(完整版)生活饮用水标准检验方法_微生物指标[1]
生活饮用水卫生标准新完整版
生活饮用水卫生标准新集团标准化办公室：[VV986T-J682P28-JP266L8-68PNN]《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2006)GB 5749—2006代替GB 5749-852007-07-01 实施生活饮用水卫生标准Standards for Drinking Water Quality前言本标准全文强制。
本标准自实施之日起代替GB 5749-85《生活饮用水卫生标准》。
本标准与GB 5749-85相比主要变化如下：——水质指标由GB 5749-85的35项增加至106项，增加了71项；修订了8项；其中：——微生物指标由2项增至6项，增加了大肠埃希氏菌、耐热大肠菌群、贾第鞭毛虫和隐孢子虫；修订了总大肠菌群；——饮用水消毒剂由1项增至4项，增加了一氯胺、臭氧、二氧化氯；——毒理指标中无机化合物由10项增至21项，增加了溴酸盐、亚氯酸盐、氯酸盐、锑、钡、铍、硼、钼、镍、铊、氯化氰；并修订了砷、镉、铅、硝酸盐；毒理指标中有机化合物由5项增至53项，增加了甲醛、三卤甲烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、1,1,1-三氯乙烷、三溴甲烷、一氯二溴甲烷、二氯一溴甲烷、环氧氯丙烷、氯乙烯、1,1-二氯乙烯、1,2-二氯乙烯、三氯乙烯、四氯乙烯、六氯丁二烯、二氯乙酸、三氯乙酸、三氯乙醛、苯、甲苯、二甲苯、乙苯、苯乙烯、2,4,6-三氯酚、氯苯、1,2-二氯苯、1,4-二氯苯、三氯苯、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯、丙烯酰胺、微囊藻毒素-LR、灭草松、百菌清、溴氰菊酯、乐果、2,4-滴、七氯、六氯苯、林丹、马拉硫磷、对硫磷、甲基对硫磷、五氯酚、莠去津、呋喃丹、毒死蜱、敌敌畏、草甘膦；修订了四氯化碳；——感官性状和一般理化指标由15项增至20项，增加了耗氧量、氨氮、硫化物、钠、铝；修订了浑浊度；——放射性指标中修订了总α放射性。
——删除了水源选择和水源卫生防护两部分内容。
——简化了供水部门的水质检测规定，部分内容列入《生活饮用水集中式供水单位卫生规范》。
生活饮用水微生物指标检验课件完整版
30min
菌落总数
• 定义：
•
是指水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养
48h后，所得1mL水样所含细菌菌落的总数 。
• 培养基： • 营养琼脂
• 设备： • 放大镜/菌落计数器
菌落总数平板计数法
1mL饮 用 水 水 样
[注意事项]
– 菌落总数测定中，应选择合适的稀释度进行。
（生活饮用水，国家标准规定每毫升不得超过100个，因此可 以直接吸取1毫升到平板进行培养）
– 各稀释管、相应平皿做好标记。包括：水样名称、 稀释度、时间、小组。
– 严格无菌操作。进行水样稀释时，每一稀释度均需 更换吸管。
– 倾注时，要注意营养琼脂的温度。 – 倾入琼脂后要混匀，待琼脂凝固后倒置培养。
菌落总数 贾第鞭毛虫
隐孢子虫
单位
MPN/100mL或 CFU/100mL
MPN/100mL或 CFU/100mL
MPN/100mL或 CFU/100mL
CFU/mL
个/10 L
个/10 L
限值 不得检出 不得检出 不得检出
100 <1 <1
说明 一般性污染 指示粪便污染 指示粪便污染 一般性污染
肠道原虫 肠道原虫
实验内容
– 水样采集； – 菌落总数的测定； – 总大肠菌群的测定; – 耐热大肠菌群的测定。
微生物指标常规检验流程
初发酵、复发酵试验结果
表2 一般水源水中菌落总数与水清洁程度的关系
耐热大肠菌群（thermotoletant Coliform Organisms）： 《生活饮用水卫生检验规范》
最新生活饮用水卫生标准(gb5749-)资料
生活饮用水卫生标准（GB5749-2006）1．范围本标准规定了生活饮用水水质卫生要求、生活饮用水水源水质卫生要求、集中式供水单位卫生要求、二次供水卫生要求、涉及生活饮用水卫生安全产品卫生要求、水质监测和水质检验方法。
本标准适用于城乡各类集中式供水的生活饮用水，也适用于分散式供水的生活饮用水。
