家庭环境无菌培养简易白芨组培培育方法

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家庭组织培养

植物的组织培养没有最基本的条件和物品是搞不成的,当时合理的利用一些最简单的用具也并非无法办到。

一、最必需的物品

1、.家用高压锅 1个最好大一点的,装的东西多一点。用于培养基、无菌水等的消毒

2、接种箱(无菌箱)1个,需要自己自制,用一些木板和一块玻璃和二尺布料。用于接种和转移。

3、药用天平1架最好是500g称量的,小一点也可以,主要用来称琼脂、糖等物品。

4、不锈钢锅或铝锅(煮汤、面条的那种)买。用于煮制培养基用的。

5、搅拌和分装培养基用的调羹一个,用于煮制和分装培养基。

6、培养用的瓶子若干,

7、制棉塞用的棉花、纱布和线若干,用于做瓶口的塞子,要注意的是,棉花要使用普通做棉衣的棉花,不要用医院用的脱脂棉,这样容易穿塞污染。

8、牛皮纸、橡皮圈若干,用于包瓶头和扎包头纸用。

9、酒精灯1盏、解剖刀1把,刀片若干、镊子2把、10ml、100ml

量筒各一个,2ml移液管1只、药棉若干。

二、怎样解决蒸馏水和基本药品

培养基的用水在一般人的心目总是觉的十分重要的,其实是多余的担

心。冷开水、清洁的河水都是给以用的,并不影响培养的效果。市场上出售的纯净水更是一般培养基理想的用水。最常用、最必要、用量最大的只需购买以下几种就行了。

1、MS培养基的大量元素(家庭或所谓袖珍组培室的培养一般采用MS 基就可以了。)共5种。也可以买市售的MS培养基

(1)、硝酸铵

(2)、硝酸钾

(3)、氯化钙

(4)、硝酸镁

(5)、磷酸二氢钾

2、酒精

3、精密试纸(PH 5.4-7.0)

4、漂白粉或漂白精

5、琼脂

6、白糖

7、福尔马林

8、高锰酸钾(可以到医院或药材商店去买)

9、微量元素、铁盐、维生素类以及激素类药品应用量极少。比如一些激素、维生素类的药品及有针剂也有片剂,他们都有比较准确的含量,你可以去按你的需要去配制比例。

爱好者在家庭环境下进行组织培养的探讨与建议植物组织培养技术,

尤其是快速繁殖,并非只有专业人员和专业实验室才能够完成的。作为对多肉植物和组织培养有着浓厚兴趣的爱好者,在充分利用家庭条件的基础上,同样可以制备出自己的试管苗来的。在我们进行多肉植物的栽培中认识到,一些比较名贵的园艺品种,比如:万象、玉扇、寿、高纹鹰爪等十二卷属品种,还是缤纷橄榄、何鲁牵牛等块茎类植物,甚至于星球属、岩牡丹属等等,这些植物的常规繁殖系数很低,他们都可以采用组织培养来解决其繁殖问题,并且可以得到相当数量的幼苗。对于奇想天外等种子萌发困难的植物,同样可以借助组织培养来进行无菌播种。在进行组织培养过程中,不但可以对培养的植物有更深一层的认识,对常规的栽培有着相当大的意义。许多搞组织培养的专家,最初都不是专业学组培的,就是凭着兴趣和探索精神取得辉煌成绩的。关键是,爱好者有着浓厚的兴趣,非凡的观察力和细致入微的操作,这些都可以弥补非专业的缺陷,并且可以充分利用日常生活中的各种可利用资源,这些就足以让爱好者在家庭环境下完成组织培养了。同时这也不仅仅满足了自己的兴趣,还可以有一定的经济收益,甚至可以有所创新和发明。

一、如何解决场地和基本设备:

进行组织培养,没有一定的设备是无法开展的。正规实验室的组织培养设备是昂贵的,不适合家庭消费,但如果能有途径买到廉价的实验室设备,那就在好不过了。如果没有办法搞到实验室设备,就不妨动手自己制作一些简单的设备。

1.无菌操作的主要设备——接种箱和压力锅:

接种箱:植物组织培养的主题操作需要在一个相对密闭的无菌环境中进行。那么说我们首先要创造一个密闭的环境,可以利用一些木料、塑料板、有机玻璃、铝合金骨架等等廉价的材料,动手粘合一个小巧的接种箱。具体的参数可以找一本“食用菌栽培”的书籍,模仿种蘑菇的接种箱做一个即可。需要注意的是,组织培养的接种箱的密闭性要求比较高,尽量避免腐朽的木材和易生锈的材料,箱子的顶端按放两盏灯:20w的紫外线灯和20w的日光灯。箱体的周边尽量采用玻璃材料,因为这样便于观察,有时候接种箱还可以借用为培养箱,周边采用玻璃材料更方便于观察和培养。

高压锅:主要用来对培养基和其他材料的灭菌。在实验室通常使用医用高压灭菌器,然而在家庭要充分利用厨房使用的高压锅,高压锅的压力要低于灭菌器,但是适当延长灭菌时间,还是可以取得较好的效果的。比如:对培养基灭菌40分钟就基本上可以达到灭菌效果(灭菌器是20分钟);无菌水采用间歇灭菌法,先用高压锅压40分钟,放置24小时,再压20分钟即可达到效果。

2.场地:

这个就因人而易了,总体的要求就是进行组织培养操作的地方要尽量无尘,减少空气流动,最好有一定的阳光。比如书房、写字间都可以用来进行无菌操作。

进行培养基的配制可以借用一下厨房,但所使用的器具必须和厨具分开。一般说,组织培养中的几乎全部化学物质对人体是无害的,除了少数激素类物质和灭菌剂。对于有毒害的物质,需要认真保管,以免

发生危险。

3.辅助设备:

主要指冰箱,它是用来储存化学物质和培养基的。天平,可以采用感量在100克的托盘天平,甚至用中药的药衡都可以代替。培养架,这个就更简单了,采用铝合金-玻璃的培养箱既可以满足要求,如果日光不足,可配合日光灯补光等。

4.化学试剂:

化学试剂是不可缺少的,因为组织培养的核心就是培养基的成分,而并不是简单的无菌操作。一些用量较大的化学物质是有必要买的,比如大量元素(硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙等)、高锰酸钾、甲醛、酒精、白砂糖、琼脂等等。微量元素和有机复合物不需要购买,因为它们的用量很小,我们可以用蔬菜浸汁或者马铃薯浸汁来代替。激素是必不可少的,他们的称量需要借助分析天平,但这是家庭条件所不允许的,如果有条件可以借助关系单位代替配成母液,每次取一些使用即可。最好的办法是到农资商店(卖农药化肥的地方),它们一般出售农业用的激素,有的是用安瓿装的,按照一定的比例加入到培养基当中即可。近几年来,有些化学品公司开始生产植物组织培养基原粉,只需要称取一定量加水即可,很方便。比如泛生化学品公司生产的ms原粉,只需要称量40克,加1升水,用微波炉加热5分钟即可分装,相当简便。

消毒剂通常采用氯化汞(剧毒),如果不容易搞到,可以用漂白粉代替。

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