石碳酸复红染色液
实验室常用染色液
他用来染细胞质时, 能把 胶 胚胎材料等。
刚果红 可以跟苏 所以洗涤和脱水 处理要迅速。
三、常用染料介绍 (一)天然染料1、苏木精苏木精是从南美的苏木 (热带豆科植物) 干枝中用乙醚浸制出来的一种色素, 是最常用的染 料之 一。
苏木精不能直接染色, 必须暴露在通气的地方, 使他变成氧化苏木精 (又叫苏木素) 后才能 使用,这叫做“成熟” 。
苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力 愈强。
被染材 料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒 染剂。
常用的媒染剂 有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体, 易溶于酒精, 微溶于水和甘油, 是染细胞核的优良 材 料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因处理的情 况而异, 用酸性溶液 (如盐酸—酒精) 分化后呈红色, 水洗后仍恢复青蓝色, 用碱性溶液 (如 氨水)分 化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。
2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末, 提取出虫红,再用明 矾处 理,除去其中杂质, 就制成洋红。
单纯的洋红不能染色, 要经酸性或碱性溶液溶解后才 能染色。
常 用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料, 染色的标本不易褪色。
用作切片或组织块染都适宜, 尤其适宜于 小型 材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后 再用。
(二)人工染料人工染料, 即苯胺染料或煤焦油染料,种类很多, 应用极广。
它们的缺点是经日光照射容易 褪 色,苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。
在制片中注意掌握酸碱度,并避免日光直射,也 能经几年不 褪色。
1、酸性品红 酸性品红是酸性染料,呈红色粉末状,能容于水,略溶于酒精(0.3% )。
他是良好的细胞制染色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
常用染色液的配制
常用染色液的配制1.染料饱和酒精溶液的配制配制染色液常先将染料配成可长期保存的饱和酒精溶液,用时再予以稀释配制。
配制饱和酒精溶液,应先用少量95%酒精先在研钵中徐徐研磨,使染料充分溶解,再按其溶解度加于95%酒精之中,贮存于棕色瓶中即可。
附表1 几种常用染料在95%酒精中的溶解度(26℃)染料名称美蓝结晶紫龙胆紫碱性复红沙黄溶100mL95%酒精中的重量(g) 1.4813.8710.003.203.412.常用染色液的配制(1)碱性美蓝(亦称骆氏美蓝)染色液:取美蓝饱和酒精溶液30ml,加入0.01%氢氧化钾水溶液l00mL,混合即成。
此染色液在密闭条件下可保存多年。
若将其在瓶中贮至半满,松塞棉塞,每日拔塞摇振数分钟,并不时加水补充失去的水分,约1年后可获得多色性,成为多色美蓝染色液。
(2)草酸铵结晶紫(亦称赫克结晶紫)染色液:取结晶紫饱和酒精溶液2mL,加蒸馏水18mL稀释10倍,再加入1%草酸铵水溶液80mL,混合过滤即成。
(3)革兰氏碘溶液:将碘化钾2g置乳钵中,加蒸馏水约5mL。
再加入碘片1g,予以研磨,并徐徐加水,至完全溶解后,注入瓶中,被加蒸馏水至全量为300mL即成。
此液可保存半年以上,当产生沉淀或褪色后即不能再用。
(4)沙黄水溶液:沙黄也称番红花红。
将沙黄饱和酒精溶液以蒸馏水稀释10倍即成。
此液保存期以不超过4个月为宜。
(5)石炭酸复红染色液:取3%复红酒精溶液10mL,加入5%石炭酸水溶液90mL混和过滤即成。
(6)稀释石炭酸复红染色液:将石炭酸复红染色液以蒸馏水稀释10倍即成。
(7)3%盐酸酒精(亦称含酸酒精):加浓盐酸3mL于95%酒精97mL中即成。
(8)瑞士染色色液:取瑞氏染料0.1g置乳钵中,徐徐加入甲醇,研磨以促其溶解。
将溶液倾入有色中性玻瓶中,并数次以甲醇洗涤乳钵,亦倾入瓶内,最后使全量为60mL即可。
将此瓶置暗处过夜,次日滤过即成。
此染色液须置于暗处,其保存期约为数月。
石炭酸复红染液(苯酚品红染液)
石炭酸复红染液(苯酚品红染液)
货号:G1160
