蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

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蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测蔬菜是我们日常生活中不可或缺的食物之一,是我们餐桌上重要的一部分。

随着农业生产的发展,农药的使用也在逐渐增加,为了提高产量和质量,农民们经常使用有机磷及氨基甲酸酯类农药来防治病虫害。

这些农药的残留问题却引起了人们的关注。

对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测成为了一个迫切需要解决的问题。

有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前农业生产中广泛使用的一类农药,它们能够有效地抑制害虫和杂草的生长,提高作物产量。

在农药使用过程中,由于农民对农药的使用不当或者过量使用,导致蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量超标的情况屡见不鲜。

这些农药残留会对人体健康造成潜在的威胁,因此对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测显得尤为重要。

目前,关于蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测的方法有很多种,包括色谱法、光谱法、质谱法等。

这些方法虽然在检测有机磷及氨基甲酸酯类农药残留方面具有一定的灵敏度和准确性,但是它们需要昂贵的设备和复杂的操作流程,并且需要较长的时间才能得到结果,无法满足快速检测的需求。

研究人员正在不断寻找更加简便、快速和准确的方法来检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留。

近年来,基于生物传感技术的快速检测方法逐渐成为研究热点。

生物传感技术是一种利用生物材料的特异性反应来检测目标化合物的技术,具有操作简便、灵敏度高、结果快速等优点。

在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测中,常用的生物传感技术包括酶传感技术、免疫传感技术和核酸传感技术等。

酶传感技术是利用酶对目标化合物的特异性反应来进行检测的技术。

在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测中,常用的酶包括乙酰胆碱酯酶、磷酸化酶等。

当有机磷及氨基甲酸酯类农药存在时,它们会与酶发生特异性的化学反应,产生颜色变化或发光信号,从而实现对有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。

除了传统的生物传感技术之外,近年来还出现了一些新的快速检测方法,如基于纳米材料的快速检测方法、基于光学技术的快速检测方法等。

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
随着人们生活水平的提高,对于蔬菜的需求量也越来越大,这也就导致了蔬菜的生产
量和种植面积也不断增加。

而随之而来的问题就是蔬菜生产的过程中使用的农药残留问题。

农药残留问题一直备受人们关注,因为它直接关系到人们的健康。

其中有机磷及氨基甲酸
酯类农药一直是蔬菜中常见的一种农药,因此对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量
的快速检测显得尤为重要。

有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前蔬菜中最常见的一类农药,它们在蔬菜生产过程中
被广泛使用,可以有效地防治害虫和病害,提高蔬菜产量。

有机磷及氨基甲酸酯类农药在
使用过程中也存在一定的风险,因为它们对人体健康有一定的危害,长期食用残留有机磷
及氨基甲酸酯类农药过量的蔬菜对人体健康将会产生严重的影响,甚至会引发一些严重的
疾病。

对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测变得尤为重要。

目前,常见的
有机磷及氨基甲酸酯类农药残留检测方法有气相色谱法、液相色谱法和免疫测定法等。


些方法可以对有机磷及氨基甲酸酯类农药残留进行比较精确的检测,但是需要花费较长的
时间和费用,无法满足蔬菜快速上市的需求。

为了解决这一问题,近年来,一些新型的有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测技
术开始逐渐出现。

基于光谱技术的有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术备受关注。

光谱技术是一种非破坏性的检测技术,它可以通过测量样品对光的吸收、散射、发射等特
性来分析样品的成分和性质。

这种技术具有快速、简便、高效的特点,非常适合于蔬菜中
有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。

蔬菜农药残留快速检测技术

蔬菜农药残留快速检测技术

蔬菜农药残留快速检测基础知识一、蔬菜农药残留酶抑制法检测原理农残速测仪检测原理是酶抑制法,在必然条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶的活性,其抑制率与农药的浓度呈正相关。

在正常情况下,酶催化代谢产物水解,其水解产物与显色剂反映,产生黄色物质,用分光光度计在410纳米处测定吸光度随时间的转变值,计算出抑制率,通过抑制率的大小可以判断样品中是不是有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。

二、农药残留速测法检测对象一、有机磷类农药包括:甲胺磷、水胺硫磷、乐果、敌百虫、敌敌畏、氧化乐果、马拉硫磷、甲基异柳磷、辛硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、乙酰甲胺磷、久效磷、杀螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱等。

二、氨基甲酸酯类农药包括:叶蝉散、速灭威、西维因、涕灭威、克百威(呋喃丹)、异丙威、灭多威等。

三、农药残留速测法依据的标准中华人民共和国国家标准GB/—2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生部中国国家标准化管理委员会发布四、检测方式一、准备阶段试剂或条件发生转变及时间距离比较长时,应重做。

