收，如L-肉碱、左旋延胡索乙素等。

其中，薄荷醇是薄荷油中含量最高的一种成分，一般约占50% 以上，文献研究显示，薄荷醇作为促透剂也具有良好的经皮促透效果。

但是，薄荷油与薄荷醇的经皮促透研究多集中在对某单一成分的促透评价，对中药复杂成分的经皮促透特征目前尚不清楚，同时，薄荷醇作为薄荷油中最主要成分，是否可用成分单一的薄荷醇代替组成复杂的薄荷油用于中药外用制剂的经皮促透，有待进一步研究。

因此，本文基于现代经皮定量结构-渗透性关系( quantitative structure-permeation relationships，QSPRs)研究结果，即药物理化性质中logP( 油水分配系统) 是影响药物经皮吸收最主要的影响因素。

因此，选择系统不同logP 有效成分简化并表征复杂中药成分体系，即蛇床子素( osthole，OT，logP = 3. 85) 、川芎嗪( tetramethylpyrazine，TMP，logP = 2. 34) 、阿魏酸( ferulic acid，FA，logP =1. 26) 、葛根素( puerarin，PR，logP = - 0. 35) 、京尼平苷( geniposide，GP，logP = - 1. 01) ，通过测定其经皮促透作用情况，对比探讨薄荷油与薄荷醇的经皮促透作用特征。

同时，采用傅利叶变换红外光谱技术( FTIR) 进一步比较薄荷油与薄荷醇对角质层内在分子结构的影响，从而为其在中药外用制剂中的合理应用提供科学指导。

1 材料TK-20B 型透皮扩散试验仪( 上海锴凯科技贸易有限公司) ; 岛津高效液相色谱系统( 包括LC-20AT 泵、SPD-20A 紫外检测器，日本岛津公司) ; Nexus 型全反射傅利叶变换红外光谱仪( ATR-FTIR，美国Thermo-Nicolet 公司) ; Sartorius BS 110 型电子分析天平( 北京赛多利斯科学仪器有限公司) ; CP-7800型电动递毛器( 科德士电器有限公司) 。

薄荷药材购于北京本草方源药业有限公司，批号20131007，产地江苏，经北京中医药大学中药炮制系谭鹏副教授鉴定为唇形科植物薄荷M. haplocalyx的干燥地上部分，符合《中国药典》( 2010 年版) 相应项标准。

薄荷油采用2010 年版《中国药典》附录挥发油提取甲法提取，得淡黄色油状液体，无水硫酸钠脱水后避光密闭保存。

GC-MS 测定其主要成分为薄荷醇( menthol，51. 00%) 、薄荷酮( menthone， 6. 11%) 、瓜菊醇酮( cinerolone，3. 19%) 、优香芹酮( eucarvone，2. 58%) 、胡椒酮( piperitone，2. 19%) 、异薄荷酮( isomenthone，1. 99%) 、长叶薄荷酮( pulegone，1. 32%) 等[8]。

薄荷醇、阿魏酸( 纯度> 98. 00%) 均购于国药集团化学试剂有限公司，批号分别为F20110811，20120328; 川芎嗪购于Sigma-Aldrich 公司，批号为14003DEV; 蛇床子素、葛根素、京尼平苷均购于NCEBiomedical 公司，纯度均> 98. 00%，批号分别为20131209，20131209，20131209; 苄泽98( Brij 98) 购于Sigma-Aldrich 公司，批号为MKBP0994V; 丙二醇购于Sigma-Aldrich 公司，批号为WXBB1075V; 冰醋酸购于北京化工厂，批号为20080103; 乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

健康雄性SD 大鼠，5 周龄，体重约( 200 ±10)g，由斯贝福( 北京) 实验动物科技有限公司提供，合格证号SCXK( 京) 2011-004。

2 方法2. 1 模型药物HPLC 法的建立分别配制各模型药物对照品的对照液、体外透皮试验空白接收液及含药体外透皮试验接收液，考查各方法专属性、线性关系、精密度及相对回收率，见表1。

结果显示，接受液中其他成分对各模型药物的测定均无干扰，其中，蛇床子素在0. 01 ～100mg·L - 1 线性关系良好，低、中、高3 个质量浓度( 0. 1，10，50 mg · L - 1 ) 的日内精密度分别为0. 29%，0. 060%，0. 14%，日间精密度分别为1. 8%，0. 13%，0. 19%，相对回收率分别为95. 63%，100. 6%，100. 1%; 川芎嗪在0. 1 ～400 mg·L - 1 线性关系良好，低、中、高3 个质量浓度( 1，20，200 mg·L - 1 ) 的日内精密度分别为0. 35%，0. 12%，0. 20%，日间精密度分别为2. 4%，2. 5%，2. 7%，相对回收率分别为95. 59%，95. 80%，97. 61%; 阿魏酸在0. 1 ～200 mg·L - 1 线性关系良好，低、中、高3 个质量浓度( 1，20，100 mg·L - 1 ) 的日内精密度分别为0. 38%，0. 21%，0. 25%，日间精密度分别为1. 8%，0. 15%，0. 14%，相对回收率分别为91. 72%，90. 74%，95. 24%; 葛根素在0. 1 ～400 mg·L - 1线性关系良好，低、中、高3 个质量浓度( 1，20，200 mg·L - 1 ) 的日内精密度分别为0. 48%，0. 32%，0. 26%，日间精密度分别为0. 22%，0. 070%，0. 050%，相对回收率分别为97. 48%，97. 74%，99. 27%; 京尼平苷在0. 1 ～400 mg·L - 1线性关系良好，低、中、高3 个质量浓度( 1，20，200mg·L - 1 ) 的日内精密度分别为0. 79%，0. 72%，1. 2%，日间精密度分别为1. 7%，2. 3%，1. 2%，相对回收率分别为96. 41%，97. 84%，99. 59%。