规格:100ml/500ml
保存:室温密封保存,有效期12个月。
产品说明:
石炭酸复红染色液又称苯酚品红染色液。
该染色液与醋酸洋红有相似之处,醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料,常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。
生物学上也常用石炭酸复红染色液作观察细胞分裂时染色体形态的染色剂。
染色体染色时用醋酸洋红染色液染色,虽然染色效果较好,但却存在着染色需时较长的问题。
石炭酸复红染色液常用于植物组织的压片法和涂片法,染液稳定,主要用于染色体染色如体细胞染色体和减数分裂染色,是很好的细胞核、线粒体染色剂。
使用步骤(仅供参考):
1.固定将经过预处理或没有预处理的材料,放到卡诺氏固定液(3份甲醇:1份冰乙酸)中固定2~24h,再分别在95%和85%乙醇中各30min,再转入70%酒精中,可4℃保存备用。
2.解离取固定好的植物组织,用蒸馏水漂洗2~3次,放入1N HCl溶液中60℃水解8~12min,再用蒸馏水洗净。
3.染色将组织放在载玻片中央,用镊子或解剖针将材料轻轻捣碎。
滴加苯酚品红染液,染色8~15min 后,盖上盖玻片。
4.压片在盖玻片上面铺上滤纸,固定好盖玻片,用拇指垂直压片,然后用铅笔的橡皮头轻轻均匀地敲打盖片,至肉眼见材料呈雾状即可,使细胞核染色体分散。
5.镜检观察显微镜下观察染色形态和计数,对典型分裂相细胞进行摄影记录。
注意事项:
组织4℃保存时间最好不超过二个月。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴手套操作。
抗酸染色操作规程
抗酸染色操作规程
1.目的
规范抗酸染色操作规程,确保染色结果清晰可靠。
2、原理
分枝杆菌细胞壁含脂质较多,其中主要成分为分枝菌酸,此物具有抗酸性,染色时与石炭酸复红结合牢固,能抵抗酸性乙醇的脱色作用,因此抗酸菌能保持复红的颜色,达到染色目的。
3、范围
用于抗酸性细菌(结核、麻风分枝杆菌)初步鉴定
4、质量控制
龟分枝杆菌ATCC93326做染色阳性,大肠埃希菌ATCC25922为染色阴性对照。
5、试剂
5.1石炭酸复红
碱性复红 10g 95,酒精 100ml 5,石炭酸 900ml (边加边研磨) 5.2盐酸脱色液(3,盐酸酒精)
浓盐酸 3ml 95,酒精 97ml
5.3吕氏美兰
美兰 0.3g 95,酒精 30ml 蒸馏水 70ml 10,KOH水溶液 0.1ml 复染液 6、工作程序
6.1制片:待检标本用无菌生理盐水涂片,经自然干燥后用火焰固定。
6.2初染:加石炭酸复红溶液,徐徐加热至有蒸汽出现,切不可沸腾。
反复染5分钟,清水冲洗。
6.3脱色:加盐酸脱色液,不时摇动玻片至无红色脱落为止,清水冲洗。
6.4复染:加美蓝复染,染0.5-1分钟,清水冲洗。
6.6待涂片自然干燥后,油镜镜检。
7、结果判断
结核杆菌呈红色,其它细菌呈蓝色
8、注意事项
染液注意密封,以免凝结产生沉淀影响使用效果。
体液标本均应离心后取下层沉淀液与染液混合,以提高检出率。
提高责任心,做到全片检查。
细菌的染色方法
细菌的染色方法细菌的染色方法主要有革兰氏染色,抗酸色法和特别染色法(包括英膜染色法,芽抱染色法, 鞭毛染色法)1.革兰氏染色法:1)器材:金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,结晶紫染液,革兰氏碘液,0.4 %复红乙醇液,接种环,泗精灯,载玻片等。
2)方法:先制片,接着染色。
(1 )结晶紫染液染色1分钟,水冲洗;(2 )革兰氏碘液色1分钟;水冲洗;(3 ) 0.4 %复红乙醇液染色3秒钟,水冲洗,吸纸吸干后镜检。
2.抗酸染色法:1)器材:卡介苗与大肠杆菌和葡萄球菌的混合菌液,石炭酸复红,3 %的盐酸酒精,碱性美兰染液,接种环,酒精灯,载玻片等。
2)先制片一,接着染色。
(1 )石炭酸复红染液先沸水浴1 0分钟,滴加2 一3滴掩盖菌膜染色5分钟,水冲洗;(2 )3 % 的盐酸酒精脱色3 0秒钟,水冲洗;(3 )碱性美兰复染3。
秒钟,水冲洗,吸水纸吸干后镜检.3.芽抱染色法:1)器材:破伤风杆菌厌氧培育物,5 %孔雀绿水溶液,0.5 %沙黄水溶液,载玻片,酒精灯等。
2)先制片,接着染色。
(1 )加孔雀绿染液2 — 3滴于小试管中,并使其与菌液混合匀称,然后将试竹放厂沸水浴的烧杯中,加热染色15分钟:(2 )涂片、固定:(3 )水冲洗,至到流出的水无绿色为止;(4)用0.5 %沙黄液复染2分钟,弃去多余的染液,吸水纸吸干镜检(此步骤不用水冲洗)。
