甘草有效成分的提取分离实验方案
甘草有效成分的提取分离实验方案
甘草有效成分的提取分离实验方案实验目的：通过对甘草中甘草黄酮、甘草酸和甘草多糖的提取分离，进一步理解他们的理化性质，并且初步掌握提取分离的方法。
实验原理：黄酮类化合物则泛指两个苯环（A环与B环）通过中央三碳相互联接而成的一系列化合物。
根据中央三碳的氧化程度、是否成环、B 环的联接位点等特点，可将该类化合物分为多种结构类型。
代表化合物有甘草黄酮、甘草素、异甘草素、甘草甙、异甘草甙、甘草查尔酮等。
甘草中已经发现的黄酮类化合物有一百多种，本实验只对其进行粗提，并且测定其总含量。
甘草酸是一类三萜类皂苷，主要以甘草酸钾、钙盐的形式存在，是甘草次酸的二葡萄糖醛酸甙，含量在4-20%之间；甘草酸水解脱去糖酸链变形成了甘草次酸。
超临界CO2萃取甘草总黄酮的萃取率是1. 35%，含量32. 45%，是索氏提取法提取甘草总黄酮的提取率的2.2倍，索氏提取溶剂用量是超临界CO2萃取的6倍。
本实验采取超临界CO2萃取法提取甘草黄酮。
【1】大孔树脂适于物质水溶液的分离纯化，超临界C02萃取提取的甘草总黄酮中乙醇含量过高，即使对萃取液进行浓缩处理，其中乙醇的含量仍然很高，所以大孔树脂的吸附、解吸附的效果不好。
萃取液浓缩近干加入水后，所要分离的物质析出变混浊，也不适合用大孔树脂进行分离纯化。
与大孔树脂层析比较，硅胶柱层析可以更有效的分离纯化甘草黄酮。
使用硅胶柱层析可以有效地使甘草黄酮类物质的含量达到55%以上，收率1. 12%，符合国家中药二类新药的原料要求。
【1】综合考虑，本实验选择硅胶柱层析对甘草黄酮进行分离纯化。
甘草酸和甘草次酸的极性比黄酮类物质的极性大，更易溶于极性大的低浓度乙醇中，采用85%乙醇作为夹带剂，使得在二氧化碳超临界萃取甘草黄酮类物质过程中，大部分甘草酸和甘草多糖仍然留在残渣中。
鉴于甘草酸和甘草多糖都溶于水的性质，本实验采用超声或微波辅助法对它们同时进行提取[3]。
对于提取后的甘草酸和甘草多糖的分离，可查阅到的方法包括醇沉酸沉法[3]。
甘草中有效成分的分离提取
甘草中有效成分的分离提取摘要：甘草具有多种药用功效，自古以来就是一味重要的药材。
本文简要探讨对甘草中有效成分的分离提取方法，以期为甘草的研究与应用提供参考依据。
关键词：甘草有效成分分离与提取一、甘草简介甘草属于豆科多年生草本植物。
作为我国传统药材之一，甘草具有多种药用功效，如补脾益气、清热解毒、祛痰咳喘、调和百药等作用。
甘草中含有多种化学成分，其中，有效成分为三萜皂苷类化合物（甘草酸、甘草次酸）、黄酮类化合物（甘草苷、异甘草苷）、甘草多糖等。
据有关研究显示，目前人们已从甘草中成功分离出多种有效成分，仅黄酮类化合物就超过100多种[1]。
因此，随着甘草有效成分的价值日益被人们所认识，甘草有效成分的提取、纯化技术也成为当前研究的一个热点。
二、甘草中的有效成分1.甘草甜素甘草甜素的主要成分是甘草酸，因此它又被称为甘草酸。
它的甜度是蔗糖的2～3百倍。
它具有多种功效：抗病毒作用、抗肿瘤作用、免疫调节功能、解毒作用、糖类皮质激素作用、清除氧自由基等。
2.甘草次酸甘草次酸在常温条件下为白色针状结晶，具有消炎、抗溃疡、抗过敏、镇咳、平喘、祛痰、降低血脂等功效；同时，它还具有保肝、抑制肝癌的作用。
3.甘草黄酮甘草具有的抗氧化功能主要是甘草黄酮发挥的作用，它在甘草中占27%左右。
4.甘草多糖它是将甘草提纯后获得的一种α-D-吡喃多糖，属于生物活性多糖，对肿瘤有一定的抑制效果。
三、甘草有效成分的提取方法1.甘草酸的提取方法1.1溶剂提取法指利用中草药中不同成分在溶剂中的溶解性质，把有效成分从药材中溶解出来的方法。
根据溶剂的不同，分为两种方法，水提法与有机溶剂提取法。
1.2超声提取法根据超声波的空化作用、热效应及机械作用等提高物质分子运动的频率及速度，并强化溶剂穿透力，使目标成分浸出率提高。
具体做法如下：容器的外壁连接换能器振子或用密封的不锈钢盒子放置振子，再放进容器内。
启动超声波发生器，振子向提取溶媒中发出超声波，在超声波的作用下甘草的细胞壁被破坏，从而使有效成分溶解到提取溶媒中。
甘草鲜药材加工方案
甘草鲜药材加工方案一、试验报告1.试验目的1.1通过甘草出膏率、提取物含量两个质量指标对比甘草鲜药材不同加工方法的质量差异，找到影响甘草提取物含量转移率的最佳加工方法，提高甘草提取物含量转移率。
从而确定一条合理的生产工艺。
2.1通过对不同干燥程度甘草的前处理、提取、浓缩等过程分别检验其含量（甘草苷和甘草酸），确定甘草最佳干燥程度。
2.试验背景目前，我公司生产甘草时甘草提取物含量转移率偏低，为保证产品质量对甘草工艺进行再研究，通过对甘草鲜药材不同加工方法的质量差异考察，找到影响甘草提取物含量转移率的主要因素，提高甘草提取物含量转移率。
3. 实验方法3.1原药材切制及提取的考察3.1.1 取某批号的甘草鲜药材800g，将鲜药材用水冲洗干净后，切成约0.2-0.5cm的厚片，切制后饮片铺成2-3cm进行晾晒，每天上午8点到下午4点每隔一小时翻晒一次，其中每天上午8点和下午4点必须翻晒一次，取样检测，大约晒至五成干、八成干、完全燥时，分别备用。
3.1.2 另取与3.1.1同一批号的药材800g，置于通风良好且阳光充足的空间晾晒，至测定含水量约50%、20%、0%左右，再切成约0.2-0.5cm的厚片，分别备用。
表1原药材处理方法批次原药材重量（g）干燥程度（水分%）处理方式切制规格（cm）样品重量（g/份）样品份数200 100 先切再晒0.2-0.550 120050 先切再晒0.2-0.550120020 先切再晒0.2-0.550 12000 先切再晒0.2-0.550 1200 100 先晒再切0.2-0.5 50 1200 80 先晒再切0.2-0.5 50 1200 50 先晒再切0.2-0.5 50 1200 0 先晒再切0.2-0.5 50 13.1.3 将两份饮片分别加热煎煮两次，第一次加投料量10倍的水，加热煎煮2小时；第二次加投料量8倍的水，加热煎煮1.5小时，煎液滤过。
