组胺检查法

试验动物豚鼠1只（250～350g），雌雄不限。

MP100型十六道生理仪、恒温水浴槽、注射器（1ml）、移液管（1ml和5ml）、电子天平、剪刀、镊子等。

试剂蒸馏水、氯化钠注射、氯化钾、氯化钙、氯化镁、磷酸二氢钠等。

药品硫酸阿托品、磷酸组胺对照品、供试品

试验方法

实验准备

将离体器官浴筒洗净并干燥，备用。

将恒温水浴槽接通电源，加热使其温度保持为34～36℃，备用。

对照品溶液：取磷酸组胺对照品1支，加水配制成每1ml含1.0mg组胺的对照品溶液，用氯化钠注射液继续稀释。

A溶液：称取氯化钠160g、氯化钾4g、氯化钙2g、氯化镁1g、磷酸二氢钠0.1g，加水溶解并稀释至1000ml。

B溶液：取A溶液50ml，称取硫酸阿托品0.5mg、碳酸氢钠1g、葡萄糖0.5g，加水溶解并稀释至1000ml（24h内使用）。

离体肠段的固定：

取禁食24h的豚鼠，处死。剖取远端小肠（距离盲肠2cm）一段约2cm长的肠段，用注射器抽取溶液B，小心冲洗除去肠段的内容物。两端用细线结扎，在肠段中部作一横的小切口，将其放入体积20ml的离体器官浴筒中，该浴筒含有溶液B，维

持恒温（34～36℃），并通入95％O

2和5％CO

2

的混合气体。肠段一端用细线结扎固

定在靠近浴筒底部，另一端细线附着在十六道生理仪拉力转换器上。根据其灵敏

度加以调节使对肠段的拉力约为1g，记录该肠段的收缩。用溶液B冲洗器官浴筒，让浴液保留10min。再用溶液B冲洗2-3次。

实验方法

用磷酸组织胺溶液0.2～0.5ml加入浴液中，刺激其一系列的收缩，找出可重复的低于最大收缩反应的组胺浓度，即为高剂量（S

H

）。每次加入组胺前，用溶液B冲洗浴筒3次，使肠段能完全松弛。加入等体积的组胺溶液，引起收缩反应约为

高剂量的一半，而且可以重复出现，此剂量为低剂量（S

L

）。等体积的供试品原液

（T

1、T

2

、T

3

……）。按顺序将S

H

、S

L

、T

1

、T

2

、T

3

……依次加入溶液B中，记录反应

值。

品种干扰判定方法

a) 如T

1不引起肠段收缩，则更换新的溶液B，并加入等体积的S

1

+T

1

，如果产

生的收缩与加入的组胺量不相符，则说明此检查方法对该品种有干扰。

b) 如供试品溶液可以引起收缩，则重复S

H 、S

L

、T的次序两次，如供试品引

起的收缩不能重复出现，或者随后对组胺高、低剂量的反应被减小，则说明此检查方法对该品种有干扰。

品种无干扰判定方法

a) 供试品如引起肠收缩，可调节其浓度，找出低于组胺高剂量收缩幅度的浓

度，并重复S

H 、S

L

、T的次序两次，如T引起的收缩可以重现，并且S

H

、S

L

的反应

不变，则此品种可以用组胺检查法检查，如果测出的组胺量不超过药典正文中规

定的降压物质检查法规定的限值，即符合规定。

b) 如T不引起肠段收缩，且更换新的溶液B后，加入等体积的S

1

+T后产生的

收缩与加入的S

1

引起的收缩相符，则认为此品种符合规定。

c) 各品种的限值：注射用抑肽酶的限值为1.5单位的抑肽酶所含的组胺量不得多于0.1μg、注射用果糖二磷酸钠的限值为每50mg（以无水物计）所含的组胺量不得多于0.1μg、复方氨基酸注射液（18AA）的限值为每1ml所含的组胺量不得多于0.1μg、乳糖酸阿奇霉素的限值为每2000单位所含的组胺量不得多于0.1μg。