高效液相色谱仪日常维护记录--竖版
高效液相色谱仪器维护和保养
HPLC故障诊断
保留时间不稳定。 首先观察保留时间是否有规律的变化，并同时观察压力是否稳定 若压力稳定而保留时间呈有规律变化，多数是色谱柱未平衡好，特别
HPLC日常维护
5. 安装有seal wash组件的，无论是否使用缓冲盐，开泵之前都应该使之 充满流动的液体（10%IPA水溶液）并调流速为20滴/分钟。
6. 正相色谱、反相色谱切换时应使用IPA过渡，长期使用正相，应更换正 相柱塞密封垫
7. 样品进样之前最好过滤，如果样品量太少，可以适当抬高进样针的位 置
Agilent 1100四元泵中使用盐溶液和有机溶剂时，建 议将盐溶液接到下面的 口上，有机溶剂接到上面的梯度阀口 上。有机溶剂通道最好直接在盐溶液通 道的上面。建议定期 用水冲洗所有MCGV通道，以去除在阀口上可能出现的盐 沉淀 。
四元／二元/单元泵日常维护
更好地使用四元泵
将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵上面(或较高处)。
流程
检测器使用注意事项及日常维护
可变波长紫外检测器使用注意事项. 如果流动池被污染可先用以下方法处理:在不连接色谱柱的情
况下先用高纯水冲洗20分钟，然后用5％硝酸冲洗2小时，最后再 用高纯水冲洗至流出液中性即可。 如上述方法不果，就需更换流动池的检测窗。
上述处理方法也适用于DAD的流动池。
检测器使用注意事项及日常维护
关闭泵，拧开脱气机出口或比例阀入口管线 ,此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶剂过 滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。
Agilent 1100 泵头(Pump Head)结构图
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Holding/Lock Screw (PEEK)
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带有Seal Wash的泵头结构图
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种高效分离和分析样品成分的仪器，广泛应用于医药、化工、环境监测、食品等领域。
在使用HPLC 的过程中，保养和维护工作非常关键。
良好的保养和维护能够延长设备寿命，保证分析结果的准确性和可靠性。
本文将就HPLC的保养和维护进行较全面的探讨，以期为相关使用者提供帮助和指导。
一、日常保养1. 清洗：定期对HPLC进行清洗是保持设备正常工作的关键。
清洗前，首先应关闭色谱柱开关，拔掉电源，然后用无水乙醇清洗柱及管路，最后用纯水冲洗干净。
在一些需要不断更新样品溶剂的实验中，还需要对溶剂瓶、进样器等部件进行定期清洗。
2. 检查密封性：检查HPLC各接口的密封性，确保各部件之间无漏气、不漏液，避免因为漏气或漏液造成分析数据的误差。
3. 检查压力：在使用HPLC过程中，经常检查色谱柱前后的压力表读数，确保在正常范围内。
如果发现异常，应及时排查原因并进行处理。
4. 校准：定期对HPLC进行校准，保证设备和检测器的准确性。
可以借助标准物质进行定期的校准维护。
5. 检查溶剂余量：定期检查溶剂瓶的余量，确保实验过程中不会因为溶剂用尽而中断。
6. 检查灯管：若HPLC设备配备有紫外-可见检测器，需要定期检查和清洗灯管，以保证检测器的灵敏度和准确度。
二、周期性维护1. 良好的使用环境：保持HPLC设备使用环境的干净整洁，避免灰尘、化学气体等对设备造成影响。
需要注意设备周围的温度和湿度，避免影响设备的正常工作。
2. 正确存放标准溶液：在使用标准溶液时，要注意存放条件，避免因为存放不当导致标准溶液的失效。
3. 定期更换消耗品：HPLC设备的使用需要大量耗材，比如柱、进样器、检测器灯管等，这些耗材的使用寿命有限，需要定期更换，以保证设备的正常工作。
4. 记录维护情况：建立设备的维护记录，记录设备的使用情况、维护情况以及出现的问题及处理情况，为设备的维护提供参考。
液相色谱仪的日常维护
3、进样系统
自动进样系统
a. 样品瓶不配套
瓶小——针弯、折断 瓶大——样品少，抽不上样 瓶破碎 更换合适的样品瓶。
3、进样系统
自动进样系统
b. 注意样品瓶隔垫，防止污染。 c. 进样器针头堵塞（样品、缓冲
盐、隔垫碎片、针头本身)， 可用溶剂清洗，金属丝疏通， 或换新针头。
3、进样系统
自动进样系统
液相色谱仪的日常维护 与常见故障排除
一 液相色谱仪的 日常维护
储液器
使用HPLC试剂/溶剂，含缓 冲盐的流动相过0.45μm膜除去 微粒物质;更换流动相时,应彻底 清洗，防止交叉污染。
定期清洁储液器及附件，防 止长微生物。
输液泵
密封垫易损坏引起故障，每天实验结 束一定要认真冲洗泵,注意防止堵塞,使用 缓冲盐流动相时,更要小心。
使用HPLC级试剂,注意泵压力不要太高, 要适当调整压力,一般压力上限在1020MPa，下限为0.5MPa，注意防止因泵堵 塞造成压力过高损坏柱塞杆或烧坏电机 。
进样器
停机前一定冲洗干净进样 器内残留的样品或缓冲盐，防 止样品和无机盐沉积造成进样 阀转子面磨损或堵塞。
注射器最好使用仪器自配 尖头、平头针，不要用其它仪 器的。
流动相接近用完 过滤器堵塞（有颗粒，长霉） 流速过高,阻力大,造成空化现象. 解决的办法是:降低流速;换大孔过 滤器;加大管路内径;抬高储液器.
