发酵法生产L缬氨酸技术
L-缬氨酸
中文名L-缬氨酸英文名L-Valine别名L-2-氨基-3-甲基丁酸2-氨基-3-甲基丁酸缬氨酸英文别名L-2-Amino-3-methylbutyric acidL-Valine, FCC Grade L-2-Amino-3-methylbutyric acid, FCC GradeH-Val-OH2-Amino-3-methylbutanoic acidLvalineL-2-Aminoisovaleric acid(S)-(+)-2-Amino-3-methylbutyric acid1-2-Amino-3-methylbutyric acidValineCAS 72-18-47004-03-7EINECS 200-773-6化学式C5H11NO2分子量117.148inchi InChI:1S/C5H11NO2/c1-3(2)4(6)5(7)8/h3-4H,6H2,1-2H3,(H,7,8)熔点315℃水溶性85 g/L (20℃)折射率1.507产品用途是人体必需氨基酸,医药上用作氨基酸输液成分之一,合成新药,还可作为食品添加剂安全术语S24/25 - 避免与皮肤和眼睛接触。
上游原料葡萄糖L-缬氨酸- 用途1.属必需氨基酸。
成人男子需要量为10mg/(kg·d)。
L-型的生理效果为D-型的2倍。
如缺乏可引起神经障碍、停止发育、体重下降、贫血等。
作为营养增补剂,可与其他必需氨基酸共同配制氨基酸输液、综合氨基酸制剂。
米制糕饼中添加缬氨酸(1g/kg),产品有芝麻香,用于面包亦能改善风味。
2.氨基酸类药。
营养增补剂,可作氨基酸输液、综合氨基酸制剂的主要成分。
L-缬氨酸是支链氨基酸(BCAA)中的一种,动物体自身不能合成,必须从日粮中摄取才能满足其营养需要,因此属于必须氨基酸。
氨基酸是蛋白合成的基本结构单位、代谢所需其他胺类的前身,是生命不可缺少的物质。
目前已知氨基酸有20~30种,其中有些在人体内可以合成,称为非必需氨基酸,有些则在人体内不能合成,必需从外界补充,称为必需氨基酸,哺乳动物的细胞需要12种必需氨基酸:L-精氨酸、L-胱氨酸、L-组氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-赖氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-缬氨酸。
缬氨酸生产工艺
缬氨酸生产工艺
缬氨酸(Xylose lysine deoxycholate agar,简称XLD)是一种富含氨基酸缬氨酸的培养基,常用于肠道细菌的分离和鉴定。
下面将介绍缬氨酸的生产工艺。
缬氨酸的生产工艺主要分为以下几个步骤:
1. 原料准备:选择优质的缬氨酸发酵菌株,如大肠杆菌等。
购买缬氨酸发酵培养基,如缬氨酸粉末。
将培养基按照要求加入适量的水,并加热至沸腾搅拌溶解使其均匀。
2. 接种培养基:将培养基倒入消毒的发酵罐中,接种适量的缬氨酸发酵菌株。
并将发酵罐放入恒温恒湿的培养箱中,提供适量的氧气和营养物质。
3. 发酵培养:调节培养基的温度、pH值和搅拌速度等条件,使其适合于缬氨酸发酵菌株的生长和代谢。
同时定期采样检测培养液中的缬氨酸浓度以及细菌的生长情况。
4. 分离和提取:当发酵液中的缬氨酸达到一定浓度时,停止发酵过程。
使用离心机将发酵液离心分离得到细胞渣和发酵液。
5. 精制和纯化:将细胞渣用适量的溶剂进行提取,使得缬氨酸与其他有机物分离。
然后利用蒸馏、结晶、过滤等方法对提取液进行精制和纯化,得到纯度较高的缬氨酸产品。
6. 干燥和包装:将纯化的缬氨酸产品进行干燥处理,除去其中
的水分。
然后按照客户要求进行包装,一般采用密封的塑料袋或瓶子进行包装。
通过以上几个步骤,就可以得到纯度较高的缬氨酸产品。
在整个生产过程中需要注意卫生和生产环境的控制,以确保产品的质量和安全。
缬氨酸作为一种重要的氨基酸,在生物医药、食品等领域具有广泛的应用前景。
因此,缬氨酸的生产工艺也需要不断优化和改进,以提高产量和质量,满足市场需求。
L-缬氨酸的发酵工艺条件研究
L 缬 氨酸 是人体 必 需氨基 酸 之一 , 一 具有 多种 生 理功 能. 医 药 上 , 一 氨 酸 主要 用 于配 制 复 合 氨 在 L缬 基 酸 制剂 , 特别 是应 用 于配制 高 支链 氨基 酸输液 及
1 4 - 氨 酸 测 定 方 法 . L 缬
1 材 料 与 方 法
1 1 菌 种 . 谷 氨酸 棒杆 菌 C C 2 8 7 购 自中国工业 微 生 I C O8 ,
采 用纸 上层 析法 . 1 4 1 标 准曲 线 的制 定 .. 精 密 称取 缬氨 酸标 准 品
物 菌种 保藏 管理 中心 .
