HPLC内标法测定原料药中对-乙酰氨基酚的含量
HPLC法测定对乙酰氨基酚片中有关物质的含量
HPLC法测定对乙酰氨基酚片中有关物质的含量作者：杨莉梅勇龙涛罗磊陈小雪来源：《中国药房》2020年第10期中图分类号 R917 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）10-1233-06DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.10.15摘要目的：建立测定对乙酰氨基酚片中有关物质含量的方法。
方法：采用高效液相色谱法。
色谱柱为Agilent 5HC-C8，流动相A、B分别为甲醇-水-冰醋酸（50 ∶ 950 ∶ 1，V/V/V）和甲醇-水-冰醋酸（500 ∶ 500 ∶ 1，V/V/V）（梯度洗脱），流速为0.9 mL/min，检测波长为254 nm，柱温为40 ℃，进样量为5 μL。
结果：该色谱条件下，对乙酰氨基酚片中的主药（对乙酰氨基酚）、6个已知杂质（对氨基酚、对氯苯乙酰胺和杂质A、B、D、F）、3个制剂特定辅料（羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯）和1个未知杂质的分离度均大于1.5。
6个已知杂质检测质量浓度的线性范围分别为0.539～1.617、0.026～0.384、0.237～17.799、0.257～19.271、0.239～17.955、0.246～18.462 μg/mL（r≥0.999 8），杂质A、B、D、F的校正因子分别为2.9、1.0、1.2、6.2;检测限分别为0.009 6、0.024 2、0.164 0、0.051 1、0.055 9、0.422 0 ng，定量限分别为0.032 0、0.080 6、0.546 0、0.170 0、0.186 0、1.406 0 ng;平均回收率为95.96%～111.09%（RSD为0.05%～2.42%）;精密度试验的RSD均小于15%，且耐用性良好。
3批样品均检出了对氨基酚（均为0.006%）、杂质B（0.016%～0.017%）、未知杂质（0.002 0～0.002 1%），未检出对氯苯乙酰胺和杂质A、D、F。
HPLC法测定小儿对乙酰氨基酚灌肠液中对乙酰氨基酚的含量
基金项 目:黑龙江省青年基金项 目( 项 目编号:QC0 C l 4 l ) 作者单位 : 150040 哈尔滨 ， 黑龙江省医药工业研究所( 杨静伟
赵晶岩) ; 衡阳市 ， 南华大学( 杨晶凡)
040701) 按照含量测定方法， 分别于 0 、 4、 12、 2、 8、
detector was set at 250 nm. Result s The calibration cur e was linear over the range of 0. 4一 4 林 The coef v 9. i f cient of r lativity was o. 999 6. The average recover es of paracetamo1was 99. 54% ， relatieve standar deviae i the d tion was l . 29% . Conclusion The method is simple ， accurate with a good sensitivity. It can be applied to the quality contr 1 of pediatr c par cetamol enema。 o i a
【 wordsl Key
pediat石 par cetamol enema;paracetamol;HpLC c a
对乙酞氨基酚( pa a e amo ) 是临床常用的解热 rct l
镇痛药物， 其退热效果好， 毒副作用小， 较适合小儿 患者使用。小儿对乙酞氨基酚灌肠液是以对乙酞 氨基酚为主要成分的解热镇痛类外用制剂。药物 以分子形式分散， 通过直肠戮膜吸收， 避免了对肝
HPLC测定复方感冒灵颗粒中对乙酰氨基酚的含量
摘 要 目的： 建立高效液相色谱法测定复方感 冒灵颗粒 中对 乙酰氨基酚含量 的方法。方法 ： 采用 Ａｉｎ ｇｅｔ ｌ
Ｃ抱 谱 柱 （５ｍ ｌ ２０ ｍ×４６ ｍ， ｔ ．ｍ ５ｔ ｍ）， 动相为 甲醇 一 一 醋酸 （０： ０： ．） 检 测 波长 ２９ｍ，流速 ０５ ｌ 流 水 冰 ２ ８ ０５ ， ４ｎ ．ｍ／ ｒｎ ａ 。结 果 ：对 乙酰 氨基 酚在 ００ ～０９ｔ ｉ ．４ ．６ｔ 围 内线性 关 系 良好 ， ＝０９９ （， ） 平 均 回收率 为 ９ ．８ ， ｇ范 ｒ ．９７ ／＝６ ； ７ ７３ ％ Ｒ Ｄ＝２２ ％（， ） Ｓ ．２ ／＝９ 。结论 ：Ｐ Ｃ法结果 准确 ， 以为复 方感 冒灵 颗粒 的质量 控 制提供 科 学依据 。 ７ ＨＬ 可 关键 词 对 乙酰 氨基 酚 ； 复方感 冒灵颗 粒 ； ＰＣ Ｈ Ｌ
按 处
菊花、 三叉苦 、 南板蓝根 、 岗梅、 对 析纯； 复方感冒 灵 Ｄ 品及空白阴 方 比例及制备工艺 ， 羊 制备不含乙酰
氨基 酚 的阴性 样 品 ， 照上 述供 试 并 品 溶 液 的 制 备 方 法 制 成 阴性 对 照