4荚膜染色法:1)器材:肺炎球菌(小鼠腹腔液),石炭酸复红,9 5 %的乙醇,2 0 %鞅酸水溶液,0.8 %孔雀绿水溶液。
2)方法:(1 )石炭酸复红染色1分钟,水冲洗:(2)95 %乙醇短暂脱色(几秒钟为宜),水冲洗(3 ) 2 0 %糅酸溶液染色1 0分钟,水冲洗;(4 ) 0.8 %孔雀绿溶液染色1分钟,水冲洗,吸水纸吸干后镜检。
5.鞭毛染色法(镀银染色法)1)器材:变形杆菌新奇菌液,镀银染色法1液(糅酸5克,5 0%氯化铁2. 0ml, 1.5 %甲醛2. 0 ml, 1 %氢氧化钠1. 0 ml,蒸储水100 nd),糅银染色法2液(2 %硝酸银溶液,少量氨水) 2)方法:(1 )糅银染色1液染色5分钟,水冲洗;(2 )糅银染色法2液染色1分钟,水冲洗,吸纸吸干后镜检。
实验用染色液的配制
实验用染色液的配制1.黑色素液水溶性黑素10g,蒸馏水100mL, 甲醛(福尔马林)0.5mL。
可用作荚膜的背景染色。
2.墨汁染色液国产绘图墨汁40mL,甘油2mL,液体石炭酸2mL。
先将墨汁用多层纱布过滤,加甘油混匀后,水浴加热,再加石炭酸搅匀,冷却后备用。
用作荚膜的背景染色。
3.吕氏(Loeffier)美蓝染色液A液:美蓝(methylene blue, 又名甲烯蓝)0.3g, 95%乙醇30mL;B液:0.0l% KOH l00mL。
混合A液和B液即成,用于细菌单染色,可长期保存。
根据需要可配制成稀释美蓝液,按1:10或1:100稀释均可。
4.革兰氏染色液(1)结晶紫(crystal violet)液:结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸铵水溶液80mL 将两液混匀置24h后过滤即成。
此液不易保存,如有沉淀出现,需重新配制。
(2)卢戈(Lugol)氏碘液:碘1g,碘化钾2g,蒸馏水300mL。
先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,然后加入碘使之完全溶解,再加蒸馏水至300mL即成。
配成后贮于棕色瓶内备用,如变为浅黄色即不能使用。
(3)95%乙醇:用于脱色,脱色后可选用以下(4)或(5)的其中一项复染即可。
(4)稀释石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱和液(碱性复红1g, 95%乙醇l0mL, 5%石炭酸90mL混合溶解即成碱性复红乙醇饱和液),取石炭酸复红饱和液l0mL加蒸馏水90mL即成。
(5)番红溶液:番红O(safranine,又称沙黄O)2.5g, 95%乙醇100mL,溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中,用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。
以上染液配合使用,可区分出革兰氏染色阳性(G+)或阴性(G-)细菌,G-被染成蓝紫色,G+被染成淡红色5. 鞭毛染色液A液:丹宁酸5.0g, FeCl3 1.5g,15%甲醛(福尔马林)2.0mL,l%NaOH 1.0mL,蒸馏水l00mL;B液:AgNO3 2.0g, 蒸馏水100mL。
实验室常用染色液和试剂配方
实验室常用染色液和试剂配方【很全】实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
石碳酸复红染色法原理
石碳酸复红染色法原理
石碳酸复红染色法是一种用于检测组织学样本中骨质矿化的方法。
这种染色方法的原理基于石碳酸钙与铵铁氰化钾在酸性条件下的化学反应。
以下是石碳酸复红染色法的原理:
1. 制备染色溶液:制备石碳酸染色液,通常是将石碳酸钙和铵铁氰化钾混合在适当的溶剂(如酒精)中。
2. 染色过程:组织学样本通常需要脱水、浸蜡等步骤处理后,将其切成薄片,然后将薄片浸入染色溶液中。
3. 化学反应:在酸性条件下,石碳酸钙会与铵铁氰化钾发生化学反应,形成蓝色的沉淀物,该沉淀物与钙盐结合形成复合物,从而显示出骨组织的钙盐沉积。
4. 洗涤和固定:经过染色后,样本需要进行洗涤去除多余的染色剂,然后进行固定和脱水等后续处理步骤。
5. 显微镜观察:最后,用显微镜观察染色后的组织学样本,可以通过观察沉积物的形态和位置来评估骨组织的矿化情况。
这种染色方法对骨组织中的钙盐沉积有很好的特异性,可以帮助研究者评估骨骼的矿化程度和骨组织的健康状况。
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实验室常用染色液