趁热用350目筛过滤，合并滤液。
实验七 甘草中甘草酸的提取分离
实验七甘草中甘草酸的提取分离
【实验目的】
1、学会运用煎煮法、渗漉法、回流法等方法从甘草中提取、分离干甘草酸
【实验原理】
甘草酸以钾盐的形式存在于植物体内，易溶于热水，因此可用水提取甘草酸钾盐，水提液加硫酸酸化后生成游离甘草酸，因其在冷水中的溶解度较小而沉淀析出。
也可以用乙醇渗漉后再酸化得到甘草总皂苷沉淀，将沉淀溶解于盐酸的甲醇溶液中，用三氯甲烷除去黄酮类化合物，即可得甘草皂苷。
【实验材料】
设备: 电炉、托盘天平、量筒、玻璃棒、纱布、滴管、抽滤装置、圆底烧瓶、冷凝管、水浴锅、烧杯、锥形瓶、渗漉筒
药品: 甘草粗粉、蒸馏水、硫酸、氢氧化钾、乙醇、甲醇、盐酸、三氯甲烷
【实验步骤】
1、甘草酸（粗品）的提取
（1）水提法：取甘草粗粉100g，加水煎煮提取2-3次，滤过得水提液，静置，取上清液，浓缩得甘草浸膏（含甘草酸>20%）。
浸膏加3倍量水溶解，加硫酸酸化，放置，滤过得甘草酸粗品。
（2）醇提法：取甘草粗粉100g，加10%乙醇渗漉，收集渗漉液酸化，放置过夜，滤过得沉淀（甘草总皂苷）。
总皂苷用7%盐酸的甲醇，回流4~6小时，滤取甲醇液，冷却，放置后滤取沉淀，溶于三滤甲烷，用5%KOH萃取除去黄酮类，再用蒸馏水洗去碱性，所得沉淀用80%乙醇重结晶，滤过得甘草酸白色针状结晶。
【注意事项】
1、提取甘草酸粗品时，水提液酸化后析出的沉淀，杂质较多难以过滤，故可倾出上清液再抽滤。
【实验装置图】【实验结论】【实验注意】。
甘草提取黄铜实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本实验旨在学习甘草中黄酮类化合物的提取方法，通过溶剂提取、分离纯化等步骤，获得甘草黄酮粗品，并对其理化性质进行初步分析。
二、实验原理甘草中含有丰富的黄酮类化合物，具有多种生物活性。
本实验采用溶剂提取法，利用有机溶剂（如甲醇、乙醇等）提取甘草中的黄酮类化合物，再通过有机溶剂萃取、浓缩等步骤进行分离纯化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：甘草粉末（市售）甲醇（分析纯）乙醇（分析纯）氯仿（分析纯）碳酸氢钠（分析纯）石英砂烧杯蒸馏装置漏斗滤纸烧瓶恒温水浴锅紫外-可见分光光度计2. 实验仪器：上述实验材料所列仪器四、实验步骤1. 甘草粉末的制备：将甘草粉末过筛，取40目筛的粉末备用。
2. 甘草黄酮的提取：（1）取10g甘草粉末，加入100mL甲醇，在恒温水浴锅中回流提取2小时。
（2）提取液过滤，滤液浓缩至约10mL。
3. 甘草黄酮的分离纯化：（1）将浓缩液转移至分液漏斗中，加入等体积的氯仿，充分振荡，静置分层。
（2）分取氯仿层，加入5g碳酸氢钠，充分振荡，静置分层。
（3）分取水层，用氯仿萃取2次，合并氯仿层。
（4）将氯仿层浓缩至约1mL，加入适量乙醇，溶解，转移至50mL容量瓶中，用乙醇定容。
4. 甘草黄酮的鉴定：（1）取适量甘草黄酮溶液，在紫外-可见分光光度计上测定其吸收光谱。
（2）与标准黄酮溶液进行比较，确定甘草黄酮的吸收峰。
五、实验结果与分析1. 甘草黄酮的提取率：根据实验结果，甘草黄酮的提取率为1.5%。
2. 甘草黄酮的理化性质：（1）甘草黄酮的吸收光谱：在紫外-可见分光光度计上，甘草黄酮的吸收峰位于278nm和355nm。
（2）甘草黄酮的性状：甘草黄酮为黄色粉末，无臭，味苦。
六、实验讨论本实验采用溶剂提取法提取甘草黄酮，操作简便，提取率较高。
通过有机溶剂萃取、浓缩等步骤，可获得较纯的甘草黄酮粗品。
实验结果表明，甘草黄酮具有良好的理化性质，具有进一步研究开发的潜力。
七、实验总结本实验成功地从甘草中提取了黄酮类化合物，并对甘草黄酮的理化性质进行了初步分析。
甘草中甘草酸提取与分离的研究
内 蒙古 石 油化 工
１
甘 草 中甘 草 酸 提 取 与分 离 的 研 究
李赞 忠 ， 子 荣 ， 乔 乌 云
（ 内蒙古化工职业学院 ， 内蒙 古 呼和 浩特 ００１） １ ０ ０
摘
要 ： 草 是我 国传 统 的 中药 ， 甘 来源于 豆科植 物甘 草 （ ｙ ｙｒ ｉ ｒｌｎ ｉ Ｆｓｈ 、 果甘 草 （ Ｇｌｃ ｒｈｚ ｕａｅ ｓ ｉ ） 胀 ａ ｓ ｃ Ｇ．
（） １ 粉碎 ： 将挑 选 除杂后 干净 干燥 的甘 草放入 粉
碎 机 中粉碎 ， １ 过 Ｏ目筛 选 ， 得甘 草粉 试样 。 制
（） ２ 提取 ： 称取 ２ ０ ０ ｇ甘 草粉 试样 ， 滤纸 包好 放 用 入 索 氏 提 取 管 中 ， １ ０ ｍＬ 圆 底 烧 瓶 中 ， 入 在 ５０ 加
草酸 （ｌｃｒｈｚ ｃ ＧＡ） ｇｙｙｒｉｃａｉ ｉ ｄ， 又名甘 草 甜 素 ， 是甘 草 中分 离 出的一种 三 萜 类化 合 物［ ， ３ 也是 最 重 要 的有效 Ｊ
成分 之一 。本 文对 甘 草 中甘 草酸 及 其他 成分 的提取 分 离方 法进行 了摸 索和改进 ， 得 了较 好 的效 果 。 取 关键 词 ： 草 ； 甘 甘草 酸 ； 提取 ； 离 分 中图分 类号 ： ８ ． Ｒ２ ４ ２ 文献 标识 码 ： Ａ 文章 编号 ：Ｏ ６ ７ ８ （ ０ ０ ２ ～ Ｏ ０ — ０ １Ｏ — ９１ ２ １）４ ｏ１ ３
ｉｆ ｔ ａ． 或光 果甘 草 （ ｇａ ｒ ． 的干燥 根 和根 茎［ 。具 有 多种 药 用功 效 ， ｎｌ ａＢ ｔ ） ａ Ｇ． ｌｂ ａＬ ） １ ］ 主要 生长 在 我 国西 北、 华北 、 东北 等三北 地 区［ 近 年 来在 内 蒙古 自治 区西部人 工 栽培甘 草 已获成 功 ， 草 资源极 为丰 富［ 。 。 甘 引 甘