2．规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是标注日期的引用文件，其随后所有的修改（不包括勘误内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB 3838 地表水环境质量标准GB/T 5750 生活饮用水标准检验方法GB/T 14848 地下水质量标准GB 17051 二次供水设施卫生规范GB/T 17218 饮用水化学处理剂卫生安全性评价GB/T 17219 生活饮用水输配水设备及防护材料的安全性评价标准CJ/T 206 城市供水水质标准SL 308 村镇供水单位资质标准卫生计生委生活饮用水集中式供水单位卫生规范3．术语和定义下列术语和定义适用于本标准3.1 生活饮用水drinking water供人生活的饮水和生活用水。
3.2 供水方式type of water supply3.2.1 集中式供水central water supply自水源集中取水，通过输配水管网送到用户或者公共取水点的供水方式，包括自建设施供水。
为用户提供日常饮用水的供水站和为公共场所、居民社区提供的分质供水也属于集中式供水。
3.2.2 二次供水secondary water supply集中式供水在入户之前经再度储存、加压和消毒或深度处理，通过管道或容器输送给用户的供水方式。
3.2.3 农村小型集中式供水 small central water supply for rural areas日供水在1000m3以下（或供水人口在1万人以下）的农村集中式供水。
生活饮用水微生物指标检验 PPT课件
在2012年成为常规检验项目
微生物指标检验方法的总结
细菌学 指标
菌落 总数
总 大肠 菌群
耐热 大肠 菌群
大肠 埃希 氏菌
平板 计数 法
多管 发酵 法
滤 膜 法
大肠埃希氏菌三种方法比较
多管发酵法 滤膜法 酶底物法
时间 验证试验
48h 需要
28h 需要
24h-28h 需要
简便 可操作性强 压膜机 较高
步骤
较繁锁
较简便
特殊设备 价格
/ 低
过滤设备 低
不产气
× 5管
耐热 培养 24h EC培 养液 44.5 ℃培 养 24 h
× 5管
× 5管
阳性
36± 1℃ 培 养 24h
阴性
报告 未检出
证实 试验 24h
型 无典
菌落
报告 阴性
EMB 36± 1℃ 培 养 24h
产气
有典型菌落
检 索 MPN表
结果.45μｍ的滤膜过滤水样，细菌被阻留 在膜上，将滤膜贴在MFC培养基上，44.5℃培养 24h能形成蓝色菌落的细菌为耐热大肠菌群。
• 培养基：
1. EC-MUG培养基
• 设备：
• 紫外灯：波长366nm
检测步骤
• 初发酵（同总大肠菌群），24h
• 耐热显色培养：阳性管接种，24h • 荧光观测，报告
大肠埃希氏菌多管发酵法检测步骤
水样
10 倍 稀 释
10mL
报告 阴性 乳糖 蛋白 胨培 养液 × 5管 耐热 显色 培养 24h
中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验方法微生物指标
中华人民共和国国家标准生活饮用水标准检验方法微生物指标Standard examination methods for drinking water一Microbioloical parameters1、菌落总数1.1平皿计数法1.1.1范围本标准规定了用平皿计数法测定生活饮用水及其水源水中的菌落总数本法适用于生活饮用水及其水源水中菌落总数的测定。
1.1.2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
1.1.2.1菌落总数standard plate - count 加cteria水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h后，所得1ml水样所含菌落的总数1.1.3培养基与试剂1.1.3.1营养琼脂1.1.3.1.1成分：A 蛋白陈10gB 牛肉膏3gC 氯化钠5gD 琼脂10g——20gE 蒸馏水1000ml1.3.1.2制法：将上述成分混合后，加热溶解，调整pH为7.4一7.6，分装于玻璃容器中（如用含杂质较多的琼脂时，应先过滤），经103.43 kPa (121℃，15lb）灭菌20 min，储存于冷暗处备用。
1.1.4仪器1.1.4.1高压蒸汽灭菌器。
1.1.4.2干热灭菌箱。
1.1.4.3培养箱36℃士2℃。
1.1.4.4电炉。
1.1.4.5天平。
1.1.4.6冰箱。
1.1.4.7放大镜或菌落计数器。