1、储液器
▪ 储液器或流动相被污染
产生有规则的噪声； 基线上升，梯度洗脱出鬼峰； 原因:
溶剂质量差（含杂质多）； 配流动相的玻璃器皿不合格,微生物 影响； 配制流动相的操作不当（过滤、脱 气、搅拌).
记录器数据处理系统
记录仪:
热敏式打印头要注意记录纸的质 量,开机前注意检查走纸部件,不要 卡纸.
安捷伦高效液相色谱仪(HPLC)的日常维护
安捷伦高效液相色谱仪（HPLC）的日常维护1、为什么溶剂和样品要过滤? 溶剂和样品过滤非常重要，它会对色谱柱、仪器起到保护作用，消除由于污染对分析结果的影响。
色谱柱：由于填料颗粒很细，色谱柱内腔很小，溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。
仪器：溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损，同时也会增加泵头内的蓝宝石活塞杆和活塞的磨损。
样品过滤头的类型： 30mm内径：适用于大进样量的过滤，由0.2μm和 0.45μm两种规格,材料有纤维素,醋酸纤维,聚四氟乙烯。
处理样品体积少于50μl。
13mm内径：适用于范围广的过滤，由0.2μm和0.45μm 两种规格,材料为纤维素。
3mm内径：适用于小进样量的过滤，由0.2μm和 0.45μm两种规格。
处理样品体积为7μl。
滤膜类型：聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，酸和滤膜类型盐，并无任何可溶物。
醋酸纤维滤膜：不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶液，推荐用于蛋白质和其相关样品。
尼龙66滤膜：适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可用于强酸，70%乙醇、二氯甲烷、不适用于二甲基甲酰胺。
再生纤维素滤膜：具有蛋白吸收低，同样适用水溶性样品和有机溶剂。
2、为什么HPLC用缓冲盐时要加在线Seal-wash选项？ HPLC用缓冲盐时,由于泵头内的缓冲盐溶液存在高压析盐现象,析出的细小盐粒非常坚硬,它附着在蓝宝石活塞杆上,随着蓝宝石活塞杆的往复运动,容易产生划痕, 并磨损密封垫,造成漏液等故障现象。
在线Seal-wash 选项能有效的带走可能存在的缓冲盐结晶。
缓冲盐的浓度在0.1mol 或大于0.1mol时,必须使用该在线冲洗选项。
清洗液配制: 90%水+10%异丙醇.该混合液可抑制菌类生长和减小水的表面张力。
以2-3滴/min 的速度虹吸流下，不能干涸。
For personal use only in study and research; not for comm ercial use3、为什么Agilent 1200LC的流动相管路非常细、为什么的流动相管路非常细? 的流动相管路非常细在使用HPLC时,应特别注意”柱外效应”对分析结果的影响，由于样品分子在液体流动相中的扩散系数比在气体中小4～5个数量级，液体流动相的流速也比 1-2 气相慢1 -2个数量级。
高效液相色谱仪组成及日常维护
减少死体积 防止填料的氧化
常用的脱气方法有： 抽真空脱气法： 特点：可以一次完成过滤和脱气任务 注意：抽真空会引起混合溶剂组分的
变化，适合单一溶剂体系
超声波脱气法 简单，但效果不理想
常用的脱气：
(1)使用新鲜配制的流动相，特别是水溶剂或盐缓 冲液建议不超过两天，最好每天更换
双柱塞往复式串联泵示意图
输液系统的辅助设备
主要有管道过滤器、脉动阻尼器、由 压力传感器组成的压力测量、显示装置， 以及流动相流量的测量装置
梯度洗脱装置 梯度洗脱技术可以提高柱效、缩短分
析时间，改善检测器的灵敏度，它类似于 GC种使用的程序升温技术
影响梯度洗脱的主要因素有：溶剂的 纯度、溶剂的互溶性、检测器的种类
二极管阵列检测器
紫外-可见光检测器光路示意图
光栅
氘灯
狭缝
光电二极管
流通池
可变波长紫外检测器
﹠ 选用氘灯作为光源，在190—600 nm 范围内可连 续调节，选择不同的波长检测
流动相的要求：
(4)pH的影响
高压输液泵和梯度洗脱装置