①开机预热15分钟。

②仪器调0。

③仪器调100。

④制作对照。

第①、②、③步在天天利用前必需做,在改换新一瓶试剂时也必需做。

二、对照①在干净的试管顶用移液管加入提取液。

②用移液器提取的酶,加入到试管中。

③用移液器提取的显色剂,加入到试管中。

④适度晃动试管,使液体混合均匀,25℃左右的温度放置15分钟。

⑤15分钟后,用移液器提取的底物,加入到试管中,晃动试管,使液体混合均匀,马上倒入比色皿中,放入仪器1通道,按启动键开始检测。

⑥时间到后显示对照结果,一般对照值应在30以上,按Y保留,对照结束。

3、样品检测液①用天平称取表面干净蔬菜或水果1g剪成1cm左右的方块,放入小烧杯中。

②用移液器提取5ml的提取液用振荡器震荡2分钟。

③将烧杯中的液体用移液器提取的上清液到试管中,为检测液。

酶抑制率法快速检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量

酶抑制率法快速检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量

·50·试 验 研 究农业开发与装备 2013年第4期于人类健康。

因此,该“液肥”系列产品对环境、土壤和人类健康的影响,是无法用增产增收效果来衡量的。

3.3 操作简单、容易掌握该“液肥”系列产品应用操作简单,使用方便、针对性强,见效快,通过四年来的推广应用,深受广大农民群众欢迎,成为在发展绿色生态农业中起着不可忽视的作用。

3.4 增强植株抗性,达到健身栽培效果明显该“液肥”系列产品应用后,作物生长健壮,减轻了自然灾害,减少农药和化肥用量,保证农产品的无公害、绿色、安全生产,促进了干旱地区的农业生产向着高产、高效、优质、绿色农产品方向发展的转变,促进了社会健康和文明发展,实现了农业的可持续发展。

摘要:介绍了采用酶抑制率法快速测定有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的技术,酶抑制率法即分光光度法,是根据在一定条件下,有机磷及氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶的正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关,进而通过抑制率来判断蔬菜中是否含有有机磷及氨基甲酸酯类农药的存在。

因其快速、简便、经济等特点,应用范围涵盖较广,保证有问题的蔬菜及时的排除。

关键词:酶抑制率法;快速检测;蔬菜;有机磷及氨基甲酸酯类;农药残留量;乙酰胆碱酯酶;分光光度法食品安全是民生工程,关系国计民生的头等大事。

农产品安全是食品安全工作中的重中之重,也是未来社会的发展趋势。

农产品质量安全是人民群众生存的基本要求,因此,农产品质量安全有保障,人民群众的身体健康和生命安全才有保障。

目前,各级政府和各级农业行政主管部门对蔬菜生产与流通环节中的监管措施和频次在不断强化。

这就需要我们开发出用时少、成本低,易操作的快速检测方法应用于蔬菜生产基地、蔬菜批发市场等地。

而传统的检测技术使用大型仪器设备,由于其检测时间长、成本高、对检测人员专业性要求高等不利因素而无法马上对有问题的农产品进行应急处理。

1 实验原理酶抑制率法是在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性,造成神经传导介质乙酰胆碱的积累,影响正常传导,使昆虫中毒致死,根据这一昆虫毒理学原理,用在对农药残留的快速检测中。

KJ01蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测(精)

KJ01蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测(精)
《食品安全快速检测》
§3.1 蔬菜中有机磷和氨基甲 酸酯类农药残留量的快速检测
1.农药残留测试的相关知识点 2.农药残留的快速检测技术 3.多功能食品安全检测仪的使用
上海农林职业技术学院
一、背

2001年,杭州的空心菜有机磷中毒事件。 2003年,南京蔬菜有机磷残留导致中毒的事件。
2007年,福建大田发生有机磷污染水源导致中毒事件。
品种类中的“空白测”项,按“确认”键。
将放置10min的样液倒入比色皿中,加入0.1 mL低物摇匀,吹吸混匀
马上放入仪器中,按“检测”键,进行空白检测,记录反应3 min,过
程中请勿打开盖子。
《食品安全快速检测》
上海农林职业技术学院
实验:蔬菜农药残留快速检测技术-仪器法
3、 样品溶液测定
先于试管中加入2.5 mL样品提取液,再加入0.1 mL酶液、0.1 mL显色 剂。摇匀后于35 ℃放置10 min以上。 于“检测”状态下选择“农药残留”项目,按“确认”键,选择样品 种类中的“蔬菜”项,按“确认”键。 将放置10min的样液倒入比色皿中,加入0.1 mL低物摇匀,吹吸混匀 马上放入仪器中,按“检测”键,进行空白检测,记录反应3 min, 过程中请勿打开盖子。
药的总称。大多为磷酸酯类或硫代磷酸酯类。
有机磷类农药包括:甲胺磷、水胺硫磷、乐果、敌百虫、敌敌畏、氧化 乐果、马拉硫磷、甲基异柳磷、辛硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、乙酰甲 胺磷、久效磷、杀螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱等。 氨基甲酸酯类农药包括:叶蝉散、速灭威、西维因、涕灭威、克百威 (呋喃丹)、异丙威、灭多威等。
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实验:蔬菜农药残留快速检测技术-仪器法

植物酶抑制技术用于检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留

植物酶抑制技术用于检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留

植物酶抑制技术用于检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留随着现代农业的发展,农药在农作物的种植和保护中发挥着非常重要的作用。

农药残留问题也备受关注。

蔬菜作为人们日常饮食中不可或缺的一部分,其安全性更是备受关注。

有机磷及氨基甲酸酯类农药作为常用的农药之一,在蔬菜的生产过程中广泛使用,其残留量是否符合国家安全标准成为了备受关注的问题。

为了能够准确快速地进行蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的检测,研究人员提出利用植物酶抑制技术进行检测的方法。

