茶 游离氨基酸的测定
茶叶中游离氨基酸分析方法的研究进展
责任编辑章练红责任校对卢瑶
茶叶中游离氨基酸分析方法的研究进展
井然１’。，冯雷２，陈丽梅ｈ
（１．昆明理工大学生命科学与技术学院生物工程技术研究中心，云南昆明，６５０２２４；２．云南省产品质量监督检验研究院，云南昆明６５之一，也是茶叶的主要化学成分之一，是形成茶叶滋味的重要组成部分，因此对茶叶中游离氨基 酸的分析检测是十分必要的：综述了目前用于茶叶中游离氨基酸分析检测的诸多方法，并对这些方法的优缺点进行了分析，同时对未 来分析方法的发展提出了展望。 关键词游离氨基酸；茶叶；分析检测方法 中图分类号￥５７２ 文献标识码Ａ 文章编号０５１７—６６１ ｌ（２０１０）１７—０９１８６—０２ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ａｎａｌｙｍｉｇ Ｆｒｅｅ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ Ｔｅａ ａｌ（Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｒｅ，Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｓｃｈｏｏｌ，Ｋｕｎｍｉｎｇ Ｕ＿西Ｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．Ｋｕｎｍｉｎｇ，Ｙｕｎｎａｎ ６５０２２４） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｉＳ ｏｎｅ ｏｆ ｔｈｅ ｂａｓｉｃ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｉｎ ｏｒｇａｎｉｓｍｓ．Ｉｔ ｉＳ ａ１８０ ｏｎｅ ｏｆ ｐｒｉｍａｒｙ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｏｆ ｔｅａ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｅｏｍｐｏ－ ｎｅｎｔ ｏｆ ｔｅａ ｔａｓｔｅ．１１１ｕｓ．ａｎａｌｙｚｉｎｇ ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｔｈｅ ｆｒｅｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｔｅａ ｉｓ ｖｅｒｙ ｎｅｃｅｓｓａｒｙ．Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ａｎａｌｙｚｉｎｇ ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ
茚三酮法测定茶叶游离氨基酸总量研究
茚三酮法测定茶叶游离氨基酸总量研究作者：涂云飞来源：《现代农业科技》2018年第14期摘要鉴于茚三酮法测定游离氨基酸总量不够稳定，本文对茚三酮法测定茶游离氨基酸的显色反应时间与氨基酸浓度因素进行了条件优化，并考察了方法的准确度与精密度。
结果表明，将200 μL的2×pH 5.6的缓冲液、200 μL水或茶叶水提取液（茶水比1∶250，沸煮30 min）和400 μL茚三酮溶液显色体系均匀混合，沸煮结束后立即用自来水充分冷却并加入4.8 mL去离子水，于570 nm处测定吸光值，所获得的结果稳定可靠，适宜作为茶叶中游离氨基酸总量的测定条件。
关键词茶叶；游离氨基酸总量；茚三酮中图分类号 TS272.7 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2018）14-0235-01Abstract In this paper，ninhydrin reaction parameters for determination of total free amino acid in tea samples were optimized.The results indicated that，the method was stable and reliable in the following cases：200 μL buffer（2×pH 5.6），200 μL water or tea extraction aqueous（tea to water was 1∶250，boiling 30 min），and 400 μL ninhydrin solution mixed sufficiently in one system，after boiling，the reaction system was cooled by tap water and then added 4.8 mL deionized water to colorimetric analysis at 570 nm，which was suitable to determine the total free amino acid in tea.Key words tea；total free amino acid；ninhydrin茶叶中的游离氨基酸除了含有组成蛋白质常见的20种基酸外，还含有含量较为丰富的非蛋白质组成成分的茶氨酸及γ-氨基丁酸。
游离氨基酸的测定实验报告
游离氨基酸的测定实验方案（茚三酮比色法）一、实验目的茚三酮比色法测定发酵液中游离氨基酸含量，利用氨基酸含量这个参数，控制发酵过程。
二、实验原理游离氨基酸的游离氨基可与水合茚三酮作用，产生蓝紫色的化台物二酮茚一二酮茚胺，产物的颜色深浅与游离氨基酸含量成正比，用分光光度计在570nm 下测其含量。
因蛋白质中的游离氨基酸也会产生同样反应，在测定前必须用蛋白质沉淀剂将其除掉。
三、实验材料发酵液样品；实验试剂：水合茚三酮；氨基酸标准液；0.1%抗坏血酸实验仪器：100ml容量瓶；漏斗；三角瓶；研钵；移液器；枪头；沸水浴；具塞刻度试管20 ml×10；分光光度计四、实验方法1.溶液配制（1）水合茚三酮称取0.6g重结晶的茚三酮放烧杯中，加入15ml 正丙醇、30ml正丁醇、60ml乙二醇及9 ml PH4.54的醋酸盐缓冲液混匀，棕色瓶中冰箱内保存，10天内有效。