性能：①泵体材料耐化学腐蚀 ②能在高压下连续工作 ③ 输液流量范围宽
对填充柱：分析型输出流量为0.1~10 ml/min 制备型输出流量为1~100 ml/min
对微孔柱：分析型输出流量为10~1000 μl/min 制备型输出流量为1~9900 μl/min
吸光度∶ A = -log(T)= log(I0/I)
吸光度 ∶ A = abc
溶剂的影响
不同种类溶剂有其截止波长 溶剂的质量好坏对其截止波
长有影响 何为溶剂质量不好?
含紫外吸收的杂质 溶解在其中的氧气 缓冲液溶质的紫外吸收
高效液相色谱仪器维护和保养演示文稿
将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。先用水冲洗残留之溶剂然后 将过滤器放在装有浓硝酸 （35％）的烧杯里浸一小时。 用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器。建议不使用超声波清洗机清洗。 将过滤器重新装好。 建议定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶，每三个月至少清洗一次。 注意：不要使用没有安装溶剂过滤器的系统．可能会严重堵塞系统
Agilent 1100 泵头(Pump Head)结构图
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Holding/Lock Screw (PEEK)
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带有Seal Wash的泵头结构图
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Agilent 四元／二元/单元泵日常维护
如何更换溶剂出口过滤芯
Agilent 四元／二元/单元泵日常维护
严重污染的溶剂出口过滤芯
避免使用下述可腐蚀钢铁的 溶剂： 碱金属卤化物及其酸溶液(如：碘化锂、氯化钾等)。 高浓度无机酸，如硝酸、硫酸. 可能含有过氧化物的色谱纯醚(如THF、二氧六环、二丙基乙醚)。这些在 使用 前必须用干燥氧化铝过滤除去过氧化物。 含强络合剂的溶液(如EDTA，乙二胺四乙酸)。 四氯化碳与2-异丙醇或四氢呋喃的混合液。
泵的使用须知
当泵头安装有冲洗附件时，由于该附件中也有密封垫，这样就会增加活 塞杆运动时的阻力。所以开泵前一定要用10％异丙醇，并将其流速调至 约20滴/分钟使这溶液流过冲洗装置。
在线脱气机日常维护,故障诊断
防止堵塞溶剂过滤器
污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命， 并且影 响泵的运行。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液 (pH 4 至 7) 中尤其如 此。下 列建议将会延长溶剂过滤器的使用寿命并维持泵的运行。
使用灭过菌的溶剂瓶来减缓藻类生长。
液相色谱日常维护
VP
产品信息组
MAINTENANCE Press Func or VP
VP
维修信息组
VALIDATION Press Func or VP
VP
认证功能组
CALIBRATION Press Func or VP
校正功能组
PRODUCT INFO
设定 扫描起始波长
设定扫描终止波长
检测器参数设定
SCAN STEP Input 1 ~ 5 设定扫描波长步长
PLOT SPD 1: 1 2: 3 3: 10 nm/s
SPC PLOT Enter to Plot AUX RANGE Input 1 ~ 6
设定光谱输出速度
输出光谱图
设定积分仪输出端口 的量程
流速
最高压力
最低压力
输液泵辅助功能设定
0.000 FILE NUM Select File 0~9 选择文件
0.000 S－PROT 0: Clear 1: Set
0.000 MODE CHANG Enter to Change 0.000 P－SET 0: Clear 1: Set
设定系统保护
设定输液方式
降低柱压
保证检测稳定性
色谱柱
ODS柱的使用注意点：