下面将详细介绍植物酶抑制技术在检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留中的应用。

一、植物酶抑制技术的基本原理植物酶抑制技术是一种利用植物酶特异性反应来进行检测的方法。

在植物细胞中存在着多种酶,这些酶对不同的底物具有特异的反应活性。

有机磷及氨基甲酸酯类农药可以抑制某些植物酶的活性,因此可以利用这些受到抑制的植物酶来进行农药残留的检测。

基于植物酶抑制技术的检测方法具有快速、简单、灵敏等优点,因此在农药残留的检测中得到了广泛的应用。

1. 样品的处理在进行有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的检测之前,需要对蔬菜样品进行处理。

首先是提取样品中的目标化合物,通常采用的方法是将样品经过适当的分散和提取过程,将目标化合物从样品中提取出来,以保证后续的检测过程可以得到准确的结果。

2. 检测方法的建立植物酶抑制技术在检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留时,需要建立相应的检测方法。

这包括选择适当的植物酶作为检测底物、确定反应条件和标准曲线等。

通过不断的试验和优化,建立一套适合于蔬菜中农药残留的检测方法是非常重要的。

1. 快速性基于植物酶抑制技术的检测方法具有很高的快速性,可以在短时间内完成对蔬菜样品的检测。

这对于农产品质量监测中的紧急情况有很大的帮助。

2. 灵敏性植物酶抑制技术可以对目标化合物进行高灵敏度的检测。

这对于蔬菜中微量有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的检测非常有帮助。

3. 简便性相比于传统的检测方法,基于植物酶抑制技术的检测方法更为简便,不需要复杂的仪器和操作步骤。

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测【摘要】本文针对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测进行研究。

在分别阐述了研究背景、研究意义以及研究目的。

在详细介绍了有机磷类农药和氨基甲酸酯类农药的种类和残留量,以及快速检测技术的发展。

还探讨了蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的危害和现有快速检测方法的局限性。

在提出了发展更快速、灵敏的检测方法、加强对农药残留的监管措施以及保障蔬菜食品安全的重要性。

通过本研究,有望为解决蔬菜中农药残留问题提供有效的应对措施,保障公众健康。

【关键词】关键词:有机磷类农药、氨基甲酸酯类农药、农药残留、快速检测技术、蔬菜、食品安全、监管措施1. 引言1.1 研究背景农药残留一直是蔬菜安全问题中备受关注的话题。

随着人们生活水平的提高,蔬菜的需求量也越来越大,为了提高产量和保护作物免受病虫害的侵袭,农民逐渐使用了大量的农药。

农药残留却成为一个令人担忧的问题。

有机磷及氨基甲酸酯类农药是常用的农药之一,它们在农作物生长过程中被广泛使用,而这些农药具有较强的毒性,对人体健康产生潜在风险。

目前,我国蔬菜中农药残留问题严重,尤其是有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量较高。

据统计,蔬菜中有机磷类农药残留超标的情况时有发生,部分蔬菜中氨基甲酸酯类农药的残留量也存在较大的波动。

对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测势在必行。

通过对不同农产品中农药残留问题的分析研究,可以有效提高农产品质量安全,保障食品安全,减少对人体健康的潜在风险。

开展蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测研究,对于促进农产品质量安全和人民身体健康至关重要。

1.2 研究意义有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前农业生产中广泛使用的农药种类,其在提高农产品产量和质量方面发挥着重要作用。

随着农药残留对人体健康的不良影响逐渐被重视,快速、准确地检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的方法显得尤为重要。

本研究的意义主要表现在以下几个方面:蔬菜是人们日常生活中不可缺少的食品,而农药残留会对人体健康产生潜在威胁,因此必须对蔬菜中的有机磷及氨基甲酸酯类农药残留进行及时检测,以保障消费者的健康。

蔬菜中有机磷类农药残留的快速检测

蔬菜中有机磷类农药残留的快速检测

近年来,由蔬菜中农药残留超标而引起的中毒事故时有发生,因此对蔬菜中农药残留的监测显得尤为重要。

在蔬菜生产中,所使用的农药主要包括有机磷类和氨基甲酸酯类农药[1]。

传统的有机磷类和氨基甲酸酯类农药的残留分析方法主要有气相色谱法、液相色谱法、薄层色谱法及质谱联用[2]等,这些方法测试灵敏、准确度高,但预处理较为烦琐,测试时间较长,且仪器比较昂贵,对仪器的使用条件和操作人员要求也比较严格,只适用于实验室检测[3]。

如果能在蔬菜上市前快速检测出其农药残留是否超标,将能防止许多农药中毒事件的发生,确保消费者的安全。

为了满足市场需求,九十年代快速检测方法应运而生[4],其中植物酯酶抑制法以其操作简单、方法灵敏、检测快速、原料来源广、成本低廉、保存期长、适合现场检测等优点被广泛使用[5]。

目前用于快速检测的植物酯酶主要是从大米、小米、玉米、面粉[6]、大豆[7]等粮食作物中提取,在很大程度上造成了粮食的浪费。

本实验通过使用从苜蓿这种非粮食作物中提取的植物酯酶,以2,6—二氯乙酰靛酚为显色剂,通过对蔬菜中常用的氧化乐果、甲基对硫磷、甲拌磷、甲胺磷、久效磷等5种有机磷农药的敏感性研究,确定了蔬菜中有机磷农药残留的快速检测方法。

