槐米中芦丁的提取分离与鉴定.
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
１ ２ ３
标准品：葡萄糖、鼠李糖
芦丁的提取与定性反应
薄 层 色 谱 鉴 别
样品：分别取精制的芦丁、槲皮素适量，加95% 乙醇溶解成每1ml含1mg的溶液，备用。 展开剂：醋酸乙酯-甲酸-水（8：1：1） 显色剂：2%AlCl3乙醇溶液，105℃加热至斑 点清晰，置紫外灯(365nm)下观察。
实验记录
天然产物提纯实训
项目一 槐米中芦丁的提取分离 与鉴定
项目一
芦丁的提取分离与鉴定
子项目一 槐米中芦丁的提取
子项目二 槐米中芦丁的精制
子项目三 水解芦丁得到槲皮素
子项目四 芦丁和槲皮素的鉴别
实训目的
能够运用碱溶酸沉法和结晶法的操作技术对 槐米中的芦丁进行提取分离 能够运用酸水解的操作技术对槐米中芦丁进 行水解 能够运用纸色谱、薄层色谱法和化学法鉴别 芦丁、槲皮素和糖类化合物
需要的仪器设备
每组需要抽滤设备（需要1000ml的抽滤瓶）、 滤纸、 玻璃棒、1000ml烧杯、加热回流设 备（电热套、冷凝管、烧瓶）、小烧杯、浓 硫酸、浓盐酸
芦丁的提取分离与鉴定
提 取 与 精 制
第一次实验所得滤液 抽滤，少量水洗涤沉淀至中性 滤液 沉淀（粗品芦丁）
重结晶 取粗制芦丁3g,加蒸馏水 200-250ml,煮沸10分钟后， 趁热抽滤 滤液 冷却（可以用流动水快速冷却）静置 精制芦丁（备用） 抽滤， 干燥、称重
精制芦丁1.5g 加入2%硫酸或者 (1mol/lHCL)100ml，加热 回流30min(从有液滴滴下开 始计时），放冷静置，抽滤
沉淀 粗品槲皮素
注意观察整个过程的现 象！( 溶液澄明度和颜色 的变化)为什么出现这种 情况？
滤液
作糖的检识用
水解
抽滤
洗涤沉淀
干燥
称重
具体做法：芦丁水解方法： 取精制芦丁1.5g，研细后 置于250ml圆底烧瓶中，加入2％硫酸或 （1mol/lHCL)100m1，加热回流 30min，瓶中浑浊 液逐渐变为澄清的棕黄色液体，最后生成鲜黄色沉淀。 放冷沉淀，抽滤，保存滤液（应为澄清无色液体）， 作为糖的检查，沉淀物为芸香苷苷元（槲皮素），用 蒸馏水洗至中性，抽干水分，晾干，称量。得粗制槲 皮素，再用乙醇重结晶得精制槲皮素。 1mol/lHCL配法:取约90毫升浓盐酸定容至1000毫升
相关内容介绍
性能：苦，性微寒。 功效：凉血止血、清肝泻火 应用：用于便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、 衄血、肝热目赤、头痛眩晕等。 主要含有芦丁、槲皮素，还含少量皂苷类及多 糖、粘液质等。近代研究表明槐米含芦丁可高 达23.5%，槐花开放后降至13.0%。
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
OH OH HO O
注意观察现象：未加热时，瓶内为混悬
液（芦丁不溶于冷水），加热后，混悬 液逐渐变为澄清液（芦丁易溶于热水）， 继续加热，有鲜黄色沉淀析出（槲皮素不 溶于水）
滤液处理： 取芦丁水解后的滤液15m1，加 氢氧化钡粉 中和至中性（搅拌下进行）滤去白色的硫酸 钡沉淀(漏斗滤纸），滤液在沸水浴上蒸干后， 加1－2 ml乙醇溶解，作为糖的供试液。 （如果加 氢氧化钡加过量后可以加少量的硫 酸回调pH)
硫酸可以同时沉淀Ba2+ Ba2+ + SO4 2========BaSO4↓ 使芦丁水解后的滤液更 纯净
学生做的结果：芦丁的得率大约是：20-25% 精制芦丁的得率是大约87% 槲皮素占芦丁分子是：13%到 20