（2）氨基酸标准液称取80℃烘干的亮氨酸23.4mg，以10%的异丙醇溶解定溶至50ml（含氮为50ug/ ml），取此液5ml，用水定容至50 ml，此为含氮量5ug/ ml工作液。
（3）0.1%抗坏血酸称取0.1g抗坏血酸定容100 ml，随用随配。
2.标准曲线绘制取6支20ml 试管，按下表加剂：试剂管号12 3 4 5 6 亮氨酸标准液(ml) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 无氨蒸馏水(ml) 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 水合茚三酮(ml) 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 抗坏血酸(ml) 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 氨基氮量（ug/管 ）1.02.03.04.05.0将各管溶液混合均匀，封口，在沸水中加热15min ，取出后立即用冷水摇动冷却，用60%乙醇定容至20 ml ，摇匀。
λ=570nm 处测定吸光度0 0.025 0.055 0.099 0.146 0.186以吸光度为纵坐标，氨基氨ug 数为横坐标，绘标准曲线如图：茚三酮比色法测定游离氨基氮标准曲线-0.0500.050.10.150.2氨基氮（ug）吸光度A3.样品中游离氨基酸的测定取20ml 试管，取待测液1ml ，加蒸馏水l ml ，水合茚三酮3.0 ml ，坏血酸0.1ml ，混匀，封口。
茶叶中游离氨基酸总量的测量不确定度评定
四 川 林 业 科 技 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｉｃｈｕａｎＦｏｒｅｓｔｒｙＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
Ｖｏ１．４０， Ｎｏ．３ Ｊｕｎ．， ２０１９
ｄｏｉ：１０．１６７７９／ｊ．ｃｎｋｉ．１００３－５５０８．２０１９．０３．０２３
茶叶中游离氨基酸总量 的测量不确定度评定
谢颖颖１，２
（１．国家茶叶产品质量监督检验中心（四川），四川 雅安 ６２５０００； ２．四川省雅安市产品质量监督检验所，四川 雅安 ６２５０００）
摘ห้องสมุดไป่ตู้要：通过对分光光度法 测 定 茶 叶 中 游 离 氨 基 酸 总 量 的 测 量 过 程 进 行 分 析，根 据 《测 量 不 确 定 度 评 定 与 表 示 》 （ＪＪＦ１０５９．１－２０１２）中有关规定，识别检测过程的不确定度来源，并推导出不确定度计算公式，得出各种因素对检 测结果的影响程度，发现标准曲线拟合对不确定度的影响最大，这为提高测量数据的质量提供了依据。 关键词：不确定度；分光光度法；茶叶；游离氨基酸总量 中图分类号：ＴＳ２７２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００３－５５０８（２０１９）０３－０１０９－０６
测量不确定度是“表征合理地赋予被测量之值 的分散性，与测量结果相关联的参数”［１］。测量不 确定度可以衡量测量过程是否持续受控，测量结果 是否保持稳定一致，可以找出影响测量结果的最主 要因素，并加以控制改进。测量不确定度越大，表示 测量能力越差；反之，表示测量能力越强。
茶叶水浸出物中具有 α－氨基的有机酸且呈游 离状态存在者，均称茶叶游离氨基酸。该指标与茶 叶的“鲜 香 ”特 征 有 关。 有 关 测 量 茶 叶 中 游 离 氨 基
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｗａｓａｄｏｐｔｅｄｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｆｏｒｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｏｔａｌａｍｏｕｎｔｏｆｆｒｅｅａｍｉｎｏａｃｉｄｓｉｎｔｅａ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｒｅｌｅｖａｎｔｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓｄｏｃｕｍｅｎｔｅｄ ｉｎｔｈｅ《ＥｖａｌｕａｔｉｏｎａｎｄＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＵｎｃｅｒｔａｉｎｔｙｉｎＭｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ》（ＪＪＦ１０５９．１－２０１２），ｔｈｅｓｏｕｒｃｅｏｆｔｈｅ ｕｎｃｅｒｔａｉｎｔｙｉｎｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓｗａｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ，ａｎｄｔｈｅｕｎｃｅｒｔａｉｎｔｙｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｆｏｒｍｕｌａｗａｓｄｅｄｕｃｅｄ． Ｃｏｍｐａｒｉｎｇｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｆｆｅｃｔｓｏｆｖａｒｉｏｕｓｆａｃｔｏｒｓｏｎｔｈｅｍｅａｓｕｒｅｒｅｓｕｌｔｓ，ｉｔｗａｓｆｏｕｎｄｔｈａｔｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄ ｃｕｒｖｅｆｉｔｔｉｎｇｈａｄｔｈｅｂｉｇｇｅｓｔｉｍｐａｃｔｏｎｔｈｅｕｎｃｅｒｔａｉｎｔｙ．Ｔｈｉｓｆｉｎｄｉｎｇｍａｄｅｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｔｏｉｍｐｒｏｖｉｎｇｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙｏｆｄａｔａｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｕｎｃｅｒｔａｉｎｔｙ，Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ，Ｔｅａ，Ｔｏｔａｌａｍｏｕｎｔｏｆｆｒｅｅａｍｉｎｏａｃｉｄｓ