1.1.4.8 pH计或精密pH试纸。
1.1.4.9灭菌试管、平皿（直径9cm）、刻度吸管、采样瓶等1.1.5检验步骤1.1.5.1生活饮用水1.1.5.1.1门以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注人灭菌平皿中，倾注约15mL已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照1.1.5.1.2待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于36℃士1℃培养箱内培养48h，进行菌落计数，即为水样1 ml 中的菌落总数1.1.5.2水源水1.1.5.2.1以无菌操作方法吸取lml充分混匀的水样，注入盛有9ml、灭菌生理盐水的试管中，混匀成1 : 10稀释液。
《生活饮用水卫生标准》(GB5749_2006)2018年0802
水质106项《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2006)2016-01-11 文科_360阅 8129 转 77转藏到我的图书馆微信分享：GB 5749—2006代替GB 5749-852007-07-01 实施生活饮用水卫生标准Standards for Drinking Water Quality前言本标准全文强制。
本标准自实施之日起代替GB 5749-85《生活饮用水卫生标准》。
本标准与GB 5749-85相比主要变化如下：——水质指标由GB 5749-85的35项增加至106项，增加了71项；修订了8项；其中：——微生物指标由2项增至6项，增加了大肠埃希氏菌、耐热大肠菌群、贾第鞭毛虫和隐孢子虫；修订了总大肠菌群；——饮用水消毒剂由1项增至4项，增加了一氯胺、臭氧、二氧化氯；——毒理指标中无机化合物由10项增至21项，增加了溴酸盐、亚氯酸盐、氯酸盐、锑、钡、铍、硼、钼、镍、铊、氯化氰；并修订了砷、镉、铅、硝酸盐；毒理指标中有机化合物由5项增至53项，增加了甲醛、三卤甲烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、1,1,1-三氯乙烷、三溴甲烷、一氯二溴甲烷、二氯一溴甲烷、环氧氯丙烷、氯乙烯、1,1-二氯乙烯、1,2-二氯乙烯、三氯乙烯、四氯乙烯、六氯丁二烯、二氯乙酸、三氯乙酸、三氯乙醛、苯、甲苯、二甲苯、乙苯、苯乙烯、2,4,6-三氯酚、氯苯、1,2-二氯苯、1,4-二氯苯、三氯苯、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯、丙烯酰胺、微囊藻毒素-LR、灭草松、百菌清、溴氰菊酯、乐果、2,4-滴、七氯、六氯苯、林丹、马拉硫磷、对硫磷、甲基对硫磷、五氯酚、莠去津、呋喃丹、毒死蜱、敌敌畏、草甘膦；修订了四氯化碳；——感官性状和一般理化指标由15项增至20项，增加了耗氧量、氨氮、硫化物、钠、铝；修订了浑浊度；——放射性指标中修订了总α放射性。
——删除了水源选择和水源卫生防护两部分内容。
——简化了供水部门的水质检测规定，部分内容列入《生活饮用水集中式供水单位卫生规范》。
生活饮用水卫生标准(GB5749-2006)
生活饮用水卫生标准（GB5749-2006）1．范围本标准规定了生活饮用水水质卫生要求、生活饮用水水源水质卫生要求、集中式供水单位卫生要求、二次供水卫生要求、涉及生活饮用水卫生安全产品卫生要求、水质监测和水质检验方法。
本标准适用于城乡各类集中式供水的生活饮用水，也适用于分散式供水的生活饮用水。
2．规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是标注日期的引用文件，其随后所有的修改（不包括勘误内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB 3838 地表水环境质量标准GB/T 5750 生活饮用水标准检验方法GB/T 14848 地下水质量标准GB 17051 二次供水设施卫生规范GB/T 17218 饮用水化学处理剂卫生安全性评价GB/T 17219 生活饮用水输配水设备及防护材料的安全性评价标准CJ/T 206 城市供水水质标准SL 308 村镇供水单位资质标准卫生计生委生活饮用水集中式供水单位卫生规范3．术语和定义下列术语和定义适用于本标准3.1 生活饮用水drinking water供人生活的饮水和生活用水。