匀. 分别 吸取 1 L于层析 滤纸上 , 在层析 液E 正 丁 v( 醇): 冰 乙 酸 ): H O)=4:1:1 中展 开 , V( V( = = ] 6 ℃烘干 , 0 0 茚 三 酮一 酮 溶 液 喷湿 , 0 O 用 .5 丙 6 ℃烘
干 , 色_ . 下 斑 点 放 入 1 显 3 剪 ] 0 mL 的 C S  ̄7 u O 一5
硫 酸 亚 铁 :. 1g L, 酸 锰 : . 1g L, 质 碳 酸 0 0 / 硫 0 0 / 轻 钙 : 0 0g L, — e :. / L Ie : . / 生 1 . / L M t 0 3g L, —l 0 2g L, u
C H。 2 OH溶 液洗脱 , 常温静 置 2h 直 至斑 点完 全洗 , 脱_ ] 以洗脱剂 作空 白对 照 , ¥ 2 C型 分光 光度 4. 在 2P
摘
要 :以谷 氨 酸棒 杆 菌 ( oy eat im gua cm) IC 08 为 生 产 菌 株 , 用 单 因 素 实 验 研 C rnbc r ltmi eu u CC 2 8 7 采
_从发酵液中高效提取L-缬氨酸的工艺研究
近 年 来 ,L- 缬 氨 酸 作 为 必 需 氨 基 酸 , 在 输 液 、 食 品、饲料、农药等方面的应用日益广泛,价格一直较 高,如有廉价高效的生产及提取方法,将可推进 L- 缬氨酸的应用。 因此,研究 L-缬氨酸的提取方法很 有实用价值。
发酵法生产缬氨酸是一个复杂的生物化学反 应过程。 发酵液呈深黄色浆状,表面有少许泡沫,pH 值为 6.7~7.2,发酵液中的主要成分有培养基的残留 物、代谢产物和菌体。 因此,研究缬氨酸提取工艺、 寻求高效率低成本的提取方法,便成了需要解决的 首要问题。 膜分离技术在常温下操作无相态变化, 分离精度高,选择性强,污染小,因而逐步取代絮凝 法、离心法,成为分离提取氨基酸发酵液中产物的
将超滤液在 75℃下减压浓缩至原体积的 1 / 3~ 1 / 5,调 pH 值为 6.0,降温至 20℃以下,抽滤得到 L-
2 结果
2.1 L-缬氨酸提取工艺流程 本实验采用黄色短杆菌 XV0505 的发酵 液 ,该
菌株具有 L-亮氨酸和 L-异亮氨酸双缺陷标记,因 此发酵液中没有 L-亮氨酸和 L-异亮氨酸杂酸,主 要杂酸是 L-丙氨酸, 且丙氨酸的含量在 4 g / L 以 下,提取工艺中可以考虑先除去菌体蛋白,再进行 浓缩结晶,获得 L-缬氨酸产品,对结晶母液通过离
件:选择 732 强酸性阳离子树脂,料液 pH 值为 3.0 左右,用 0.4 mol / L 的氨水以 1.0 mL / min 的速度 洗 脱 ,L-缬 氨 酸
的收率为 89.2%。 结论:通过有机膜过滤和离子交换法分离提取发酵液中的 L-缬氨酸,可以提高提取收率和产品质
量。
[关键词] L-缬氨酸;发酵;提取;离子交换
[收稿日期] 2010-10-15 [基金项目] 国家科技重大专项(2008ZX09401-05);
发酵法生产L-缬氨酸菌种和工艺技术
发酵法生产L-缬氨酸菌种和工艺技术1. 产品介绍L-缬氨酸(L-Valine)具有保持神经系统机能正常运转的作用,不足时则易使生长停滞、运动失调。
缬氨酸能增强免疫能力,有促进肝脏再生的作用。
人体缺乏时会影响肌体生长发育,引起神经障得、运动失调、贫血等。
1.1 化学名称:L-2-氨基-3-甲基丁酸1.2 分子式:C5H11 NO21.3 分子量:17.151.4 特征与用途:白色单斜晶系晶体或结晶性粉末,用乙醇水溶液重洁净者为无色板状或鳞片状结晶。
无臭,有特殊苦味。
熔点约315℃。
5%水溶液的PH值为5.5~7.0。
对热、光及空气稳定。
易溶于水(8.85g/100ml,25℃),几乎不溶于乙醇和乙醚。
与亮氨酸的分离困难。
属必需氨基酸。
用途:营养增补剂。
可与其他必需氨基酸共同配制氨基酸输液、综合氨基酸制剂。