甘草酸的提取、分离和纯化
甘草酸的提取、分离及纯化实验甘草酸的性质及用途甘草为豆科植物的根，主要产于我国内蒙古、山西、甘肃、宁夏、新疆等地。
甘草味甘，故又名甜草、蜜草。
其主要化学成分有四类：三萜类、黄酮类、生物碱类及多糖类。
其中三萜类成分有甘草酸、羟基甘草次酸等。
甘草酸又称甘草皂苷、甘草甜素。
白色结晶，可用冰醋酸结晶，有很强的甜味。
分子式为C42H62O16，分子量为822.90。
纯品为白色、无臭的结晶性粉末，熔点212～217℃，易溶于热水及热的稀乙醇，几乎不溶于无水乙醇或乙醚。
甘草酸在植物中常以钙、钾、铵盐等形式存在。
从甘草根为原料制得的甘草浸膏中提取的铵盐，其甜度为蔗糖的50～100倍，精制甘草酸钠、钾盐的甜度为蔗糖的200～300倍，是一种天然的甜味剂。
甘草素入口后不能立刻感觉到甜味，而是逐渐才有感觉，并且一直延续很长时间还留有余味，因此甘草素与砂糖、葡萄糖等糖类复配，可以得到口感良好的甜味。
因为它是非糖类、高甜度的甜味剂，因此没有褐变、吸湿及发酵等缺点。
甘草素在医药上还可用作消化道溃疡治疗剂、解毒剂、消炎剂以及降血脂、抗动脉粥样硬化、降胆固醇等。
目前，甘草素已广泛用于食品、医药、化妆品、饮料、卷烟等行业。
我国甘草资源丰富，带皮甘草中含甘草酸7%～10%，去皮甘草中约5.5%～9.0%。
甘草经溶剂浸取，可以制得甘草浸膏，再进一步加工可以制得甘草酸。
1 实验目的1.掌握甘草酸的提取原理和方法。
2.掌握甘草酸的分离纯化方法。
2 实验原理甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂提取。
提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。
3实验材料、仪器和试剂实验材料：甘草实验仪器：电子分析天平（精确至0.001g）、移液管、紫外分光光度计、超声波清洗器、抽滤装置、水浴锅、旋转蒸发仪、容量瓶（10mL、25mL、100mL）试剂：70 ％的乙醇溶液、蒸馏水、硫酸（3.5mol/L）、浓氨水、25 ％氨水、冰醋酸、80%甲醇质量分数为70 ％的乙醇溶液（100 mL）：用量筒量取75 mL 无水乙醇，25 mL 二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为10 ％的乙醇溶液（100 mL）：用量筒量取12．5 mL 无水乙醇，87．5 mL 二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为0．5 ％的氨水溶液（100 mL）：用量筒量取2 mL 25 ％氨水，98 mL 二次重蒸馏水于烧杯中，混匀；质量分数为0．5 ％的氨性醇溶液（100 mL 以无水乙醇为溶剂）：用量筒量取98．5 mL 无水乙醇，1．5 mL25 ％氨水于烧杯中，混匀。
论甘草药用价值及其提取分离方法
论甘草药用价值及其提取分离方法发布时间：2021-09-25T00:38:08.915Z 来源：《探索科学》2021年8月下16期作者：林丽[导读] 甘草作为我国中医临床治疗中的一种常用药物，其中的甘草黄酮、甘草酸、甘草次酸等几类化合物都是其中的重要组成部分，并且在抗氧化、抗病毒等方面发挥着十分重要的作用。
本文针对甘草有效成分的医疗价值做出了深刻的分析，随后就常见的有效成分提取分离方法进行了研究。
广州市康伦生物技术有限公司 3708021973102****0 林丽广州 510320摘要: 甘草作为我国中医临床治疗中的一种常用药物，其中的甘草黄酮、甘草酸、甘草次酸等几类化合物都是其中的重要组成部分，并且在抗氧化、抗病毒等方面发挥着十分重要的作用。
本文针对甘草有效成分的医疗价值做出了深刻的分析，随后就常见的有效成分提取分离方法进行了研究。
关键词:甘草；有效成分；提取分离方法1、甘草中有效成分的实际药用价值1.1甘草黄酮成分甘草黄酮作为甘草内所含有的一类重要化合物，在抗肿瘤方面具备着十分优异的疗效。
在实际的临床治疗过程中，甘草黄酮这类化合物质能够更好地抑制肿瘤细胞的增殖，对其生长产生一定的阻碍，并对肿瘤组织内部调控细胞凋亡的蛋白表达给出合理的影响，以此来达成诱导肿瘤细胞逐渐凋亡的治疗目的。
黄酮类物质的抗氧化作用是其能够对抗肿瘤生长的重要因素，因为自由基可以引发脂质的过氧化反应，又能够和蛋白质、核酸等物质进行作用，从而引发DNA链的断裂以及碱基改变，从而带来基因突变导致癌症的发生[1]。
甘草黄酮类物质能够在清除多种类型自由基的前提下，对脂质过氧化反应做出有效的抑制，发挥其抗肿瘤的临床治疗作用。
除此之外，甘草内所含有的异甘草素作为黄酮类物质的一种，能够在对L型钙电流通道以及电压依赖性钾电流通道做出有效阻滞，做到在L型钙电流峰值及电压依赖性有效抑制的同时，对整流K+电流进行延迟，以此对心律失常的潜伏期进行有效延长，缩短心律失常现象出现、持续的时间，具备较为显著的抵抗心律失常的医疗作用。
甘草有效成分的分离与纯化的研究进展[文献综述]
![甘草有效成分的分离与纯化的研究进展[文献综述]](https://img.taocdn.com/s3/m/9ea5a8b8910ef12d2af9e76b.png)
毕业论文文献综述生物工程甘草有效成分的分离与纯化的研究进展1 前言甘草是临床最常应用的药品。
生甘草能清热解毒，润肺止咳，调和诸药性；炙甘草能补脾益气，临床用量特大，出口量大。
除药用之外，食品上也大量用甘草做糕点添加剂，它的甜度是蔗糖的百倍。
甘草的主要有效成分为甘草酸(glycyrrhizic acid)或甘草甜素(glycyrrhizin)及甘草次酸(gly-cyrrhetinic acid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等[1-2]。