1）柱压低于150kgf/cm2
2）柱温在40℃左右，最高使用温度为50℃
3）缓冲液PH使用范围为2～7
*硅胶在PH为3～4时稳定性最好 *碱浓度越低，流动相含水量越低，硅胶越稳定。
返回
检测器
HPLC常用检测器：
紫外检测器（包括二极管阵列检测器） 示差折光检测器 蒸发光检测器
高效液相色谱的日常使用及维护
液相维护
1.管路过滤器的检查及清洗，吸滤头及在线过滤器先用异 丙醇超声5~15min, 然后用甲醇超声5~15min，随后用双蒸 水超声5~15min，再用甲醇清洗超声5~15min，安装。
2.液相的清洗，一般使用4周以后，将系统在没有连接色谱 柱的条件下，依次用甲醇、异丙醇、甲醇、50%甲醇、甲 醇各冲洗1h。
7. 进样（六通阀）搬到LOAD位置时进针（在此位置将微量进 样器中的溶液注射到定量环）→打完针后搬到INJECT位置进样→ 取下微量进样器。进样针内不能有气泡；转动阀时速度要快；部 分装液法（最多75%）和完全装液法（3~5倍）；结束后冲洗。
高效液相色谱仪的一般使用方法
8.冲洗色谱柱：分析完毕后关闭检测器，用流动相冲洗一 段时间（溶剂量为10～15倍的柱体积），然后再用有机溶 剂冲洗。流动相中含有酸、缓冲盐、离子对时，使用完后应 先用无盐流动相（10%甲醇/乙腈）冲洗40~60min。之后 逐步增加有机溶剂比例进行冲洗（保证最后管路和色谱柱中 充满90%以上的甲醇或乙腈）。
常见的色谱问题——鬼峰、双峰
鬼峰——即使不进样也会出现的峰 原因：流动相脏或样品过量
双峰 柱效下降 过滤片部分堵塞 只有一个双峰——组分的共洗脱 样品与溶剂不匹配
常见的色谱问题——峰展宽
所有的峰都展宽 • 柱效降低 • 进样量大 • 高粘度流动相 • 样品与流动相不匹配
部分峰展宽 • 前次进样后流出的组分 • 大分子量样品
常见的色谱问题——基线噪音
1. 在流动相、检测器或泵中有空气(尖锐峰)：流动相脱气，冲 洗系统以除去检测器或泵中的空气。 2. 漏液：检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析 出和不正常的噪音。如有必要，更换泵密封。 3. 流动相混合不完全：用手摇动使混合均匀或使用低粘度的 溶剂。 4. 温度影响(柱温过高，检测器未加热)：使用柱温箱，减少温 度差异或加上热交换器。 5. 在同一条线上有其他电子设备(偶然噪声)：断开LC、检测 器和记录仪，检查干扰是否来自于外部，加以更正。 采用精 密级稳压电源。
高效液相色谱常见故障排除及维护保养
• a 、在不开UV检测器，工作站的前提下， 将其中一台泵接上蒸馏水作为流动相。
• b 、打开排空阀，用针筒抽出些流动相， 确认泵中已有该流动相，然后将针筒内 的液体排出，并重新接在排空阀上。
• c 、启动冲洗功能。流量3ml/min，时间 5min（注意：此时排空阀仍要打开，否 则将冲坏色谱柱）
故障排除
（3）如使用注射器 的手动进样器，需确 保进样操作重复；
（4）如使用自动进 样器需确保正确的进 样体积，注射器不含 空气，样品瓶有足够 的样品，系统不泄漏
（5）如手动进样器、 自动进样器都使用， 应确保系统的平衡
现象
判断 峰积分不正确
进样问题 准确度 降低 样品预处理时样
品降解或混入杂 质
检测池被污染或 用甲醇或其他强极性
有气体
的溶剂冲洗流通池
现象 判断
测定的波长选择 有误 基线漂 移
系统泄漏 样品中有强保留 的物质
故障排除
使用分光光度计说明 背景吸收，如背景值 高，说明流动相含有 紫外吸收化合物导致 基线漂移。使用的流 动相应在紫外截止波 长以外，或更换溶剂
检查并进行维修
用强度合适的溶剂清 洗色谱柱
系统泄漏
检查并进行维修
现象 判断
流动相脱气不够 充分
保留时
间不断 变化
室温变化
柱恒温箱设置有 误
故障排除
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂 使用柱温箱、将系统 置于恒温、空气对流 小的环境
设置正确的温度
10.基线漂移
现象 判断 系统不稳或没有 达到平衡
室温不稳
基线漂
移
流动相污染或分
7.鬼峰
现象
判断
液相色谱仪日常维护方法(pdf 10页)