芦丁的提取分离与鉴定
定 芦丁供试品溶液：取精制芦丁约5mg，用5ml甲 性 醇（无水乙醇）使溶液，备用。 反 应 槲皮素供试品溶液：取粗槲皮素约5mg，用5ml
槲皮素
子项目一 槐米中芦丁的提取
思考问题
1、加入硼砂目的是什么？ 2、为什么要加入石灰水，在芦丁的提取中能 起到什么作用？ 3、酸沉pH值为什么不宜过低？
那个天然产物的实验，要算下得率,粗芦丁重 量/槐米的重量； 精制芦丁的重量/粗芦丁的 重量；并且计算下，每克芦丁分子中槲皮素 和糖所占的百分比。
所需的试剂和设备
1、样品：槐花米 试剂：硼砂、CaO、浓盐酸 仪器：每一组需要： 电炉、1000ml烧杯、 小烧杯、 500ml烧杯、玻璃棒、pH试纸、玻 璃漏斗、滴管 公共需要：棉花、天平
芦丁的提取分离与鉴定
子项目一 槐米中芦丁的提取
提 取
槐花米 （22g） 加0.4%硼砂 沸水200ml 搅拌下加 入石灰乳 调节 pH8-9 加热 趁热用棉花 滤过
所需要的药品和设备：氢氧化钡、葡萄糖、鼠李糖、 正丁醇、乙酸、苯胺、邻苯二甲酸盐、无水乙醇、甲 醇、乙酸乙酯、甲酸、AlCl3、镁粉、浓盐酸、 α-萘酚溶液、浓硫酸、三氯化铁、紫外灯、新 华1号滤纸、点样毛细管、水浴锅、硅胶G预制板
11块、分液漏斗 喷雾器几个
每组需要：1个蒸发皿、玻璃漏斗、玻璃棒、10ml试 管8支、2个小烧杯、胶头滴管
FeCl3反应
酚羟基
将样品溶液1ml，加入1～2滴2%Fecl3溶液， 观察现象。
子项目四 芦丁和槲皮素的鉴别
思考问题
1、纸色谱的原理及操作要点？ 2、黄酮类化合物有哪些显色方法，各针对哪类黄酮？ 3、黄酮类薄层色谱中，经常用到的吸附剂有哪几类？ 各自的原理有什么不同？ 4、黄酮类薄层色谱中常用到AlCl3乙醇溶液显色？显色 后一般呈什么颜色？ 5、薄层色谱的操作要点有哪些？
实验规则
5、保持室内整洁：学生进入实验室必须穿戴工作衣 帽。实验完毕应将本组实验台、实验架等整理洁净方 可离开。实验小组轮流值日，主要负责实验室内、走 廊地面、门窗的卫生整洁，以及废物缸的清倒工作， 将水、电门窗关好，经指导教师验收后再离开实验室。 6、写好实验报告：实验报告是考查学生分析总结实 验资料能力和写作能力的重要方面，亦是评定实验成 绩的主要依据
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
OH OH HO O
O OH OH O OH OH OH OH OH O CH2O O
用于治疗毛细管脆弱引 起的出血病，并用作高 血压的辅助治疗剂。
芦丁
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O O 4'
性状：黄色针状结晶（稀乙醇）。 溶解度：冷乙醇中1:300，热乙醇中 1:23。可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、 冰乙酸、吡啶，不溶于水、氯仿、乙 醚、苯和石油醚等。
保持微 沸 20min 补充水分， 保证pH值
滤液
在60-70度下，用 浓盐酸调pH3-4
静置
残渣
2010.11月，实验结果：食品091班30克槐米 制得的粗芦丁大约5－8克不等。
子项目二
槐米中芦丁的精制和水解
思考问题
先进行项目二，冷却后等沉沉析出时候，再讨论项目3 1、以热水重结晶法精制芦丁的依据是什么？ 2、重结晶的操作要点有哪些？
实验规则
3、杜绝差错事故：称取药品时，要在拿取、称量 和放回时进行核对。称量完毕应盖好瓶塞，放回原 处。实验成品应写明名称、规格、配制者、配制时 间及班组号，交实验指导教师验收。