三、常用染料介绍(一)天然染料1、苏木精苏木精是从南美的苏木(热带豆科植物)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一。
苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。
苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。
被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。
常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优良材料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。
2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末,提取出虫红,再用明矾处理,除去其中杂质,就制成洋红。
单纯的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。
常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料,染色的标本不易褪色。
用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。
(二)人工染料人工染料,即苯胺染料或煤焦油染料,种类很多,应用极广。
它们的缺点是经日光照射容易褪色,苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。
在制片中注意掌握酸碱度,并避免日光直射,也能经几年不褪色。
1、酸性品红酸性品红是酸性染料,呈红色粉末状,能容于水,略溶于酒精(0.3%)。
他是良好的细胞制染色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
他跟甲基绿同染,能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用,所以染色过度,易在自来水中褪色。
2、刚果红刚果红是酸性染料,呈枣红色粉末状,能溶于水喝酒精,遇酸呈蓝色。
染色液的配制
染色液得配制一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液A液:美蓝(methylene blue) 0.6g95%酒精 30mlB液:KOH 0.01g蒸馏水 100ml分别配制A液与B液,配好后混合即可。
二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(basic fuchsin) 0.3g95%酒精 10mlB液:石炭酸 5.0g蒸馏水 95ml将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解,配成A液。
将石炭酸溶解于水中,配成B液。
混合A液及B液即成。
通常可将此混合液稀释5—10倍使用,稀释液易变质失效,一次不宜多配。
三、革兰氏(Gram)染色液1.草酸铵结晶紫染液A液:结晶紫(crystal violet) 2g95%酒精 20mlB液:草酸铵(ammonium oxalate) 0.8g蒸馏水 80ml混合A、B二液,静置48小时后使用。
2.卢戈氏(Lugol)碘液碘片 1.0g碘化钾 2.0g蒸馏水 300ml先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液中,待碘全溶后,加足水分即成。
3.95%得酒精溶液。
4.番红复染液番红(safranine O) 2.5g95%酒精 100ml取上述配好得番红酒精溶液10ml与80ml蒸馏水混匀即成。
四、芽孢染色液1.孔雀绿染液孔雀绿(malachite green) 5g蒸馏水 100ml2.番红水溶液番红 0.5g蒸馏水 100ml3.苯酚品红溶液碱性品红 11g无水酒精 100ml制法取上述溶液10ml与100ml5%得苯酚溶液混合,过滤备用。
4.黑色素(nigrosin)溶液水溶性黑色素 10g蒸馏水 100ml称取10g黑色素溶于100ml蒸馏水中,置沸水浴中30分钟后,滤纸过滤二次,补加水到100ml,加0.5ml甲醛,备用。
五、荚膜染色液1.黑色素水溶液黑色素 5g蒸馏水 100ml福尔马林(40%甲醛) 0.5ml将黑色素在蒸馏水中煮沸5分钟,然后加入福尔马林作防腐剂。
石碳酸复红染色液
