微生物检验基础知识——检验流程.

（三）冷冻样品

冷冻样品，先将中样在0~4 ℃下解冻，时间不能超过 18h，或在45 ℃下解冻，时间不能超过15min。再取 检样25g做稀释处理。
六 . 致病菌检验参考菌群的选择

蛋及蛋制品：沙门氏菌、葡萄球菌、变形杆菌等 水产品海产品：链球菌、副溶血性弧菌 乳制品：沙门氏菌、志贺氏菌、葡萄球菌、链球菌、 蜡样芽胞杆菌 畜禽肉类：肠道致病菌和致病性球菌 米面类：蜡样芽胞杆菌、变形杆菌、酵母霉菌等 罐头：耐热性芽胞杆菌、嗜热脂肪杆菌、大芽胞杆 菌、凝值芽胞杆菌

七 . 样品的检验

（一）、收样： 1、收到样品后逐一核对验收，登记编号； 如2004年收到的50号样品，编号可写成：20040050 2、立即将样品放在冰箱或冰盒中，并积极做好准备 工作。
（二）、检验

1、选择检验方法： 国内：国家标准 国外： 国际标准：如FAO标准、WHO标准；
（4）所有检测项目完成后，检测人员将原始记录、 样品卡、报告书底稿交科主任作全面校核。

源自文库

3、样品的保留 （1）阴性样品：在发出报告可及时处理； （2）阳性样品：在发出报告以后3天才能处理样品； （3）进口食品的阳性样品：要保留6个月才能处理。

（4）微生物检验不进行复检
八、检验结果的报告


复习题

1、在微生物检验中，检验前要做好哪些准备工作？ 2、在微生物检验中，采样时要遵守哪些要求？ 3、在微生物检验中，样品的送检有哪些要求？ 4、在微生物检验中，如何进行样品的保留？
3. 研磨法

将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样 放入无菌乳钵中充分研磨后，再放入带有225mL无菌 稀释液的稀释瓶中，盖紧盖后充分摇匀。
4. 整粒振摇法

直接称取25g整粒样品置于带有225mL稀释液和直径 5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速 振摇50次，振幅要大于40cm。
（五）食品微生物检验的采样方案
1 、食品卫生学微生物检验的取样方案

检验目的：检验食品的微生物卫生指标是否合格。
取样方案有：

ICMSF取样方案； 美国FDA的取样方案； 世界粮农组织（FAO）取样方案； 我国的食品取样方案。
2 、食物中毒微生物检验的取样

检验目的：查找食物中有何病原菌。
样 品 采 集
选 择 参 考 菌 群
致 病 菌
分离培养 增 菌
分离培 养 纯 化
染色镜检 生化试验 血清学试验 动物试验
二 . 检验前的准备

准备好所需的各种仪器。 按技术要求将各种玻璃仪器进行清洗、烘干、包扎、灭菌， 冷却后送无菌室备用。 准备好所用的各种试剂，做好普通营养琼脂或其他选择必 培养基。 做好无菌室或超净工作台的灭菌工作，提前1h灭菌 30~60min. 工作衣、鞋、帽、等灭菌后备用。 工作人员进入无菌室后，实验没有完成之前不得随便出入 无菌室。
号__________产品依据标准__________
有效成分及含量__________________检验目地________________检测项目_____________________
采样人仔细阅读以下句子，然后签字。
我认真负责地填写了该样品采样单，承认以上填写的合法性，被该采亲单位所证
实的样品系按照采样方法取得的，该样品具有代表性、真实性和公正性。
生产厂家_______________通讯地址__________邮政编码□ □ □ □ □ □受检地点_____________
通讯地址__________邮政编码 □ □ □ □ □ □采样地点_______________采样日期_____________
采样基数______________生产日期_______________批

车间空气采样：将5个直径90mm的普通琼脂平板分 别置于车间的四角和中部，打开平皿盖5min，然后 盖盖送检。
（七）采样标签的填写

标签内容主要： 编号、样品名称、生产单位、生产日期、产品 批号、产品数量、存放条件、采样时间、采样人姓 名，现场情况。
×××××采样单
样品编号：___________产品名称（商品名）______规格型号__________注册商标_____________
3 、人畜共患病病原菌检验的取样

检验目的：鉴定畜禽及其产品是否带有人兽共患的 病原菌。
（六）食品微生物检验采样方法

采样原则： 上能采取完整包装的样品就不拆开取样，必须 拆开包装取样的应按无菌操作进行取样.
1 、液体样品采样方法

充分混匀后，无菌操作打开包装，用100mL无菌 注射器抽取,注入无菌盛样容器.

