常见蔬菜消除超氧阴离子作用的研究

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四川大学学报 （工程科学版）
第 ’# 卷
样品分解放出了少量 !"# $ 所致， 或是随试样提取液加 入体积的增大， 浑浊度略有上升所致。蔬菜提取液于 光照前加入时， 反应体系的吸光度有显著的降低， 结合 上述的结论， 表明吸光度的下降完全是 "# ・ 被消除所
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为了考察蔬菜中的抗坏血酸对消除 "# $・ 作用的贡献， 抗坏血酸溶液亦被作为一种 “样品” 来考察， 结果见图 (。
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专一性消除超氧阴离子， 保护细胞免受超氧阴离子损
［’］ 伤 。生物体内的维生素 (、 谷胱甘肽、 维生素 )、 尿 ［$］ ［*， +］ 类胡萝卜素 、 槲皮素、 维生素 酸、 血浆铜蓝蛋白 、 ［-］ 等许多物质都能消除活性氧。上述许多酶或非酶 , 类抗氧化物质如 %!&、 谷胱甘肽转硫酶、 维生素 )、 维生
活性氧以前被认为是赐予万物生命的高度活性物 质， 近三十多年来却发现它们对人体健康也有危害的 一面。在正常情况下， 生物体内细胞新陈代谢过程中 内源性活性氧不断产生， 又不断被消除。一旦活性氧 产生过多或者机体对其消除能力减弱， 产生与消除失 去平衡， 就会对机体造成氧化性破坏 。研究已经证 实， 衰老、 恶性肿瘤、 动脉粥样硬化、 糖尿病、 某些自身
素 (、 类胡萝卜素等普遍存在于植物中。人每天都要摄 取大量的蔬菜、 水果， 科学的日常饮食就可能起到一定 的抗氧化功效， 正如俗话所说 “医食同源”。所以食物 抗活性氧功能逐渐引起人们的重视。蔬菜水果种类繁 多， 其中各种抗氧化物质种类和含量可能不同， 对活性 氧的消除作用就可能不同， 还可能因烹饪方法而变化。 因此， 研究蔬菜消除活性氧的作用， 对通过膳食而达到 大众保健防病、 延缓衰老、 延年益寿有积极的意义。因 的作用进行了研究。 此， 对多种常见蔬菜消除 !" #・ 的活性的方法有多种。其中 测定 %!& 消除 !" #・
" 结果与讨论
图 $ 是南瓜对超氧阴离子的消除作用， 玉米与此 类似； 图 "、 图 ’ 分别是大蒜、 苦瓜的消除作用， 西红柿、 胡萝卜、 韭菜花与它们类似； 图 * 是空心菜的消除作 用。结果表明， 这 B 种蔬菜， 于光照后加入其提取液 时， 反应体系的吸光度均没有减弱， 说明反应条件下它 们没有消除 1!" # 的作用。略有上升的吸光度可能是
收稿日期： *<<<=**=*<
［*］
免疫性疾病、 肺气肿、 白内障等许多疾病与活性氧有
［"］ 关 。因此， 生物抗氧化过程是当前生命科学研究的
热点。活性氧之一的超氧阴离子 （," Z・ ） 既可作为还原 剂失去单电子， 使氧化型细胞色素 4、 过氧化物酶复合 物 3、 对苯醌等化合物还原； 又可作为氧化剂接受单电 子， 使半胱胺酸、 抗坏血酸、 肾上腺素、 儿茶酚等化合物
$ 实验部分
$7$ 仪器 自制 "5 : 日光 ."$ 光度计，809 # $ 高速分散器， 灯光照恒温箱。 $7" 试剂 核黄素溶液 （57 $" 22;< = >） ： 称取核黄素粉 $$7 ’ 溶于 "+5 2< 蒸馏水中， 盛棕色瓶中， 置冰箱保存。 2?， （+ 22;< = >） ： 称 取 13"(&@A・"0"! 13"(&@A 溶液 溶于蒸馏水中并稀释至 $55 2<。 $B- 2?， 万方数据 羟胺溶液 （*5 22;< = >） ： 称取羟胺盐酸盐 ".B 2?，
文章编号： （")))） *))<=!)>? )#=))!@=)@
常见蔬菜消除超氧阴离子作用的研究
梁
摘
冰 ，张荣生，周国防
（四川大学 制药工程系，成都 #*))#A ）
要：用核黄素光化学氧化光度法研究了南瓜、 玉米、 大蒜 、 苦瓜、 空心菜、 西红柿、 胡萝卜、 韭菜花 > 种常见蔬菜
对超氧阴离子的消除作用。结果表明这些蔬菜均具有消除超氧阴离子的作用； 煮沸 ") BCD， 玉米和南瓜的消除超氧 空心菜的有所上升， 而大蒜、 苦瓜、 西红柿、 胡萝卜、 韭菜花的消除作用均没有变化。将吸 阴离子能力减弱约 !)E ， 光度随这八种蔬菜提取液加入量的变化趋势与维生素 4 的相比较， 提出蔬菜消除超氧阴离子的作用主要是依靠维 生素 4 以外的超氧化物歧化酶等物质。 关键词： 蔬菜； 超氧阴离子； 消除作用 中图分类号：,#A? ’ ! 文献标识码 ： /