蒙顶山名茶游离氨基酸总量及组分的测定分析_刘东娜
第３０卷 第２期 ２０１２年６月 四川农业大学学报Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｉｃｈｕａｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＶｏｌ．３０ Ｎｏ．２Ｊｕｎ．２０１２ 收稿日期：２０１２－０３－０５基金项目：四川农业大学校市合作项目（２０１１－１０３）。
作者简介：刘东娜，硕士研究生。
＊责任作者：杜晓，教授，博士生导师，研究方向：茶学，Ｅ－ｍａｉｌ：ｄｕｘｉａｏ＠ｖｉｐ．１６３．ｃｏｍ。
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２６５０．２０１２．０２．０１３蒙顶山名茶游离氨基酸总量及组分的测定分析刘东娜１，郑晓娟１，卿 钰１，杜 晓１，２＊（１．四川农业大学茶学系； ２．四川省茶叶产品质量检测中心，四川雅安 ６２５０１４）摘要：【目的】探讨蒙顶山名茶“鲜香”与“鲜味”特征的产生机制，提供蒙顶山名茶品质评价的理论依据。
【方法】试验通过全量法和杯茶法制备茶汤试液，分别采用水合茚三酮比色法和Ｌ－８９００型全自动氨基酸分析仪测定了４种蒙顶山名茶中的游离氨基酸总量和组分含量。
【结果】４种蒙顶山名茶的游离氨基酸总量较高，分别为蒙顶黄芽（５．２８±０．５７）％，蒙顶石花（５．５９±０．５１）％，蒙顶甘露（４．６５±０．８２）％，蒙顶毛峰（５．３４±０．９６）％；在杯茶法１次冲泡５ｍｉｎ条件下，蒙顶山名茶游离氨基酸的浸出率与浸出浓度亦较高，浸出率为５５．２４％～７６．１４％，浸出浓度为５８．７３～７８．２４ｍｇ／１００ｍＬ；蒙顶山名茶游离氨基酸组分含量的特征为茶氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸和丝氨酸的含量在１ ０００ｍｇ／ｋｇ以上，色氨酸、半光氨酸、组氨酸和络氨酸组分含量为１００～５００ｍｇ／ｋｇ。
【结论】蒙顶山名茶高氨基酸总量、丰富的组分含量及独特配比是其茶香“鲜香高长”、茶味“鲜浓爽口”的重要物质基础。
关键词：蒙顶山名茶；游离氨基酸总量；游离氨基酸组分中图分类号：Ｓ５７１．１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１０００－２６５０（２０１２）０２－０１９０－０５Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｆｒｅｅ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ Ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ＩｔｓＣｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ Ｖａｒｉｏｕｓ Ｍｅｎｇｄｉｎｇ ＴｅａＬＩＵ Ｄｏｎｇ－ｎａ１，ＺＨＥＮＧ Ｘｉａｏ－ｊｕａｎ１，ＱＩＮＧ Ｙｕ１，ＤＵ Ｘｉａｏ１，２＊（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｓｉｃｈｕａｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ；２．Ｑｕａｌｉｔｙ Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｓｉｃｈｕａｎ Ｔｅａ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｙａａｎ ６２５０１４，Ｓｉｃｈｕａｎ，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】Ｔｈｉｓ ａｒｔｉｃｌｅ ａｉｍｅｄ ｔｏ ｆｉｎｄ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｔｈｅ＂ｄｅｌｉ－ｃｉｏｕｓ＂ａｎｄ＂ｆｌａｖｏｒ＂ｆｅａｔｕｒｅ ｉｎ ｖａｒｉｏｕｓ ｋｉｎｄｓ ｏｆ Ｍｅｎｇｄｉｎｇ ｆａｍｏｕｓ ｔｅａ，ａｎｄ ｆｕｒｔｈｅｒ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｔｈｅｏ－ｒｅｔｉｃａｌ ｄａｔａ ｆｏｒ ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ ｔｅａ ｑｕａｌｉｔｙ．【Ｍｅｔｈｏｄ】Ｔｗｏ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｉｔｈ ｔｏｔａｌ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｒｅｗｉｎｇｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｐｒｅｐａｒｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｓａｍｐｌｅ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｆｒｅｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ，ｗｈｉｃｈｗｅｒｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｒｅｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｉｎ ｆｏｕｒ ｋｉｎｄｓ ｏｆ Ｍｅｎｇｄｉｎｇｆａｍｏｕｓ ｔｅａ ｂｙ ｔｈｅ ｎｉｎｈｙｄｒｉｎ ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｔｈｅ Ｌ－８９００ｔｙｐｅ ａｕｔｏｍａｔｉｃ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ａｎａｌｙ－ｚｅｒ．