实验结果表明,该方法农药残留最低检测限较低,可以满足国内和欧盟对以上5种有机磷农药最低残留量的检测要求。

1试剂与仪器1.1仪器UV-2802PCS 型紫外可见分光光度计(上海尤尼柯仪器有限公司),高速冷冻离心机(法国JOUAN ),蔬菜中有机磷类农药残留的快速检测王亚飞,张金艳(黑龙江八一农垦大学文理学院,大庆163319)摘要:通过研究蔬菜中常用的5种有机磷农药对植物酯酶的抑制作用,以2,6—二氯乙酰靛酚为显色剂,确立了蔬菜中有机磷农药残留的快速检测方法。

实验结果表明:该方法能快速检测氧化乐果、甲基对硫磷、甲拌磷、甲胺磷、久效磷等5种有机磷农药在蔬菜中的残留,最低检测限范围为0.002~0.05μg ·mL -1。

农药残留速测卡使用说明

农药残留速测卡使用说明

农药残留速测卡使用说明一、适用范围和标准:本方法适用于蔬菜、水果中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测。

依据的标准是国标《GB/T5009。

199-2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》。

二、检测意义:在农业生产中,会在很长的一段时间内使用化学性农药,如果不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药,或施用了不允许在蔬菜、水果上使用的剧毒、高毒农药,就会引起农药超标或农药中毒。

目前所使用的农药按其化学结构大致可分为以下几类:有机氯类,有机磷类,氨基甲酸酯类,拟除虫菊酯类等。

在我国农药中,70%为有机磷农药,而在我国生产使用的有机磷农药中70%为剧毒、高毒类,而且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。

在以往发生的农药中毒案例中,由有机磷或氨基甲酸酯类引起的占95%以上。

因此是农药检测的重点。

三、检测步骤㈠样品的预处理1、整体测定法:选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm 左右见方碎片,取5g放入带盖瓶中,加入10mL纯净水或缓冲溶液,震摇50次(有条件可将提取瓶放入超声波提取器中震荡30秒),静置2min 以上待用。

【提示:每剪完一个样品,剪刀要用纯净水洗三次再剪另一个样品;使用一次性手套,以免交叉污染,影响测试结果】2、表面测定法:擦去蔬菜表面泥土,滴2~3洗脱液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。

【提示:实际操作中一般需滴3~5洗脱液在蔬菜表面摩擦后提取的待测样液才够检测用】㈡、检测1、将速测卡沿中间线对折一下,揭开透明膜,插入预热到指定温度的便携式农药残留速测仪检测槽中,用滴管吸取样品液滴在白色药片上2~3滴(每个样品需要更换一次吸管或用纯净水洗三次再使用),同时在空白对照卡白色药片上滴入纯净水或洗脱(缓冲)液.2、预反应10min,预反应后的药片表面必须保持湿润.再合上盖子显色3分钟。

3、显色结束,打开盖子进行比较判定.四、结果判定①白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同为阴性结果,表示无农药残留或浓度很低;②白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果,表示有农药残留且浓度高。

蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

GB/T 5009.199—2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测1 范围本标准规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。

本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。

测速卡法(纸片法)2 实验原理胆碱酯酶可催化靛酚乙酸脂(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。

3 实验试剂3.1 固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片(速测卡)。

3.2 pH 7.5磷酸盐缓冲液:分别称取15.0g 磷酸氢二钠[Na2HPO4•12H2O]与1.59g 无水磷酸二氢钾[KH2PO4],用500mL蒸馏水溶解。

4 实验仪器4.1 常量天平4.2 有条件时配备37℃ 2℃5 分析步骤5.1 整体测定法5.1.1 选取具有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右方形碎片,取5g 放入带盖瓶中,加入10 mL缓冲溶液,振摇50次,静置2min 以上。

5.1.2 取一片速测卡,用白色药片沾取提取液,放10min以上进行预反应,有条件时在37℃恒温装置中放置10min。

预反应后的药片表面必须保持湿润。

5.1.3 将速测卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。

5.1.4 每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。

5.2 表面测定法(粗筛法)5.2.1 擦去蔬菜表面泥土,滴2~3 滴缓冲液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。

5.2.2 取一片速测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。

5.2.3 放置10min以上进行预反应,有条件时在37℃恒温装置中放置10 min。

预反应后的药片表面必须保持湿润。

5.2.4 将速测卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着人们对食品安全意识的提高,食品安全问题成为社会关注的焦点。

蔬菜中农药残留是影响食品安全的主要因素之一,尤其是有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量高,对人体健康造成潜在危害。

因此,快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的方法显得尤为重要。

常规检测方法需要样品预处理、分离纯化并经过复杂分析程序,耗时且成本高。

因此,发展新的快速检测方法迫在眉睫。

近年来微波辅助提取-气相色谱/质谱联用技术被广泛用于农产品中农药残留快速检测,其操作简单、灵敏度高、准确性好等优点越来越受到人们的关注。

1.快速检测方法的原理微波辅助提取技术能够使有机磷和氨基甲酸酯类农药能够充分溶解于有机相中,提取过程快速、高效。

同时,气相色谱/质谱联用技术能够将溶解后的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留物清晰准确地分离和定量,具有高灵敏度和高准确性的特点。

