白细胞计数

实验白细胞计数

【原理】用稀醋酸溶液，将血液稀释一定倍数并破坏红细胞，混匀后，充入计数池，在显

微镜下计数一定体积内的白细胞数，经过换算求得每升血液中的细胞数。

【试剂】

一：3%冰醋酸+10g/L 美兰，蒸馏水加至100ml

二：3%冰醋酸1.5mL和1%龙胆紫1 mL，混匀，加蒸馏水至100mL。

三; 3%冰醋酸+25%戊二醛1ML，加蒸馏水至100mL

【器材】显微镜、枪、计数板

【方法】

取稀释液38 ul +混悬液20ul，混匀静置片刻，充池，2′后，低倍镜计数四角的四个大方格中的白细胞总数。在低倍镜下，白细胞呈园形，浆透亮，核呈紫黑色，稍有折光，借此特点可与杂质相区别。WBC/ML =四大格白细胞总数×50

【注意事项】

1. 采血迅速，避免凝血，深度适宜，不能过甚挤压。

2. 计数时若每大格间细胞数相差>8 个时，应重新充池计数。二次重复计数结果相差

不得>10%。

3. 当白细胞<3.0×109/L 时，可数8 格内白细胞数（二个池），或吸40ul 血降低稀释

倍数，结果除2。当白细胞>15.0×109/L 可适当增加稀释倍数

4. 试管，计数扳应清洁，以免有杂质误认为白细胞，稀释液要过滤。

5. 对压线细胞计数原则是：数上不数下，数左不数右。

6. 周围血出现有核红细胞时，可使白细胞数偏高，应进行校正：

100

WBC/L=X·----------

100+ Y

X：未校正前白细胞数

Y：分类100个白细胞时，遇到的有核红细胞数

7. 充液过多，断续充池，产生气泡，充池后移动盖片，均可使细胞分布不匀，使计数

结果偏低。

8. 充池前一定要充分混匀，适当用力快速振荡30 秒即可达混匀目的。不宜产生过多

气泡，其粘在管壁上易蒸发，影响重复计数。