【Ｒｅｓｕｌｔｓ】Ｒｅｌａｔｉｖｅ ｈｉｇｈ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｆｒｅｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｆｏｕｒ Ｍｅｎｇｄｉｎｇ ｆａ－ｍｏｕｓ ｔｅａ（Ｍｅｎｇｄｉｎｇ Ｈｕａｎｇｙａ（５．２８±０．５７）％，Ｍｅｎｇｄｉｎｇ Ｓｈｉｈｕａ（５．５９±０．５１）％，ＭｅｎｇｄｉｎｇＧａｎｌｕ（４．６５±０．８２）％ａｎｄ Ｍｅｎｇｄｉｎｇ Ｍａｏｆｅｎｇ（５．３４±０．９６）％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ）．Ａｆｔｅｒ ｂｒｅｗｉｎｇ ｏｎｅｔｉｍｅ ｆｏｒ ５ｍｉｎｕｔｅｓ，ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｒａｔｅ ａｎｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｒｅｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ５５．２４％～７６．１４％ａｎｄ５８．７３～７８．２４ｍｇ／Ｌ ｉｎ Ｍｅｎｇｄｉｎｇ ｆａｍｏｕｓ ｔｅａ．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅａｎｉｎｅ，ａｓｐａｒｔａｔｅ，ｇｌｕｔａｍａｔｅ，ａｒｇｉｎｉｎｅ ａｎｄｓｅｒｉｎｅ ｗｈｏｓｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ １ ０００ｍｇ／ｋｇ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｔｈｅ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｏｆ ｆｒｅｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓｉｎ Ｍｅｎｇｄｉｎｇ ｆａｍｏｕｓ ｔｅａ，ａｌｔｈｏｕｇｈ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｔｒｙｐｔｏｐｈａｎ，ｃｙｓｔｅｉｎｅ，ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ ａｎｄ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｗｅｒｅｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ １００ｍｇ／ｋｇ ｔｏ ５００ｍｇ／ｋｇ．【Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ】Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｓｅ ｆｏｕｒ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｉｎ－ｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ Ｍｅｎｇｄｉｎｇ ｆａｍｏｕｓ ｔｅａ ｈａｄ ｒｉｃｈ ｆｒｅｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ａｎｄ ｒｅａｓｏｎａｂｌｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｒａｔｉｏ，ｗｈｉｃｈ ｃｏｕｌｄ ｂｅｔｈｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｆｅａｔｕｒｅ ｏｆ ｔｅａ ａｓ＂Ｌａｓｔｉｎｇ ｆｒｅｓｈ ｆｒａｇｒａｎｃｅ＂ａｎｄ＂Ｆｒｅｓｈ ｇｏｏｄ ｔａｓｔｙ＂．Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｍｅｎｇｄｉｎｇ ｆａｍｏｕｓ ｔｅａ；ｔｏｔａｌ ｆｒｅｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ；ｆｒｅｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ第２期刘东娜（等）：蒙顶山名茶游离氨基酸总量及组分的测定分析 蒙顶山名茶是中国名茶的典型代表，其花色品类众多，品质各具特色。
茶叶中茶多酚、氨基酸的测定
测定方法：
高锰酸钾直接滴定法 酒石酸铁比色法
酒石酸铁比色法原理：
酒石酸亚铁能与茶多酚生成蓝紫色络合物，络合物溶 液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比。因此可以用比色 方法测定。
仪器：分光光度计 水浴锅，锥形瓶，容量瓶（100mL,25ml) 试剂： （1）酒石酸亚铁溶液：称取 FeSO4· 7H2O 1.000g，含 4个结晶水的 酒石酸钾钠5.000g，加蒸馏水溶解后，用蒸馏水稀释至1000mL （2）PH7.5的磷酸缓冲液
准确称取茶叶磨碎样品3g于500ml烧杯中加入沸水350ml在沸水浴中浸提45min每隔10min摇动11次趁热抽滤残渣用少量热蒸馏水洗涤2233次滤液倒入500ml容量瓶中冷却至室温用蒸馏水定容至刻度摇匀备用
茶叶中茶多酚的测定
茶多酚
茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的20％～35％，由约30 种以上的酚类物质所组成，通称茶多酚。 茶多酚的性质： 能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。 对热、酸较稳定，2%的溶液加热至120 ℃并保持30min， 无明显变化。在碱性条件下易氧化变质。