实验规则
4、爱护仪器药品：实验仪器、药品应妥善保管、存 放和使用。如有破损缺少，必须立即报告实验指导 教师，并填写仪器药品报损表，然后到准备室补领。 实验小组合用的仪器药品，每次实验前应检查核对 后再取用。实验指导教师对破损缺少的仪器药品应 查明原因，按本院校对仪器药品破损处理办法提出 处理意见。 打破玻璃器皿和试 备要赔偿！
甲醇（无水乙醇）使溶液，备用。
其余试剂：镁粉、浓盐酸、10%α -萘酚溶液、浓硫酸、2% 三氯化铁乙醇溶液 准备3支试管（一个空白管， 样品用蒸馏水代替，一个是芦丁、一个是槲皮素）
试验记录
试剂
盐酸-镁粉反 应 Molish反应 FeCl3反应 试验现象 空白 芦丁 槲皮素
结论及解释
芦丁的提取分离与鉴定
颜色 样品 芦丁 槲皮素
直接观察 日光 UV
AlCl3 喷雾 日光 UV
R f值
注意：硅胶预制板，用之前105度烘半个小 时。
实验规则
1、预习实验内容：要明确实验目的与要求。对处方 中药物性质、配制原理、操作步骤、操作关键等， 做到“心中有数”，并合理安排实验时间。 2、遵守实验纪律：应保持实验室内肃静，不得无故 迟到或早退，不得擅离实验操作岗位，甚至高声 谈笑。如发生差错事故或异常现象，应随时报告 指导教师，查明原因，及时解释。注意安全，严 防火灾、烧伤或中毒事故发生。
子项目三
水解芦丁得到槲皮素
思考问题
1、芦丁是？苷（ N- 苷 、O-苷、S-苷or C苷? 2、苷键的裂解可以用什么方法 ？最常用的方 法是？ 影响酸水解速度的因素有哪些？ 2、芦丁水解后的产物是什么？ 3、如何进行苷类酸水解操作，如何分离得到 苷元成分？
芦丁的提取分离与鉴定
子项目三
水解芦丁得到槲皮素
芦丁的提取分离与鉴定
子项目三 芦丁 和槲皮素的鉴别
糖 的 鉴 定
残渣
水解所得滤液 20ml
用饱和Ba(OH)2调PH值至 中性，折叠滤纸过滤
滤液 蒸干，放冷 加2-3ml乙醇溶解 供试品溶液 纸色谱
芦丁的提取分离与鉴定
糖 的 纸 色 谱 鉴 定
标准品：葡萄糖、鼠李糖
展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）上层液 显色剂：苯胺—邻苯二甲酸试剂。 105℃烘10min显色(显棕色或棕红色斑点)
新华一号滤纸 标本缸
倒入缸内约30毫升的展开剂
芦丁的提取分离与鉴定
糖 展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）放到分 的 液漏斗中，平衡后取上层备用。 纸 显色剂：苯胺—邻苯二甲酸试剂。 色 105℃烘10min显色(显棕色或棕红色斑点) 谱 鉴 定 试验记录： 粘附纸色谱，并计
算斑点的Ｒf值 当溶剂走到溶剂前沿6－ 8cm即可，约需40分钟
实训报告格式
参照书P139和P216页， 具体要求老师再规定！
残渣
食品091班得到的精制芦丁大约（粗芦丁4克 精制后大约？）
减压抽滤装置
减压过滤操作 减压过滤也就是抽滤,利用抽气泵使抽滤瓶中的 压强降低,达到固液分离的目的. 装置:布式漏斗,抽滤瓶,胶管,抽气泵,滤纸 过程: 1、安装仪器,检查布式漏斗与抽滤瓶之间连接是否 紧密，抽气泵连接口是否漏气； 2、修剪滤纸，使其略小于布式漏斗，但要把所有 的孔都覆盖住，并滴加蒸馏水使滤纸与漏斗连接紧密； 3、将固液混合物转移到滤纸上； 4、打开抽气泵开关，开始抽滤。 5、过滤完之后，先抽掉抽滤瓶接管，后关抽气泵。 （防止倒吸）
实训结果
得到两个单体化合物
OH OH