石炭酸复红染色液简介:石炭酸复红染色液与改良苯酚品红染色液不同。
石炭酸复红染色液主要由石碳酸、碱性品红等组成,主要用于痰涂片或拭子结核杆菌染色和革兰氏染色,较少单独使用。
改良苯酚品红染色液又称卡宝品红(Carbol fuchsin)染色液,主要由苯酚、碱性品红、山梨醇、氧化剂等组成,常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。
Leagene 石炭酸复红染色液主要用于抗酸杆菌染色和革兰氏染色中,亦可单独使用。
组成:自备材料:1、 载玻片、盖玻片2、 自来水3、 光学显微镜操作步骤(仅供参考):(一)抗酸染色:1、 接种环挑取待检样本,涂布于载玻片上,自然干燥。
2、 滴加石碳酸复红染色液,染色。
不必加热,蒸馏水冲洗。
3、 用脱色液脱色至无红色为止。
蒸馏水冲洗。
4、 用亚甲基蓝染色液染色。
蒸馏水冲洗。
5、 轻轻吸干水分,自然干燥。
6、 油镜镜检。
(二)石蜡切片染色:1、 石蜡切片脱蜡至水。
2、 滴加石碳酸复红染色液,染色。
流水稍洗。
3、 盐酸乙醇分化。
流水稍洗。
4、 直接二甲苯透明,树胶封片。
注意事项: 编号 名称 DM0090 Storage 石炭酸复红染色液 100ml RT 避光 使用说明书 1份1、染色结束后,应立即显微镜下观察。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:18个月有效。
相关:编号名称DC0032 Masson三色染色液DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)DG0005 糖原PAS染色液DM0016 增强革兰氏染色液DM0035 抗酸染色液(Kinyoun冷染法)PW0053 Western抗体洗脱液(碱性)TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。
生物学常用染色液汇总
常用染料介绍(一)天然染料1、苏木精苏木精是从南美的苏木(热带豆科植物)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一。
苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。
苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。
被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。
常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优良材料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。
2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末,提取出虫红,再用明矾处理,除去其中杂质,就制成洋红。
单纯的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。
常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料,染色的标本不易褪色。
用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。
(二)人工染料人工染料,即苯胺染料或煤焦油染料,种类很多,应用极广。
它们的缺点是经日光照射容易褪色,苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。
在制片中注意掌握酸碱度,并避免日光直射,也能经几年不褪色。
1、酸性品红酸性品红是酸性染料,呈红色粉末状,能容于水,略溶于酒精(0.3%)。
他是良好的细胞制染色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
他跟甲基绿同染,能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用,所以染色过度,易在自来水中褪色。
2、刚果红刚果红是酸性染料,呈枣红色粉末状,能溶于水喝酒精,遇酸呈蓝色。
实验二细菌抹片的制备及染色
实验二细菌抹片的制备及染色目的要求1.掌握细菌抹片的制备方法和几种常用的染色方法。
2.认识革兰氏染色的反应特性。
操作步骤染色是细菌学上一个重要而基本的技术。
由于细菌个体微小,且半透明,如不经染色往往不易识别。