研究表明[3]，甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用，还用于防治病毒性肝炎、癌症以及艾滋病等。
我国甘草资源丰富，具体分布情况如下表1.1[4-5]表1-1中国甘草资源的分布情况乌拉尔甘草新疆、甘肃、青海、陕两、宁夏、内蒙占、河北、山西、山东、辽宁、黑龙江, 光果甘草新疆和青海胀果甘草新疆刺果甘草黑龙江、辽宁、内蒙古、河北、山东、江苏、河南、陕西粗毛甘草仅分布在新疆的东部和北部黄甘草甘肃云南甘草云南、四川等高寒地区侧果甘草新疆甘草的主要有效成分为草酸(glycyrrhizic acid)或甘草甜素(glycyrrhizin)及甘草次酸(gly-cyrrhetinic acid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等。
此外，国内外对甘草及其制剂药理与临床应用方面也进行了研究。
本文就甘草的有效成分的分离及纯化，药理作用等方面的最新研究加以概述。
2 甘草的化学成分概述2.1 地上部分化学成分研究2.1.1 黄酮类成分有研究证明，已发现了160多种甘草黄酮类化合物，药用作用优于甘草甜素[6]，从云南甘草中已分离出12种化合物，刺果甘草中分离得42种化合物用。
2.1.2 其它化学成分1989年日本Toshio从黑龙江产乌拉尔甘草的地上部分分离得到1个香豆素类成分，后来又分离到5个其他酚类衍生物。
贾世山等从内蒙古自治区西部地区产乌拉尔甘草叶分离到1个酚酸甙类成分。
甘草中甘草酸的提取纯化以及多糖的提取
生化实验报告设计性实验甘草中甘草酸的提取纯化以及多糖的提取一.实验目的（一）掌握甘草酸的提取原理和方法。
（二）熟悉皂甙的性质和测定方法。
（三）掌握甘草酸的分离纯化方法。
（四）掌握多糖类物质的提取方法。
二.实验原理（一）甘草酸提取原理中药甘草，属豆科植物，生长于草原向阳干燥钙质土地以及河岸沙质地土壤中，富含甘草皂苷，又称甘草酸，特点是高甜度、低热能、安全无毒，起泡性和溶血作用很低。
具有增溶、增加药物稳定性、提高生物利用度及降低毒副作用的功效。
甘草酸的许多金属盐，人体可适当吸收，不易造成元素的积蓄中毒。
因此常被用来配制成健脾开胃、止咳化痰、顺气止喘、治疗慢性肝炎、降低血脂的良药。
同时还具有抗癌防癌、干扰素诱生剂及细胞免疫调节剂等功能。
甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂提取，提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。
（二）甘草酸的纯化原理提取的甘草酸溶液中，还含有大量的蛋白质、果胶、鞣质等物质，在提取过程中，这些杂质也转移到了提取液中。
由于这些物质的大量存在，使得产物的含量降低，试验误差加大，同时甘草酸作为药物和保健品等使用时，杂质还会引起一些副作用，因此必须将这些杂质除去，对甘草酸进行纯化。
提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。
（三）残渣中甘草多糖的提取分离原理甘草在中医处方中占有举足轻重的地位，被医药界誉为“众药之王”。
甘草的主要有效成分是甘草酸、黄酮和多糖类化合物，但目前多糖还没有被有效利用。
甘草多糖具有抗肿瘤、免疫调节作用、抗辐射、抗病毒、抗溃疡、降血糖、抗衰老和免疫调节等作用，因此对多糖的研究越来越受到人们的重视。
本实验以提取甘草酸后的甘草渣为原料提取多糖，这对甘草资源的综合利用和多糖的开发均具有特别重要的意义。
甘草多糖为易溶于水的白色粉末，熔点很高，不溶于酒精等有机溶剂，故可用水提醇沉法得到甘草多糖。
三.实验器材（一）仪器、用具:剪枝剪、粉碎机、烘箱、微波炉、电子天平、抽滤机、分光光度计、真空干燥箱、XAD9 型树脂、旋转蒸发仪、柱层析系统（层析柱，恒流泵，紫外监测仪，部分收集器）（二）试剂：甘草、极性溶剂、硫酸、苯酚、95%乙醇、葡萄糖标准品、70%乙醇、甘草酸标准品。
残渣中甘草多糖的提取分离
甘草酸的提取和测定一．实验目的：1掌握干草的提取原理2熟悉皂甙的性质和测定方法二实验原理甘草酸是由甘草中提取。
甘草，又名美草、蜜甘、甜根子，多生长在我国西北、华北、东北地区，为多年生草本植物。
甘草酸作为其主要成分，随产地不同含量亦不同，一般在(4～14)％之内。
甘草酸是甘草甜味的有效成分，又名甘草甜素、甘草皂甙。
分子式42H62O16，相对分子质量822.92。
甘草酸为白色或淡黄色结晶型粉末，熔点220 ℃，有特殊甜味，其甜度约为蔗糖的250倍，溶于热水和热的稀乙醇，不溶于无水乙醇和乙醚。
甘草酸遇酸则沉淀，常利用此性质进行提取和精制。
为了使用方便，一般都把甘草酸制成水溶性的盐类，如甘草酸钠、甘草酸二钠、甘草酸三钠、甘草酸铵等。
方法：甘草酸在原料中以钾盐和钙盐的形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂溶解，提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离的甘草酸。
三．实验步骤甘草酸的制备（1）粉碎：将干净干燥的甘草放入粉碎机中粉碎，过10目筛选，制得甘草粉。
（2）提取：称取一定质量的甘草粉放入反应器中，加入其5倍质量的水，在搅拌下于85 ℃以上加热回流2．5 h，过滤、滤渣再加3倍质量的水重复提取一次，合并泸液。
（3）浓缩：将甘草酸提取液用薄膜蒸发器进行真空浓缩，当滤液体积减少4／5时，趁热过滤。
（4）分离：在已经冷却的浓缩滤液中，加入其1／2容量的95%的乙醇，然后静止过夜，经过滤除去植物蛋白、多糖等沉淀物。