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O O 4'
HO
O
O OH OH O OH OH OH OH OH O CH2O O
槲皮素
芦丁源自文库
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
槐花 槐米
槐花为豆科植物槐Sophora japonica L．的干燥 花及花蕾
芦丁的提取分离与鉴定
需要配制的试剂: 1 苯胺—邻苯二甲酸试剂配法：苯胺0.93g和邻苯二甲酸 1.66g溶于100ml水饱和的正丁醇中。 （我们实验需要配 100ml）(用分液漏斗中加入50ml水和 100ml正丁醇震摇后 静置取上层即为水饱和的正丁醇） 2 10%α-萘酚乙醇溶液 25ml 3 2%三氯化铁乙醇溶液 20ml 4、展开剂：醋酸乙酯-甲酸-水（8：1：1）（我们实验需要 配300ml 5、5组配一瓶配200ml正丁醇-乙酸-水（4：1：5）放到分液 漏斗中，平衡后取上层备用 配两瓶 6、 2%AlCl3乙醇溶液 100ml 7、硅胶预制板，用之前105度烘半个小时。
定 性 反 应
盐酸-镁粉反应
黄酮母核
将样品溶液1ml，先滴加1－2滴浓盐酸再加入少许 镁粉振摇，1-2min内，观察颜色变化。（注意顺序） Molish反应
苷类
将样品溶液1ml，加入与样品等体积10%α -萘 酚溶液，倾斜试管，摇匀，沿管壁滴加适量浓硫 酸（约2ml），至分层注意观察两界面产生的变 化。（不要摇动）
O OH OH O OH OH OH OH OH O CH2O O
性状：浅黄色粉末或极细微淡黄色针 状结晶。 溶解度：在冷水中1:10000，沸水中 1:200；冷乙醇中1:200，沸乙醇中 1:60。沸甲醇中1:7。 酸碱性：芦丁分子中具有较多酚羟基， 显弱酸性，易溶于碱液中，酸化后又 可析出。
芦丁
标准品：葡萄糖、鼠李糖
芦丁的提取与定性反应
薄 层 色 谱 鉴 别
样品：分别取精制的芦丁、槲皮素适量，加95% 乙醇溶解成每1ml含1mg的溶液，备用。 展开剂：醋酸乙酯-甲酸-水（8：1：1） 显色剂：2%AlCl3乙醇溶液，105℃加热至斑 点清晰，置紫外灯(365nm)下观察。
实验记录
天然产物提纯实训
项目一 槐米中芦丁的提取分离 与鉴定
项目一
芦丁的提取分离与鉴定
子项目一 槐米中芦丁的提取
子项目二 槐米中芦丁的精制
子项目三 水解芦丁得到槲皮素
子项目四 芦丁和槲皮素的鉴别
实训目的
能够运用碱溶酸沉法和结晶法的操作技术对 槐米中的芦丁进行提取分离 能够运用酸水解的操作技术对槐米中芦丁进 行水解 能够运用纸色谱、薄层色谱法和化学法鉴别 芦丁、槲皮素和糖类化合物
需要的仪器设备
每组需要抽滤设备（需要1000ml的抽滤瓶）、 滤纸、 玻璃棒、1000ml烧杯、加热回流设 备（电热套、冷凝管、烧瓶）、小烧杯、浓 硫酸、浓盐酸
芦丁的提取分离与鉴定
提 取 与 精 制
第一次实验所得滤液 抽滤，少量水洗涤沉淀至中性 滤液 沉淀（粗品芦丁）
重结晶 取粗制芦丁3g,加蒸馏水 200-250ml,煮沸10分钟后， 趁热抽滤 滤液 冷却（可以用流动水快速冷却）静置 精制芦丁（备用） 抽滤， 干燥、称重
精制芦丁1.5g 加入2%硫酸或者 (1mol/lHCL)100ml，加热 回流30min(从有液滴滴下开 始计时），放冷静置，抽滤
沉淀 粗品槲皮素
注意观察整个过程的现 象！( 溶液澄明度和颜色 的变化)为什么出现这种 情况？
滤液
作糖的检识用
水解
抽滤
洗涤沉淀
干燥
称重