b、 更 换 放 空 阀
C、 进 样 阀 漏 液
原因
解决方法
转子密封损坏
重新安装或更换进样阀
3
定量环阻塞 进样口密封松动 进样针头尺寸不合适 废液管中产生虹吸 废液管阻塞 D、 色 谱 柱 漏 液
原因 尾端接头松动 卡套内有填料 筛板厚度不合适
筛板选择指导 物质粒径
3-4u 5-20u E、 检 测 器 漏 液
J. W. Dolan, “Troubleshooting”, LC/GC Magazine. This is a monthly discussion.
1
二、压 力 异 常
操作压力的变化往往是故障的征兆。从下表中找出所观察到的现象，并在
右侧的列表中参考相应的解决方法。
A、 没 有 压 力 显 示 ， 没 有 流 动 相 流 动
份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能
解 决 漏 液 的 问 题 ， 就 必 须 将 接 头 取 下 ， 检 查 是 否 损 坏 (例 如 ， 卡 套 损 坏 、 密 封 表
面 有 杂 质 )； 损 坏 的 接 头 应 该 更 换 掉 。
A、 接 头 处 漏 液
原因
解决方法
液相色谱仪日常维护办法
一、介 绍
怎样确定和解决故障 解决 HPLC 存在的故障应该从判断故障所在开始。本手册将从五个方面帮
助您快速找到故障所在。 压力异常 漏液 谱图问题 进样阀问题 其它由气味、现象和声音可以判断的问题。 将问题解决后，请将方法记录下来，以备将来参考。
前期维护 许多液相色谱的故障通过日常维护一般都是可以避免的。例如：定期的更
见列表 A、B
见列表 D
解决方法
液相色谱仪维护保养记录
□更换聚四氟乙烯滤芯□DAD/UV检测器检查
□更换色谱柱□清洗流路
□更换流通池□荧光检测器检查
□更换PEEK管线□清洗溶剂入口滤芯
□更换不锈钢管线□仪器断电清洁
□更换聚四氟乙烯滤芯□DAD/U设备型号/名称：编号：
时间
保养内容
保养人
备注
□更换色谱柱□清洗流路
□更换流通池□荧光检测器检查
□更换PEEK管线□清洗溶剂入口滤芯
□更换不锈钢管线□仪器断电清洁
□更换聚四氟乙烯滤芯□DAD/UV检测器检查
□更换色谱柱□清洗流路
□更换流通池□荧光检测器检查
□更换PEEK管线□清洗溶剂入口滤芯
□更换不锈钢管线□仪器断电清洁
□更换聚四氟乙烯滤芯□DAD/UV检测器检查
□更换色谱柱□清洗流路
□更换流通池□荧光检测器检查
□更换PEEK管线□清洗溶剂入口滤芯
□更换不锈钢管线□仪器断电清洁
□更换聚四氟乙烯滤芯□DAD/UV检测器检查
□更换色谱柱□清洗流路
□更换流通池□荧光检测器检查
□更换PEEK管线□清洗溶剂入口滤芯
□更换不锈钢管线□仪器断电清洁
□更换聚四氟乙烯滤芯□DAD/UV检测器检查
□更换色谱柱□清洗流路
□更换流通池□荧光检测器检查
□更换PEEK管线□清洗溶剂入口滤芯
□更换不锈钢管线□仪器断电清洁
□更换聚四氟乙烯滤芯□DAD/UV检测器检查
□更换色谱柱□清洗流路
□更换流通池□荧光检测器检查
□更换PEEK管线□清洗溶剂入口滤芯
高效液相色谱仪的日常维护及常见故障
【 中图分类号】 Ｒ １ ９ ７ ． ３ ９
一
【 文献标识码】 Ａ
【 文章编号】 １ ｏ ０ ７ — ４ ２ ４ ４ （ ２ ｏ １ ４ ） １ １ — ４ ９ ４ — １
脱气 ， 如仍有气泡不断从 过滤器 冒出， 继续将过滤器浸泡于５ ％硝 酸溶液 中 ， 如没有气泡不断从 过滤器中 冒出， 说 明过滤器内部的 霉菌菌 团已被硝酸破坏 ， 流动相可以流 畅地通过过滤器。打开泄 压阀， 打开泵 ， 流速调至 １ ． ０～３ ． ０ ｍ ］ ／ ｍ ｉ ｎ ， 纯水 冲洗过 滤器 １ 小时左 右。即可将过滤器清洗干净 。关闭 阀， 纯 甲醇 冲洗半小时即可 。 （ 二） 柱压高 原 因： （ １ ） 缓冲液盐分如 （ 乙酸铵 等） 沉 积于柱 内 ； （ ２ ） 样品污染