3.2 供水方式type of water supply3.2.1 集中式供水central water supply自水源集中取水，通过输配水管网送到用户或者公共取水点的供水方式，包括自建设施供水。
为用户提供日常饮用水的供水站和为公共场所、居民社区提供的分质供水也属于集中式供水。
3.2.2 二次供水secondary water supply集中式供水在入户之前经再度储存、加压和消毒或深度处理，通过管道或容器输送给用户的供水方式。
3.2.3 农村小型集中式供水 small central water supply for rural areas日供水在1000m3以下（或供水人口在1万人以下）的农村集中式供水。
生活饮用水中水中微生物的检验
生活饮用水中水中微生物的检验生活饮用水已经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理，含微生物很少，但当其水源水不洁或处理达不到要求时，仍然会含相当量的微生物甚至含有致病性微生物。
供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染。
因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。
我国生活饮用水水质标准(GB5749-85)中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/ml，总大肠菌群不得大于3个/L。
细菌总数相关的检验方法为平皿计数法，总大肠菌群为多管发酵法和滤膜法(GB5750-85)。
生活饮用水卫生标准和标准检验法修订版已在报批中(简称“报批稿”，下同)，“报批稿”中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100cfu/ml，总大肠菌群和粪大肠菌群不得检出(0MPN/100ml)。
cfu即菌落形成单位(colony forming units)，MPN为最近似数。
细菌总数相关的检验方法为平皿计数法，总大肠菌群和粪大肠菌群为多管发酵法和滤膜法。
大肠菌群的测定结果采用了国际上通用的cfu/100ml(或 MPN/100ml)为单位，以利于与国外的测定结果具可比性。
“报批稿”中还增加了粪大肠菌群(fecal coliform)的测定项。
粪大肠菌群的基本性状与总大肠菌群相似，而且是总大肠菌群的一部分，但在44.5℃仍能生长，这又与总大肠菌群不同。
粪大肠菌群细菌来源于人和温血动物的粪便。
检出粪大肠菌群表明已被粪便污染，有可能存在其他肠道致病菌或寄生虫等病原体的危险。
因此粪大肠菌被列为重要的卫生指标菌。
可疑污染的生活饮用水或疫区的生活饮用水有必要进行致病菌或病毒等相关致病性微生物的检验。
一样本采集采集的水样必须具有代表性。
在采集样品的整个操作过程中，必须注意无菌操作；采样容器需经过严格的灭菌；并保证在水样的采集、运送、保存过程中不受任何污染。
在采取自来水样品时，先用酒精灯将水龙头烧灼灭菌，灭菌后把水龙头完全旋开，放水5～10min，待积留于水管中的水排净后再行取样。
生活饮用水微生物检验方法和评价标准
生活饮用水微生物检验方法和评价标准随着人们物质生活的不断提高，对于生活饮用水也有了较高标准，并且饮用水已经成为了人们重点关注的对象。
饮用水是生命的保障，也影响着人们的身体健康，水在人体内维持着细胞的正常状态，促进着人的消化吸收、调节着人体温度，是万万不能缺少的。
所以我国政府对于饮用水的卫生很重视，并且制定了相应的水卫生标准。
我国对于饮用水的处理方式有许多，常见的有对水进行过滤沉淀或者加氯消毒。
这两种方法能清除水中的杂质和部分微生物，这样处理过后的水资源能够使用。
但是如今水资源运输管道、处理方法、等各种外界因素的对饮用水的影响很大，最终达到用户的水资源已经不能保证使用健康。
要想人们使用上健康卫生的饮用水，就要使微生物的检验达到标准，这对饮用水质量的提高有着非常重要的意义。
这篇文章对生活饮用水微生物检验方法和评价标准做出了一定分析，相关分析如下：一、生活饮用水微生物检测方法（一）多管发酵法（1）设备及试剂在对饮用水进行检测时，有一种专门检测大肠菌群的方法，这种方法就是多管发酵法。
大肠菌群是一种卫生细菌领域的用语，并不代表一种或者某一类细菌，而是一类无芽孢杆菌，这种菌群在35～37摄氏度的情况下，经过48个小时的培养可以发酵乳糖并且能够产酸产气。