’+
的红细胞中的氧合血红蛋白转变为高铁血红蛋白的过 程中产生相当量的 !" ・ 。 生物体内的某些酶如 %!&、 过氧化氢酶、 过氧化物 酶、 谷胱甘肽过氧化物酶、 谷胱甘肽转硫酶、 谷胱甘肽
［$］ 还原酶等有消除活性氧、 保护机体的作用 。%!& 能 # ［$］
蒸馏水溶解并定容为 $55 2<。磷酸盐缓冲溶液 （" = ’ ： 取 " = ’ 2;< = > 磷酸氢二钠 B57B 2<， 加 2;< = >， /0 .7Fra Baidu bibliotek） 混匀即成。 " = ’ 2;< = > 磷酸二氢钾 $C7" 2<， 氨基苯磺酸溶液 （$B55 2? = >） ： 称取氨基苯磺酸 用 ’5D 醋酸溶液溶解并稀释至 $55 2<， 盛棕色 $B5 2?， 瓶中。 （$+5 2? = >） ： 称取 1 # 1 # 甲萘基二氨基乙烯溶液 甲萘基二氨基乙烯 $+ 2?， 用 ’5D 醋酸溶液溶解并稀释 至 $55 2<， 盛棕色瓶中， 置冰箱保存。 混合显色液： 使用当日将上述氨基苯磺酸溶液、 1 # 甲萘基二氨基乙烯溶液和 ’5D 0AE 溶液按 ’： ’7 +： 盛棕色瓶中。 "7+ 的体积比混合， $7’ 试样及处理 蔬菜生样提取液： 南瓜、 玉米、 大蒜、 苦瓜、 空心菜、 西红柿、 胡萝卜、 韭菜花购自自由市场。将其洗净沥 干， 称取 $5 ?， 切成小颗粒， 置烧杯中， 加入 +5 2< 蒸馏 水， 用均浆机捣碎为均浆液， 用干慢速定量滤纸过滤， 弃去前面的数毫升， 取后面的滤液， 即得到各种蔬菜的 提取液， 按下面 $7* 实验方法进行测定。 蔬菜熟样提取液：按上述操作称样， 切成小颗粒 并补充 后， 加水， 置于电炉上加热煮沸 $5 2F6 或 "52F6， 蒸馏水以保持液位不变， 冷却后， 均浆过滤操作同上。 抗坏血酸溶液 （"2? = 2<） ：称取抗坏血酸 （AG 级） 用蒸馏水溶解并定容为 +5 2<， 按 $7* 实验方法 $55 2?， 进行测定。 $7* 实验方法 在参考文献 ［’， 的基础上， 经实验优化， 建立了 .］ 下列 分 析 操 作 步 骤： 取 若 干 支 "+ 2< 比 色 管， 加入 溶液 ，磷酸盐缓冲溶液 （ ） 13"(&@A 57’5 2< /0 .7 * 57 C5 羟胺溶液 57*5 2<， 核黄素溶液 57’+ 2<， 试液 （蔬菜 2< ， 提取液或抗坏血酸溶液） 若干毫升， 水稀释至 $5 2< 刻 度， 摇匀后置于 ’. H恒温箱内， 距日光灯管 - E2，光照 停止光照 （试液或在此时加入） ， 加入混合显色 $5 2F6， 液 C 2<， 蒸馏水稀释至 "+ 2<，摇匀， 恒温箱内放置 "5 在 ++5 62 波长下， 以蒸馏水为参比， 测定吸 2F6。取出， 光度。
［’， .］ 灵敏度高、 核黄素光化学氧化 # 羟胺 # 偶氮显色法 ［.］ 、 操作简便、 仪器要求不高。通过实验证实 重复性好
了该方法能够应用于蔬菜消除 !" #・ 的作用的研究， 国 光照有溶解氧共 内外未见相似报道。/0 中性介质中， # 存的 核 黄 素 溶 液， 产 生 !" ・ 。后 者 将 羟 胺 氧 化 成 1!" # 。变为酸性条件后， 1!" # 与氨基苯磺酸和 1 # 甲 萘基二氨基乙烯发生偶氮反应， 生成红色化合物 （ ! 234 。若在光照前， 反应体系加有蔬菜提取液， 蔬菜 ++5 62） # 中的 %!& 等消除 !" ・ 。根据 ++5 62 波长处吸光度的 减弱程度， 可测出蔬菜消除 !" #・ 的能力。因蔬菜中还 原性物质消耗 1!" # 而造成的吸光度的降低可以通过 在光照后加入试液的实验结果来推断。
［*］ 氧化 ， 使细胞膜中不饱和脂肪酸过氧化， 使含 Z 25 的
酶钝化， 大量的 ," Z ・也使细胞中超氧化物歧化 酶
作者简介： 梁 冰（*<A? Z ） ， 副教授 ’ 研究方向： 分析化学 ’
万方数据
［!］ （2,:） 钝化， 从而使细胞受到毒害甚至死亡 。人体内
第-期
梁冰 ， 等： 常见蔬菜消除超氧阴离子作用的研究
第 !" 卷 第 # 期 "))) 年 ** 月
四 川 大 学 学 报（ 工 程 科 学 版 ）
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