茶多酚的功效：
1）茶多酚能清除活性氧自由基，且能有效消除脂 质过氧化产物丙二醛，具有降血脂的显著功效。 2）茶多酚还具有抑制痢疾、伤寒、霍乱、金黄色 葡萄球菌等有害菌的作用。 3）具有较强的抗放射性作用，以及在抗衰老，抑 制瘤细胞，预防心脑血管疾病等方面都显示出很 好的效应。
是一种有开发前景的天然抗氧化剂。
实验步骤
（l）样品溶液的制备方法：准确称取茶叶磨碎样品3g于 500mL烧杯中，加入沸水350mL，在沸水浴中浸提45min， 每隔10min摇动1次，趁热抽滤，残渣用少量热蒸馏水洗涤 2-3次，滤液倒入500mL容量瓶中，冷却至室温，用蒸馏水 定容至刻度，摇匀，备用。
HPLC分析测定不同茶叶中的游离氨基酸
HPLC分析测定不同茶叶中的游离氨基酸王富花【摘要】The composition of free amino acids in different tea (green tea, black tea and oolong tea) is ana-lyzed. Each dried pretreated tea(0.25 g) was extracted by 10 mL pure water in a designed temperature(90℃), extraction time 20 min. then filtrated through 0.45μm cellulose membrane, pretreated by SPE column. Take 70μL samples and 10μL O-phthalaldehyde(OPA) derivatization liquid in water bath reaction at a temperature of 25 ℃, 2 minutes later were determined by high performance liquid chromatography (HPLC), chromato-graphic condition was performed on a C18 column, DAD detector, detection wavelength was 338 nm. The mobile phase A was the methanol acetonitrile water solution, and the mobile phase B was the phosphate buffer solution. The results showed that the solid phase extraction cartridges (SPE) column treatment could effectively remove the influence of chromatographic peaks of impurities, and the HPLC method could be effective for the separation and determination of 17 kinds of amino acids in different tea,the content of amino acid in green tea was higher than fermented tea, especially aspartic acid, glutamic acid, and the content of L-Theanine in three kinds of tea was significantly different.%分析检测不同茶叶(绿茶,红茶,乌龙茶)中游离氨基酸的组成.称取0.25 g的茶叶于10 mL 90℃纯净水中浸提20 min后过0.45μm纤维素膜,滤液通过固相萃取(solid phase extraction cartridges,SPE)柱预处理后得到茶汤样品.取70μL的样品与10μL的邻苯二甲醛(OPA)衍生液在25℃水浴中反应2min后通过高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)测定,色谱条件为C18柱,DAD检测器,338 nm检测波长,流动相A为甲醇-乙腈-水溶液,流动相B为磷酸盐缓冲液.试验表明:通过SPE柱能有效去除影响色谱出峰的杂质,HPLC方法能有效地分离测定茶叶中的17种不同氨基酸,绿茶中的氨基酸含量要比发酵茶高,尤其是天冬氨酸、谷氨酸,而茶氨酸在3种茶叶中的含量显著不同.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2018(039)001【总页数】6页(P141-146)【关键词】氨基酸;高效液相色谱法;固相萃取;茶叶【作者】王富花【作者单位】扬州工业职业技术学院,江苏扬州225127【正文语种】中文茶圣陆羽《茶经》中精论：“茶之为用，味之寒，为饮为最，精行俭德之人，若热渴、凝闷、脑疼、目涩、四肢烦、百节不舒，聊四五啜，与醍醐甘露抗衡也。
改进茶叶中游离氨基酸总量测定方法
ｄ ｉ１．９ ９ ．ｓ． ７ － ０ Ｘ２ １．２ ０ ２ ｏ：０３ ６ ￣ｉ ｎ１ ４ ５ ６ ． ２０ — ２ ｓ ６ ０
茶 叶中 的游离 氨基 酸是构 成茶 叶鲜 爽香 味的重
０２ ｍｇｍ ，．０ ／ ． ５ ／ Ｌ ０３ ｍｇ ｍＬ有 时 吸 光 值 变 化 无 梯 度 ． 线 性 相关 性也 不好 。导 致茶 叶样 品检测 数据 重复 性 不 高 ． 以得 到准 确 的结 果 。 难
ｗｈ ｃ ａ ｓ ｄ ｈ ｔａ ｓ ｍｐ ｅ ｘ ｍｉ ａｉ ｎ ａ ａ ｅ ｅ ｔｂ ｌ ｙ ｏ ｏ ｅ ｈ ｇ ｉｈ ｃ ｕ ｅ ｔ ｅ ｅ ａ ｌ ｅ ａ ｎ ｔ ｄ ｔ ｒ ｐ ａａ ｉ ｔ ｎ ｔ ｔ ｂ ｉｈ． ａ ｄ ｂ ａｎ ｄ ｃ ｕ ａ ｅ ｅ ｕ ｔ ｗｉ ｄｍ — ｏ ｉ ｎ ｏ ｔ ｉｅ ａ ｃ ｒ ｔ ｒ ｓ ｌ ｔ ｈ ｉ
Ｄｅ ｅ ｍ ｉ ａ ｉ ｎ Ｍ ｅｈ ｄ ｍｐ ｏ ｅ ｅ ｔｏ ｈ ｔ ｒ ｎ ｔｏ ｔ ｏ ｓ Ｉ ｒ ｖ ｍ ｎ ｆ ｔ ｅ Ａｍｉ ｏ Ａｃｄ ｎ ｉ
