酶的基本性质实验

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唾液酶化学实验报告

唾液酶化学实验报告

一、实验目的1. 了解唾液酶的基本性质和作用。

2. 掌握唾液酶的提取和鉴定方法。

3. 学习运用化学方法研究生物酶的性质。

二、实验原理唾液酶是一种消化酶,主要存在于唾液中,能够催化淀粉分解为麦芽糖。

本实验通过提取唾液酶,观察其在不同条件下的催化活性,以及与其他物质的反应,来研究唾液酶的性质。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:唾液、淀粉、碘液、氯化钠、氢氧化钠、硫酸铜、酚酞指示剂等。

2. 实验仪器:试管、烧杯、电子天平、恒温水浴锅、滴管、移液管等。

四、实验步骤1. 唾液酶提取(1)取一定量的唾液,加入适量的氯化钠溶液,搅拌均匀。

(2)将混合液用离心机以3000r/min离心10分钟,取上清液作为唾液酶提取液。

2. 唾液酶活性测定(1)取两支试管,分别编号为1号和2号。

(2)向1号试管中加入2mL淀粉溶液,2号试管中加入2mL唾液酶提取液。

(3)将两支试管放入恒温水浴锅中,保持37℃水浴10分钟。

(4)向两支试管中分别加入2滴碘液,观察颜色变化。

3. 唾液酶与氢氧化钠反应(1)取两支试管,分别编号为3号和4号。

(2)向3号试管中加入2mL唾液酶提取液,4号试管中加入2mL唾液。

(3)向两支试管中分别加入2mL 5%的氢氧化钠溶液,观察颜色变化。

4. 唾液酶与硫酸铜反应(1)取两支试管,分别编号为5号和6号。

(2)向5号试管中加入2mL唾液酶提取液,6号试管中加入2mL唾液。

(3)向两支试管中分别加入2mL 3%的硫酸铜溶液,观察颜色变化。

五、实验结果与分析1. 唾液酶活性测定实验结果显示,1号试管中的淀粉溶液在加入唾液酶提取液后,颜色变蓝,说明唾液酶具有催化淀粉分解为麦芽糖的作用。

2. 唾液酶与氢氧化钠反应实验结果显示,3号试管中的唾液酶提取液在加入氢氧化钠溶液后,颜色变为红褐色,说明唾液酶在碱性条件下发生变性。

3. 唾液酶与硫酸铜反应实验结果显示,5号试管中的唾液酶提取液在加入硫酸铜溶液后,颜色变为蓝绿色,说明唾液酶与铜离子发生反应。

酶的专一性实验报告

酶的专一性实验报告

酶的专一性实验报告篇一:实验酶的活性及专一性测定实验七酶的活性及专一性测定一、实验目的通过本实验,了解酶的活性测定方法及其对底物催化的专一性。

二、实验原理唾液淀粉酶能专一的催化淀粉水解,生成一系列水解产物,即糊精、麦芽糖、葡萄糖等。

麦芽糖或葡萄糖都属于还原糖,能使班氏试剂中的二价铜离子还原成亚铜,并生成砖红色的氧化亚铜。

淀粉酶不能催化蔗糖水解,且蔗糖本身不是还原糖,所以不能与班氏试剂作用呈色,以此证明酶催化底物的专一性。

三、器材及试剂1. 器材:试管、试管夹、样品杯、滴瓶、温度计、恒温水浴锅,冰箱等。

2. 试剂:(1)0.5%淀粉溶液(含0.3%NaCl):称取可溶性淀粉0.5g,加5ml蒸馏水调成糊状,徐徐倒入80ml煮沸的蒸馏水中,不断搅拌,待其溶解后,加0.3gNaCl,加蒸馏水至100ml。

此液应新鲜配制,防止细菌污染。

(2)2%蔗糖溶液:称2g蔗糖,加蒸馏水至100ml溶解。

(3)班氏试剂:溶解结晶硫酸铜17.3g于100ml热的蒸馏水中,冷却后加水至150ml为A液。

取柠檬酸钠173g和无水碳酸钠100g,加蒸馏水600ml ,加热溶解,冷却后加水至850ml为B液。

将A液缓慢倒入B液中,混合即可。

(4)稀释唾液:用清水漱口,清除食物残渣。

再含蒸馏水15ml作咀嚼运动,2分钟后将稀释唾液收集于样品杯中备用。

(5)碘-碘化钾溶液:四、实验方法1. 唾液淀粉酶的活性测定唾液的稀释:取10支试管,分别编上号1-6,取1ml唾液加入1号试管,加水稀释10倍后从中取出1ml加入2号试管,依次梯度稀释。

各取上述稀释的唾液各1ml,分别加入相应编号的试管里,然后向6支试管内同时加入1ml的0.5,的淀粉溶液,振荡混匀后放入37? 恒温水浴中,10分钟后取出,滴加2滴碘液,振荡混匀,观察颜色,选取颜色变化适中的一支,记录稀释倍数,计算酶的活性,用于后续实验。

2. 淀粉酶的专一性取3个试管,分别编号,按下表操作,记录实验现象。

酶性质实验报告结果现(3篇)

酶性质实验报告结果现(3篇)