（5）沉淀：在经上述处理的甘草酸浓缩液中，用浓硫酸调其PH值，使甘草酸沉淀析出，然后进行离心分离，得粗甘草酸。
（6）重结晶：用(60～70) ℃的稀乙醇进行重结晶，减压过滤后得甘草酸湿品。
（7）干燥：将湿甘草酸放入真空干燥箱内，调节真空度，在(70～80) ℃温度下加热(40～60) min，即得干甘草酸。
（8）成品：将干燥的甘草酸粉碎，过筛，即得甘草酸成品。
甘草酸的定性和定量测定1 甘草酸的定性鉴别取样品4 mg，置白磁板上，加4%硫酸7滴，渐渐变成橙黄色至橙红色。
甘草提取实验报告
实验目的：1. 学习甘草的提取方法。
2. 掌握提取过程中各因素的影响。
3. 分析提取效率及提取物的质量。
实验时间：2023年X月X日实验地点：实验室实验材料：1. 甘草药材：干燥甘草片，净重100g。
2. 乙醇：分析纯，95%。
3. 水浴锅。
4. 烧杯、漏斗、滤纸、容量瓶、移液管、玻璃棒等。
实验方法：1. 称取甘草药材100g，加入适量乙醇，浸泡过夜。
2. 第2天，将浸泡好的甘草药材与乙醇混合物倒入烧杯中，加热回流提取2小时。
3. 提取结束后，将混合物过滤，得到滤液。
4. 将滤液置于水浴锅中，减压浓缩至约10ml。
5. 将浓缩后的溶液转移至容量瓶中，用乙醇定容至100ml。
6. 取一定量的提取液，用分光光度法测定其总黄酮含量。
7. 分析提取效率及提取物的质量。
实验步骤：1. 称取甘草药材100g，置于烧杯中。
2. 加入适量乙醇，浸泡过夜。
3. 将浸泡好的甘草药材与乙醇混合物倒入烧杯中，加热回流提取2小时。
4. 提取结束后，将混合物过滤，得到滤液。
5. 将滤液置于水浴锅中，减压浓缩至约10ml。
6. 将浓缩后的溶液转移至容量瓶中，用乙醇定容至100ml。
7. 取1ml提取液，加入一定量的显色剂，混匀后静置10分钟。
8. 在510nm波长下，测定提取液吸光度。
9. 根据标准曲线计算提取液中的总黄酮含量。
实验结果：1. 甘草提取物的总黄酮含量为1.23mg/ml。
2. 提取过程中，乙醇浓度、提取时间、温度等因素对提取效率有显著影响。
实验分析：1. 本实验采用乙醇回流提取法，提取效率较高，总黄酮含量为1.23mg/ml，符合实验要求。
2. 在提取过程中，乙醇浓度、提取时间、温度等因素对提取效率有显著影响。
乙醇浓度越高，提取效率越高；提取时间越长，提取效率越高；温度越高，提取效率越高。
3. 在实验过程中，发现部分甘草药材中存在杂质，影响了提取物的质量。
为提高提取物质量，可考虑采用更严格的药材筛选方法。
实验结论：1. 本实验采用乙醇回流提取法提取甘草总黄酮，提取效率较高，符合实验要求。
甘草酸的提取实验报告
甘草酸的提取实验报告一、实验目的本实验旨在探索从甘草中提取甘草酸的有效方法，并对提取过程中的关键因素进行研究和优化，以提高甘草酸的提取率和纯度。
二、实验原理甘草酸是甘草中的主要活性成分，具有多种药理作用。
甘草酸在水中溶解度较低，但在碱性溶液中溶解度增加。
通过将甘草粉末与碱性溶液混合，加热搅拌，使甘草酸溶解出来，然后用酸调节溶液 pH 值，使甘草酸沉淀析出，从而实现甘草酸的提取。
三、实验材料与仪器1、实验材料甘草：干燥的甘草根，购自当地药材市场。
氢氧化钠（NaOH）：分析纯。
盐酸（HCl）：分析纯。
乙醇：分析纯。
2、实验仪器电子天平：精度 0001g。
恒温水浴锅。
电动搅拌器。
真空抽滤装置。
旋转蒸发仪。
紫外分光光度计。
四、实验步骤1、甘草粉末的制备将干燥的甘草根用粉碎机粉碎，过40 目筛，得到甘草粉末，备用。
2、甘草酸的提取称取 50g 甘草粉末，放入 500ml 三口烧瓶中，加入 200ml 05mol/L的氢氧化钠溶液，在 80℃恒温水浴锅中加热搅拌 2h。
3、过滤提取结束后，将反应液冷却至室温，用真空抽滤装置过滤，收集滤液。
4、酸沉向滤液中缓慢滴加盐酸，调节 pH 值至 2-3，此时有大量白色沉淀生成。
静置 2h，使沉淀完全。
5、过滤与洗涤再次用真空抽滤装置过滤，收集沉淀。
用去离子水洗涤沉淀 3 次，以去除杂质。
6、干燥将沉淀放入干燥箱中，在 60℃下干燥至恒重，得到甘草酸粗品。
7、纯化将甘草酸粗品用适量乙醇溶解，然后通过旋转蒸发仪浓缩去除乙醇，得到纯化后的甘草酸。
五、实验结果与分析1、提取率的计算提取率＝（提取得到的甘草酸质量／甘草粉末质量）× 100%经过实验，本次提取得到的甘草酸质量为_____g，甘草粉末质量为50g，计算得出提取率为_____%。
2、纯度的测定采用紫外分光光度计测定甘草酸的纯度。
以标准甘草酸溶液绘制标准曲线，然后测定提取得到的甘草酸溶液的吸光度，根据标准曲线计算出甘草酸的纯度。
甘草中甘草酸的提取实验报告
甘草中甘草酸的提取实验报告
实验目的：了解分离纯化技术的应用，掌握无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作。
实验原理：甘草又名甘草根，是一种广泛使用的中草药。
其主要成分是甘草酸、甘草素、甘草皂苷等。
甘草酸是甘草的主要有效成分，具有降糖、抗氧化、抗肝损伤等多种药理作用。
该实验是利用无机酸法将甘草酸从甘草中提取出来。
实验步骤：
1.样品制备：取适量甘草，去除杂质后切碎成小片备用。
2.提取：将切碎的甘草用石英研钵研成粉末，加入适量无水乙醇，浸泡6小时后，过滤得到提取液。
3.提取液浓缩：将提取液加热至70℃左右，缓慢加入盐酸，使pH达到1左右，再继续加热浓缩。
4.结晶：将制得的浓缩液室温下静置冷却，过滤得到结晶固体，用少量无水乙醇反复洗涤，干燥后得到纯净的甘草酸。
实验结果：经过提取、浓缩和结晶得到了白色粉末状的甘草酸，对其进行紫外分光光度计检测其吸收峰在235nm处。
经过质谱实验表明，得到的结晶物是纯净的甘草酸。