Ｔｏａ ａ ｔ ｙ ｉ ａ ｔｌＱｕ ｎｉ ｎ Ｔｅ ｔ
ＨＵＡＮＧ Ｂｅ － ｅ ｎ ｆ ｎ， Ｌｖ Ｘｉｏ ｔｎｇ， ＨＥ ａ －ｉ Ｚｈｅ ｇ ｉ ｎ －ｘｕ
茚 三 酮 与 氨 基 酸 的显 色反 应 原 理 ［。 反 应 分 ３该 ］ 两步进行 ． 先是 氨基酸被 氧化 ， 生二 氧化碳 、 首 产 氨和醛 ， 水合茚三酮被还原成还原性茚三酮 ； 而 第
分 别 吸 取 ００ ｍＬ ０５ ｍＬ １ ０ ，．０ ， ． ０ ，． ０ ，． ｍＬ １ ｍＬ ０ ５ ２ ０ Ｌ．． ｍ ３ ０ Ｌ，． ｍ ． ｍ ２ ０ Ｌ，． ｍ ４Ｏ Ｌ氨 基 酸 工作 液 于一 ０ ５ ０ Ｏ 组 ２ｍ ５ Ｌ比 色管 中 。先 加 入 ｐ ． 酸 盐 缓 冲液 Ｈ ８ ０磷 ０５ ｍ ． Ｌ摇 匀 ． 加 入 显 色 液 １ ０ ， 匀 后 放 在 沸 ０ 再 ． ｍＬ 摇 ０
茶汤中游离氨基酸的分离条件初探
昆明学院学裉2018, 40 (3) ：37-40Journal of Kunming UniversityISSN 1674 -5639CN 53 -1211/G4茶汤中游离氨基酸的分离条件初探陈圆圆1,钏相龙2,陈春月2,曹喜念2,肖涵2*(1.云南商测质量检验技术服务有限公司，云南昆明650017; 2.昆明学院化学科学与技术系，云南昆明650214)摘要：为建立适合滇产茶叶氨基酸分离分析的方法，使用全自动氨基酸分析仪，对茶汤中游离氨基酸分离条件进行初步探索.结果表明，茶氨酸混合标准溶液最佳配比为其他氨基酸（100 nm〇l/L) 150 ^L +茶氨酸（17.2nm〇l/L)261.3jxL，进样量50^L;流动相C的P H=7.96.在以上分离条件下，所有氨基酸组分分离良好，各峰型均能满足定量需求，适用于实际茶样的分离分析.关键词：茶汤；游离氨基酸；氨基酸分析仪；条件优化中图分类号：TS272. 7文献标识码：A文章编号：1674 -5639 (2018) 03 -0037 -04DOI：10. 14091/j. cnki. k m xyx b. 2018. 03. 007Preliminary Study on Separation Conditions of Free Amino Acid in Tea InfusionCHEN Yuanyuan1，CHUAN Xianglong2，CHEN Chunyue2，CAO Xinian2，X I AO Han2*(1. Yunnan S hangce Quality Inspection Technology Service Co. ，Ltd，Kunming，Yunnan，China 650117 ；2. Department o f Chemical Science and Technology，Kunming University，Kunming，Yunnan，China 650214)Abstract ：The separation conditions of free amino acids in tea infusion were preliminary studied order to find out the method for separation analysis on amino acid in the tea from Kunming areas. The results matching ratio in the mixed standard solution of theanine was as follows ：other amimo acids ( 100 n nm ol/L) 150 jjl L + theanine((7. 2 n m ol/L) 261. 3 jxL with 50 jxL injection volume and p H o f mobile phase C = 7. 96. Under the separation conditions above, allthe amino acid constituents were satisfied separated ；the peak curve could meet the quantitative requireme suitable for the actual tea sample separation analysis.Key words：tea infusion；free amino acids；amino acid analyzer；condition optimization茶汤是山茶属（CameffiaL.)植物的嫩芽叶 干制品冲泡得到的水提取液.茶汤作为常见饮品，其中不仅具有多种营养成分和保健效果，更具有丰 富良好的风味特征.茶汤中茶多酚、游离氨基酸总 量（Total free amino acids，TFAA)、咖啡碱等生化 成分[1]是茶汤滋味和功效的主要贡献因子.茶叶的游离氨基酸（Free amino acids，FAA)指茶叶水 浸出物中呈游离状态存在，非蛋白质态的可溶性氨 基酸，目前已研究分离出的共26种，包括：天冬 氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸、茶氨酸、甘氨 酸、丙氨酸、a氨基丁酸、蛋氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、亮氨酸、酪氨酸、卩-丙氨酸、苯丙氨酸、P-氨基异丁酸、7-氨基丁酸、组氨酸、色氨酸、赖 氨酸、精氨酸、半胱氨酸、缬氨酸等[2].其中游离氨基酸质量分数约占茶叶干质量的2%〜5%，而茶氨酸占干物质的1%〜2%[3].因为游离氨基酸总量与茶叶品质显著正相关[44，所以其含量对 茶叶的滋味判断、质量控制显得尤为重要.近年来，茶叶中游离氨基酸定量分析方法常见 的有茚三酮比色法[6-7]、氨基酸自动分析仪测定 法[8_9]、高效液相色谱法[10_12]、近红外光谱法[13-4]等.而常规国标法[]使用茚三酮比色法测定收稿日期：2018 -05 -03基金项目：昆明学院应用型人才培养改革创新资助项目“化学化工类大学生创新实践基地建设”作者简介：陈圆圆（1994一），女，云南昆明人，主要从事食品与药品检验研究.