第1篇一、实验目的本次实验旨在通过一系列的实验操作,观察和分析不同因素对酶活性的影响,探究酶的专一性、激活剂与抑制剂的作用以及酶的最适温度。

二、实验材料与仪器1. 实验材料:淀粉酶、葡萄糖酶、果糖酶、淀粉、葡萄糖、果糖、磷酸盐缓冲液、氯化钠、硫酸铜、碘液、苯酚、乙醇等。

2. 实验仪器:恒温水浴锅、离心机、分光光度计、移液器、容量瓶、试管等。

三、实验方法1. 酶的专一性实验(1)将淀粉酶分别与淀粉、葡萄糖、果糖混合,置于恒温水浴锅中,在一定温度下反应一定时间。

(2)将反应后的溶液进行离心,取上清液。

(3)用碘液检测上清液中淀粉的含量,用苯酚-硫酸法检测葡萄糖和果糖的含量。

2. 激活剂与抑制剂实验(1)将淀粉酶分别与磷酸盐缓冲液、氯化钠、硫酸铜混合,置于恒温水浴锅中,在一定温度下反应一定时间。

(2)将反应后的溶液进行离心,取上清液。

(3)用碘液检测上清液中淀粉的含量。

3. 酶的最适温度实验(1)将淀粉酶分别置于不同温度的恒温水浴锅中,反应一定时间。

(2)将反应后的溶液进行离心,取上清液。

(3)用碘液检测上清液中淀粉的含量。

四、实验结果与分析1. 酶的专一性实验结果实验结果显示,淀粉酶对淀粉的催化效果明显,而对葡萄糖和果糖的催化效果较差。

这表明淀粉酶具有高度的底物专一性,只能催化淀粉的水解反应。

2. 激活剂与抑制剂实验结果实验结果显示,氯化钠对淀粉酶的活性有促进作用,而磷酸盐缓冲液和硫酸铜对淀粉酶的活性有抑制作用。

这说明氯化钠可以作为淀粉酶的激活剂,而磷酸盐缓冲液和硫酸铜可以作为淀粉酶的抑制剂。

3. 酶的最适温度实验结果实验结果显示,淀粉酶在40℃时的活性最高,而在其他温度下,酶的活性逐渐降低。

这表明淀粉酶的最适温度为40℃。

五、讨论与心得1. 酶的专一性是酶催化反应的一个重要特点,本实验验证了淀粉酶对淀粉的专一性,为后续研究酶的应用提供了理论依据。

2. 激活剂和抑制剂在酶催化反应中起着重要作用。

本实验发现氯化钠可以作为淀粉酶的激活剂,而磷酸盐缓冲液和硫酸铜可以作为淀粉酶的抑制剂,为酶的调控提供了参考。

实验三酶的基本性质

实验三酶的基本性质
5
二、原理 (三)酶的激活和抑制
酶的活性常受某些物质的影响。 有些物质能使酶的活性增加,称为酶的激活剂; 有些物质能使酶的活性降低,称为酶的抑制剂。
例如,氯化钠为唾液淀粉酶的激活剂,硫酸铜为其抑 制剂。
很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性,而且常具有 特异性。
激活剂和抑制剂不是绝对的,有些物质在低浓度时为某种 酶的激活剂,而在高浓度时则为该酶的抑制剂。 例如,氯化钠达到1/3饱和度时就可抑制唾液淀粉酶的 活性。
实验三 酶的基本性质
(P85)
1
酶的定义: 是生物细胞产生的、以蛋白质为主要成分的生
物催化剂。生物体内的化学反应基本上都是在酶 催化下进行的。 酶的特点:
酶具有高效性、专一性、活性可调节控制等特 性。 温度、pH值、激活剂、抑制剂可影响酶的活性。
2
一、目的
通过检验不同温度下唾液淀粉酶的活性,了解温 度对酶活性的影响,明确最适温度的概念;
反应10min 冷却3min 碘液(滴)
管号
1
2
3
1
1
1
0℃
37℃ 100℃
2
2
2
1
1
1
0℃
37℃ 100℃
流动水冷却
1
1
1
9
四、实验方法
(二)pH值对酶活性的影响
操作项目
管号
1
2
3
pH5.0缓冲液(mL)
3
/
/
pH7.0缓冲液(mL)
/
3
/
pH8.0缓冲液(mL)
/
/
3
1%淀粉液(含0.3%NaCl)(mL) 1
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90

酶的基本性质实验报告

酶的基本性质实验报告

一、实验目的1. 了解酶的基本概念和特性。

2. 掌握酶的催化作用及其影响因素。

3. 学习酶活力测定方法。

4. 通过实验,加深对酶学理论的理解。

二、实验原理酶是一种生物催化剂,具有高效、专一、温和等特性。

酶的活性受温度、pH值、底物浓度、酶浓度等因素的影响。

本实验通过测定酶活力,分析不同因素对酶活性的影响。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 酶制剂- 底物- 水浴锅- 移液器- 计时器- pH计- 温度计2. 实验仪器:- 酶活力测定仪- 分光光度计四、实验方法1. 酶活力测定:- 采用比色法测定酶活力。

- 将底物溶液和酶溶液混合,在一定温度和pH值下反应。

- 使用分光光度计测定反应体系在特定波长下的吸光度。

- 根据吸光度变化计算酶活力。

2. 不同因素对酶活性的影响:- 温度:在0℃、25℃、37℃、50℃、70℃等不同温度下测定酶活力。

- pH值:在pH值分别为3、5、7、9、11的缓冲溶液中测定酶活力。

- 底物浓度:在一定范围内改变底物浓度,测定酶活力。

- 酶浓度:在一定范围内改变酶浓度,测定酶活力。

五、实验结果与分析1. 酶活力测定结果:- 在不同温度下,酶活力随温度升高而增大,在37℃时达到最大值,之后随温度升高而降低。

- 在不同pH值下,酶活力在pH值为7时达到最大值,pH值过高或过低都会使酶活力降低。

- 在一定范围内,底物浓度和酶浓度对酶活力有显著影响。

2. 不同因素对酶活性的影响分析:- 温度:酶活性受温度影响较大,过高或过低的温度都会使酶失活。

- pH值:酶活性受pH值影响较大,不同酶的最适pH值不同。

- 底物浓度:在一定范围内,底物浓度越高,酶活力越大。

- 酶浓度:在一定范围内,酶浓度越高,酶活力越大。

六、实验结论1. 酶具有高效、专一、温和等特性。

2. 酶活性受温度、pH值、底物浓度、酶浓度等因素的影响。

3. 在实际应用中,应根据酶的特性选择合适的反应条件,以提高酶的催化效率。

认识酶的实验报告(3篇)

认识酶的实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解酶的概念、特性及其在生物体内的重要作用。

2. 掌握酶的催化活性、专一性和影响酶活性的因素。

3. 通过实验验证酶的催化作用,加深对酶的理解。

二、实验原理酶是一种生物催化剂,由活细胞产生,具有高效性、专一性和温和性。

酶催化作用具有以下特点:1. 高效性:酶催化反应速率比无机催化剂快10^3~10^17倍。

2. 专一性:一种酶只能催化一种或一类底物。

3. 温和性:酶催化反应在较温和的条件下进行。

三、实验材料与仪器1. 材料:(1)酶:淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等。

(2)底物:淀粉、蛋白质、脂肪等。

(3)指示剂:碘液、酚酞等。

2. 仪器:(1)恒温水浴箱(2)试管及试管架(3)移液器(4)显微镜四、实验步骤1. 酶催化反应速率实验(1)取两只试管,分别加入相同量的淀粉溶液和碘液。

(2)向一只试管中加入适量的淀粉酶,另一只试管中加入等量的蒸馏水作为对照。

(3)将两只试管放入恒温水浴箱中,观察并记录碘液褪色所需时间。

2. 酶的专一性实验(1)取两只试管,分别加入相同量的淀粉溶液和蛋白质溶液。

(2)向一只试管中加入适量的淀粉酶,另一只试管中加入等量的蛋白酶。

(3)将两只试管放入恒温水浴箱中,观察并记录反应现象。

3. 影响酶活性的因素实验(1)温度对酶活性的影响取两只试管,分别加入相同量的淀粉酶和淀粉溶液。

向一只试管中加入适量蒸馏水作为对照,另一只试管中加入少量NaOH溶液,观察并记录碘液褪色所需时间。

(2)pH值对酶活性的影响取两只试管,分别加入相同量的淀粉酶和淀粉溶液。

向一只试管中加入适量蒸馏水作为对照,另一只试管中加入适量醋酸溶液,观察并记录碘液褪色所需时间。

五、实验结果与分析1. 酶催化反应速率实验:淀粉酶催化淀粉水解反应速率明显快于对照组,证明酶具有催化作用。

2. 酶的专一性实验:淀粉酶对淀粉具有催化作用,而对蛋白质无催化作用,证明酶具有专一性。

3. 影响酶活性的因素实验:(1)温度对酶活性的影响:NaOH溶液对淀粉酶活性有抑制作用,证明温度对酶活性有影响。

磷酸酶实验报告

磷酸酶实验报告

一、实验目的1. 了解磷酸酶的基本性质和作用;2. 掌握磷酸酶活性测定的原理和方法;3. 学会使用分光光度计进行酶活性测定;4. 熟悉磷酸酶的动力学分析。

二、实验原理磷酸酶是一类催化磷酸酯键水解的酶,具有广泛的生物学功能。

磷酸酶活性测定通常采用分光光度法,通过检测底物或产物浓度的变化来反映酶的活性。

本实验采用磷酸苯二钠为底物,在碱性条件下,磷酸酶将磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸盐。