这种菌群还有需氧以及兼性厌氧的特性。
在进行多管发酵的时候，需要用到的设备有许多，如：小倒管、天平、培养箱、冰箱、试管、显微镜等。
多管发酵时，需要用到培养基和一定的试剂，这些试剂包括：乳糖蛋白胨培养液、革兰氏染色液等。
（2）检测步骤第一步：首先选出十毫升的饮用水水样，将这些水样，倒入双料乳糖蛋白胨的培养基中；在取一毫升的饮用水水样，将其倒入单料，乳糖蛋白胨的培养基中；再将一毫升的水样倒入九毫升的生理盐水中，生理盐水必须经过无菌处理，二者在搅拌均匀后，取1/10的混合液，滴进单料乳糖蛋白胨培养液，这样的稀释度在完成后，每一个都要接种，并且数量为五管。
以上的步骤完成后，在进行培育的时，每天都要进行检查。
生活饮用水标准检验方法12微生物指标
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生活饮用水标准检验方法-微生物指标[1]
![生活饮用水标准检验方法-微生物指标[1]](https://img.taocdn.com/s3/m/6ddc49a9daef5ef7ba0d3c6c.png)
修订后
微生物指标 限值 微生物指标
限值
-
肠球菌/（CFU/100mL）
0
-
产气荚膜梭状芽胞杆/（CFU/100mL）
0
一、菌落总数
修订前
修订后
细菌总数
菌落总数
原理：细菌总数是指水样在一定 定义：水样在营养琼脂上有氧条 条件下培养后（培养基成分、培 件下37℃培养48h后，所得1ml水 养温度和时间、pH、需氧性质等） 样所含菌落的总数。 所得1ml水样所含菌落的总数。按 本规范规定所得结果只包括一群
酶底物法定义：总大肠菌群酶底物法是指在选择性培养基上能产生β半乳糖苷酶的细菌群组，该细菌群组能分解色原底物释放出色原体 使培养基呈现颜色变化，以此技术来检测水中总大肠菌群的方法。 培养基：MMO-MUG培养基（Minimal Medium ONPG-MUG）。 本方法可分为定性和定量。 定量法：10管法、51孔定量法 培养条件： 36±1℃ 24h
在滤膜上,将滤膜贴在选择培养上, 膜过滤水样, 将滤膜贴在添加乳
经培养后,计数生长在滤膜上的典 糖的选择培养上, 37℃ 培养24h，Fra bibliotek型大肠菌群菌落数。
能形成特征菌落的需氧和兼性厌
培养条件：37℃ 18-24h
氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌以检 测水中总大肠菌群的方法。
培养条件：37℃ 24±2h
酶底物法
能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组分解ONPG使培养基呈黄色 酶底物法的主要特点： 优点： 可同时判断水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌 检测时间较短，只需18-24h，最长需要28h 无需确证试验 操作简单，对试验条件和人员要求低 缺点： 检测成本高
总大肠菌群三种方法的比较
时间 验证试验 步骤 特殊设备 价格
中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验方法微生物指标
中华人民共和国国家标准生活饮用水标准检验方法微生物指标Standard?examination?methods?for?drinking?water一Microbioloical? parameters 1、菌落总数1.1平皿计数法1.1.137℃?培养48h后，所得1ml水样所含菌落的总数3gC????氯化钠5gD????琼脂10g121℃，15lb）灭菌20?min，储存于冷暗处备用。
1.1.4.1高压蒸汽灭菌器。
1.1.4.2干热灭菌箱。
1.1.4.3培养箱36℃?士2℃?。
1.1.4.4电炉。
1.1.4.5天平。
1.1.49cm45℃36℃士1℃?1cm翌中的菌落数，除2求出每平方厘米内平均菌落数．乘以皿底面积63.6cm?中华人民共和国国家标准???生活饮用水标准检验方法微生物指标Standard?examination?methods?for?drinking?water一Microbiolo只ical?parameters?????2、总大肠菌群2.1多管发酵法 2.1.137℃?10g?B????牛肉膏????????????????????3g?C????乳糖??????????????????????5g?D????氯化钠????????????????????5g?E????嗅甲酚紫乙醇溶液（16g16g/l的澳甲酚紫乙醇溶液，充分混匀，分装于装有倒管的试管中，68.95kPa?(115℃，10lb10g?B??乳糖???????????????10g?C??磷酸氢二钾?????????2g?D??琼脂???????????????20g一30g?E??蒸馏水?????????????l000ml?F??伊红水溶液（20g/l)?20ml?G??美蓝水溶液（5g115℃?，10lb）高压灭菌20min。