具体做法：芦丁水解方法： 取精制芦丁1.5g，研细后 置于250ml圆底烧瓶中，加入2％硫酸或 （1mol/lHCL)100m1，加热回流 30min，瓶中浑浊 液逐渐变为澄清的棕黄色液体，最后生成鲜黄色沉淀。 放冷沉淀，抽滤，保存滤液（应为澄清无色液体）， 作为糖的检查，沉淀物为芸香苷苷元（槲皮素），用 蒸馏水洗至中性，抽干水分，晾干，称量。得粗制槲 皮素，再用乙醇重结晶得精制槲皮素。 1mol/lHCL配法:取约90毫升浓盐酸定容至1000毫升
相关内容介绍
性能：苦，性微寒。 功效：凉血止血、清肝泻火 应用：用于便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、 衄血、肝热目赤、头痛眩晕等。 主要含有芦丁、槲皮素，还含少量皂苷类及多 糖、粘液质等。近代研究表明槐米含芦丁可高 达23.5%，槐花开放后降至13.0%。
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
OH OH HO O
注意观察现象：未加热时，瓶内为混悬
液（芦丁不溶于冷水），加热后，混悬 液逐渐变为澄清液（芦丁易溶于热水）， 继续加热，有鲜黄色沉淀析出（槲皮素不 溶于水）
滤液处理： 取芦丁水解后的滤液15m1，加 氢氧化钡粉 中和至中性（搅拌下进行）滤去白色的硫酸 钡沉淀(漏斗滤纸），滤液在沸水浴上蒸干后， 加1－2 ml乙醇溶解，作为糖的供试液。 （如果加 氢氧化钡加过量后可以加少量的硫 酸回调pH)
硫酸可以同时沉淀Ba2+ Ba2+ + SO4 2========BaSO4↓ 使芦丁水解后的滤液更 纯净
学生做的结果：芦丁的得率大约是：20-25% 精制芦丁的得率是大约87% 槲皮素占芦丁分子是：13%到 20
芦丁的提取分离与鉴定
定 芦丁供试品溶液：取精制芦丁约5mg，用5ml甲 性 醇（无水乙醇）使溶液，备用。 反 应 槲皮素供试品溶液：取粗槲皮素约5mg，用5ml
槲皮素
子项目一 槐米中芦丁的提取
思考问题
1、加入硼砂目的是什么？ 2、为什么要加入石灰水，在芦丁的提取中能 起到什么作用？ 3、酸沉pH值为什么不宜过低？
那个天然产物的实验，要算下得率,粗芦丁重 量/槐米的重量； 精制芦丁的重量/粗芦丁的 重量；并且计算下，每克芦丁分子中槲皮素 和糖所占的百分比。
所需的试剂和设备
1、样品：槐花米 试剂：硼砂、CaO、浓盐酸 仪器：每一组需要： 电炉、1000ml烧杯、 小烧杯、 500ml烧杯、玻璃棒、pH试纸、玻 璃漏斗、滴管 公共需要：棉花、天平
芦丁的提取分离与鉴定
子项目一 槐米中芦丁的提取
提 取
槐花米 （22g） 加0.4%硼砂 沸水200ml 搅拌下加 入石灰乳 调节 pH8-9 加热 趁热用棉花 滤过
所需要的药品和设备：氢氧化钡、葡萄糖、鼠李糖、 正丁醇、乙酸、苯胺、邻苯二甲酸盐、无水乙醇、甲 醇、乙酸乙酯、甲酸、AlCl3、镁粉、浓盐酸、 α-萘酚溶液、浓硫酸、三氯化铁、紫外灯、新 华1号滤纸、点样毛细管、水浴锅、硅胶G预制板
11块、分液漏斗 喷雾器几个
每组需要：1个蒸发皿、玻璃漏斗、玻璃棒、10ml试 管8支、2个小烧杯、胶头滴管
FeCl3反应
酚羟基
将样品溶液1ml，加入1～2滴2%Fecl3溶液， 观察现象。
子项目四 芦丁和槲皮素的鉴别
思考问题
1、纸色谱的原理及操作要点？ 2、黄酮类化合物有哪些显色方法，各针对哪类黄酮？ 3、黄酮类薄层色谱中，经常用到的吸附剂有哪几类？ 各自的原理有什么不同？ 4、黄酮类薄层色谱中常用到AlCl3乙醇溶液显色？显色 后一般呈什么颜色？ 5、薄层色谱的操作要点有哪些？
实验规则