苯酚在碱性溶液中与4-氨基安替比林作用,经铁氰化钾氧化生成红色醌的衍生物,根据红色深浅可测出酶活力高低。

三、实验器材与试剂1. 器材:试管架、试管、移液管、移液枪、恒温水浴箱、721型分光光度计、移液器、磁力搅拌器、电子天平、滴定管等。

2. 试剂:0.02mol/L底物液、pH10碳酸缓冲液、蒸馏水、酶液、碱性溶液、4-氨基安替比林、铁氰化钾、磷酸苯二钠等。

四、实验步骤1. 准备实验试剂,配制底物溶液、缓冲液、酶液等。

2. 设置实验组:分别取不同浓度的底物溶液(0.05、0.10、0.20、0.50、1.00、2.00、5.00、10.00、20.00mmol/L)和酶液,在恒温水浴箱中保温至实验温度。

3. 每个实验组分别取3支试管,编号为1、2、3。

4. 在1号试管中加入底物溶液、缓冲液和酶液,混合均匀后立即加入碱性溶液,启动反应。

5. 在2号和3号试管中分别加入底物溶液、缓冲液和酶液,混合均匀后立即加入4-氨基安替比林和铁氰化钾,启动反应。

6. 将1、2、3号试管分别置于分光光度计中,于特定波长下测定吸光度。

7. 根据吸光度计算酶活性,绘制酶活性-底物浓度曲线。

8. 根据曲线计算米氏常数(Km)和最大反应速度(Vmax)。

五、实验结果与分析1. 酶活性-底物浓度曲线呈典型的米氏曲线,说明实验成功。

2. 根据曲线计算得到Km值为X mmol/L,Vmax为Y mmol/L·min。

3. 分析Km值和Vmax值,了解酶的催化特性。

酶的基本性质实验报告

酶的基本性质实验报告

酶的基本性质实验报告酶的基本性质实验报告引言:酶是一类生物催化剂,能够加速和调控生物体内的化学反应速率。

酶的研究对于理解生物体的代谢过程以及开发新药和生物技术具有重要意义。

本实验旨在探究酶的基本性质,包括催化活性、温度和pH值对酶活性的影响。

实验一:酶的催化活性材料与方法:1. 取一小块新鲜牛肉,切成细丝。

2. 准备一杯水,将牛肉丝放入其中。

3. 在室温下观察牛肉丝的变化。

结果与讨论:经过一段时间,我们可以观察到牛肉丝开始变得更加松软。

这是因为牛肉中的酶分解了蛋白质,使其变得更易消化。

这个实验说明了酶具有催化作用,能够加速化学反应的进行。

实验二:温度对酶活性的影响材料与方法:1. 准备三个试管,分别标记为A、B、C。

2. 在试管A中加入一定量的淀粉溶液。

3. 在试管B中加入一定量的淀粉溶液和一滴淀粉酶。

4. 在试管C中加入一定量的淀粉溶液和一滴淀粉酶。

5. 将试管A放入冰箱,试管B放在室温下,试管C放在加热器上加热。

结果与讨论:经过一段时间,我们可以观察到试管A中的淀粉溶液没有发生明显的变化,试管B中的淀粉溶液开始变得混浊,而试管C中的淀粉溶液变得更加透明。

这是因为酶的活性受温度的影响。

在低温下,酶的活性较低,无法有效催化淀粉的降解。

在适宜的温度下,酶的活性最高,可以充分发挥催化作用。

然而,当温度过高时,酶的结构可能发生变化,导致酶的活性降低甚至失活。

实验三:pH值对酶活性的影响材料与方法:1. 准备三个试管,分别标记为A、B、C。

2. 在试管A中加入一定量的牛奶。

3. 在试管B中加入一定量的牛奶和一滴乳酸酶。

4. 在试管C中加入一定量的牛奶和一滴乳酸酶。

5. 分别在试管A、B、C中加入不同pH值的缓冲液。

结果与讨论:经过一段时间,我们可以观察到试管B中的牛奶开始变酸,而试管C中的牛奶保持了原有的味道。

这是因为酶的活性受pH值的影响。

在适宜的pH值下,酶的活性最高,可以催化乳酸的产生。

然而,当pH值偏离适宜范围时,酶的结构可能发生变化,导致酶的活性降低甚至失活。

试验七酶的基本性质

试验七酶的基本性质

实验七酶的基本性质一、实验目的1.了解酶催化的高效性、专一性;2.pH、温度、抑制剂和激活剂对酶活力的影响。

二、实验原理过氧化氢酶广泛分布于生物体内,能将代谢中产生的有害的H2O2分解成H2O和O2,其催化效率比无机催化剂铁粉高10个数量级。

酶的另一特点是具有高度的特异(专一)性,淀粉酶和蔗糖酶虽然都催化糖苷键的水解,但是淀粉酶只对淀粉起作用,蔗糖酶只水解蔗糖。

通过比较淀粉酶在不同pH、不同温度以及有无抑制剂或激活剂是水解淀粉的差异,说明这些环境因素与酶活性的关系。

三、仪器、试剂和材料1.仪器(1)恒温水浴(37℃,70℃);(2)沸水浴;(3)冰浴;(4)移液管:1ml,2ml,5ml各2支;(5)量筒:10ml3支;(6)多孔白瓷板。

2.试剂(1)铁粉。

(2)2%H2O2(用时现配)。

(3)唾液淀粉酶溶液:先用蒸馏水漱口,再含10ml左右蒸馏水,轻轻漱动,数分钟后吐出收集在烧杯,用数层纱布或棉花过滤,即的清澈的唾液淀粉酶原液,根据酶活性的高低稀释50-100倍,即为唾液淀粉酶溶液。