2. 用途1. 食品添加剂和动物饲料。
2.营养增补剂。
3.食品强化剂、食品营养强化剂。
4. 食品增香剂和发色剂。
5. 氨基酸输液。
6. 合成环孢菌素和缬沙坦。
7. 氨基酸和高级脂肪酸制成的表面活性剂。
8. 以氨基酸作为载体的抗肿瘤药物,如苯丙氨酸芥子气。
9. 高效免疫抗生素的原料。
3.我们的技术参数发酵浓度:50-55g/l发酵时间:50-55hrs收率:82.5%转化率:18-20%4.质量标准:FCC,1996项目质检标准含量(以干基计) 98.5%~101.5% 重金属(Pb计)≤0.002%铅≤10mg/kg干燥失重(105℃,3h) ≤0.3%灼烧残渣≤0.1%旋光度[α]20D 26.7~+29.0。
发酵法工艺生产小品种氨基酸技术实施方案(一)
发酵法工艺生产小品种氨基酸技术实施方案一、实施背景随着生物技术的不断发展,利用微生物发酵法生产小品种氨基酸已成为当前及未来氨基酸产业的重要趋势。
小品种氨基酸具有特殊的生物活性及高附加值,其市场需求不断增长。
然而,传统的合成法生产小品种氨基酸存在流程长、产率低、成本高等问题,无法满足市场日益增长的需求。
因此,开发利用微生物发酵法生产小品种氨基酸的技术具有重要意义。
二、工作原理发酵法工艺生产小品种氨基酸主要依赖于特定的微生物菌种,通过控制发酵条件,如温度、pH、溶氧量等,实现微生物的高效代谢,进而产生目标氨基酸。
其主要工作原理如下:1.菌种筛选与优化:选择具有高生产能力及耐受性的微生物菌种,并通过遗传工程手段进行改造,提高其生产效率及抗逆性。
2.培养基优化:设计并优化适合微生物生长及代谢的培养基,提高目标氨基酸的产量。
3.发酵过程控制:通过实时监控发酵过程,调整发酵条件,保证微生物的高效代谢及目标氨基酸的产生。
4.分离纯化:利用物理、化学及色谱等方法,将目标氨基酸从发酵液中分离出来,得到高纯度的产品。
三、实施计划步骤1.菌种筛选与优化:挑选具有高生产能力的微生物菌种,通过遗传工程手段进行改造,提高其生产效率及抗逆性。
2.培养基优化:设计并优化适合微生物生长及代谢的培养基,提高目标氨基酸的产量。
3.发酵过程控制:通过实时监控发酵过程,调整发酵条件,保证微生物的高效代谢及目标氨基酸的产生。
4.分离纯化:利用物理、化学及色谱等方法,将目标氨基酸从发酵液中分离出来,得到高纯度的产品。
5.产品质量检测:对所得产品进行质量检测,确保其符合相关标准。
6.工业化放大:根据实验室结果,进行工业化放大研究,为后续的工业化生产提供技术支持。
四、适用范围此技术适用于生产各种小品种氨基酸,如L-脯氨酸、L-缬氨酸、L-异亮氨酸等。
不仅适用于实验室研究,也适用于工业化生产。
五、创新要点1.利用微生物发酵法生产小品种氨基酸,突破了传统合成法的限制,提高了生产效率及产率。
【CN109652476A】一种发酵生产L缬氨酸的方法【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910136501.5(22)申请日 2019.02.25(71)申请人 内蒙古拜克生物有限公司地址 010206 内蒙古自治区呼和浩特市托克托县托克托工业园区(72)发明人 钟迎东 叶朋 宫颖章 王奇 (74)专利代理机构 北京精金石知识产权代理有限公司 11470代理人 刘俊玲(51)Int.Cl.C12P 13/08(2006.01)C12R 1/15(2006.01)(54)发明名称一种发酵生产L-缬氨酸的方法(57)摘要本发明公开了一种发酵生产L -缬氨酸的方法,包括以下步骤:将谷氨酸棒状杆菌接种到发酵培养液中发酵培养,当发酵培养至6-8h时流加含维生素H和钼酸铵的葡萄糖溶液,使发酵培养液中的葡萄糖控制在20g/L,当发酵培养至30-40h时流加含柠檬酸盐的葡萄糖溶液,使发酵培养液中的葡萄糖控制在5g/L。