2. 2 体外经皮渗透试验2. 2. 1 离体鼠皮的制备在体外经皮渗透实验前，取雄性SD 大鼠断颈处死，用剃毛器小心剃去腹部鼠毛后剥离其腹部皮肤，在玻璃板上小心剔除皮下脂肪组织和黏连物，然后用磷酸缓冲液( PBS) 清洗干净，待用。

2. 2. 2 供给液的制备为求算薄荷醇和薄荷油的经皮透渗稳态流速、滞后时间，采用无限给药技术进行体外透皮实验。

故供给池中药液的配制方法为:将足量的模型药物分别溶于丙二醇-水( 80∶20) 混合溶剂系统中，加入相应浓度薄荷醇或薄荷油，涡旋5min，超声15 min 使其充分溶解。

2. 2. 3 体外透皮试验将剥离的大鼠腹皮固定于FranZ 扩散池之间( 扩散池有效扩散面积为1. 77cm2，接收池体积为7 mL) ，皮肤角质层面朝向供给池，真皮层面朝向接收池。

在加入供给液前平衡约0. 5 h，供给池加入供给液2 mL，然后封口膜封住供给池口防止水分蒸发; 接收池中蛇床子素透皮接收液选择3% Brij98 PBS 为接收液，其他药物均以0. 01 mol PBS 溶液( pH 7. 2) 为接收液。

温度设置为( 32 ±0. 3) ℃，接收池搅拌子转速为300 r·min - 1。

在1，2，4，6，8，10，12，22，24 h 分别取样1mL，然后向接收池中补加相同体积新鲜接受液，所得样品过滤后，按照建立的方法测定药物含量。

2. 3 衰减全反射傅利叶变换红外光谱( ATR-FTIR)研究将制得的大鼠腹皮置于0. 4% 胰蛋白酶溶液中，室温放置约10 h，然后用棉签小心分离皮肤角质层，取得的角质层片用蒸馏水洗清干净，置于真空干燥箱干燥，备用。

取大小适宜( 1 cm × 1 cm) 的干燥角质层片，分别置于10 mL 离心管内。

试验分为空白组( Blank组，不做任何处理) 、对照组[Control 组，丙二醇-水( 20∶80) 溶剂处理]、薄荷醇组和薄荷油处理组( 配制方法同透皮试验挥发油) 。

分别取干燥角质层片置于约5 mL 各组对应促透剂溶液中，室温条件下处理12 h 后，用蒸馏水清洗掉角质层片上残留溶剂，放置于真空干燥箱37 ℃脱水干燥。

干燥后的角质层片采用衰减全反射傅利叶变换红外光谱进行扫描测定，仪器参数设置为: 分辨率2 cm - 1 ; 扫描次数为100; 扫描范围为650 ～4 000 cm - 1。

2. 4 透皮数据处理及统计分析根据药物单位面积累积透过量与时间作图得到药物经皮渗透动力学曲线，各药物的累积透过量可按下式计算。

Q = ( Cn × V + Σn - 1i = 1Ci × Vi) /A其中，Q( μg·cm - 2 ) 为单位面积累积透过量，V为扩散池的体积( 7 mL) ，Vi为每次取样体积，Cn和Ci分别为第n 次和第i 次取样时接收液中药物浓度，A 为扩散面积( 1. 77 cm2 ) 。

以累积透过量对时间作图，所得直线部分( 6 ～12 h) 的斜率即为稳态透皮速率( Jss，μg·cm - 2·h - 1 ) ，直线部分反向延长线与X 轴的交点即为滞后时间( Tlag，h) 。

为进一步比较促透剂的促渗效果，按下列公式计算其经皮促渗倍数: ER( enhancement ratio) = Jss( 含促透剂) /Jss( 不含促透剂) ; 实验数据以珋x ± s 表示，以SPSS 16. 0软件进行数据统计分析，组间比较采用t 检验，P < 0. 05为差异有统计学意义。

3 结果3. 1 促透剂对模型药物的经皮促透作用情况薄荷醇与薄荷油对各模型药物渗透过大鼠皮肤的体外渗透动力学曲线及相关经皮渗透参数的影响分。

除个别模型药物外，1%薄荷醇和薄荷油对各模型药物的经皮渗透参数( 如体外稳态经皮速率、累积透过量等) 没有显著影响，而随着促透剂浓度的增加，对各模型药物的经皮渗透速率增加明显，并表现出显著性差异( P <0. 05) ，表明薄荷醇与薄荷油对不同lgP 药物经皮渗透的影响呈现出浓度依赖性关系。