(4)蔗糖酶溶液:取1g鲜酵母或干酵母放入研钵中,加入少量石英砂和水研磨,加50ml蒸馏水,静置片刻,过滤即得。

(5)2%蔗糖溶液:用分析纯度蔗糖配置(用时现配)。

(6)1%淀粉溶液:1g淀粉和0.3gNaCl,用5ml蒸馏水悬浮,慢慢倒入60ml 煮沸的蒸馏水中,煮沸1min,冷却至室温,加水到100ml,冰箱储存。

(7)0.1%淀粉溶液:0.1淀粉,以5ml水悬浮,慢慢倒入60ml煮沸的蒸馏水中,煮沸1min,冷却至室温,加水到100ml,冰箱储存。

(8)本乃狄(Benedict)试剂:17.3gCuSO4·5HO,加100ml蒸馏水加热溶解,冷却;173g柠檬酸钠和100gNaCO3·2H2O,以600ml蒸馏水加热溶解,冷却后将CuSO 4溶液慢慢加到柠檬酸钠—碳酸钠溶液中,变加边搅匀,最后定容至1000ml。

酶的性质实验报告

酶的性质实验报告

一、实验目的1. 了解酶的基本概念和特性。

2. 探究pH值、温度等因素对酶活性影响。

3. 分析酶催化反应的速度与底物浓度的关系。

二、实验原理酶是一种生物催化剂,具有高效、专一、温和等特性。

酶的活性受多种因素影响,如pH值、温度、底物浓度等。

本实验通过观察不同条件下酶催化反应的现象,分析影响酶活性的因素。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:淀粉、碘液、NaOH、HCl、NaCl、蒸馏水、pH试纸、温度计等。

2. 实验仪器:试管、酒精灯、烧杯、移液器、计时器等。

四、实验步骤1. pH值对酶活性的影响(1)取三支试管,分别编号为1、2、3。

(2)向1号试管中加入2ml淀粉溶液,2号试管中加入2ml淀粉溶液和1滴HCl,3号试管中加入2ml淀粉溶液和1滴NaOH。

(3)观察并记录三支试管中淀粉溶液的颜色变化。

2. 温度对酶活性的影响(1)取三支试管,分别编号为1、2、3。

(2)向1号试管中加入2ml淀粉溶液,2号试管中加入2ml淀粉溶液和1滴HCl,3号试管中加入2ml淀粉溶液和1滴NaOH。

(3)将1号试管放入冷水浴中,2号试管放入温水浴中,3号试管放入热水浴中。

(4)观察并记录三支试管中淀粉溶液的颜色变化。

3. 底物浓度对酶活性的影响(1)取三支试管,分别编号为1、2、3。

(2)向1号试管中加入1ml淀粉溶液,2号试管中加入2ml淀粉溶液,3号试管中加入3ml淀粉溶液。

(3)向每支试管中加入1滴碘液,观察并记录三支试管中淀粉溶液的颜色变化。

五、实验结果与分析1. pH值对酶活性的影响实验结果显示,1号试管(中性)淀粉溶液颜色最深,2号试管(酸性)和3号试管(碱性)淀粉溶液颜色逐渐变浅。

这说明pH值对酶活性有显著影响,最适pH值约为中性。

2. 温度对酶活性的影响实验结果显示,1号试管(冷水浴)淀粉溶液颜色最深,2号试管(温水浴)淀粉溶液颜色变浅,3号试管(热水浴)淀粉溶液颜色最浅。

这说明温度对酶活性有显著影响,最适温度约为温水浴温度。

生化实验六 酶的基本性质

生化实验六 酶的基本性质

课程名称: 生物化学实验 指导老师: 史影 成绩: 实验名称: 酶的基本性质实验——底物专一性、激活剂和抑制剂、最适温度 同组学生姓名: 陈莞尔,潘盛警Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性 一、实验目的1.了解酶的专一性。

2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。

3.学会排除干扰因素,设计酶学实验。

二、基本原理酶是具有高度专一性的有催化功能的蛋白质。

酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性,酶促反应要比无机催化反应快数十倍。

酶催化的一个重要特点是具有高度的底物专一性,即一种酶只能对一种或一类底物其催化作用,对其他底物无催化反应。

根据各种酶对底物的选择程度不同,可分成下列几种:1.相对专一性。

一种酶能催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。

2.绝对专一性:有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物,而不作用于任何其他物质。

如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。

如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖,淀粉酶只作用于淀粉,而不作用于纤维素。

3.立体异构专一性:有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种,而对另一种则全无作用。

如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。

本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。

用Benedict 试剂检测反应产物。

Benedict 试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化铜沉淀。

Na 2CO 3+ 2H 2O 2NaOH + H 2CO 3 CuSO 4+ 2NaOH Cu(OH)2+ Na 2SO 4专业:____生物工程 姓名:_____陈传鑫 学号:___3090104963 日期:____2011.3.22_ 地点:_生物实验楼306实验报告还原糖(—CHO or —C=O)+ 2Cu(OH)2Cu2O + 2H2O + 糖的氧化产物(黄色或砖红色)淀粉和蔗糖无半缩醛基,无还原性,与Benedict试剂无显色反应。

实验四、多酚氧化酶的活性的测定及酶学性质

实验四、多酚氧化酶的活性的测定及酶学性质

实验四、多酚氧化酶的活性的测定及酶学性质多酚氧化酶(Polyphenol oxidase, PPO)是一种广泛存在于植物、菌类和动物体内的酶,主要催化化学反应为将多酚氧化成醛或酮。

本实验旨在通过测定PPO的活性来了解酶的基本特性及其酶学性质。

一、实验材料1、经过离心沉淀的香蕉、苹果、洋葱原汁。

2、6%聚乙烯醇(PVA)溶液。

3、明胶溶液(1%)。

4、酚酞指示剂。

5、75mM bicine缓冲液(pH 8.5)。

6、0.05% 过氧化氢溶液。

7、1% 多巴胺溶液。

8、分光光度计。

二、实验原理多酚氧化酶是一种铜单子酶,催化剂的过程时首先将基质中的酚乙酸类化合物与氧气反应形成间醌,然后间醌的氧化、聚合,形成花青素、黑色素等产物。

本实验采用的基质是多巴胺(L-dopa),媒介是酚酞指示剂,测定体系的光学吸收度。

酶的活性按单位时间内反应的基质质量而计算。

三、实验步骤1、提取PPO将香蕉、苹果、洋葱各取50g,切碎,加入200ml 0.1M盐酸溶液,搅拌后放在4℃冷库20-30min,滤去上清液。

将残渣加入100ml冷水,搅拌,离心至沉淀物无明显色泽,取上清液后pH调节至8.5,保存于冷库。

2、测定PPO的活性(1)制备基质溶液:10mg多巴胺溶于2ml 0.1M的硫酸钠溶液中,用1M的NaOH溶液调节pH至8.5,加入12ml0.75M缓冲液,加水至50ml。

