淀粉中还原糖的测定

法方他其
糖含量定量测定的方法除此之外还有 ①高效液相色谱法（ HPLC ） ②苯酚-硫酸法 ③蒽酮法 ④双折射现象
得心
从结果中所得到的的心得 并不是所有的糖有甜的味 道，只有少数结构简单的糖是有甜味的，如葡萄 糖、蔗糖、麦芽糖、果糖、乳糖等，充斥于各种 甜食之中的就是它们。自然界存在的多数糖——多
骤步验实
3 ）显色和比色，取 2 支 25 ml 刻度试管， 编号，按下表所示的量操作。
管号
还原糖待 蒸馏水 测液（ml) （ml)
DNS
查曲线葡 光密度值 萄糖含量
(ml)
(mg)
样品1 0.5
1.5
1.5 0.112 0.27
样品2 0.5
1.5
1.5 0.121 0.28
样品光密度平均值=(0.112+0.121)/2=0.1165
析分差误验实
1. 在称取面粉时候，滤纸上有少许淀粉未倒 干净，或者电子天平不太准确造成的质量 上的误差。
2. 在定容和移取液体时，读数不准确，或者 有的移液管没有写吹字却吹了，造成的误 差。
3. 在测吸光度值的时候没有擦干净导致的测 量误差，或者用酒精洗的时候没有洗干净 造成的误差。
还原糖的测定
3,5-二硝基水杨酸比色 法
班级 ： 生科2班 姓名 ： 胡雨雨 同组人 ：张贤明
的目验实
? 1. 掌握还原糖和总糖测定的基本原理。 ? 2. 学习比色法测定还原糖的操作方法
和分光光度计的使用。
理原验实
还原糖是具有还原性的糖类的统称。分子中含有
游离醛基或者酮基的单糖和含有游离醛基的二糖 都具有还原性。如葡糖糖、果糖、半乳糖、乳糖、 阿拉伯糖、麦芽糖等。 在碱性条件下，还原糖与 3 ， 5 一二硝基水杨酸共热， 3 ， 5 一二硝基水 杨酸被还原为 3-氨基 -5- 硝基水杨酸（棕红色物 质），还原糖则被氧化成糖酸及其他产物。一定 范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程 度成一定的比例关系， 540nm 波长下测定棕红 色物质的消光值，查对标准曲线并计算，便可分 别求出样品中还原糖和总糖的含量。
1.5
0.8
1.5
1.0
1.5
1.2
骤步验实
? 按照上表取 7支试管配好试剂，将各管摇匀， 在沸水浴中加热 5min ，取出后立即冷却 至室温，再以蒸馏水定容至 25ml ，混匀。 在 540nm 波长下，用 0 号管调零，分别 读取 1-6 号管的吸光度。以吸光度为纵坐 标，葡萄糖毫克数为横坐标，绘制标准曲 线。
骤步验实
得出吸光值
管号
1mg/ml葡
萄糖标准 液(ml)
蒸馏水 (ml)
0
0
2
1
0.2
1.8
2
0.4
1.6
3
0.6
1.4
4
0.8
1.2
5
1.0
1.0
6
1.2
0.8
DNS (ml)
葡萄糖含 量（mg)
光密度值
1.5
0
0
1.5
0.2 0.052
1.5
0.4 0.196
1.5
0.6 0.293
1.5
0.8 0.441
6. 实验完成后洗净仪器，放回原位。
骤步验实
? 1.标准曲线的绘制
管号
1mg/ml 葡
萄糖标准 液(ml)
蒸馏水 (ml)
0
0
2
1
0.2
1.8
2
0.4
1.6
3
0.6
1.4
4
0.8
1.2
5
1.0
1.0
6
wk.baidu.com
1.2
0.8
DNS (ml)
葡萄糖含 量（mg)
光密度值
1.5
0
1.5
0.2
1.5
0.4
1.5
0.6
料材、剂试、器仪
仪器 ： （ 1 ）试管X 11 （ 2 ）玻璃漏斗 X2 （ 3 ）烧杯： 1OOml X
1 （ 4 ）三角瓶： 100m1 X 1 （ 5 ）容量瓶： 100ml X 3 （ 6 ）恒温水浴 （ 7 ）沸水浴 （ 8 ）电子天平 （ 9 ）分光光 度计
试剂 ： （ 1 ） 1 mg/ ml 葡萄糖标准液：准确称取 10mg 分析纯葡萄 糖（预先在 8 0 ℃烘至恒重），置于小烧杯中，用少量蒸馏 水溶解后，定量转移到 10ml 的容量瓶中，以蒸馏水定容至 刻度，摇匀，冰箱中保存备用。 （ 2 ） 3 ， 5- 二硝基水杨 酸试剂：将 0.315g 3, 5- 硝基水杨酸和 13.1ml 2mol/NaOH 溶液，加到 25ml 含有 9.25g 酒石酸钾钠的热水溶液中，再 加 0.25g 结晶酚和 0.25g 亚硫酸钠，搅拌溶解。冷却后加蒸 馏水定容至 50ml ，贮于棕色瓶中备用。
糖，吃起来并不甜，各种粮食都是含糖大户，主 要是淀粉和糊精。粮食不仅可以提供能量，而且 还是B族维生素、膳食纤维、矿物质的重要来源， 因此人们的生活中的确不能没有它。当我们食用 面食时，虽然食用的是主食，但事实上其中的一 半都是糖分所以对于不同身体素质的人要注意合 理食用面食。众所周知，糖分摄入过多会导致不 同的疾病，摄入过多的糖分，多余不能消化的糖 分，会被身体储存起来，青少年在饮食中摄入过 多糖分，他们成年后患心血管疾病的风险会明显 升高。但其实正常食用面食并不会导致严重的疾 病，重要是合理安排膳食，合理搭配就好了。
根据函数 y=0.595x-0.046 可得葡萄糖含量
理处据数及果结验实
? 已知提取液总体积为100ml、测定时取用体积为 0.5ml、样品毫克数为3000mg、根据以下公式进 行计算。
样品平均葡萄糖 =0.27+0.28=0.275mg 还原糖%= （0.275*100*100% ）/
（0.5*3000 ）=18.3%
1.5
1.0 0.549
1.5
1.2 0.668
? 以吸光度为纵坐标，葡萄糖毫克数为横坐 标，绘制标准曲线
骤步验实
骤步验实
2. 样品中还原糖和总糖含量的测定
样品中还原糖的提取：准确称取 3.0g 食用 面粉，放在 50ml 三角瓶中，先以少量蒸 馏水调成糊状，然后加 25ml 蒸馏水，搅 匀，置于 5 0 ℃恒温水浴中保温 20min ， 使还原糖浸出。离心，用 2Oml 蒸馏水洗 残渣，再过滤，将两次的滤液全部收集在 50ml 的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度， 混匀，作为还原糖待测液。
材料 ： 食用面粉。
项事意注
1. 沸水浴时应将试管口用保鲜膜封住，以防 止水分蒸发引起体积误差。
2. 应该待反应体系稳定后进行比色（约 10min ）。
3. 比色时，比色皿中盛放的溶液体积不应过 多，一般在 2/3~3/4 。
4. 比色时不能将溶液溅在仪器面板和仪器内。
5. 标准曲线制作与样品含糖量测定应同时进 行，一起显色和比色。