本发明的有益效果为:提高了L -缬氨酸的产量和糖酸转化率,同时可以有效抑制杂酸的产生,提高发酵液中L -缬氨酸的纯度,为L -缬氨酸的规模化生产提供了技术支持。
权利要求书1页 说明书5页CN 109652476 A 2019.04.19C N 109652476A1.一种发酵生产L -缬氨酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:将谷氨酸棒状杆菌接种到发酵培养液中发酵培养,当发酵培养至6-8h时流加含维生素H和钼酸铵的葡萄糖溶液,使发酵培养液中的葡萄糖控制在20g/L。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的发酵培养液,包括以下质量百分比的组分:玉米浆1.2-1.8%、硫酸铵1.0-1.5%、磷酸二氢钾0.15-0.2%、硫酸镁0.01-0.04%和螺旋藻粉0.01-0.05%,灭菌前pH为7.0-7.2。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的谷氨酸棒状杆菌的接种量为发酵培养液体积的3.5-6.2%。
从发酵液中高效提取L-缬氨酸的工艺研究
[ b tat Obet e s g ogncm m rn la o n o xhn et et c L vl e f m te f m na A src] jci :U i rai e ba eft t n ad in ecag o x at - ai r h e e t— v n i ri r n o r
量。
[ 关键 词 】 L 缬 氨 酸 ; 酵 ; 取 ; 子 交换 一 发 提 离
[ 图分 类 号 ] T 9 2 Q 0 中 Q 2 ; 53
[ 献标识码 ] A 文
[ 章编 号 ] 1 0— 0 22 1)2 0 2 — 5 文 0 9 0 0 (0 1 — 2 9 0 0
Su y n t d o L- l e f ce t Va i Ef in Ex r c i n n i t a to Te h o o y r m t e c n l g f o h Fe - r
生
L TY E ERS I O CHNOL N BI TE OGY Vo.2 No2 Ma. 0 1 . r,2 1 2 1
物
技
术
通
讯
29 2
d i 03 6 ̄.s. 0 — 0 2 0 0 .1 o:1 . 9 i n1 9 0 0 . 1 . 离子 树 脂 , 液 p 值 为 30左 右 , 0 o L的 氨 水 以 1 / n的速 度 洗 脱 ,一 氨 酸 选 3 料 H . 用 . ml 4 / . mL mi 0 L缬
的 收率 为 8 . 。结 论 : 过 有机 膜 过 滤和 离子 交 换 法 分 离提 取 发 酵 液 中的 L 缬 氨 酸 , 以提 高 提 取 收 率 和 产 品质 92 % 通 一 可
江南大学科技成果——微生物发酵生产L-缬氨酸
江南大学科技成果——微生物发酵生产L-缬氨酸
成果简介
L-缬氨酸是生命有机体的重要组成部分,在生命体内物质代谢调控和信息传递等许多方面扮演着重要角色。
L-缬氨酸属于八种必需氨基酸之一,也是三种支链氨基酸之一。
L-缬氨酸发酵是典型的代谢控制发酵。
国内虽有天然蛋白质水解液分离提取L-缬氨酸的产品,但由于其产量很低,质量不佳,纯度不高,所以无法实现大规模工业化生产。
利用微生物发酵法生产L-缬氨酸具有原料成本低,反应条件温和及易实现大规模生产等优点,是一种非常经济的生产方法。
但是,以微生物发酵法生产L-缬氨酸,国内大多数菌株的产酸水平不高,特别是L-缬氨酸的生产水平和产量远不能满足国内市场的需求。
因此,开展发酵法生产L-缬氨酸的研究具有极其重要的意义。
本研究室通过高通量筛选策略,获得一株高产缬氨酸的黄色短杆菌。
技术指标发酵60h,产量60g/L,糖酸转化率为25%。
产品性能:产量高,质量优,纯度高。