5、保持室内整洁：学生进入实验室必须穿戴工作衣 帽。实验完毕应将本组实验台、实验架等整理洁净方 可离开。实验小组轮流值日，主要负责实验室内、走 廊地面、门窗的卫生整洁，以及废物缸的清倒工作， 将水、电门窗关好，经指导教师验收后再离开实验室。 6、写好实验报告：实验报告是考查学生分析总结实 验资料能力和写作能力的重要方面，亦是评定实验成 绩的主要依据
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
OH OH HO O
O OH OH O OH OH OH OH OH O CH2O O
用于治疗毛细管脆弱引 起的出血病，并用作高 血压的辅助治疗剂。
芦丁
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O O 4'
性状：黄色针状结晶（稀乙醇）。 溶解度：冷乙醇中1:300，热乙醇中 1:23。可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、 冰乙酸、吡啶，不溶于水、氯仿、乙 醚、苯和石油醚等。
保持微 沸 20min 补充水分， 保证pH值
滤液
在60-70度下，用 浓盐酸调pH3-4
静置
残渣
2010.11月，实验结果：食品091班30克槐米 制得的粗芦丁大约5－8克不等。
子项目二
槐米中芦丁的精制和水解
思考问题
先进行项目二，冷却后等沉沉析出时候，再讨论项目3 1、以热水重结晶法精制芦丁的依据是什么？ 2、重结晶的操作要点有哪些？
实验规则
3、杜绝差错事故：称取药品时，要在拿取、称量 和放回时进行核对。称量完毕应盖好瓶塞，放回原 处。实验成品应写明名称、规格、配制者、配制时 间及班组号，交实验指导教师验收。
实验规则
4、爱护仪器药品：实验仪器、药品应妥善保管、存 放和使用。如有破损缺少，必须立即报告实验指导 教师，并填写仪器药品报损表，然后到准备室补领。 实验小组合用的仪器药品，每次实验前应检查核对 后再取用。实验指导教师对破损缺少的仪器药品应 查明原因，按本院校对仪器药品破损处理办法提出 处理意见。 打破玻璃器皿和试 备要赔偿！
甲醇（无水乙醇）使溶液，备用。
其余试剂：镁粉、浓盐酸、10%α -萘酚溶液、浓硫酸、2% 三氯化铁乙醇溶液 准备3支试管（一个空白管， 样品用蒸馏水代替，一个是芦丁、一个是槲皮素）
试验记录
试剂
盐酸-镁粉反 应 Molish反应 FeCl3反应 试验现象 空白 芦丁 槲皮素
结论及解释
芦丁的提取分离与鉴定
颜色 样品 芦丁 槲皮素
直接观察 日光 UV
AlCl3 喷雾 日光 UV
R f值
注意：硅胶预制板，用之前105度烘半个小 时。
实验规则
1、预习实验内容：要明确实验目的与要求。对处方 中药物性质、配制原理、操作步骤、操作关键等， 做到“心中有数”，并合理安排实验时间。 2、遵守实验纪律：应保持实验室内肃静，不得无故 迟到或早退，不得擅离实验操作岗位，甚至高声 谈笑。如发生差错事故或异常现象，应随时报告 指导教师，查明原因，及时解释。注意安全，严 防火灾、烧伤或中毒事故发生。
子项目三
水解芦丁得到槲皮素
思考问题
1、芦丁是？苷（ N- 苷 、O-苷、S-苷or C苷? 2、苷键的裂解可以用什么方法 ？最常用的方 法是？ 影响酸水解速度的因素有哪些？ 2、芦丁水解后的产物是什么？ 3、如何进行苷类酸水解操作，如何分离得到 苷元成分？
芦丁的提取分离与鉴定
子项目三
水解芦丁得到槲皮素
芦丁的提取分离与鉴定
子项目三 芦丁 和槲皮素的鉴别
糖 的 鉴 定
残渣
水解所得滤液 20ml