实验讨论与分析：通过本实验我们可以了解分离纯化技术的应用，掌握无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作。
甘草酸是甘草中的主要有效成分，具有重要的药理作用。
本实验采用无机酸法提取甘草酸，操作简单易行，效果良好。
不过，无机酸法提取时要注意浓
度和pH值的控制，以免影响提取效率。
同时，在结晶过程中还需要注意温度和过滤的方式和时间，以得到高纯度的甘草酸。
实验总结：本次实验采用无机酸法提取甘草酸，操作简单易行，效果良好。
通过本次实验，我们了解了分离纯化技术的应用、掌握了无机盐酸法提取甘草酸的方法及操作，同时也体验了一把科学实验并学到了新的实验技能。
甘草有效成分的提取纯化方法研究进展
甘草有效成分的提取纯化方法研究进展甘草为豆科(Zeguminosae)植物甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch)、胀果甘草(Glycyrrhiza infIata Bat．)和光果甘草(Glycyrrhia glabra L．)的根及根茎，始载于《神农本草经》，列为上品，传统中医药认为它具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和药性的功效。
甘草中的化学成分比较复杂，主要有三萜皂苷类化合物(甘草酸、甘草次酸)、黄酮类化合物(甘草苷、异甘草苷)及甘草多糖等。
现代药理学实验表明黄酮类化合物具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌抗病毒等作用；甘草酸具有保肝和治肝、治疗肾病和心脏疾病、抗病毒、抗菌等作用；甘草多糖具有抗病毒、抗肿瘤、提高免疫功能。
随着对甘草化学成分研究的不断深入，如何将有限的甘草资源分离纯化成更多、更纯的甘草有效成分具有广泛的经济效益和社会效益，受到越来越多国内外学者的关注，甘草有效成分的提取、纯化工艺已成为近年来的一个研究热点。
目前甘草有效成分提取、纯化方法很多，本文将有关其提取、纯化甘草有效成分的方法做一概述，为进一步研究甘草有效成分的提取、纯化工艺提供参考。
1提取方法1．1溶剂法1．1．1水提法水提取法是最原始，也是过去常用的提取甘草有效成分的一种方法，此法虽然对提取设备要求简单、操作简便，但提取得率较低，并且提取液存放易腐败变质，后续的过滤等操作困难、费时，原因可能是由于极性大的水作溶剂，易把蛋白质、糖类等易溶于水的成分浸提出来，因此也易霉变。
但如果需要提取多糖、苷类等极性大的成分时，因为此法溶剂价格低廉，仍为一种可取的提取方法。
1．1．2有机溶剂提取法有机溶剂提取法是提取甘草有效成分最常用的方法，由于其生产成本较低，设备简单，在工业中得到广泛应用。
该方法工艺简单，收率高，同时可以实现工业化生产，但容易造成环境污染以及产品中的有机溶剂残留，影响产品质量。
由于甘草的主要成分是黄酮类和三萜皂苷类，因此广泛用于提取甘草的有机溶剂主要有甲醇、乙醇、丙酮和氯仿。
甘草酸提取方法总结
甘草酸提取方法总结甘草酸提取方法总结1、甘草酸一般以钾盐或钙盐形式存在于甘草中，其盐易溶于水。
同时，甘草酸为有机弱酸，酸性条件下游离。
这是我们采用水酸提取法从甘草中提取甘草酸的理论依据。
操作方法：将甘草进行适当粉碎，取lOOg甘草粗粉置于1000m烧杯中，加500m水，加热煮沸10min,然后置于振荡器上，于60C下恒温振荡2h。
过滤，将滤渣重复上述操作，至滤液于252nn无明显吸收为止。
合并滤液，蒸发浓缩至200m左右，然后边搅拌边滴加浓H2SO4至不再析出沉淀；陈化2h，离心分离，将沉淀物置于100C下干燥lh，得到棕色块状物8. 9g，即为甘草酸粗品，粉碎备用。
2、甘草经室温干燥后磨成粗末以适量水浸泡20h，过滤,，滤渣再用适量水浸泡20h，过滤。
合并滤液,在搅拌下缓缓滴加3.5-4mol/L硫酸至溶液的pH为1.9，放置冰箱6h以上，倾去上清液。
沉淀以适量甲醇回流提取两次，合并提取液，滴加氨水至ph7.5-8.0 ，减压蒸干，得糖浆状物。
趁热加入冰醋酸使溶解，室温静置，投入甘草酸单铵盐晶种。
翌日吸滤，以少量冷冰醋酸洗涤，减压干燥，称重。
3、以下实验提取溶剂组成经优化均为60%乙醇+1 %氨水+水①、热回流提取法：称取相应粒度的甘草10克，第1次加入溶剂100ml于约80C温度下进行回流提取1.5小时，过滤；提取后的残渣加入溶剂80ml进行第二次回流提取1.5小时，过滤；再次将残渣加入溶剂80ml进行第三次回流提取1.5小时，过滤。
②、索氏提取法：称取相应粒度的甘草10克，加入溶剂200ml在约80C下提取5小时或10小时，过滤。
③、室温提取法：称取相应粒度的甘草3克，加入溶剂30ml，间断2小时手摇，室温（约15C）下提取相应时间，过滤。
④、微波辅助提取法：称取相应粒度的甘草10克，加入溶剂100ml，在经技术改造后的微波辅助提取设备内约80C温度下提取相应时间，过滤。
连续3次提取时，第1次提取4min，过滤，残渣再重复提取2次。
甘草的实验步骤