创新点:生产成本低、副产物少。
效益分析经初步核算,预计项目L-缬氨酸的综合成本为8万元/吨。
按11万元/吨的价格销售,以300吨级L-缬氨酸生产线为例,年毛利润约900万元。
应用情况
广泛应用于食品、医药、饲料、农业和日化工等方面,尤其随着抗癌药物制剂、氨基酸输液制剂的飞速发展,对原料氨基酸的需求量日益增长,市场需求量不断增加。
改进L_缬氨酸发酵工艺的实验研究_陈刚
文章编号:1005-4014(2003)01-0040-04改进L-缬氨酸发酵工艺的实验研究陈 刚,王开国,浦军平(江苏亚太氨基酸有限公司,江苏张家港 215600)关键词:L-缬氨酸;菌株;发酵摘要:以谷氨酸产生菌乳糖发酵短杆菌(Brev ibactium lactofermentum)AT CC13058为出发菌株,经亚硝基胍和硫酸二乙脂多次诱变,获得了一株产L-V al的多重标记菌株,其遗传标记为AHV r+α-AB r+2-T a r+Leu++M et-+Ileu-。
通过控制葡萄糖的浓度、玉米浆浓度、豆饼水解液浓度,调节发酵罐上风量(通气比)、温度、pH值,使30t发酵罐产酸率达3.0%~3.5%。
在合适的条件下,副生杂酸少,且不副生Leu、Ileu、M et等比较难分离的杂酸,转化率超过20%,达到较高的生产水平。
详述了实验过程及其结果。
中图分类号:T Q922.9 文献标识码:AExperimental study for improving the fermentation process of L-ValineCHEN Gang,W ANG Kai-guo,PU Jun-ping(Jiangsu Yatai Amino Acid Co.L td.,Zhangjiag ang215600,China)Key words:L-Valine;strain;fermentationA bstract:Using Brevibacterium actfermentum as production glutamate strain and metagenizing with ni-trosoguanidine and diethy l sulfare,w e obtain a multi-character strain with inheritance charater AHV r+α-AB r+2-Ta r+Leu++Met-+Ileu-.Controlling the glucose concentration,the SC L concentration,and the soybean hydroly state concentration;adjusting the ventilating quantity,temperature,and pH value in the30-Tone fermentation tanks,we acquire the L-Valine productivity of3.0%-3.5%with.Under suit-able condition,it delivers little miscellaneous amino-acide and no L-Leu,L-Met,and L-Ileu.These acids are hard to be separated from L-Valine.It achieves a high production level w ith transformation ratio more than20%.This article details the experimental process and results. L-缬氨酸属于支链氨基酸,主要用于氨基酸输液和氨基酸口服液。
谷氨酸棒杆菌发酵成缬氨酸的反应式
谷氨酸棒杆菌发酵成缬氨酸的反应式引言谷氨酸棒杆菌(Escherichia coli)是一种常见的细菌,广泛应用于生物工程和制药领域。