用饱和Ba(OH)2调PH值至 中性，折叠滤纸过滤
滤液 蒸干，放冷 加2-3ml乙醇溶解 供试品溶液 纸色谱
芦丁的提取分离与鉴定
糖 的 纸 色 谱 鉴 定
标准品：葡萄糖、鼠李糖
展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）上层液 显色剂：苯胺—邻苯二甲酸试剂。 105℃烘10min显色(显棕色或棕红色斑点)
新华一号滤纸 标本缸
倒入缸内约30毫升的展开剂
芦丁的提取分离与鉴定
糖 展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）放到分 的 液漏斗中，平衡后取上层备用。 纸 显色剂：苯胺—邻苯二甲酸试剂。 色 105℃烘10min显色(显棕色或棕红色斑点) 谱 鉴 定 试验记录： 粘附纸色谱，并计
算斑点的Ｒf值 当溶剂走到溶剂前沿6－ 8cm即可，约需40分钟
实训报告格式
参照书P139和P216页， 具体要求老师再规定！
残渣
食品091班得到的精制芦丁大约（粗芦丁4克 精制后大约？）
减压抽滤装置
减压过滤操作 减压过滤也就是抽滤,利用抽气泵使抽滤瓶中的 压强降低,达到固液分离的目的. 装置:布式漏斗,抽滤瓶,胶管,抽气泵,滤纸 过程: 1、安装仪器,检查布式漏斗与抽滤瓶之间连接是否 紧密，抽气泵连接口是否漏气； 2、修剪滤纸，使其略小于布式漏斗，但要把所有 的孔都覆盖住，并滴加蒸馏水使滤纸与漏斗连接紧密； 3、将固液混合物转移到滤纸上； 4、打开抽气泵开关，开始抽滤。 5、过滤完之后，先抽掉抽滤瓶接管，后关抽气泵。 （防止倒吸）
实训结果
得到两个单体化合物
OH OH
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O O 4'
HO
O
O OH OH O OH OH OH OH OH O CH2O O
槲皮素
芦丁源自文库
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
槐花 槐米
槐花为豆科植物槐Sophora japonica L．的干燥 花及花蕾
芦丁的提取分离与鉴定
需要配制的试剂: 1 苯胺—邻苯二甲酸试剂配法：苯胺0.93g和邻苯二甲酸 1.66g溶于100ml水饱和的正丁醇中。 （我们实验需要配 100ml）(用分液漏斗中加入50ml水和 100ml正丁醇震摇后 静置取上层即为水饱和的正丁醇） 2 10%α-萘酚乙醇溶液 25ml 3 2%三氯化铁乙醇溶液 20ml 4、展开剂：醋酸乙酯-甲酸-水（8：1：1）（我们实验需要 配300ml 5、5组配一瓶配200ml正丁醇-乙酸-水（4：1：5）放到分液 漏斗中，平衡后取上层备用 配两瓶 6、 2%AlCl3乙醇溶液 100ml 7、硅胶预制板，用之前105度烘半个小时。
定 性 反 应
盐酸-镁粉反应
黄酮母核
将样品溶液1ml，先滴加1－2滴浓盐酸再加入少许 镁粉振摇，1-2min内，观察颜色变化。（注意顺序） Molish反应
苷类
将样品溶液1ml，加入与样品等体积10%α -萘 酚溶液，倾斜试管，摇匀，沿管壁滴加适量浓硫 酸（约2ml），至分层注意观察两界面产生的变 化。（不要摇动）
O OH OH O OH OH OH OH OH O CH2O O
性状：浅黄色粉末或极细微淡黄色针 状结晶。 溶解度：在冷水中1:10000，沸水中 1:200；冷乙醇中1:200，沸乙醇中 1:60。沸甲醇中1:7。 酸碱性：芦丁分子中具有较多酚羟基， 显弱酸性，易溶于碱液中，酸化后又 可析出。
芦丁