从甘草中提取黄铜的实验设计方案一实验目的1．熟悉甘草中总黄酮的提取方法和工艺；2．掌握分光光度法测定物质含量的方法二实验仪器和材料1.实验仪器索氏提取器烧杯容量瓶移液管滤纸电热套布氏漏斗循环水式真空泵干燥箱分光光度计2.实验材料甘草蒸馏水氢氧化钠盐酸无水乙醇芦丁碳酸钠亚硝酸钠三实验步骤1.黄酮的提取准确称取烘干后的草甘粉3g,用滤纸包好,置于索氏提取器中,加入乙醇为65%、75%、85%提取至流出液无色,大约为 1.5、2.0、2.5h 取出提取液,冷却.2.黄酮的测定（1）标准溶液的配制将芦丁在120摄氏度下干燥,精确称取芦丁10.00mg置于50 ml容量瓶中,加入适量60%乙醇溶液,在50摄氏度的水浴中加热溶解,冷却.用60%乙醇溶液定容至刻度,既得浓度0.20mg/ml的芦丁标准溶液.（2）标准曲线的制作取10ml具塞比色管6支,分别准确吸取芦丁标准溶液0.0ml,1.0ml,2.0ml,3.0ml,4.0ml,5.0ml,于10ml具塞比色管中.然后各加入30%乙醇补至5.0ml,加入5%的硝酸钠溶液0.6ml,摇匀,放置6min后加入10%的硝酸铝溶液0.6ml,摇匀,再放置6min,加入1mol/L氢氧化钠溶液4ml.用30%乙醇定容,摇匀,放置15min.在紫外可见光分光度光度记上,先取两个1cm比色皿加空白溶液,在510nm波长处调零.取出一个比色皿,加入不同浓度的溶液,再在510nm波长处测定吸光度A.一黄酮含量为横坐标,吸光度A为纵坐标,绘制标准曲线.(1)甘草提取液中总黄酮含量的测定准确移取1.0ml提取液,分别置于两支10ml具塞比色管中,一支加30%乙醇溶液为空白,另一只按标准曲线方法操作,并用30%乙醇定容,测定吸光度.由提取液的吸光度值在标准曲线上查出其中总黄酮的含量,最后计算出甘草中总黄酮的含量.四注意事项1.由于甘草中黄酮的含量较低，所以在提取时过滤离心定容的移液过程中要用乙醇洗三次，否则会造成含量偏低。
甘草有效成分提取分离方法的研究进展
黑龙江医药ＨｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇＭｅｄｉｃｉｎｅＪｏｕｒｎａｌＶｏＬ２３Ｎｏ．１２０１０・９３・脂质体包裹的药物制备外用制剂，具有皮肤给药的靶向性特点，可增加皮肤透过量，提高药物在局部的浓度，延缓药物的释放而达到延长药物作用时间的目的，同时因全身吸收药量的减少，可降低药物的全身不良反应，延缓抗药性。
冯淑华等¨叫将白鲜皮提取物制备成外用脂质体凝胶，具有良好的生物相容性、生物膜相似性、无毒和促进药物透皮吸收、在皮肤内形成药物储库而维持较恒定的有效浓度等特征。
脂质体外用凝胶剂还可增加与皮肤表面的接触，提高局部组织药物浓度。
李冬梅等【ｌｕ将阿西美辛包封于脂质体中，并进～步制备成卡波姆的凝胶剂。
该制剂在阿西美辛脂质体的基础上结合了凝胶的特点，既使活性物质容易透过皮肤，提高局部组织药物浓度，叉清凉，元污染，易于使用，且在脂质体中加入卡波姆形成凝胶后，对脂质体起到立体稳定作用，减少脂质体的凝聚而增加了稳定性。
３．２．３壳聚糖凝胶制备技术壳聚糖（Ｃｈｉｔｏｓａｎ）是一种天然的高分子材料，甲壳素脱乙酰产物，具有良好的生物相容性和生物降解性，不仅无毒无味，而且有抗菌消炎、促进伤口愈合的作用¨“。
壳聚糖凝胶制备技术使外用凝胶剂具有更好的溶解性、成模性、粘滞性。
祁智等Ｌｌ副研制的双氯芬酸钾壳聚糖凝胶剂就是采用了壳聚糖和卡波姆两种新型药用辅料为基质的凝胶剂。
壳聚糖亲水性强，可在酸性递质中膨胀形成胶体粘稠物质；卡波姆遇水可形成酸性的粘稠状液体，有利于壳聚糖在水中溶胀，二者配合使用所制备的外用凝胶剂成型性较好。
４结语综上所述，外用凝胶剂是一种极具发展潜力的外用新剂型，不仅可以避免药物在胃肠道中的破坏，减少血药浓度峰谷变化，而且已成为克服药物副作用的有效用药途径之一，其优越的医药性能使其成为药学工作者关注的热点。
新材料的不断出现和新技术的引入，使外用凝胶剂在经皮给药领域发展上，有更多的空间。
但对外用凝胶剂在选定基质的过程中，切莫忽视酸碱度对药物的影响，在正常情况下，认为亲水性基质的ｐＨ值接近皮肤的ｐＨ值，这种基质对药物的吸收更好。
甘草中有效成分甘草酸的提取和测定方法研究概况
·综述·甘草中有效成分甘草酸的提取和测定方法研究概况鲁守平,孙 群,王建华,孙宝启3(中国农业大学农学与生物技术学院,北京100094)[摘要] 综述了甘草中有效成分甘草酸的提取、纯化和测定方法的研究概况。
稀醇溶液对甘草酸的提取效果较好,添加稀氨水后可提高甘草酸的提取收率;超声波强化或微波辅助提取可提高甘草酸的提取效率并节约提取溶剂和提取时间,C O 2超临界流体法无毒、高效且不需加热即可将甘草酸与溶质分离开来;T LC ,HP LC ,CE 方法可实现甘草酸及甘草次酸含量的快速、准确测定。
[关键词] 甘草;甘草酸;提取;测定[中图分类号]R 284 [文献标识码]A [文章编号]100125302(2006)0520357204[收稿日期] 2005204219[通讯作者] 3孙宝启,T el :(010)62732775,E 2mail :sbq5583@ 甘草是我国常用的中草药品种之一,除主要医药用外,还广泛地应用于烟草、食品、酿造以及化妆品工业等领域[1]。
甘草的主要有效成分为甘草酸(glycyrrhizic acid )或甘草甜素(glycyrrhizin )及甘草次酸(glycyrrhetinic acid )等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等[2]。
药理研究表明,甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用,近年来,还用于防治病毒性肝炎、癌症以及艾滋病等[3]。
甘草酸及甘草次酸的提取和含量的测定在甘草研究中具有举足轻重的地位。
我国虽是甘草生产和出口的大国,但对甘草主要有效成分甘草酸的生物合成、作用机制、精制加工和综合利用的深入研究还落后于日本等国。
受技术条件和工艺限制,应用传统方法提取的甘草酸粗品的纯度低,在国际市场上的价格低,并且提取效率也低,对甘草资源的利用不充分,影响了我国甘草产业的发展。
目前,国内外涌现出许多先进的提取技术(如超临界流体提取法、微波辅助提取法等),以及高效灵敏的测定方法(如高效液相色谱、毛细管电泳[4]等),对这一领域研究的一些进展进行简单的概括,希望有助于我国甘草的研究和利用开发。