通讯作者：肖涵（1981—），女，云南大理人，副教授，博士，主要从事环境分析和食品分析研究，E-imil: blackcrossing630@ vip. sin a. com .38昆明学院学报2018年6月茶汤中游离氨基酸总量，结果稳定性较差，无法得 知氨基酸组成及具体含量.此外，已有的26种氨基 酸风味特征或偏鲜、或偏苦、或偏甜，仅使用氨基 酸总量难以切实把握不同氨基酸的比例特征，因此 无法准确预测出茶叶的风味特性，进而判定其品质. 就测定茶汤中氨基酸含量而言，全自动氨基酸分析 仪能够实现目标组分分离完全，有良好的重复性和 稳定性，准确率高，已有多个报道[8_9]使用该仪器 研究分离了龙井、乌龙等茶样的游离氨基酸组分.滇产大叶种茶叶香气口感浓郁，茶浸出物总量 高，滋味组分比例特殊.为更好地了解滇产茶叶的 风味特征及营养成分，本研究拟使用全自动氨基酸 分析仪，对氨基酸分析过程中的标样、茶样各游离 氨基酸组分分离测定条件进行研究，以建立适合滇 产茶叶氨基酸分离分析的方法，以期为进一步研究 滇产茶氨基酸组分与风味特征的相互规律奠定基础. 1材料与方法1. 1样品茶氨酸（99.9%)，B R级，100 mg/瓶，上海融 禾医药科技有限公司；游离氨基酸混合标样(100nmol/L)，塞卡姆（北京）科学仪器有限公司.茶叶样品为市场采购而得，经粉碎至10目以 自封袋包装避光冷藏.1.2试剂实验所用试剂如表1所示.表1实验所用药品试剂级别规格厂家苯酚98%50/瓶东京化成（日本）茚三酮GR20 /瓶塞卡姆(德国）还原剂1mL/支塞卡姆(德国）甲醇色谱纯 4 L/瓶Merch (德国）硼酸AR500 /瓶广东光华氯化锂AR50/瓶广东光华一水合氢氧化锂AR50/瓶广东光华一水合柠檬酸钠AR50/瓶广东光华乙酸钾AR50/瓶国药集团三水合乙酸钠（乙酸钠）AR50/瓶国药集团盐酸A R(37%) 500 mL/瓶成都科龙无水乙醇AR500 mL/瓶国药集团冰乙酸AR5。
茚三酮比色法测定茶叶中游离氨基酸总量方法存在问题的探讨
茚三酮比色法测定茶叶中游离氨基酸总量方法存在问题的探讨周国兰 何 萍 郑文莉(贵州省茶叶研究所,湄潭 564100) 氨基酸是茶叶中的主要成分,茶叶中氨基酸与茶叶嫩度有密切关系,它对茶汤的滋味、色泽也有较明显的影响,是形成茶叶香气和鲜爽度的重要成分。
茶叶中有20多种游离氨基酸,其中茶氨酸占氨基酸总量的50%以上。
目前,国家标准规定测定茶游离氨基酸总量采用G B/T8314《茶 游离氨酸总量测定》,即茚三酮比色法。
由于该标准存在较多问题,导致各分析室对同一样品的测定结果有很大差异,为此笔者查找相关文献资料,咨询同行专家,对该标准中的疑点进行了反复的试验研究,并对疑点进行了修正,旨在使各分析室测定数据可比性强,达到方法统一、数据一致的目的。
1 G B/T8314标准的引用1.1 游离氨基酸定义 游离氨基酸:茶叶水浸出物中呈游离状态存在的α-氨基的有机酸。
1.2 测定原理 α2氨基酸在pH8.0的条件下与茚三酮共热,形成紫色络合物,用分光光度计在特定的波长下测定其含量。
1.3 仪器和用具 实验室常规仪器及TG-328A分析天平(感量0.0001g)、TU1901紫外分光光度计、PHS-2C型精密酸度计1.4 试剂和溶液 (1)磷酸盐缓冲溶液(pH8.0)的配制 1/15mol/L磷酸氢二钠溶液:称取23.877g磷酸氢二钠,加水溶解后定容至1L,得a溶液。
1/15mol/L磷酸二氢钾:称取9.073g磷酸二氢钾,加水溶解后定容至1L,得b溶液。
取a溶液95mL和b溶液5mL,混合均匀。
(2)茚三酮溶液:2%,称取茚三酮(纯度不低于99%)2g,加50mL水和80m g氯化亚锡搅拌均匀。
分次加少量水溶解,放在暗处,静置,过滤后加水定容至L。
2 使用国家标准方法时存在的问题2.1 不同实验室采用同一方法测定结果存在很大差异 表1为不同实验室采用G B/T8314方法测定的结果。
表1 不同实验室采用标准方法对茶样的分析结果样品编号游离氨基酸总量测定结果/%实验室1实验室2相对误差3/% 113.87.88029.5 4.810039.0 5.09048.4 4.59059.2 5.370 3注:相对误差以实验室2的测定结果为参比。
高效液相色谱法测定茶鲜叶中18种游离氨基酸含量初探
南方农业 Ｓｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ
２０１８年４月 Ａｐｒ． ２０１８
高效液相色谱法测定茶鲜叶中１８种游离氨基酸含量初探
董尚文１ ，刘腾飞２ ，董明辉 ２※
（１． 江苏省苏州第十中学，２１５０００；２． 苏州市农业科学院，江苏 ２１５１５５）
１．２ 实验方法 1.2.1 溶液的配制
1）氨基酸标准溶液。精密称取各氨基酸标准品适 量，置于25 mL容量瓶中，加超纯水溶解并定容至刻度，得 氨基酸单一标准溶液，其中茶氨酸浓度为12.5 μmol·L-1， 于-20 ℃冰箱保存。
取17种氨基酸混合标液40 μL，加入40 μL 12.5 μmol·L-1茶氨酸标准溶液，用超纯水定容到1 mL， 得到含茶氨酸的氨基酸混合标液，其中茶氨酸浓度为 500 μmol·L-1、胱氨酸为50 μmol·L-1，其余各氨基酸浓 度均为100 μmol·L-1。
摘 要 建立了一种快速、灵敏、准确的柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测器测定茶鲜叶中18种游离氨基酸含量 的方法。将茶鲜叶样品搅碎混匀，以超纯水作为萃取溶剂，在90 ℃水浴下浸提20 min，以6-氨基喹啉-N-羟基琥 珀酰亚胺基氨基甲酸酯为衍生剂柱前衍生化，使用Symmetry C18色谱柱梯度洗脱。以3倍信噪比计算方法的检出 限，18种氨基酸的检出限为0.05～1.27 μmol·L-1。应用该方法检测了2个碧螺春茶鲜叶中18种氨基酸含量。结果 表明，该方法简便、准确、快速、可靠。 关键词 茶鲜叶；游离氨基酸；柱前衍生化；高效液相色谱 中图分类号：TS272 文献标志码：B DOI：10.19415/ki.1673-890x.2018.11.071
