中药药理学实验

《中药药理学》实验教学内容

实验一丹参注射液对小白鼠耐常压缺氧的影响

[目的]观察丹参注射液对小鼠耐常压缺氧的作用，掌握小鼠耐常压缺氧实验方法。

[原理]缺氧对机体是一种劣性刺激。丹参注射液可提高机体的血氧利用率，降低机体耗氧量。同时复方丹参注射液可扩张血管（尤其是冠脉和脑部血管），改善微循环，增加供氧量，改善机体缺氧状态。本实验以小鼠在常压缺氧条件下呼吸停止死亡为指标观察丹参注射液的耐缺氧作用。

[器材]天平、200ml磨口广口瓶、小鼠灌胃器、秒表。

[药品] 丹参注射液2.5g/ml、生理盐水、苦味酸液、钠石灰（或等量氢氧化钠和碳酸钙）、凡士林。

[动物] 小鼠，体重18～22g。

[方法]取4只小鼠，雌雄不限，称重，用苦味酸标记，随机分为两组。给药组腹腔注射丹参注射液0.2ml/10g，对照组腹腔注射生理盐水0.2ml/10g，给药后10min 将小鼠放入盛有15g钠石灰的广口瓶内（每瓶只放1只小鼠），用凡士林涂抹瓶口盖严，使之不漏气，立即计时。以呼吸停止为判断死亡指标，记录小鼠因缺氧而死亡的时间。与对照组比较并进行统计学处理。

综合全实验室的结果，分别算出两组的平均存活时间

[结果]按表记录

丹参注射液对小鼠耐常压缺氧的影响

组别动物数剂量存活时间

（n）（ml/10g）（min）

生理盐水

丹参注射液水煎液

[注意]（1）瓶盖应注意封以免漏气，否则会影响实验的结果。（2）每个广口瓶最好只放1只小鼠，以免互相扰动影响实验结果。（3）钠石灰吸水和二氧化碳变色以后应立即更换

[思考题]（1）丹参注射液对小鼠耐常压缺氧的影响及其机制是什么？（2）本实

验的影响因素有哪些？

实验二大黄对小白鼠小肠运动的影响

[目的]观察大黄对小鼠肠道炭末推进时间、数量的影响。

[原理]中药不同制剂，其作用往往有不同。生大黄可使肠蠕动加速，粪便排出快，成形差；制大黄因其致泻成分分解破坏，作用较弱，因而粪便排出慢、少而成形。运用色素流动法，以黑色炭末为指示剂，以排黑粪时间，粪便性状和数量为指标，即可直接反应不同大黄制剂泻下作用的强弱。

[器材]小鼠灌胃针头，1ml注射器、钟罩，滤纸，鼠笼，台秤、棉签、记时钟、镊子。

[药品]生大黄水煎液1g/ml(含炭末0.1g/m1)，制大黄水煎液1g/ml(含炭末0.1g/ml，炭末生理盐水混悬液0.1g/m1，苦味酸。

[动物]小自鼠。

[方法]取禁食20h体重相近的小白鼠9只，随机分成3组．没组3只，苦味酸标记。各组分别按0.3m1/10g 灌服大黄、生理盐水溶液混悬液。

给药10min后，试验各组灌胃给予碳素墨水0.2ml,15min后将大鼠处死，打开腹腔，分理处小肠。从幽门和回盲部剪短小肠，测量小肠全场和碳末运行距离，计算碳末在小肠的运行率。

[结果]按结果记录分析并填表。

表大黄对小白鼠肠运动的影响（X±SD）

组别动物数

（只）剂量

（g/kg）

小肠长度

（cm）

碳末运行距

离(cm)

碳末运行率

（%）

生理盐水

生大黄

制大黄

[注意]（1）吸药液前，应将药液摇匀，以保证药量及炭末量准确。

[附] （1）生大黄制剂的制备：取生大黄100g，砸成小块后，以水浸没。冷浸24h后．过滤，40℃水浴浓缩至1g/ml。（2）制大黄制剂的制备：取制大黄l00g，

加水煎沸1.5h以上，过滤，药液水浴浓缩至1g/ml。

[思考题] （1）为何不同制剂的大黄使小鼠排便时间和排便数不同？临床应用大黄致泻应注意什么？（2）比较大黄和大黄的泻下作用，并解释导致的结果。

实验三延胡索乙素镇痛作用的比较（扭体法）

【目的】学习扭体法镇痛实验方法；观察延胡索乙素镇痛作用的差异。

【原理】动物的疼痛反应常表现出嘶叫、舔足、翘尾、蹦跳及皮肤、肌肉抽搐。化学法，即将某些化学物质，如强酸、强碱、钾离子、缓激肽等，涂布于动物的的某些敏感部位或腹腔注射。腹腔注射损伤物质引起受试动物腹痛，动物表现出“扭体反应”（即腹部内凹、躯干与后肢伸张、臀部高起）。本实验将0.7%醋酸直接腹腔注射，刺激腹膜引起持久的疼痛反应，致使小鼠出现“扭体反应”。镇痛药物可以抑制动物的“扭体反应”，本法敏感、简便、重复性好。

【器材】1ml注射器、鼠笼、天平。

【药品】延胡索乙素注射液、生理盐水、0.8%醋酸。

【动物】小鼠，雌性，体重18 ～ 22 g。

【方法】

1、随机分组：取4只小鼠，称重，编号，随机分为实验组和对照组，各2

只。

2、给药：实验组腹腔注射延胡索乙素0.2ml/10g ；对照组腹腔注射生理盐

水0.2ml/10g。20分钟后，各组小鼠腹腔注射0.8%醋酸0.2ml/10g。

3、观察：记录15分钟内各小鼠出现“扭体反应”的次数。

【结果】

1、将生理盐水组和延胡索乙素组小鼠扭体次数进行组间t检验，确定延胡

索有无镇痛作用；

【注意事项】

1. 0.8%醋酸溶液在临用时新配为宜，存放过久可使作用减弱。

2. 小鼠体重轻，“扭体反应”次数较低。

3. 室温以20℃为宜，低温时，小白鼠扭体次数减少。

4. 动物的疼痛反应个体差异较大，因此实验用动物数越多结果越可靠。

【思考题】

根据实验结果讨论延胡索产生镇痛作用差异的原因。

要求：最后一个实验完成一周内，交试验报告。

实验报告（格式）

1、题目

2、实验目的

3、实验原理

4、实验器材

5、试验方法

6、实验结果（要求，统计分析，有原始数据和标准差）

7、讨论

注：不要忘记学号和姓名。