理化因素和药物对家兔离体肠肌的作用
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理化因素和药物对家兔离体肠肌的作用
浙江中医药大学14级临床医学本部三班张伊娜
【摘要】目的:研究乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH、HCl、低温台氏液、缺氧对离体家兔肠肌的作用及机制。方法:向浸有离体家兔肠肌的38℃台氏液中依次滴加乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH、HCl各2滴,将38℃台氏液迅速换成25℃的台氏液,停止供氧及恢复供氧,用生物信号采集处理系统记录肠肌的收缩情况。结果:滴加乙酰胆碱、NaOH后,肠肌收缩张力和频率都增大;滴加肾上腺素、HCl和将38℃的台氏液迅速换成25℃台氏液后,肠肌收缩张力与频率都降低;停止供氧后,肠肌收缩早期张力及频率增强,晚期减弱。通气后频率先降低又逐渐恢复正常。结论:一定浓度乙酰胆碱、NaOH可促进肠肌的运动;一定浓度的肾上腺素、HCl以及低温会抑制肠肌的运动;短时间的缺氧能使肠肌收缩一开始增强,随后减弱。
【关键词】理化因素;小肠平滑肌;家兔;电活动
1实验材料和方法
1.1实验材料
1.1.1实验动物
家兔(雌雄不限)。
1.1.2实验材料和器械
微机化生物信号采集处理系统(RM6240系统),麦氏浴槽,张力换能器,铁支架,双凹夹,恒温水浴箱,气泵,温度计,烧杯,螺旋夹,棉线,L型固定钩,剪刀,眼科镊,注射器,持针器,手术圆针,手术盘,搪瓷碗等;台氏液,乙酰胆碱(10-4mol/L),肾上腺素(10-4mol/L),氢氧化钠,盐酸,阿托品等。
1.2实验方法
1.2.1实验装置准备和仪器参数设置
安装麦氏浴槽,在麦氏浴槽中加固定量(10-15mL)的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度温度在38℃。通气管接95%O2+5%CO2混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气体一个个逸出为止。换能器输出线连接微机生物信号采集处理系统,仪器参数设置:RM6240,点击“实验”菜单中的“肠肌记录”,通道时间常数为直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1s/div。1.2.2离体家兔肠肌制备
取家兔一只,用木槌猛击兔头枕部使其昏迷,迅速剖开腹腔找到胃,以胃幽门与十二指肠交界处为起点,先将肠系膜沿肠缘剪去,再剪取20-30cm肠管,用4℃台氏液冲洗,除去肠管内容物。冲洗干净后将肠管剪成数小段(约1~1.5cm),换以新鲜台氏液备用(注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能)。取小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中(此过程一直通有空气),在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。注意保持肠管畅通,勿使其封闭。
1.2.3标本固定
肠管一端连线系于浴槽固定钩上,然后放入38℃麦氏浴槽中,再将肠管另一端系结在张力换能器的悬梁壁上。
1.2.4实验观察
1.2.4.1待离体肠肌稳定后,记录一段正常张力曲线。然后用滴管加ACh(10-4mol/L)2
滴于浴槽内,观察并记录其张力曲线,然后立即从排水管放出浴槽内含ACh的台氏液,然后从侧管加入38℃的新鲜台氏液,重复2次(每次用针管抽取20mL),以洗去残余药物,使之降到无效浓度,再加入与一开始等量的台氏液。待张力恢复到用药前的水平后进行下一项实验。
1.2.4.2用滴管加肾上腺素(10-4mol/L)2滴于浴槽内,观察并记录其张力曲线,然后按相同步骤处理含肾上腺素的台氏液。待张力恢复到正常水平后进行下一项实验。
1.2.4.3用滴管加2滴NaOH于浴槽内,观察并记录其张力曲线,然后按相同步骤处理含NaOH的台氏液。待张力恢复到用药前的水平后进行下一项实验。
1.2.4.4用滴管加2滴HCl于浴槽内(实际操作中因效应不明显,我们小组最后是加了4滴),观察并记录其张力曲线,然后按相同步骤处理含HCl的台氏液。待张力恢复到正常水平后进行下一项实验。
1.2.4.5将38℃的台氏液迅速换成25℃的台氏液,观察并记录其张力曲线,等待温度回升张力恢复到正常水平后进行下一项实验。
1.2.4.6用滴管加阿托品2滴于浴槽内,等3min后用滴管加ACh(10-4mol/L)2滴于浴槽内,观察并记录其张力曲线,然后按相同步骤处理台氏液。待张力恢复到正常水平后进行下一项实验。
1.2.4.7关闭电源停止供氧,5min后恢复供氧,观察并记录其张力曲线[1]。
2实验结果
实验名称:理化因素和药物对家兔离体肠肌的作用
实验日期:2016.4.7
实验人员:张伊娜谢来娣陈扬扬龚丽芬龚青青
图一各种因素对家兔离体肠肌的作用
图二乙酰胆碱对家兔离体肠肌的作用 图三肾上腺素对家兔离体肠肌的作用
图像描述:加入2滴乙酰胆碱后,曲线迅速上升, 图像描述:加入2滴肾上腺素后,曲线逐渐下降 频率加快,收缩幅度、强度增加,表明小肠平滑 及基线下移。收缩幅度、强度减小,频率减慢, 肌张力增加,自律性增加。 表明小肠平滑肌张力减小,自律性降低。
图四氢氧化钠对家兔离体肠肌的作用 图五盐酸对家兔离体肠肌的作用
图像描述:加入2滴氢氧化钠后,曲线呈上升态 图像描述:加入4滴盐酸后,曲线逐渐下降,收缩 但略显不规则,频率加快,收缩幅度有所减小、 幅度、强度减小,频率减慢,表明小肠平滑肌张力 强度增加,表明小肠平滑肌紧张性增加,张力增 减小,自律性降低。
加,但收缩性降低。
图六25℃台氏液对家兔离体肠肌的作用
图像描述:替换25℃台氏液后,曲线呈下降状态,频率降低,振幅、强度下降,表明小肠平滑肌张力减小,自律性降低。
图七阿托品+ACh对家兔离体肠肌的作用
图像描述:加入阿托品后,曲线先稍有下降后又迅速恢复正常,3min后加入ACh,曲线无明显变化,表明小肠平滑肌张力及自律性没什么改变。
图八缺氧对家兔离体肠肌的作用
图像描述:停止氧供后,曲线瞬间上升,频率和幅度增强,后来频率和幅度略微有所减小,表明缺氧早期小肠平滑肌张力及自律性增强,晚期减弱。通气后频率先降低又逐渐恢复正常。