(2)制备酚酞指示剂溶液:2mg的酚酞溶于100ml的乙醇中,加水至1L,制成0.2%的酚酞溶液。

(3)测定反应系统:将基质溶液、酚酞指示剂溶液和一定量提取液混合,在25℃下恒温反应5min。

(4)实验对照:在上述条件下,仅加入基质溶液和酚酞指示剂溶液,无提取液作为实验对照。

(5)催化反应停止:加入0.5ml 的聚乙烯醇溶液。

(6)光度计测量:在650nm处上述反应体系产生的色素的吸光度。

4、结果计算将吸收度计算为1cm光程曲线的峰高比,用表格法计算多酚氧化酶活性反应速率以μmol/min为单位。

酶工程实验报告一

酶工程实验报告一

酶工程实验报告一一、实验目的本次酶工程实验的主要目的是通过实际操作,深入了解酶的性质、作用机制以及酶的分离纯化和活性测定方法。

同时,培养我们的实验操作技能、观察分析能力和科学思维方法,为今后从事相关领域的研究和工作打下坚实的基础。

二、实验原理酶是一种具有生物催化功能的蛋白质或 RNA 分子。

它们能够在温和的条件下高效地催化各种化学反应,具有高度的特异性和催化效率。

本实验中所涉及的酶主要是蛋白酶和淀粉酶。

蛋白酶能够水解蛋白质中的肽键,将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸。

其活性可以通过测定水解产物的生成量或底物的消耗量来进行评估。

淀粉酶能够水解淀粉分子中的α-1,4 糖苷键,将淀粉分解为麦芽糖和葡萄糖等小分子物质。

其活性通常通过测定淀粉的水解程度来确定,常用的方法是碘量法。

酶的分离纯化是基于酶与杂质在物理化学性质上的差异,如溶解度、分子大小、电荷性质等,采用一系列的分离技术,如沉淀、层析、电泳等,逐步去除杂质,获得高纯度的酶。

三、实验材料与设备1、实验材料蛋白酶提取液淀粉酶提取液酪蛋白淀粉溶液福林酚试剂碘液其他化学试剂2、实验设备离心机分光光度计恒温水浴锅移液器电泳仪层析柱四、实验步骤制备酪蛋白底物溶液:称取一定量的酪蛋白,用氢氧化钠溶液溶解,调节 pH 至适宜值,定容备用。

设定反应体系:在试管中依次加入适量的蛋白酶提取液、酪蛋白底物溶液和缓冲液,混合均匀,置于恒温水浴锅中反应一定时间。

终止反应:反应结束后,加入三氯乙酸溶液终止反应。

测定吸光度:离心去除沉淀,取上清液,加入福林酚试剂显色,在分光光度计上测定吸光度。

计算蛋白酶活性:根据标准曲线计算出反应生成的酪氨酸量,从而计算出蛋白酶的活性。

2、淀粉酶活性的测定制备淀粉溶液:称取一定量的淀粉,用缓冲液溶解,加热糊化,冷却后定容备用。

设定反应体系:在试管中依次加入适量的淀粉酶提取液、淀粉溶液和缓冲液,混合均匀,置于恒温水浴锅中反应一定时间。

终止反应:反应结束后,加入碘液终止反应。

实验三酶的特性

实验三酶的特性

每隔1分钟由第9号试管中取出一滴混合液,置于白瓷板上,加一滴碘化钾-碘溶液,检验淀粉的水解程度,待结果呈橙黄色时,取出试
管,记录保温时间。
反 本实验观察pH对唾液淀粉酶活性的影响,唾液淀粉酶的最适pH约为6.
(1)2%蔗糖溶液
映 9号管所用的时间为 3 min
速 颜色
紫色
黄色
黄色
黄色
黄色
大多数动物酶的最适温度为37~40℃,植物酶的最适温度为50~60℃。
(一)温度对酶活力的影响
实验原理
酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下,酶的 反应温度最高。大多数动物酶的最适温度为37~ 40℃,植物酶的最适温度为50~60℃。酶对温度 的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂, 虽加热到100℃,其活性并无明显改变,但在 100℃的溶液中却很快地完全失去活性。低温能降 低或抑制酶的活性,但不能使酶失活。
黄色
黄色
黄色
度 向第9号试管中加入稀释200倍的唾液2ml,摇匀后放入37℃恒温水浴中保温。
然后,再向每个试管中加入0.
8,但在磷酸缓冲液中,其最适pH为6.
5%淀粉溶液(新鲜配制)
本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖的作用为例,来说明酶的专一性。
温度℃
(二)PH对酶活力的影响
实验原理
酶活性受环境pH的影响极为显著。通常各种酶只有 在一定的pH范围内才表现它的活性,一种酶表现其 活性最高时的pH值,称为该酶的最适pH。低于或高 于最适pH时,酶的活性逐渐降低。不同酶的最适pH 不同。本实验观察pH对唾液淀粉酶活性的影响,唾 液淀粉酶的最适pH约为6.8。酶的活性同时还受底物 性质和缓冲液性质的影响。例如,唾液淀粉酶的最 适pH约为6.8,但在磷酸缓冲液中,其最适pH为 6.4~6.6,在醋酸缓冲液中则为5.6。

实验三酶的特性(精)

实验三酶的特性(精)

实验器材及试剂
器材: (1)恒温水浴 (2)试管及试管架
试剂: (1) 0.1%淀扮溶液 (2)稀释50倍的新鲜唾液 (3)1%氯化钠溶液 (4)1%硫酸铜镕液 (5)1%硫酸钠溶液 (6)碘化钾—碘溶液
实验流程
管号
0.1% 淀 粉 溶 液 (ml) 稀释唾液(ml)
1% 硫 酸 铜 溶 液 (ml) 1% 氯 化 钠 溶 液 (ml) 1% 硫 酸 钠 溶 液 (ml) 蒸 馏水 ( 升ml ))
1 碘液 淀粉酶
将标号为2、3、4、5的试管淀粉溶液保持4℃、 40℃、60℃、80℃水浴恒温,加入唾液淀粉酶,摇
匀加入碘液,观察其呈色反应。
℃ ℃ ℃ ℃
4 2
40 3
60 4
80 5
预期结果
最合适淀粉酶的温度为40℃
反 映 速 度
温度℃
(二)PH对酶活力的影响
实验原理
酶活性受环境pH的影响极为显著。通常各种酶只有 在一定的pH范围内才表现它的活性,一种酶表现其 活性最高时的pH值,称为该酶的最适pH。低于或高 于最适pH时,酶的活性逐渐降低。不同酶的最适pH 不同。本实验观察pH对唾液淀粉酶活性的影响,唾 液淀粉酶的最适pH约为6.8。酶的活性同时还受底物 性质和缓冲液性质的影响。例如,唾液淀粉酶的最 适pH约为6.8,但在磷酸缓冲液中,其最适pH为 6.4~6.6,在醋酸缓冲液中则为5.6。
试剂:
0.3%氯化钠的0.5%淀粉溶液(新鲜配制) 稀释200倍的新鲜唾液 0.2M磷酸氢二钠溶液 0.1M柠檬酸溶液 碘化钾-碘溶液
器材:
试管与试管架 移液枪(1000微升) 锥形瓶(50毫升)×8 烧杯(100毫升) 白瓷板 恒温水浴锅 滴管 秒表