每个进口国的标准：如美国FDA标准、日本厚生 省标准、欧共体标准等
2 、检验要求

（1）按照标准操作规程进行检验操作，边工作边做 原始记录。

（2）检测结束，连同结果一起交同条线技术人员复 核。复核过程中发现错误，复核 人应通知检测人更 正，然后重新复核。 （3）检测人和复核人在原始记录上签名，并编写 “检测报告底稿”。

4 、冷冻食品采样方法

大包装小块冷冻食品按小块个体采取； 大块冷冻食品可用无菌刀从不同部位削取或用无菌 手锯从冻块上锯取样品，放入无菌容器。 若为检验食品污染情况，可取表层样品；若为检验 食品品质情况，应从深部取样。

5 、生产工序监测采样

车间用水：从车间各龙头采样； 车间台面、用具、及加工售货员手的卫生监测：用 5cm2孔无菌采样板和5支无菌棉签擦拭25cm2面积， 擦拭后立即用无菌剪刀将棉签头剪入无菌容器中。

将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g放入带 225mL稀释液的无菌均质杯中，8000~10000r/min均 质1~2min即可。
2. 剪碎振摇法

将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样进一 步剪碎，放入带225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠 的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅 要大于40cm。
代表单位（章） 签字 日期 备 注 年 月 日
代表单位（章） 签字 日期 年 月 日
四 . 样品的送检要求

1、要快速运送：不要超过3小时； 2、若路途遥远，可在1~5℃低温下运送； 3、要注意防污染、防散漏、防变质； 4、要填写检验申请单。
五 . 样品的处理方法

（一）液体样品 （二）固体样品 （三）冷冻样品
食品微生物检验的基本程序
山东商业职业技术学院
本章的主要内容

食品微生物检验的一般步骤 检验前的准备


样品的采集
样品的送检 样品的处理方法 致病菌检验参考菌群的选择 样品的检验
检验结果的报告
一 . 食品微生物检验的一般步 骤
样 品 保 存 样 品 处 理 检 验 前 的 准 备 菌落总数 结果报告 大肠菌群

经审核后的报告底稿、样品卡、原始记录，上交打 印正式报告二份 。

将报告正本交审核人及批准人签名，并在报告书上 盖上“检验专用章”CMA章和中心公章后对外发文。
收文科室或收文人要在检测申请书上收件人一栏内 签字，以示收到该报告的正式文本。 在报告正式文本发出前，任何有关检测的数据、结 果、原始记录都不得外传，否则作为违反保密制度 论处。
2. 盒装或软塑料包装样品的处理

将其开口处用75%酒精棉擦拭消毒，用灭菌剪 子剪开包装，覆盖上灭菌纱布或浸有消毒液的纱布 在剪开部分，直接吸取样品25mL ，或倾入另一灭菌 容器中再取样25mL检验。
（二）固体样品的处理

捣碎均质法 剪碎振摇法 研磨法 整粒振摇法
1. 捣碎均质法

（三）采样的步骤

采样前调查→现场观察→确定采样方案→采样 →样品 封存 →开具采样证明
（四）采样的要求

1、严格遵守样品采集的操作规程。 2、所采样品必须具有代表性。 3、采样操作要防止污染，防止变质、损坏、丢失。 4、不得加入防腐剂、固定剂等。

5、样品采集和现场测定必须有二人以上参加 。



三 . 样品的采集
（一）采样的目的和意义

便于食品卫生质量监督管理 鉴别食品中是否存在有毒有害物质。 为新产品、新资源利用、新食品化工产品、新工艺 投产前进行卫生鉴定。
（二）样品的种类

大样，就是一整批； 中样，是从样品中各部分取得的混合样品，一般为 250g； 小样，也称检样，做分析用的，一般为25g。
2 、半固体样品采样方法

无菌操作打开包装，用无菌勺子从几个部位挖取样 品，放入无菌容器。
3 、固体样品采样方法

大块整体食品用无菌刀具和镊子从不同的部位割取， 并注意其代表性；

小块大包装食品应从不同部位的小块上切取样品， 放入无菌容器。
若为检验食品的污染情况，可取表层样品；若为检 验食品品质的情况，应从深部取样。
( 一 ) 液体样品的处理

瓶装液体样品的处理 盒装或软塑料包装样品的处理
1. 瓶装液体样品的处理

用点燃的酒精棉球灼烧瓶口灭菌，接着用石炭 酸或来苏尔消毒后的纱布盖好，再用灭菌开瓶器将 盖启开；含有二氧化碳的样品可倒入500mL磨口瓶内， 口勿盖紧，覆盖一灭菌纱布，轻轻摇荡，待气体全 部逸出后，取样25mL检验。