其中,谷氨酸棒杆菌的发酵过程可以将谷氨酸转化为缬氨酸,这是一种重要的氨基酸,被广泛应用于食品和医药领域。
本文将探讨谷氨酸棒杆菌发酵成缬氨酸的反应式及其应用。
谷氨酸棒杆菌发酵成缬氨酸的反应式谷氨酸棒杆菌发酵成缬氨酸的反应式可以表示为:谷氨酸+ ATP + NADH + H+ + O2 → 缬氨酸 + ADP + Pi + NAD+ + H2O其中,ATP为三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate),NADH为辅酶Ⅱ还原型(Nicotinamide adenine dinucleotide),H+为质子,O2为氧气,ADP为二磷酸腺苷(Adenosine diphosphate),Pi为无机磷酸盐,NAD+为辅酶Ⅱ氧化型(Nicotinamide adenine dinucleotide),H2O为水。
该反应式描述了谷氨酸棒杆菌在发酵过程中,通过消耗ATP、NADH、H+和O2,将谷氨酸转化为缬氨酸,并生成ADP、Pi、NAD+和H2O。
谷氨酸棒杆菌发酵成缬氨酸的应用谷氨酸棒杆菌发酵成缬氨酸的过程在食品和医药领域具有重要的应用价值。
食品领域应用缬氨酸是一种重要的氨基酸,在食品加工中被广泛应用。
缬氨酸可以提高食品的鲜味和鲜香,增强食品的口感。
同时,缬氨酸还可以作为一种增味剂,用于增加食品的风味和口感。
谷氨酸棒杆菌发酵成缬氨酸的反应式提供了一种可行的方法来生产缬氨酸,为食品工业提供了重要的原料。
医药领域应用缬氨酸在医药领域具有广泛的应用。
缬氨酸可以用作一种药物的原料,用于合成抗生素、抗肿瘤药物等。
此外,缬氨酸还可以作为一种营养补充剂,用于改善人体免疫系统功能,促进健康。
谷氨酸棒杆菌发酵成缬氨酸的反应式为医药领域提供了一种可行的生产方法。
谷氨酸棒杆菌发酵成缬氨酸的优化策略为了提高谷氨酸棒杆菌发酵成缬氨酸的效率和产量,可以采取以下优化策略:1.优化培养基配方:通过调整培养基中的营养物质浓度和比例,可以提高菌体生长速度和缬氨酸产量。
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发酵法生产L-缬氨酸技术简介
1.产品简介
L-缬氨酸属于分枝链氨基酸,是人体必需氨基酸之一,具有多种生理功能,主要用于配制复合氨基酸输液和其它治疗药物。
最近,人们发现L-缬氨酸是合成一种免疫抗生素的重要中间体,其年消耗量猛增到数千吨。
分子结构式:
分子式:C5 H11 NO2
分子量:117.5
CAS号:72-18-4
2.产品规格
本品为白色结晶或结晶性粉末;无臭,味微甜而后苦。
本品在水中溶解,在乙醇中几乎不溶。
比旋度取本品,精密称定,加6mol/L盐酸溶液溶解并释稀成每1ml
中含80mg的溶液,依法测定(附录Ⅵ E),比旋度为+26.5°至+29.0°。
•形态:白色结晶粉末
•纯度:≥98.5
•PH值(50g/l):5.5-7.0
•干燥失重:≤0.3%
•硫酸盐灰分:≤0.1%
•硫酸盐:0.03%
饲料级别的缬氨酸要求含量30-35%即可。
3.菌种分类
谷氨酸棒杆菌(亮氨酸缺陷型)。
4.工艺描述
发酵在通过大型微生物工艺灭菌后的无菌容器中进行。
发酵过程中,温度、曝气、搅拌、PH值都可控,并添加豆油作为碳源和防沫剂。
发酵的培养基纯度通常通过检查菌落的生长行为和均匀度来测定。
当发酵进行到预计程度时,将发酵液进行转移以进行下一步的提取。
将发酵液进行酸化、过滤。
用溶剂从滤液中提取,并在酸性PH值条件下结晶得到产品。
经过筛选和拌匀后,将晶体分离、干燥和包装。
5.技术参数
•最终效价:40 ± 5 g/lt
•发酵时间:65 ± 5 hrs
•回收率:65%(医药级),75%(食品级),80%(饲料级)
•糖转化率:24 %
•发酵类型:批式+补料(葡萄糖和尿素)。