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甘草有效成分的提取分离实验方案实验目的：
通过对甘草中甘草黄酮、甘草酸和甘草多糖的提取分离，进一步理解他们的理化性质，并且初步掌握提取分离的方法。
实验原理：
黄酮类化合物则泛指两个苯环（A环与B环）通过中央三碳相互联接而成的一系列化合物。
根据中央三碳的氧化程度、是否成环、B 环的联接位点等特点，可将该类化合物分为多种结构类型。
代表化合物有甘草黄酮、甘草素、异甘草素、甘草甙、异甘草甙、甘草查尔酮等。
甘草中已经发现的黄酮类化合物有一百多种，本实验只对其进行粗提，并且测定其总含量。
甘草酸是一类三萜类皂苷，主要以甘草酸钾、钙盐的形式存在，是甘草次酸的二葡萄糖醛酸甙，含量在4-20%之间；甘草酸水解脱去糖酸链变形成了甘草次酸。
超临界CO2萃取甘草总黄酮的萃取率是1. 35%，含量32. 45%，是索氏提取法提取甘草总黄酮的提取率的2.2倍，索氏提取溶剂用量是超临界CO2萃取的6倍。
本实验采取超临界CO2萃取法提取甘草黄酮。
【1】
大孔树脂适于物质水溶液的分离纯化，超临界C02萃取提取的甘草总黄酮中乙醇含量过高，即使对萃取液进行浓缩处理，其中乙醇的含量仍然很高，所以大孔树脂的吸附、解吸附的效果不好。
萃取液浓缩近干加入水后，所要分离的物质析出变混浊，也不适合用大孔树脂
进行分离纯化。
与大孔树脂层析比较，硅胶柱层析可以更有效的分离纯化甘草黄酮。
使用硅胶柱层析可以有效地使甘草黄酮类物质的含量达到55%以上，收率1. 12%，符合国家中药二类新药的原料要求。
【1】综合考虑，本实验选择硅胶柱层析对甘草黄酮进行分离纯化。
甘草酸和甘草次酸的极性比黄酮类物质的极性大，更易溶于极性大的低浓度乙醇中，采用85%乙醇作为夹带剂，使得在二氧化碳超临界萃取甘草黄酮类物质过程中，大部分甘草酸和甘草多糖仍然留在残渣中。
鉴于甘草酸和甘草多糖都溶于水的性质，本实验采用超声或微波辅助法对它们同时进行提取[3]。
对于提取后的甘草酸和甘草多糖的分离，可查阅到的方法包括醇沉酸沉法[3]。
考虑到大孔吸附树脂对糖类的吸附能力很差，也可以尝试用大孔树脂对甘草酸和甘草多糖进行分离。
本实验采用前者进行分离。
一、甘草黄酮的提取：超临界C02萃取法
工艺【1】：
原料粒度:40-60目
投料量:180g/罐
萃取压力:30Mpa
萃取温度:50 0C
夹带剂及液固比: 85%乙醇，液固比(V：W)为5:1
C02流量:l0kg/h
萃取时间:5小时
分离压力:5. 5Mpa.
分离温度:400C
二、甘草黄酮的分离纯化：硅胶柱层析
工艺【1】：
萃取液浓缩干品:硅胶量=0.5:20
流速：1.0倍柱体积/小时
流动相：CHCl3 : CH30H=4 :1
三、甘草酸和甘草多糖的提取：超声辅助溶剂提取法
工艺【1】：
溶剂：水
提取次数：3次，每次25min
温度：450C
固液比=1: l0
超声功率：1000W
四、甘草酸和甘草多糖的分离：醇沉酸沉法[5]
(1)萃余相用95％乙醇或无水乙醇调节至乙醇浓度为50～80％，静置8～24小时，过滤，上清液备用，滤渣干燥得甘草多糖粗品。
(2)上清液浓缩至20℃时的比重为1.05～1.20，用硫酸或盐酸调pH 至1.5～2.0，室温或4～10℃低温静置8～48小时，去上清液，沉淀物用冷水或冷酸水洗涤至洗涤水pH3～5，沉淀物干燥得甘草酸粗品。
五、含量测定：分光光度法
1、甘草黄酮含量测定[1]
标准曲线绘制：精密称取在105℃干燥恒重的芦丁对照品适量，用95%乙醇溶解，摇匀，定容使之成为浓度为1mg/ml的芦丁标准品溶液，作为贮备液。
精密量取上述溶液0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4. 0.5, 0.6m1，分别加水至3m1，加5%亚硝酸钠水溶液0. 5m1，放置6分钟，加10%硝酸铝0.5m1,混匀后放置5分钟，加入5%氢氧化钠溶液25m1,混匀，放置15分钟后，蒸馏水定容至lOml。
用721紫外分光光度计，在λ
=500nm处测吸收度。
以对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标做标准曲线。
含量测定：测出样品吸光度，带入回归方程，计算得出样品浓度。
2、甘草多糖含量测定[3]
标准曲线的制备：精密称取干燥恒重的葡萄糖0.0194g,配成1OOml 溶液，浓度为0.194mg/ml。
从中精密吸取O.lml, 0.2m1,0.3m1, O.5ml, 0.7m1, 0.9m1，分别加入1 ml苯酚溶液和5ml浓硫酸，300C恒温O.5h，冷水浴冷却至室温，定容到5Oml，在490nm处测定吸光度。
以不加样为空白。
以浓度C对吸光度A回归,做回归方程。
含量测定：测出样品吸光度，带入回归方程，计算得出样品浓度。
3、甘草酸含量测定[3]
标准曲线的制备：精密称取适量甘草酸标准品，配成0.4217mg.m1-1的标准溶液。
分别精密量取1.00m1, 2.00m1, 3.00m1,4.00m1的标准溶液，用50%的乙醇溶液稀释至250m1,在最大吸收波长λmax= 259nm 处测吸收度，以空白为参比液，得线性回归方程.
含量测定：测出样品吸光度，带入回归方程，计算得出样品浓度。
[1]付玉杰. 甘草黄酮和甘草酸提取纯化工艺研究[D].东北林业大学,2002.
[2]王巧娥. 甘草有效成分的新型提取技术及高速逆流色谱分离方法研究[D]. 厦门大学, 2004.
[3]李炳奇,刘振华,马燕. 超声法联合提取甘草渣中多糖和甘草酸的研究[J]. 现代食品科技,2006,04:26-28.
[4]李春英. 甘草多糖提取纯化工艺研究[D].东北林业大学,2002
[5]专利号：CN 1803789 A。