2.实验步骤(1)样品准备:取新鲜蔬菜样品,将其洗净、切碎。

取适量的样品,加入玻璃离子交换树脂和水,混合后在微波辅助提取器中进行微波提取。

(2)微波辅助提取:将样品置于微波辅助提取器中,设定合适的时间和温度进行提取,这样有机磷和氨基甲酸酯类农药残留物极易被提取出来。

(3)萃取物的净化:通过萃取物的净化,将微波提取的样品溶液中的杂质去除,保证后续分析的准确性。

(4)色谱分析:将经过净化的样品溶液用气相色谱/质谱联用技术进行分析和检测,可以得到有关有机磷和氨基甲酸酯类农药残留物的详细数据。

3.实验结果与意义实验证明,该方法能够检测到蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留物的质量分数,具有较高的灵敏度和准确性。

比较不同样品准备方法得到的残留物结果,微波辅助提取方法的检测结果更加准确。

这种方法除了可以节省检测时间、简化操作步骤等优点,还可以为蔬菜生产和加工提供可靠的技术支持,更好地保障人们的食品安全。

(完)。

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测蔬菜是人们日常饮食中不可或缺的食物之一,但由于不规范的农药使用,导致蔬菜中常常存在有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留物。

这些农药残留物对人体健康造成潜在的威胁,因此对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测具有重要意义。

有机磷及氨基甲酸酯类农药常被广泛应用于蔬菜的种植过程中,主要用于杀虫、杀菌和除草。

这些农药残留物不仅会对蔬菜自身造成影响,还会通过人们饮食而进入人体,对人体健康造成潜在的危害。

有机磷农药一般被认为是神经毒剂,会抑制胆碱酯酶的活性,影响人体神经系统的正常功能。

氨基甲酸酯类农药则会对人体的心血管、呼吸和神经系统产生影响。

长期暴露于农药残留物可能会引发慢性中毒,并增加癌症和其他疾病的风险。

为了保障人们食品安全,各国纷纷制定了对农产品中农药残留物的安全标准。

快速检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的方法的研究成为了一个热点领域。

目前,研究人员提出了各种各样的检测方法,如色谱法、电化学法、光谱法等,不仅可以快速而准确地检测到蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留物的含量,还具有灵敏度高、操作简便等优点。

色谱法是一种常用的检测方法,主要包括气相色谱法和液相色谱法。

气相色谱法具有分离效果好、检测灵敏度高的特点,但需要耗费较长的样品前处理时间。

液相色谱法则是将样品溶解在溶剂中,并通过液相进行分离和检测,操作简便且快捷。

电化学法是一种非常灵敏的检测方法,可以通过检测电流的变化来间接地确定有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量。

光谱法则可以通过检测样品对特定波长的光的吸收或散射来确定有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量,具有快速和高灵敏度的特点。

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测是确保人们食品安全的重要一环。

各种各样的检测方法都在不断地研究和发展,以提供更准确、快速和有效的检测手段。

只有通过科学的方法确保农产品中农药残留物的安全水平,才能让人们放心地享用美味的蔬菜。

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留是造成食品安全问题的一个重要因素。

这些农药常用于农田中,以控制病虫害,帮助提高农作物产量。

过量或长期使用这些农药会导致其在农产品中残留过量,对人体健康造成潜在威胁。

快速检测蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留成为了食品安全监管的重要任务之一。

为能快速准确地检测出这些农药的残留量,科学家们进行了大量的研究,并开发了许多不同的检测方法。

一种常用的检测方法是高效液相色谱法(HPLC)。

这种方法基于样品中目标物与色谱柱中填充物之间的相互作用,通过控制样品在柱中的流动速度,分离并测量目标分析物。

利用此方法,可以快速、准确地检测出蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留。

还有一些新兴的技术用于快速检测蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量。

基于免疫分析的方法,如酶联免疫吸附测定法(ELISA)和免疫层析法,利用特异性抗体与目标农药残留物结合,从而实现快速、灵敏的检测。

还有基于生物传感器的方法,如电化学生物传感和光学生物传感,利用生物分子与目标化合物之间的相互作用来检测、定量目标农药残留。

在选择适合的检测方法时,需要考虑多个因素,包括检测的灵敏度、准确性、简便性和快速性等。

目前,各种方法已经在实践中得到应用,并逐渐得到改进和完善。

蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测是保障食品安全的重要环节。

通过选择适当的检测方法,并加强监管,能够有效地控制这些有害物质在蔬菜中的残留,保障公众食品安全。

蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测—酶抑制率法(分光光度法)

蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测—酶抑制率法(分光光度法)

结果计算
抑制率(%)=[(ΔA0-ΔAt)/ ΔA0]×100 式中: ΔA0对照溶液反应3min吸光度的变化值; ΔAt样品溶液反应3min吸光度的变化值;
结果判定


结果以酶被抑制的程度(抑制率)表示。 当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时,表 示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农 药存在,样品为阳性结果。 阳性结果的样品需要重复检验2次以上。
It
原理
在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱 酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度 呈正比。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物 (乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应,产 生黄色物质,用分光光度计在412nm处测定吸光度 随时间的变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以 判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类 农药的存在。
原理
试剂 pH8.0缓冲溶液 分别取 11.9g无水磷酸氢二钾与3. 2g磷酸二氢钾,用1000mL 蒸馏水溶解。
显色剂 分别取160mg二 硫代二硝基苯甲酸(DTNB) 和15.6mg碳酸氢钠,用20mL 缓冲溶液溶解,4℃冰箱中 保存。
试剂 底物:取25.0mg硫代乙酰 胆碱,加3.0mL蒸馏水溶解, 摇匀后置4℃冰箱中保存备 用。
乙酰胆碱酯酶 根据酶的 活性情况,用缓冲溶液溶 解,3min的吸光度变化ΔA0 值应控制在0.3以上。摇匀 后置4℃冰箱中保存备用。
分析步骤