影响酶活性的因素实验报告

影响酶活性的因素实验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除影响酶活性的因素实验报告篇一:实验报告-不同因素对酶的影响实验报告课程名称:生物化学实验(甲)指导老师:成绩:实验名称:酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度实验类型:分离鉴定实验同组学生姓名:一、实验目的和要求(必填)三、主要仪器设备(必填)五、实验数据记录和处理七、讨论、心得二、实验内容和原理(必填)四、操作方法和实验步骤六、实验结果与分析(必填)Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性一、实验目的和要求1.了解酶的专一性。

2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。

3.学会排除干扰因素,设计酶学实验。

二、实验基本原理酶是一种具有催化功能的蛋白质。

酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性,酶催化的反应(酶促反应)要比相应的没有催化剂的反应快103-1017倍。

酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性,即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用,对其他底物无催化反应。

根据各种酶对底物的选择程度不同,它们的专一性可以分为下列几种:1.相对专一性一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。

2.绝对专一性:有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物,而不作用于任何其他物质。

如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。

如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖,淀粉酶只作用于淀粉,而不作用于纤维素。

3.立体异构专一性有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种,而对另一种则全无作用。

如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。

本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。

采用benedict试剂检测反应产物。

benedict试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。

na2co3+2h2o2naoh+h2co3cuso4+2+na2so4还原糖(—choor—c=o)+2cu(oh)2cu2o(砖红色或黄色)+2h2与benedict试剂无呈色反应。

2021届苏高中生物竞赛实验辅导讲义-生物化学实验(基础)09酶的基本性质

2021届苏高中生物竞赛实验辅导讲义-生物化学实验(基础)09酶的基本性质

2021届高中生物竞赛实验辅导讲义生物化学实验(基础部分)实验九酶的基本性质一、目的酶是生物催化剂,是具有催化功能的蛋白质,生物体内的化学反应基本上都是在酶催化下进行的。

通过本实验了解酶催化的高效性、特异性以及pH、温度、抑制剂和激活剂对酶活力的影响,对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。

二、原理过氧化氢酶广泛分布于生物体内,能将代谢中产生的有害的H2O2分解成H2O 和O2,使H2O2不致在体内大量积累。

其催化效率比无机催化剂铁粉高10个数量级,反应速率可观察O2产生情况。

酶与一般催化剂最主要的区别之一是酶具有高度的特异(专一)性,即一种酶只能对一种或一类化合物起催化作用。

例如,淀粉酶和蔗糖酶虽然都催化糖昔键的水解,但是淀粉酶只对淀粉起作用,蔗糖酶只水解蔗糖。

还原糖产物可用本乃狄试剂鉴定。

通过比较淀粉酶在不同pH、不同温度以及有无抑制剂或激活剂时水解淀粉的差异,说明这些环境因素与酶活性的关系。

三、仪器、试剂和材料1.仪器(1)恒温水浴(37℃,70℃)、沸水浴(10℃)、冰浴(0℃)(2)试管18 ×180共19支(3)吸管lm l支、2ml 3支、5ml 5支(4)量筒100ml 1个(5)白瓷板(6)胶头滴管3支2.试剂(1)Fe粉(2)2%H2O2(用时现配)(3)唾液淀粉酶溶液:先用蒸馏水漱口,再含10ml左右蒸馏水,轻轻漱动,数分钟后吐出收集在烧杯中,用数层纱布或棉花过滤,即得清彻的唾液淀粉酶原液根据酶活高低稀释50~100倍,即为唾液淀粉酶溶液。

(4)蔗糖酶溶液:取1g鲜酵母或干酵母放入研钵中,加入少量石英砂和水研磨,加50ml蒸馏水,静置片刻,过滤即得。

(5)2%蔗糖溶液:用分析纯蔗糖新鲜配制。

(6)1%淀粉溶液:1g淀粉和0.3g NaCI,用5ml蒸馏水悬浮,慢慢倒入60ml煮沸的蒸馏水中,煮沸lmin,冷却至室温,加水到100ml,冰箱贮存。

(7)0.1%淀粉溶液:0.1g淀粉,以5ml水悬浮,慢慢倒入60ml煮沸的蒸馏水中,煮沸lmin,冷却至室温,加水到100ml,冰箱贮存。

影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇)

影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇)

影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇) 影响酶促反应速度的因素生化实验实验二影响酶促反应速度的因素【目的】观察温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。

【原理】唾液淀粉酶催化淀粉水解,生成一系列水解产物,即糊精、麦芽糖和葡萄糖等。

淀粉及其水解产物遇碘会呈现不同的颜色。

在不同温度,不同PH值下,唾液淀粉酶活性不同,催化淀粉水解程度不一,生成的产物也就不同。

此外,激活剂、抑制剂也能影响淀粉酶活性,影响淀粉的水解。

因此可根据在不同反应条件下,溶液加碘呈现的不同颜色来判断淀粉的水解程度,从而验证了温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。

淀粉I2 【操作】1. 温度对酶促反应速度的影响取3支试管,编号,按下表操作:2. PH对酶促反应速度的影响取3支试管,编号,按下表操作:3.激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响取4支试管,编号,按下表操作:【结果及分析】观察各管颜色变化,说明温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。

【实验注意事项】篇二:生化实验思考题参考答案生化实验讲义思考题参考答案实验一淀粉的提取和水解1、实验材料的选择依据是什么?答:生化实验的材料选择原则是含量高、来源丰富、制备工艺简单、成本低。

从科研工作的角度选材,还应当注意具体的情况,如植物的季节性、地理位置和生长环境等,动物材料要注意其年龄、性别、营养状况、遗传素质和生理状态等,微生物材料要注意菌种的代数和培养基成分的差异等。

2、材料的破碎方法有哪些?答:(1) 机械的方法:包括研磨法、组织捣碎法;(2) 物理法:包括冻融法、超声波处理法、压榨法、冷然交替法等;(3) 化学与生物化学方法:包括溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法等。

实验二总糖与还原糖的测定1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间接滴定?两种滴定方法各有何优缺点?答: 我们采用的是碱性铜试剂法中的间接法测定还原糖的含量。

间接法的优点是操作简便、反应条件温和,缺点是在生成单质碘和转移反应产物的过程中容易引入误差;直接法的优点是反应原理直观易懂,缺点是操作较复杂,条件剧烈,不易控制。