因此,借助于染色法可使细菌着色,与背景形成鲜明的对比,便于在显微镜下进行观察。
也可根据不同的染色反应,作为鉴别细菌的一种依据。
一、载玻片处理载玻片应清晰透明,清洁而无油渍,滴上水后,能均匀展开,附着性好,如有残余油渍,可按下列方法处理。
(一)滴上95%酒精2~3滴,用清洁纱布擦拭,然后以钟摆速度通过酒精灯焰3~4次。
(二)若上法仍未能除去油渍,可再滴上1~2滴冰醋酸,用纱布擦净,再在酒精灯火焰上轻轻拖过。
玻片洁净后,用玻璃铅笔在预涂材料处的背面划一个直径1.5cm的圆圈,用以标记。
二、涂片方法(一)菌落涂片方法涂片时,左手握菌种管,右手持接种环(又称铂金耳)取1~2环生理盐水,置于载玻片上,然后将接种环在火焰上灭菌,待冷后,从菌种管内钓取少许菌落,置于生理盐水中混匀,涂成直径1.5cm的涂膜,此膜既薄又均匀为好,待干即成。
(二)菌液涂片法用灭菌接种环沾取菌液(液体培养物、血清、乳汁、组织渗出液等)1~2接种环,均匀涂抹在载玻片上,使成直径为1.5cm左右圆形或椭圆形涂膜,自然干燥后备用。
(三)血液涂片方法先取一张干净无油垢边缘整齐的载玻片,其一端沾取少许血液,以45度角放在另一张干净无油垢的载玻片一端,从这端向另一端推成薄而均匀的血膜,待干后备用。
(四)组织涂片方法先用镊子夹持组织局部,然后以灭菌剪刀剪取一小块,夹出后以其新鲜切面在载玻片上压印或涂成一薄层。
三、干燥涂片最好在室温中自然干燥。
必要时,可将标本面向上,在离酒精灯火焰远处烘干,切勿紧靠火焰,以免标本糊焦而不能检查。
四、固定有两种固定方法(一)火焰固定将已干燥好的抹片,使涂面向上,以钟摆速度通过酒精灯火焰四次,使固定后的标本触及皮肤时,稍感烧烫为度。
实验室常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffl er)美蓝染色液A液:美蓝(Methyl ene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basicfuchsi n) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclke r改订)A液:结晶紫(Crysta i violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘 1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safran in O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malach ite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigros in) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congored)2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
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北京雷根生物技术有限公司
石炭酸复红染色液
简介:
石炭酸复红染色液与改良苯酚品红染色液不同。
石炭酸复红染色液主要由石碳酸、碱性品红等组成,主要用于痰涂片或拭子结核杆菌染色和革兰氏染色,较少单独使用。
改良苯酚品红染色液又称卡宝品红(Carbol fuchsin)染色液,主要由苯酚、碱性品红、山梨醇、氧化剂等组成,常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。
石炭酸复红染色液主要用于抗酸杆菌染色和革兰氏染色中,亦可单独使用。
组成:
操作步骤(仅供参考):
(一)抗酸染色:
1、 接种环挑取待检样本,涂布于载玻片上,自然干燥。
2、 滴加石碳酸复红染色液染色。
不必加热,蒸馏水冲洗。
3、 用脱色液脱色至无红色为止。
蒸馏水冲洗。
4、 用亚甲基蓝染色液染色。
蒸馏水冲洗。
5、 轻轻吸干水分,自然干燥。
6、 油镜镜检。
(二)石蜡切片染色:
1、 石蜡切片脱蜡至水。
2、 滴加石碳酸复红染色液染色。
流水稍洗。
3、 盐酸乙醇分化。
流水稍洗。
4、 直接二甲苯透明,树胶封片。
注意事项:
1、 染色结束后,应立即显微镜下观察。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 DM0090 Storage 石炭酸复红染色液 100ml RT 避光 使用说明书 1份。