样品处理:选取有代表性的蔬菜样品,冲洗掉表面泥土,剪 成1cm左右见方碎片,取样品1g,放入烧杯或提取瓶中,加 入5mL缓冲溶液,振荡1~2min,倒出提取液,静置3~5min,待 用。 对照溶液测试: 先于试管中加入2.5mL缓冲溶液,再加入 0.lmL酶液、0.1mL显色剂,摇匀后于37℃放置15min以上 (每批样品的控制时间应一致)。加入0.lmL底物摇匀,此 时检液开始显色反应,应立即放入仪器比色池中,记录反应 3 min的吸光度变化值Δ A0 样品溶液测试:先于试管中加入2.5mL样品提取液,其它操 作与对照溶液测试相同,记录反应3min的吸光度变化值Δ At

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着现代城市化发展和经济的迅速增长,人们对食品的质量和安全性越来越关注。

由于蔬菜作为人们日常饮食中不可或缺的组成部分,因此其安全性备受关注。

然而,蔬菜中存在着各种农药残留,其中包括有机磷和氨基甲酸酯类农药,这些化合物被广泛用于蔬菜生产中的虫害和病害防治。

因此,蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测具有重要的现实意义。

有机磷和氨基甲酸酯类农药对人体健康有潜在的危害。

有机磷类农药与乙酰胆碱酯酶的结合会引起中毒作用,而氨基甲酸酯类农药也有潜在的毒性。

在食品中,这些化合物的残留量可能会对人体健康造成不利影响。

因此,为了保障食品安全,有必要开发一种快速和准确的检测方法,以检测有机磷和氨基甲酸酯类农药在蔬菜中的残留量。

目前,常用的农药残留检测方法包括高效液相色谱(HPLC)、气相色谱法(GC)、液相质谱法等。

这些方法通常需要耗费大量的时间和成本,且需要复杂的仪器设备和高度技术人员的操作技能。

这使得这些方法不适合于在食品加工和销售过程中进行快速检测。

近年来,基于生物技术手段,如酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光探针法等新的农药残留检测方法得到了广泛的研究和应用。

这些方法具有快速、准确、低成本和易操作等优点,且可以实现高通量检测和多重残留物的同时检测。

其中,基于ELISA技术的快速检测方法是目前应用最广泛的一种方法。

ELISA技术是一种基于免疫反应原理的化学测量方法,通常用于快速检测多种化合物的残留量。

它通过检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的抗原抗体结合反应,确定蔬菜中的农药残留量。

基于ELISA技术的农药残留检测方法具有很多优势。

首先,它可以提高检测速度和准确性,同时可以检测多种化合物的残留量。

其次,它可以在不需要复杂的化学试剂和设备的情况下进行实验操作,降低检测成本和提高检测效率。

此外,ELISA技术还能够在食品加工和销售过程中进行快速检测,以保障食品安全。

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着人们对食品安全和健康意识的提高,农药残留问题在当前的社会中备受关注。

蔬菜中的农药残留一直是一个备受关注和争议的话题,因为蔬菜是我们日常生活中必不可少的食物之一。

而农药残留问题直接关系到我们的健康和生活质量,所以对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量进行快速检测势在必行。

有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前广泛应用于蔬菜生产过程中的一类农药,它们对昆虫、真菌等有害生物具有杀灭作用。

如果蔬菜在生长过程中使用这些农药并不当,或者在收获、加工及储藏过程中未能合理控制,就会导致蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留。

而这些农药残留物对人体健康造成的潜在危害也日益引起人们的重视。

目前,蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法主要分为化学方法和生物学方法。

化学方法的检测准确性高,但需要复杂的实验操作和昂贵的仪器,而且检测周期长,不适用于快速检测。

生物学方法虽然可以进行快速检测,但对样品的处理和分析较为繁琐,且可能存在一定的误差。

我们迫切需要一种快速、准确、简单的蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法,以确保蔬菜的食用安全。

在这方面,一种便捷、快速的光谱方法可能是一个潜在的选择。

近年来,随着光谱技术的迅速发展,包括近红外光谱、拉曼光谱及荧光光谱等在内的各种光谱技术已被广泛用于食品安全领域的快速检测。

这些技术由于操作简单、结果快速,因此较为适合蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测。

近红外光谱(NIR)是一种非破坏性分析技术,可以即时获取样品的光谱信息,并通过化学计量学方法对样品中的成分进行定量分析。

在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的检测中,近红外光谱可以通过对样品光谱进行快速扫描,获取样品中有机磷及氨基甲酸酯类农药的含量信息,从而实现对蔬菜中农药残留量的快速检测。

与传统的化学分析方法相比,近红外光谱技术具有操作简单、快速、成本低等优点,因此在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的检测中具有广阔的应用前景。

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

技术应用J1392019年6月·下蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测袁柱良1 李海英2(1.2东莞市常平镇农业技术服务中心,广东 东莞 523560)摘 要 蔬菜中农药残留作为食品安全管理的重要内容,关于检验蔬菜中的农药残留量主要是检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量。