本研究以茶叶鲜样代替茶叶干样作为样品，选用普 通的Symmetry C18柱代替氨基酸分离专用柱，采用6-氨基 喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯为柱前衍生剂[3]， 利用高效液相色谱-荧光检测器分离分析，实现了同时测 定茶叶鲜样中18种游离氨基酸的目的，为开展茶叶质量 评价、等级评定、指纹图谱构建提供了技术支持。
茶 游离氨基酸的测定
茶游离氨基酸总量测定文件类别：作业指导书文件编号：撰写单位：版本: 第 1 版发行日期：机密等级: □机密□一般合计页数: 共 2 页核准审核初审制订会审名称茶游离氨基酸总量测定文件编号:1 原理氨基酸在pH8.0的条件下与茚三酮共热，形成紫色络合物，用分光光度法在特定的波长下测定其含量。
2 仪器和用具分析天平：感量0.0001g。
分光光度仪。
3 试剂和溶液3.1 pH8.0磷酸盐缓冲液：按《茶茶多酚测定》中3.2的规定，配制1/15M磷酸氢二钠（3.2.1）和1/15M磷酸二氢钾（3.2.2）溶液。
然后取1/15M的磷酸氢二钠溶液95ml和1/15M磷酸二氢钾溶液5ml，混匀。
3.2 2%茚三酮溶液：称取水合茚三酮（纯度不低于95%） 2g，加50ml水和80mg氯化亚锡（GB 638-78，分析纯），搅拌均匀。
分次加少量水溶解，放在暗处，静置一昼夜，过滤后加水定容至100ml。
3.3 茶氨酸或谷氨酸标准液：称取100mg茶氨酸或谷氨酸（纯度不低于99%）溶于100ml水中，作为母液。
准确吸取5ml母液，加水定容至50ml作为工作液（1ml含茶氨酸或谷氨酸0.1mg）。
4 操作方法4.1取样方法按“茶叶原料验收规范”（文件编号…………）要求进行取样。
4.2试液制备按《茶茶多酚测定》中4.2.1试液制备之规定，制备试液。
4.3 测定准确吸取试液（4.2）0.5ml，注入25ml容量瓶中，加0.5ml水，0.5mlpH 8.0缓冲液（3.1）和0.5ml 2%茚三酮溶液（3.2），在沸水浴中加热15min。
待冷却后加水定容至25ml。
放置10min后，用10mm比色杯，在570nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度（A）。
生效日期页次1/2 页序 A 表号:R-0110-002-1A 文件标准用纸名称 茶 游离氨基酸总量测定 文件编号:4.4氨基酸定量标准曲线的制作分别吸取0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml 氨基酸工作液（3.3）于一组25ml 容量瓶中，各加水至4ml 、茚三酮溶液（3.2）0.5ml 和缓冲液（3.1）2ml ，在沸水浴中加热15min ，冷却后加水定容至25ml ，按4.3的操作测定吸光度（A ）。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
茶游离氨基酸总量测定
文件类别：作业指导书
文件编号：
撰写单位：
版本: 第 1 版
发行日期：
机密等级: □机密□一般
合计页数: 共 2 页
核准审核初审制订会审
名称茶游离氨基酸总量测定文件编号:
1 原理
氨基酸在pH8.0的条件下与茚三酮共热，形成紫色络合物，用分光光度法在特定的波长下测定其含量。
2 仪器和用具
分析天平：感量0.0001g。
分光光度仪。
3 试剂和溶液
3.1 pH8.0磷酸盐缓冲液：
按《茶茶多酚测定》中3.2的规定，配制1/15M磷酸氢二钠（3.2.1）和1/15M磷酸二氢钾（3.2.2）溶液。
然后取1/15M的磷酸氢二钠溶液95ml和1/15M磷酸二氢钾溶液5ml，混匀。
3.2 2%茚三酮溶液：
称取水合茚三酮（纯度不低于95%） 2g，加50ml水和80mg氯化亚锡（GB 638-78，分析纯），搅拌均匀。
分次加少量水溶解，放在暗处，静置一昼夜，过滤后加水定容至100ml。
3.3 茶氨酸或谷氨酸标准液：
称取100mg茶氨酸或谷氨酸（纯度不低于99%）溶于100ml水中，作为母液。
准确吸取5ml母液，加水定容至50ml作为工作液（1ml含茶氨酸或谷氨酸0.1mg）。
4 操作方法
4.1取样方法
按“茶叶原料验收规范”（文件编号…………）要求进行取样。
4.2试液制备
按《茶茶多酚测定》中4.2.1试液制备之规定，制备试液。
4.3 测定
准确吸取试液（4.2）0.5ml，注入25ml容量瓶中，加0.5ml水，0.5mlpH 8.0缓冲液（3.1）和0.5ml 2%茚三酮溶液（3.2），在沸水浴中加热15min。
待冷却后加水定容至25ml。
放置10min后，用10mm比色杯，在570nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度（A）。
生效日期页次1/2 页序 A 表号:R-0110-002-1A 文件标准用纸
名称 茶 游离氨基酸总量测定 文件编号:
4.4氨基酸定量标准曲线的制作
分别吸取0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml 氨基酸工作液（3.3）于一组25ml 容量瓶中，各加水至4ml 、茚三酮溶液（3.2）0.5ml 和缓冲液（3.1）2ml ，在沸水浴中加热15min ，冷却后加水定容至25ml ，按4.3的操作测定吸光度（A ）。
将测得的吸光度与对应的茶氨酸或谷氨酸浓度绘制标准曲线。
参考标准曲线：C=0.1686*A+0.0381
5 结果计算
5.1 计算方法和公式
茶叶中游离氨基酸含量，以干态质量百分率表示，按下式计算：
100m
002.11000%⨯⨯⨯⨯
=M L B C ）游离氨基酸总量（
式中： B —— 试样液总质量，g ；
L —— 测定用试样量，ml ；
M —— 试样量，g ；
C —— 根据4.3测定的吸光度从标准曲线上查得的茶氨酸的mg 数； 1.002 —— 试样液比重（经验值）；
m —— 试样干物质含量百分率，%。
5.2 重复性
同一样品进行两次测定，取两次测定的算术平均值作为结果。
测定值之差，不得超过平均值的5%。
备注：本方法参考GB 8314《茶 游离氨基酸总量的测定》。
生效日期 页 次 2/2 页 序 A
表号:R-0110-002-1A 文件标准用纸。