HPLC分析测定不同茶叶中的游离氨基酸

HPLC分析测定不同茶叶中的游离氨基酸

王富花

【摘要】The composition of free amino acids in different tea (green tea, black tea and oolong tea) is ana-lyzed. Each dried pretreated tea(0.25 g) was extracted by 10 mL pure water in a designed temperature(90℃), extraction time 20 min. then filtrated through 0.45μm cellulose membrane, pretreated by SPE column. Take 70μL samples and 10μL O-phthalaldehyde(OPA) derivatization liquid in water bath reaction at a temperature of 25 ℃, 2 minutes later were determined by high performance liquid chromatography (HPLC), chromato-graphic condition was performed on a C18 column, DAD detector, detection wavelength was 338 nm. The mobile phase A was the methanol acetonitrile water solution, and the mobile phase B was the phosphate buffer solution. The results showed that the solid phase extraction cartridges (SPE) column treatment could effectively remove the influence of chromatographic peaks of impurities, and the HPLC method could be effective for the separation and determination of 17 kinds of amino acids in different tea,the content of amino acid in green tea was higher than fermented tea, especially aspartic acid, glutamic acid, and the content of L-Theanine in three kinds of tea was significantly different.%分析检测不同茶叶(绿茶,红茶,乌龙茶)中游离氨基酸的组成.称取0.25 g的茶叶于10 mL 90℃纯净水中浸提20 min后过0.45μm纤维素膜,滤液通过固相萃取(solid phase extraction cartridges,SPE)柱预处理后得到茶汤样品.取70μL的样品与10μL的邻苯二甲醛(OPA)衍生液在25℃水浴中反应2

min后通过高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)测定,色谱条件为C18柱,DAD检测器,338 nm检测波长,流动相A为甲醇-乙腈-水溶液,流动相B为磷酸盐缓冲液.试验表明:通过SPE柱能有效去除影响色谱出峰的杂质,HPLC方法能有效地分离测定茶叶中的17种不同氨基酸,绿茶中的氨基酸含量要比发酵茶高,尤其是天冬氨酸、谷氨酸,而茶氨酸在3种茶叶中的含量显著不同.【期刊名称】《食品研究与开发》

【年(卷),期】2018(039)001

【总页数】6页(P141-146)

【关键词】氨基酸;高效液相色谱法;固相萃取;茶叶

【作者】王富花

【作者单位】扬州工业职业技术学院,江苏扬州225127

【正文语种】中文

茶圣陆羽《茶经》中精论：“茶之为用，味之寒，为饮为最，精行俭德之人，若热渴、凝闷、脑疼、目涩、四肢烦、百节不舒，聊四五啜，与醍醐甘露抗衡也。”茶叶根据加工方法不同，有红茶、绿茶、青茶（乌龙茶）、白茶、黄茶和黑茶六大基本茶类[1]。红茶在世界范围内畅销，而绿茶和乌龙茶的消费地区主要是在亚洲和北非[2]。茶叶中主要含有茶多酚、生物碱、茶多糖、茶色素、维生素、氨基酸、矿物质元素等[3]。其中氨基酸有20多种，它们是茶叶主要的鲜爽滋味成分，对茶叶的香气形成以及汤色起重要作用。

氨基酸是茶叶中具有氨基和羧基的有机化合物，是茶叶中的主要化学成分之一。茶叶中的氨基酸，不仅是组成蛋白质的基本单位，也是活性肽、酶和其他一些生物活

性分子的重要组成成分。茶叶氨基酸的组成、含量以及它们的降解产物和转化产物也直接影响茶叶品质[4]。氨基酸在茶叶加工中参与茶叶香气的形成，它所转化而

成的挥发性醛或其他产物，都是茶叶香气的成分[5]。此外，有些氨基酸本身也具

有一定的香味，特别是某些氨基酸与茶叶的滋味及香气关系密切，是构成绿茶品质的极重要的成分之一。由于茶叶中氨基酸对茶叶品质有重要作用，多年来备受重视。中性氨基酸包括甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、半氨酸、丝氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、色氨酸等。其中甲硫氨酸、苯丙氨酸、色氨酸为必需氨基酸，在茶叶滋味的协调中具有重要作用。酸性氨基酸主要包括谷氨酸和天冬氨酸，它们是茶叶中最重要的一类氨基酸，在茶叶中的含量高，是构成茶叶鲜爽滋味的重要成分[6]。

碱性氨基酸茶叶中主要有精氨酸和赖氨酸。

茶氨酸是茶叶中的特征游离氨基酸，它具有鲜爽滋味，对茶叶的香气形成以及汤色起重要作用[7]。近年来茶叶中茶氨酸的研究内容包括茶氨酸在各种茶叶中的分布；茶氨酸的体内代谢机制及其生理功能；茶氨酸的提取、检测方法（氨基酸分析仪法、高效液相色谱法、毛细管电泳法等）；以及茶氨酸在食品领域的应用等。大量研究表明，茶叶中的氨基酸具有促进大脑功能和神经的生长、降压安神、抗肿瘤等生理功能。

本实验采用高效液相色谱法，结合SPE柱对茶汤的预处理，对茶叶中游离氨基酸

的检验测定，有利于进一步地进行茶叶中氨基酸的定量分析。

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