气相色谱法是检测这两类农药的主要标准方法,尽管所具有的灵敏度较高,但是需要耗费较长时间,不适合在临床检验中进行大力推广。

为此,找到快速检测方法刻不容缓。

关键词 蔬菜;有机磷;氨基甲酸酯类农药;残留量;快速检测通过检测农产品中的农药残留可充分确保农产品的质量安全,为此农产品检测的重点在于科学的检测农药残留量。

当下,我国有一百多种有机磷与氨基甲酸酯类农药,质量参差不齐,品种复杂,在检测时很难有效的应用色相谱方法[1]。

若使用CL-BIII残留农药测定仪,对于假阳性问题很难得到有效避免。

现就两种快速检测方法进行详细介绍,详情如下。

1 酶抑制法1.1 原理有机磷与氨基甲酸酯类农药在一定情况下能够对胆碱酯酶的正常功能进行有效抑制,且抑制率的高低直接取决于农药浓度。

通过对待测样品的检测可掌握对乙酰胆碱酶活性抑制情况的了解,根据紫外可见分光光度计原理和412nm 波长的吸光度随时间的变化值可将抑制率计算出来,同时能够初筛/定性分析待测样品。

阴性:抑制率不足50%、阳性:超过50%[2]。

1.2 调试仪器采用CL-BIII 八通道残留农药测定仪。

将电源接通后,开机进行半小时预热;设置参数,选择通道,对照试样与样品试样可分别在第1、2-8通道放置;设置当日测试日期;调0使吸光度为0.000.1.3 试剂配制显色剂:取二硫代二硝基苯甲酸160mg、碳酸氢钠15.6mg,20ml 提取溶解,保存在4℃条件下。

提取溶液:取无水磷酸氢二钠11.9g、磷酸二氢钾3.2g,溶解时采用1000ml 蒸馏水,所制成的提取液pH 为8.0.乙酰胆碱酯酶:使用提取液进行溶解,控制3分钟吸光度变化值超过0.3,摇匀后保存在4℃条件下备用,保存期小于4天。

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测

蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着世界人口的不断增长和养分需求的提高,人们对农作物的生产和流通进行了广泛的农药使用。

虽然农药的大量使用使得农作物的产量得以提高,但是同样也是导致食品中有害农残残留的主要原因之一。

农药残留不仅会对人体健康产生潜在威胁,而且会危害环境生态系统稳定性。

因此,在对农产品进行贸易和出口时,对食品中的农残残留进行严格控制是非常重要的。

近年来,对食品中农药残留的检测逐渐受到了广泛关注。

有机磷和氨基甲酸酯类农药是食品中存在的最常见的两类农药残留。

在许多国家和地区,这些农药已成为必要的化学农药处理工具,以控制各种害虫,因此它们常常出现在大部分常见蔬菜中。

这就需要高效、精确的检测方法来评估蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药的含量。

目前,用于检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的方法有很多种,但是由于在进行检测过程中所需的成本和技术难度,许多检测方法并不实用。

因此,需开发出一种高效、便捷、快速、准确和经济的检测方法,帮助人们评估蔬菜中的农药残留。

近年来,蛋白质印迹技术已成为一种快速检测食品中农药残留的有效方法。

蛋白质印迹技术是一种基于分子识别原理的有效生物传感器技术,它可利用特定的分子识别机制,并产生特定的选择性,以实现对被测样品中的农药残留物的高灵敏度识别。

蛋白质印迹技术需要通过两个步骤来获得高选择性的蛋白质生物传感器。

第一步,将目标农药材料的印迹模板与生物传感器上的信号转导区结合。

在此步骤中,目标农药的分子结构被镶嵌在生物传感器的信号转导区,从而形成有选择性的绑定位点。

第二步,将生物传感器与蔬菜样本接触,旨在使目标农药残留物与生物传感器结合,进而产生信号输出。

蛋白质印迹技术是一种非常有前途的技术,可以用于快速、准确地检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的含量,具有很好的选择性。

不过,目前仍需进一步完善该技术,如降低干扰信号甚至是交叉反应产生的影响、提高灵敏度和检测速度等,才能被广泛应用。

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实验十三、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
(GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测)
方法一快速卡法
一、目的要求:学习快速卡法测定有机磷农残快速检验法及熟悉检验结果评定。

二、实验原理:
胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。

三、实验试剂:
1、固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片;
2、pH 7.5 磷酸盐缓冲液:分别称取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4•12H2O]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2PO4],用500 mL蒸馏水溶解。

四、实验步骤:
1、整体测定法
(1)选取具有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成1cm左右方形碎片,取5g防入带盖瓶中,加入10 mL缓冲溶液,振摇50次,静置2min以上.
(2) 取一片快速卡,用白色药片沾取提取液,放置10min以上进行预反应,有条件时在37 ℃恒温装置中放置10min。

预反应后的药片表面必须保持湿润。

(3)将快速卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。

注意:每批测定应设一个缓冲液的空白对照。

2、表面测定法(粗筛法)
(1)擦去蔬菜表面泥土,滴2~3滴缓冲液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。

(2)取一速片测卡,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。

(3)放置10 min以上进行预反应,有条件时在37 ℃恒温装置中放置10 min。

预反应10 min,预反应后的药片表面必须保持湿润。

(4)将快速卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。

注意:每批测定应设一个缓冲液的空白对照。

五、检测结果判断:
1、结果判断
结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制(为阳性)、未抑制(阴性)表示。