临用时加热融化琼脂，冷至50℃?～55℃?1g?b??乙醇（95%，体积分数）??20mL?c??草酸钱水溶液（10g1g?b??碘化钾???????????2g?c??蒸馏水???????????300?mlB制法：将碘和碘化钾先进行混合，加人蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水。
生活饮用水水质标准(最新)
生活饮用水水质标准（最新）文章出处：网责任编辑：作者：人气：101834发表时间：2013-08-2610:50:00前言本标准全文强制。
本标准自实施之日起代替GB5749-85《生活饮用水卫生标准》。
本标准与GB5749-85相比主要变化如下：——水质指标由GB 5749-85的35项增加至106项，增加了71项；修订了8项；其中：——微生物指标由2项增至6项，增加了大肠埃希氏菌、耐热大肠菌群、贾第鞭毛虫和隐孢子虫；修订了总大肠菌群；——饮用水消毒剂由1项增至4项，增加了一氯胺、臭氧、二氧化氯；——毒理指标中无机化合物由10项增至21项，增加了溴酸盐、亚氯酸盐、氯酸盐、锑、钡、铍、硼、钼、镍、铊、氯化氰；并修订了砷、镉、铅、硝酸盐；毒理指标中有机化合物由5项增至53项，增加了甲醛、三卤甲烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、1,1,1-三氯乙烷、三溴甲烷、一氯二溴甲烷、二氯一溴甲烷、环氧氯丙烷、氯乙烯、1,1-二氯乙烯、1,2-二氯乙烯、三氯乙烯、四氯乙烯、六氯丁二烯、二氯乙酸、三氯乙酸、三氯乙醛、苯、甲苯、二甲苯、乙苯、苯乙烯、2,4,6-三氯酚、氯苯、1,2-二氯苯、1,4-二氯苯、三氯苯、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯、丙烯酰胺、微囊藻毒素-LR、灭草松、百菌清、溴氰菊酯、乐果、2,4-滴、七氯、六氯苯、林丹、马拉硫磷、对硫磷、甲基对硫磷、五氯酚、莠去津、呋喃丹、毒死蜱、敌敌畏、草甘膦；修订了四氯化碳；——感官性状和一般理化指标由15项增至20项，增加了耗氧量、氨氮、硫化物、钠、铝；修订了浑浊度；——放射性指标中修订了总α放射性。
——删除了水源选择和水源卫生防护两部分内容。
——简化了供水部门的水质检测规定，部分内容列入《生活饮用水集中式供水单位卫生规范》。
——增加了附录A。
——增加了参考文献。
本标准的附录A为资料性附录。
为准备水质净化和水质检验条件，贾第鞭毛虫、隐孢子虫、三卤甲烷、微囊藻毒素-LR等4项指标延至2008年7月1日起执行。
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Cryptosporidium 隐孢子虫生活周期
子孢子
滋养体
Ⅰ型裂殖体
裂殖子
裂殖子
成熟卵囊
合子
雌、雄配子体
Ⅱ型裂殖体
Cryptosporidium 隐孢子虫(染色后荧光显微镜下)
Giardia 贾第鞭毛虫 ➢ 特点:单一细胞原生动物，大小约10-15m，含4对鞭毛和
双核。人、动物共染。寄生人体内为蓝氏贾第鞭毛虫
培养基：ONPG-MUG
结果判定：水样变黄色同时在366nm的紫外光下产生蓝色 荧光为阳性。水样未变黄色而有蓝色荧光产生不能判定为 阳性。
五、贾第鞭毛虫子和隐孢子虫
贾第鞭毛虫和隐孢子虫是一类寄生于人和动物体 内的肠道原虫，可致人兽共患病。患此病的人和动物 从粪便中排出大量的卵(孢)囊污染环境，在地面水和 防护差的地下水及处理不良的自来水中都可检出卵(孢) 囊。随着社会发展，优质供水势在必行。对一些潜在 的危险因素加以限制很有必要。在此基础上，新标准 中增加了贾第鞭毛虫和隐孢子虫的检测方法。
培养条件：36±1℃ 培养4h 紫外灯：波长366nm，功率6W