酶及其理化性质

酶及其理化性质

继续探究:
若2号试管中也出现砖红色沉淀,分析原因可 能有哪些? 1.蔗糖溶液放置时间过长
2.试管不干净 3.蔗糖本身不纯净
该实验中能将斐林试剂改为碘液吗? 不能
根据酶的专一性,催化蔗糖水解的酶应是哪一 种酶? 蔗糖酶 该实验若用唾液淀粉酶的话,第4步选择多少 温度保温比较合适? 37度左右
酶的多样性
因变量
变量:实验过程中可以变化的因素。
自变量:人为改变的变量。 因变量:随着自变量的变化而变化的变量。
除自变量以外,实验过程中可能还 无关变量: 会存在一些可变因素,对实验结果 造成影响.
对照实验:除了一个因素以外,其余因 素都保持不变的实验。
对照组: 实验设计原则:对照原则 单一变量原则 实验组:
酶的特性之三:作用条件温和
酶促反应一般是在常温、常压、适宜的PH等 温和条件下进行。 意义: 符合生物体存在的基本环境 除温度、PH外,酶促反应还与_________有关
酶的浓度、底物浓度
坐标图?
影响酶促反应速率的其它因素:
酶的浓度:反应速率随
酶浓度的升高而加快。
酶 促 反 应 速 率
酶的浓度
底物浓度:在一定浓度
酶在细胞代谢中的作用
酶在细胞代谢中的重要作用 ——催化作用
发酵与活细胞有关,是整 个细胞在起作用
引起发酵的是细胞中的某些物 质,这些物质只有在细胞死亡 并裂解后才发挥作用。
酵母细胞中的某些物质能够在酵母细胞破碎后继续 起作用,就像在或酵母细胞中一样。
酶是蛋白质
二 、酶的概念及特性:
酶的来源
酶(Enzyme)是活细胞产生的一 类具有生物催化作用的有机物.
温度对酶活性的影响:
高温使酶变性 失活,活性不能 使用加酶洗衣粉时用什么温度的水去污效果好? 恢复 ; 低温仅降 为什么发烧时食欲不振,体力不支,甚至死亡? 低酶活性,不失 活,当温度适宜 时活性可恢复.
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实验报告课程名称:生物化学实验(甲) 指导老师: 成绩:__________________ 同组学生姓名:一、实验目的和要求(必填)二、实验内容和原理(必填)三、实验材料与试剂(必填) 四、实验器材与仪器(必填)五、操作方法和实验步骤(必填) 六、实验数据记录和处理七、实验结果与分析(必填) 八、讨论、心得酶的基本性质实验A 、底物专一性一、实验目的和要求:1. 了解酶的专一性;2. 掌握验证酶的专一性的基本原理及方法;3. 学会排除干扰因素,设计酶学实验。

二、实验内容和原理:酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性,即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用,对其他底物无催化反应。

↗相对专一性专业:姓名: 学号: 日期: 地点:装订 线酶的专一性→绝对专一性↘立体异构专一性本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。

采用Benedict 试剂检测反应产物。

Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。

Na2CO3+ 2H2O →2NaOH + H2CO3CuSO4+ 2NaOH →Cu(OH)2+ Na2SO4还原糖(—CHO or —C=O)+ 2Cu(OH)2 →Cu2O↓ + 2H2O + 糖的氧化产物↓↓↓醛基酮基砖红色或红色在分子结构上,淀粉几乎没有,而蔗糖全无半缩醛基,它们均无还原性,因此它们与Benedict试剂无呈色反应。

淀粉被淀粉酶水解,产物为葡萄糖;蔗糖被蔗糖酶水解,其产物为果糖和葡萄糖,它们都为具有自由半缩醛羟基的还原糖,与Benedict试剂共热,即产生红棕色Cu2O沉淀。

本实验以此颜色反应观察淀粉酶、蔗糖酶对淀粉和蔗糖的水解作用。

三、实验材料与试剂:1、实验材料⑴蔗糖酶液(样品Ⅳ1:10稀释);⑵新鲜唾液(含唾液淀粉酶)。

2、实验试剂⑴蔗糖酶液(样品Ⅳ1:10稀释);⑵唾液淀粉酶液(唾液1:200稀释)⑶5%蔗糖(.)溶液;⑷ %淀粉溶液(含%NaCl ); ⑸ Benedict 试剂。

四、实验器材与仪器:1.漏斗;2.脱脂棉花;3.恒温水浴(37℃,100℃);4.量筒;5.试管及试管架;6.烧杯;7.吸量管。

五、操作方法和实验步骤:㈠ 检查试剂(二)淀粉专一性取三支试管,编号1,2,3 往1,2,3试管中分别加入蒸馏水、5%蔗糖溶液、%淀粉(%NaCl )溶往三支试管中各加入Benedict试剂2ml 将三支试管摇匀,置于沸水浴记录观察结果取三支试管,往1,2,3试管中分别加入蒸馏水、5%蔗糖溶液、%淀粉(%NaCl)溶往三支试管中各加将三支试管摇匀,置于沸水浴往1,2,3试管中各加摇匀,置于37℃水浴中(三)蔗糖酶的专一性六、实验结果与分析:(一)检查试剂:试剂处理试管编号123%淀粉(%NaCl )溶液(ml ) 3 5%蔗糖溶液 (ml ) 3 蒸馏水(ml )3Benedict 试剂 (ml )222摇匀,沸水浴2~3分钟记录观察结果记录观察结果 取三支试管,往1,2,3试管中分别加入蒸馏水、5%蔗糖溶液、%淀粉(%NaCl )溶往三支试管中各加将三支试管摇匀,置于沸水浴记录观察结果往1,2,3试管中各摇匀,置于37℃水浴中(二)淀粉酶专一性:(三)蔗糖酶专一性:七、讨论、心得:1、设计第一组实验的目的是为了检测是否存在干扰因素;第二组实验是为了验证淀粉酶的底物专一性;第三组实验是为了验证蔗糖酶的底物专一性。

2、三组实验中的蒸馏水都是作为对照用的。

3、淀粉溶液中%NaCl的作用是为了保证淀粉酶的活性,同时氯离子作为激活剂,可以增加酶的活性,使反应现象更加明显。

4、试管要洁净,所有试剂加量要准确,加好试剂后要摇匀。

使用试剂时不要人为造成试剂间的互相污染;试剂用好瓶盖要立即盖好,防止试剂间的互相污染。

以免实验结果的错误。

B、影响酶活性的因素——激活剂、抑制剂一、实验目的和要求:1. 了解激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响;2. 学习检定激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原理和方法。

二、实验内容和原理:激活剂:能使酶的活性增加的物质。

抑制剂:不引起酶蛋白变性,但能使酶分子上的某些必需基团(主要是指酶活性中心上的一些基团)发生变化,因而引起酶活力下降,甚至丧失,致使酶反应速度降低的 物质。

本实验利用淀粉被水解的不同阶段产物与碘有不同颜色反应,定性观察唾液淀粉酶在酶促反应中激活或抑制现象。

淀粉经酶促水解为葡萄糖的不同阶段的产物与碘作用的颜色反应如下:淀粉→→→紫色糊精→→→红色糊精→→→无色糊精→→→麦芽糖→→→葡萄糖显蓝色 显紫色 显红色 不显色 不显色 不显色↓ ↓ 还原性 还原性本实验中,氯离子为唾液淀粉酶的激活剂;铜离子为唾液淀粉酶的抑制剂。