与空白对照卡比较,白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。

白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同,为阴性结果。

对阳性结果的样品,可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。

2、样品检测结果记录并对检测结果进行评价。

六、实验注意事项及说明:
1、速测卡灵敏度指标如下表所示。

部分农药检出限参考表
2、速测卡法符合率:在检出的30份以上阳性样品中,经气相色谱法验证,阳性结果的符合率应在80%以上。

3、葱、蒜、萝卜、韭菜、香菜、茭白、蘑菇和番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性,处理样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提或采用表面测定法。

对一些含叶绿素较高的蔬菜,也可采取整株(体)蔬菜浸提法,减少色素的干扰。

4、当温度条件低于37℃,酶反应速度随之放慢,药片加液后放置反应的时间也应相对延长,延长时间的确定,应以空白对照卡用手指(体温)捏3min时可以变蓝,即可往下操作。

注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性。

空白对照卡不变色的原因:一是药片表面缓冲溶液加得少、预反应后的药片表面不够湿润;二是温度太低。

5、红色药片与白色药片叠合反应的时间以3min为准,3 min后的蓝色会逐渐加深,24h后
颜色回逐渐退去。

方法二酶抑制率法(分光光度法)
一、目的要求:学习酶抑制率法测定果蔬有机磷和氨基甲酸脂类农药残留的原理和方法,注意实验过程的操作要点。

二、实验原理:
根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶的活性原理,向蔬菜的提取液中加入生化反应底物碘化乙酰硫代胆碱和乙酰胆碱酯酶,如果蔬菜不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量低,酶的活性就不被抑制,实验中加入的底物就能被酶水解,水解产物与加入的显色剂反应产生黄色物质。

如果蔬菜的提取液含有农药并残留量较高时,酶的活性被抑制,底物就不被水解,当加入显色剂时就不显色或颜色变化很小。

用分光光度计在412nm 处或农药残毒快速检测仪测定吸光值,根据计算出的抑制率,就可以判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留量的情况。

三、实验试剂和仪器:
(一)试剂
1、pH8.0缓冲液分别称取11.9g无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二氢钾,溶解于1000 mL蒸馏水中。

2、乙酰胆碱酯酶(实验专用酶)根据酶活力用缓冲溶液溶解,3 min的吸光值变化ΔA0值应控制在0.3以上。

摇匀后在0~5℃冰箱中保存,保存期不超过4天。

3、底物碘化乙酰硫代胆碱称取25.0 mg碘化乙酰硫代胆碱,用3.0 mL缓冲溶液溶解,在0~5℃下保存。

保存期不超过2周。

4、显色剂分别称取160 mg二硫代二硝基苯甲酸和15.6 mg碳酸氢钠,用20 mL缓冲溶液溶解,4℃冰箱保存。

5、可选用由以上试剂配置的试剂盒。

乙酰胆碱酯酶的ΔA0值应控制在0.3以上。

(二)仪器
1、分光光度计或相应的农残快速检测仪;
2、天平(0.01g);
3、恒温水浴或恒温培养箱。

四、实验步骤: 1、样品处理
选取有代表性的蔬菜样品,去掉不可食部分后称取蔬菜试样,冲洗掉表面泥土,剪成1 cm 左右碎片。

取样品1 g ,放入烧杯或提取瓶中,加入5 mL 缓冲液,振荡1~2 min ,倒出提取液,静置3~5 min ,待用。

2、对照溶液测试
先于试管中加入2.5 mL 缓冲液,再加入0.1 mL 酶液、0.1 mL 显色剂。

摇匀后于37 ℃放置15 min 以上(每批样品的控制时间应一致)。

加入0.1 mL 低物摇匀,此时检液开始显色反应,应立即放入比色皿中,记录反应3 min 的吸光度的变化值ΔA 0。

3、 样品溶液测定
先于试管中加入2.5 mL 样品提取液,其他操作与对照测定相同,记录反应3 min 的吸光度的变化值ΔA t 。

五、结果计算:
抑制率(%)=
1000
0⨯∆∆-∆A A A t
式中 ΔA 0——对照液反应3 min 吸光度的变化值; ΔA t ——样品溶液反应3 min 吸光度的变化值。

六、实验结果判断:
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率大于50% 时,表示样品中有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药残留,可判定样品为阳性结果,对检验结果阳性的样品需重复检验两次以上。

检验结果记录:
七、实验注意事项及说明
1、对检验结果阳性的样品,需用其他方法进一步确定残留农药的种类和进行定量测定。

2、酶抑制率法对部分农药的检出限为:
3、葱、蒜、萝卜、韭菜、香菜、茭白、蘑菇和番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性,处理样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提或采用表面测定法。

对一些含叶绿素较高的蔬菜,也可采取整株(体)蔬菜浸提法,减少色素的干扰。

4、当温度条件低于37℃,酶反应速度随之放慢,药片加液后放置反应的时间也应相对延长,延长时间的确定,应以胆碱酯酶空白对照测试的吸光度变化
ΔA0在0.3以上为准。

注意样品放置时间应与空白对照溶液放置时间一致才有可比性。

酶的活性不够和温度太低都可能造成胆碱酯酶空白对照液3 min的吸光度ΔA0变化值<0.3。

5、该法适用于大量蔬菜样本的筛检,不适用于最后的仲裁检测。

八、思考题
1、使用速测卡的注意事项有哪些?
2、影响胆碱酯酶抑制检测法的因素有哪些?如何解决?
3、可用何种检测方法对检验结果为阳性样品,进行进一步的定性和定量?。

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