理论前 沿 ２ ０ １ ４ 年 第１ １ 期
高效液相色谱 仪的 日常维护及 常见故 障
王 媚
（ 陕西 中医学院药学院 ，陕西 咸 阳 ７ １ ２ ０ ４ ６ ） 【 摘 要】 本文介 绍 了高效液相 色谱仪 的 日常维护和保养 ， 总结 了在使 用过程 中出现的常见故 障和解决 办法。 【 关键词】 高校 液相 色谱仪 ； 日常维护 ； 故障
沉积 。
高效液相色谱仪的工作原理 高效液相色谱仪ｆ Ｈ ｉ ｇ ｈ ｐ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ ｍ ａ ｎ ｃ ｅ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ， 简称 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ） ， 由输 液系统 、 进样系统 、 分离系统、 检测 系统和色谱数 据 处理系统五部分组成 。待测样 品经前处理后 ， 加入进样器 ， 由高 压输液泵将流动相泵人装有填充剂 的色谱柱 ，经柱 内进行分离 后， 各成分先后进入检测器 ， 再经色谱数据处理系统获得待测样 品的相关数据和色谱图。 二、 高效液相色谱仪 的日常维护 高效液 相色谱 仪主要 由贮液器 ， 泵， 进样器 ， 色谱柱 ， 检测 器， 工作站等几部分组成 。因此 ， 日常维护工作 即可从这几个 主
高效液相色谱的日常使用和维护
高效液相色谱的日常使用和维护高新科技与现代产业的迅猛发展，促进了以高效液相色谱（HPLC）为代表的复杂样品的分离分析和分离纯化仪器的飞速发展。
HPLC以它定量分析结果准确、分析周期短、分析范围广、分析检测限低等优势，在食品添加剂、药物成分分析等多领域得到了广泛的应用。
高效液相色谱仪是一种高端检测仪器，它精密快速，有效准确检测的同时就要求我们一定要严格正确使用仪器，定期科学有效地维护仪器，只有这样仪器才能长久持续有效使用。
但是从目前实际使用情况看，与高效液相色谱仪的应用及产品技术升级的发展速度相比，其使用和维护则相对比较滞后，从而造成对仪器的滥用和对耗材不必要的浪费。
主要原因是由于对于仪器使用操作者的培训侧重于仪器的初步使用，忽略了仪器的后续培训及维护操作学习；其实很多高效液相色谱都是国外进口仪器，英文版本软件对于大多数理工科毕业的仪器操作者也是一个障碍。
笔者根据自己的工作经验，以岛津LC-20AT液相色谱仪为例，阐述液相色谱仪在使用时应注意的几个问题及日常使用后的仪器维护基本事项，并对仪器使用过程中容易遇到的问题进行分析，提出解决方法。
1、高效液相色谱仪的组成高效液相色谱仪主要是由输液系统、进样器、色谱柱、检测器和色谱软件数据处理系统组成。
1.1输液系统输液系统主要包括溶液贮器、在线脱气装置、高压输液泵、梯度洗脱装置。
溶液贮器用于存放符合HPLC要求的流动相。
在线脱气装置主要功能是流动相在进入柱子前排除气泡。
高效液相色谱柱的填料颗粒较小，通过2～5mm的色谱柱受到的流动阻力很大，因此需要通过高压输液泵抽取流动相输送至色谱柱。
高压泵按输液性能可分为恒压泵和恒流泵两种。
按机械结构又可分为液压隔膜泵、气动放大泵、螺旋注射泵和往复柱塞泵四种，前两种为恒压泵，后两种为恒流泵。
恒压泵可以输出稳定不变的压力。
在一般的分析仪器中，由于系统阻力不变，恒压亦可达到恒流的效果。
但是当系统阻力发生变化时，输入压力即使不变，流量却可随阻力而变化。