➢酶底物法定义：在选择培养基上能产生β-半乳糖苷酶分 解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化，并能产 生β-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释放出荧光产物，使菌落 能够在紫外光下产生特征性荧光，以此技术来检测大肠埃 希氏菌的方法为大肠埃希氏菌酶底物法。
—U.S.EPA
两虫的检测方法（免疫磁分离荧光抗体法） 检测程序： 水样过滤 洗涤 离心 免疫磁珠捕获卵囊 磁珠与 卵囊复合物的分离 荧光标记和DAPI染色 显微镜检 查记述 结果报告 检测问题： ➢方法操作复杂 ➢检出率低 ➢无法进行生物活性判定 ➢不能进行属、种鉴定 ➢价格高
IDEXX Filta-Max® 手动/自动系统 －滤器及滤芯
1.水样过滤
水样从两侧流经压缩的海绵膜汇集至中孔 “两虫”在滤芯表面被捕获
水样流向
滤器连接套件
滤器 滤芯（过滤模 块）
2.洗涤(淘洗)滤芯
➢ 洗涤管 ➢ 滤芯置于洗涤管,并将
滤芯下部的压缩固定锣 栓解除 ➢ 周律性地压缩/扩展海绵滤 芯
洗涤(淘洗)装置
过滤器
500ml锥 形离心瓶
Filta-Max®手动淘洗装置 Filta-Max®自动淘洗装置
结果：5个10ml 管中阳性管数为0时， 结果：5个10ml 管中阳性管数为0时， MPN值为0（主要针对出厂自来水或 MPN值<2.2 需每天检验一次的水样）
滤膜法
修订前
修订后
滤膜法原理：用孔径为0.45μm 滤膜法定义：总大肠菌群滤膜法
的微孔滤膜过滤水样,细菌被截留 是指用孔径为0.45μm的微孔滤
➢ 易感人群：3岁以内婴儿；免疫功能受损害者；旅游者。
重要的动物宿主
➢贾第鞭毛虫在自然界广泛存在，包括两栖动物；鸟类； 哺乳动物在内的40多种动物均可成为贾第鞭毛虫的宿 主。
➢调查表明，人排出孢囊可使狗、海狸、麝鼠、沙土鼠 及大鼠等动物感染。
➢一些生活在水中的动物可被来源于人的贾第鞭毛虫孢 囊感染，因此这些动物即使不是主要宿主也可能作为贾 第鞭虫的传播媒介。
多管发酵法 24-72h 需要 较繁 显微镜 低
滤膜法
酶底物法
24-48h 需要
24-28h 不需要
较简便
简便
显微镜、过滤设备 压膜机
低
较高
三、耐热大肠菌群（埃希氏菌属、耐热克雷伯氏菌）
检测方法：多管发酵法、滤膜法
修订前
修订后
原理：用提高培养温度的方法将自
然环境中的大肠菌群与粪便中大肠 菌群区分开，在44.5℃仍能生长的 大肠菌群,称为粪大肠菌群。
Cryptosporidium 隐孢子虫
➢特点:单一细胞原生动物，约3-7m 。有微小隐孢子虫、 鼠隐孢子虫和贝氏隐孢子虫三种，寄生于人、牛等体内的 主要为微小隐孢子虫（C．parvum）。 ➢宿主：人类、鸟类、鼠类、爬行类、鱼类 ➢感染源:隐孢子虫主要寄生在被感染的动物体肠道内，卵 囊通过粪便排出体外污染环境。 ➢易感人群：免疫缺陷者（如爱滋患者）、儿童、老人、医 务人员等 ➢传播方式:以粪-口，手-口途径为主，污染的水源和空气 均可传播。
隐孢子虫感染案例
1993 年在美国威斯康星州的东南 部港口城市密尔沃 基暴发 400,000 人被Cryptosporidium感染，4,000人到 医院 就医，60人死亡。调查显示致病源为处理不慎的饮 用水。
1996 年美国CDC将 Cryptosporidium感染列入国家必 须申报的传染病名单，2002年将 Giardia 感染列入国家 必须申报的传染病名单
定义：用提高培养温度的方法将自 然环境中的大肠菌群与粪便中大肠 菌群区分开，在44.5℃仍能生长的
大肠菌群,称为耐热大肠菌群。
四、大肠埃希氏菌
检测方法：多管发酵法、滤膜法、酶底物法 ➢大肠埃希氏菌多管发酵法定义：大肠埃希氏菌是指多管发酵法总大 肠菌群阳性，在含有荧光底物的培养基上44.5℃培养24h产生β-葡萄 糖酫酸酶，分解荧光底物释放出荧光产物，使培养基在紫外光下产生 特征性荧光的细菌，以此来检测水中大肠埃希氏菌的方法。 培养基：EC-MUG（4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖酫酸苷）。 培养条件：44.5±0.5℃ 培养24±2h。紫外灯：波长366nm，功率6W 大肠杆菌能产生β-葡萄糖酫酸酶分解MUG，菌落在366nm紫外光下产 生蓝色荧光 ➢滤膜法定义：用滤膜法检测水样后，将总大肠菌群阳性的滤膜 在含 有荧光底物的培养基上培养，能产生β-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释 放出荧光产物，使菌落能够在紫外光下产生特征性荧光，以此来检测 水中大肠埃希氏菌的方法。 培养基：NA-MUG