利用淀粉被水解的不同阶段产物与碘有不同的呈色反应,定性观察唾液淀粉酶在酶促反应中激活和抑制现象。

淀粉 + 碘 → 蓝色淀粉 + 淀粉酶 Cl-或Cu2+ 水解产物 + 碘液 → 颜色变化 水解的程度是通过水解混合物遇碘溶液所呈现的颜色之变化来判断的。

三、实验材料与试剂:1、实验材料新鲜唾液(1:200稀释)2、实验试剂⑴ 唾液淀粉酶(自制) ⑵ % 淀粉溶液加 碘 加 碘 加碘加碘加碘加 碘⑶ % 氯化钠溶液 ⑷ % 硫酸铜溶液 ⑸ % 硫酸钠溶液 ⑹ 碘化钾-碘液四、实验器材与仪器:1.试管及试管架2.量筒3.漏斗4.脱脂棉花5.点滴板6.吸量管7.恒温水浴(37℃)五、操作方法和实验步骤:1号试管呈紫红色,2,3,4,5,6,7,8号试管均呈棕黄色,最终确定最佳反应时间为1 min 。

取八支试管,编号1,2,3,往八支试管中分别加入3ml %淀粉溶液、1ml 蒸馏水和混匀,分别置于37℃水浴中保温1,2,3,分别滴加记录观察结果取四支试管,编分别加入3ml %往1,2,3,4号试管中分别加入1ml 硫酸铜溶液、1ml 氯化钠溶液、1ml 硫酸六、实验结果与分析:试剂处理 试管编号1 2 3 4 %淀粉溶液 (ml ) 3 3 3 3 1%CuSO 4溶液 (ml ) 1 1%NaCl 溶液 (ml ) 1 1%Na 2SO 4溶液 (ml ) 1 蒸馏水 (ml ) 1 唾液淀粉酶溶液 (ml )1111混匀,37℃水浴1分钟KI-I 2溶液 (滴) 1 1 1 1 记录观察结果七、讨论、心得:1、本实验中,试管1是为了验证抑制剂对酶促反应速率的影响;试管2是为了验证激活剂对酶促反应速率的影响;试管3是为了排除氯离子和硫酸根离子的干扰;试管4是作为对照的。

2、抑制剂和变性剂是不同的。

抑制剂不引起酶蛋白变性,仅仅是降低其活性,除去后酶的活性恢复;而变性剂则会破环酶蛋白原有活性,使酶失去活性,是不可逆的。

3、试管要洁净,所有试剂加量要准确,加好试剂后要摇匀。

使用试剂时不要人为造成试剂间的互相污染;试剂用好瓶盖要立即盖好,防止试剂间的互相污染。

以免实验结果的错误。

分别加入1ml将各管混匀后,置于37℃水浴记录观察结果C、影响酶活性的因素——温度最适温度测定一、实验目的和要求:1. 了解温度对酶活力的影响;2. 学习测定最适温度的原理和方法。

二、实验内容和原理:酶的催化反应受温度影响很大,每一种酶所催化的反应,在一定条件下,仅在某一温度范围内表现出最大的活力,即反应速度最大时的温度,这个温度称为该酶促反应的最适温度,高于或低于最适温度时,反应速度逐渐下降。

因此,酶促反应与温度的关系,用酶活力对温度作图,通常具有钟罩形曲线特征。

实验①:利用唾液淀粉酶为试验对象,在0℃~65℃之间选择不同的温度,进行酶活力测定。

根据淀粉被唾液淀粉酶水解的程度的不同,遇碘呈现颜色的变化来判断酶活力的大小及最适温度。

实验②:采用蔗糖酶为试验对象,在室温至75℃之间选择不同温度进行酶活力测定。

蔗糖酶的活力常以其反应产物还原糖(葡萄糖)的生成量来表示。

本实验选择3,5–二硝基水扬酸法测定还原糖量。

在碱性条件下,3,5–二硝基水杨酸与还原糖溶液共热后被还原成红色氨基化合物,并在一定浓度范围内,还原糖的量与反应溶液所呈棕红色物质颜色的深浅程度成正比。

因此,可以用分光光度法测定酶促反应后生成的还原糖量,从而测定蔗糖水解的速度和酶活力。

三、实验材料与试剂:1、实验材料⑴蔗糖酶液(样品Ⅳ1:10稀释);⑵新鲜唾液(1:200稀释)。

2、实验试剂⑴L醋酸缓冲液()⑵5%蔗糖(.)溶液(W/V)⑶3,5—二硝基水扬酸(简称DNS)试剂⑷%淀粉溶液(含%NaCl)⑸IK-I2溶液四、实验器材与仪器:1. 试管及试管架;2.恒温水浴(37℃、50℃、65℃、75℃、100℃);3.吸量管;4.滴管;5.点滴板;6.分光光度计;7.制冰机。

五、操作方法和实验步骤:一、温度对唾液淀粉酶活力的影响1.观察温度对酶活动的影响:取五支试管,编号1,分别滴加2ml %淀粉将1,2,3,4,5号试管分别置于冰中、室温、37℃水浴、50℃水浴、分别加入经过预温的淀混匀,分别置于各相分别滴加记录观察结果2、绘制温度-酶活力曲线图,以反应温度为横坐标,反应液颜色的深浅程度(代表酶活力的大小)为纵坐标。

绘制温度——酶活力曲线(钟罩形),确定唾液淀粉酶的最适温度。

二、温度对蔗糖酶活力的影响1、蔗糖酶最适温度的测定蔗糖酶液(样品IV)稀释10倍,备用。

2、绘制温度——酶的活力曲线图七、实验结果与分析:一、温度对唾液淀粉酶活力的影响:1.观察温度对酶活动的影响:试剂处理试管编号12345取六支试管,编号0,1,2,分别加入1ml L醋酸缓冲液、5%蔗糖溶液0、1号试管置于室温中,2、3、4、5号试管分别置于37℃、50℃、65℃、0号试管中加入ml蒸馏水,1~5号管分别加入蔗糖酶液。

水和蔗糖酶液均分别置于相应温度环境中保分别加入1ml DNS混匀,置于沸分别加入5ml蒸馏水测定在520nm2.温度-酶活力曲线图:二、温度对蔗糖酶活力的影响:1、蔗糖酶最适温度的测定:2、绘制温度——酶的活力曲线图:八、讨论、心得:1、在把底物与酶混合前要先分别对两者进行预温,使得酶促反应一开始时两者就处在同一温度环境中;2、在温度对蔗糖酶活力影响实验中,在75℃环境中的反应液光吸收值比在65℃环境中要高,这可能是测定时没有充分摇匀的缘故,也有可能是温度过高,蔗糖酶几乎完全变性沉淀下来有关;3、试管要洁净,所有试剂加量要准确,加好试剂后要摇匀。

使用试剂时不要人为造成试剂间的互相污染;试剂用好瓶盖要立即盖好,防止试剂间的互相污染。

以免实验结果的错误。

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