不得检出
水质非常规指标及限值
修订前
微生物指标
限值
-
-
修订后
微生物指标 贾第鞭毛虫/（个/10L） 隐孢子虫/（个/10L）
限值 <1 <1
小型集中式供水和分散式供水部分水质指标及限值
修订前
微生物指标
限值
-
修订后
微生物指标 菌落总数/（CFU/100mL）
限值 500
生活饮用水水质参考指标及限值
修订前
1.将装有淘洗液样本的500mL离心管置2000g离心力下，离心15min。慢慢地减速 ，（不能使用制动装置！）以免搅起沉淀物。
2.用吸气装置将沉淀物上层8-10mL处的悬浮物小心吸出 （吸气装置的真空应小于3.3kPa）。
捕获原理:
4.免疫磁珠捕获
标记A抗体的磁珠
具有A抗原的C/G
DYNAL MIX 1混 合器
MPC-S磁极
MPC-1磁极
5.免疫磁珠与孢（卵）囊复合物的分离
60min
5min
10min
染色镜检
6.染色及镜检
单克隆免疫荧光染色（FA-异硫氰酸荧光素） 或 DAPI(4,6-二氨基-2-苯基吲哚)染色 荧光显微镜（Differential Interference
FiltaMax Xpress 快速淘洗装置
压缩 空气
滤器＋滤芯
Filta-Max xpress快速法淘洗流程
❖ 滤器（带滤芯）放入淘洗装置 ❖ 淘洗装置连接缓冲液及空气压缩机 ❖ 加 4.0 巴(58 psi)压缩空气 ❖ 按动F1钮 ❖ 2分钟后收集400ml淘洗液 ❖ 快速全自动
淘洗液收集
3.离心浓缩
酶底物法定义：总大肠菌群酶底物法是指在选择性培养基上能产生β半乳糖苷酶的细菌群组，该细菌群组能分解色原底物释放出色原体 使培养基呈现颜色变化，以此技术来检测水中总大肠菌群的方法。 培养基：MMO-MUG培养基（Minimal Medium ONPG-MUG）。 本方法可分为定性和定量。 定量法：10管法、51孔定量法 培养条件： 36±1℃ 24h
总大肠菌群 每100mL水样中不得检出 CFU/100mL）
不得检出
耐热大肠菌/（MPN/100mL
粪大肠菌群 每100mL水样中不得检出 或CFU/100mL）
不得检出
游离余氯
在与水接触30min后应不 大肠埃希氏菌/
低于0.3mg/L,管梢末水不 （MPN/100mL或
应低于0.5mg/L
CFU/100mL）
能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组分解ONPG使培养基呈黄色 酶底物法的主要特点： 优点： ➢可同时判断水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌 ➢检测时间较短，只需18-24h，最长需要28h ➢无需确证试验 ➢操作简单，对试验条件和人员要求低 缺点： ➢检测成本高
总大肠菌群三种方法的比较
时间 验证试验 步骤 特殊设备 价格
在滤膜上,将滤膜贴在选择培养上, 膜过滤水样, 将滤膜贴在添加乳
经培养后,计数生长在滤膜上的典 糖的选择培养上, 37℃ 培养24h，
型大肠菌群菌落数。
能形成特征菌落的需氧和兼性厌
培养条件：37℃ 18-24h
氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌以检 测水中总大肠菌群的方法。
培养条件：37℃ 24±2h
酶底物法
修订后的标准，微生物学指标增加为6项：菌落总数、总 大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌、贾第鞭毛虫和 隐孢子虫。
同时在资料性附பைடு நூலகம்中增加了肠球菌和产气荚膜梭状芽胞杆 菌。
水质常规指标及限值
微生物指标
修订前
限值
修订后
微生物指标
限值
细菌总数 100 CFU/mL
菌落总数/（CFU/mL）
100
总大肠菌/（MPN/100mL或
生活饮用水卫生标准GB5749-2006 生活饮用水标准检验方法GB5750-2006
微生物指标及微生物检验的介绍
广东省CDC微生物检验所 严纪文
我国旧的饮用水水质标准是1985年颁布实施的GB574985，标准检验方法为GB5750-85。该标准与国外的饮用 水标准相比，主要差别在于微生物指标项目少，缺少有机 物和消毒副产物指标。微生物指标只有细菌总数和总大肠 菌群2项，不能确切的评价水质的卫生状况。