液。 ’ ２ ２ 色谱 条件 与 系统适 应 性试验 ．
Ａ 对 乙酰氨基酚对照 品
Ｂ 复方感 冒灵颗粒
图 １ ＨＬ Ｐ Ｃ图 谱
Ｃ 阴性样 品
广 西中医药 ２０ 年 ４月第 ３ 卷第 ２ ０７ Ｏ 期
维普资讯
２３ 线性 关 系考 察 ．
连 次 Ｓ 精 密吸取对 的对 乙酰氨基 酚对照 品溶 液 ， 续 下 操作 ，６ 含 量测 定结 果 的 Ｒ Ｄ ． １ ／＝６ 。 ７ 乙酰氨基 酚对照 品溶液 ０２ 、 ．０ 进 样 测 定 ６次 ，峰 面 积 的 Ｒ Ｄ为 为 ０ ６ ％ （， ） 表 明此 分析 方法 ．５０ ５、 Ｓ ．２ ／＝６。结果 表 明 ， 分 析 重 现性 良好 。 ７ 此 １０ 、 ．０ ４ ０ 、 ．０ｌ ２ｍ 量 ０４ ％ （， ） ．０ ２ ０ 、 ．０ ６ ｏ Ⅱ 至 ５ ｌ ｌ ２７ 加样 回收 率试验 ． 称取 已知
HPLC测定抗感冒片中对乙酰氨基酚含量
ＨＰＬＣ测定抗感冒片中对乙酰氨基酚含量目的：建立用HPLC测定抗感冒片中对乙酰氨基酚的含量。
方法：色谱柱为Symmetry C18(4.6 mm×150 mm，5 μm)；流动相为甲醇-水（15∶85）；柱温为30℃，流速为1.0 ml/min，检测波长为257 nm。
结果：对乙酰氨基酚在4.998~499.8 μg/ml范围内呈良好的线性关系（r=0.999 4，n=5），平均回收率为100.66%，RSD 为1.3%。
结论：本方法简便、快速、准确，适应于抗感冒片中对乙酰氨基酚的含量测定。
[Abstract] Objective: To establish determination method for the content of paracetamol in Kangganmao Tablets. Methods: The chromatographic column was Symmetry C18(4.6 mm×150 mm，5 μm), the mobile phase consisted of methanol- water(15∶85),the column temperature was 30℃,the flow rate of 1.0 ml/min,the UV detection wavelength was 257 nm.Results: The linear range of concentration of paracetamol was 4.998~499.8 μg/ml.The average recovery was 100.66% with RSD of 1.3%.Conclusion: The method is simple,fast and accurate. It is suitable for content determination of paracetamol in Kangganmao Tablets.[Key words] HPLC; Kangganmao Tablets; Paracetamol; Content determination抗感冒片是江門市新会区中医院自制的中西药复方制剂，具有疏散风热，祛痰利咽之功效。
HPLC法测定对乙酰氨基酚滴剂的含量
HPLC法测定对乙酰氨基酚滴剂的含量
董超琪
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2014(000)005
【摘要】目的：建立高效液相色谱外标法测定对乙酰氨基酚滴剂的含量。
方法采用 Waters SunFireTM C18柱（150mm ×4.6mm，5μm），流动相为
0.05mol· L -1醋酸铵溶液-甲醇（85∶15），流速1.0mL· min -1，检测波长243nm。
结果对乙酰氨基酚在52.25～261.2μg· mL -1的范围内线性关系良好（r ＝1.000，n＝5），测得平均回收率为99.83％（RSD＝0.71％）。
结论本方法简便、快速、准确，可用于测定对乙酰氨基酚滴剂的含量。
【总页数】3页(P52-54)
【作者】董超琪
【作者单位】江苏省泰州市食品药品检验所泰州225300
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
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HPLC法测定复方对乙酰氨基酚片含量
HPLC法测定复方对乙酰氨基酚片含量作者：鲁波来源：《科学与财富》2016年第10期摘要：目的：建立复方对乙酰氨基酚片中乙酰水杨酸、对乙酰氨基酚以及咖啡因含量的具体检测方法。
方法：在测定的过程中采用高效液相色谱仪，将C18当做色谱柱，将PH值为3.0的0.05M磷酸二氢钾-配比为75：25的甲醇当做流动相，检测的波长为254nm，同时在测定的过程中还要采用外标法进行测定。
结果：在对3种成分进行检测之后发现，其具有非常好的线形关系，此外，在分离度方面也完全符合检测的要求。
结论：采用高效液相色谱法对复方对乙酰氨基酚片的含量进行测定操作非常的简单，同时测定的结果精确性强，所以也可以将其当做复方对乙酰氨基酚片的基本检验方法。
关键词：复方对乙酰氨基酚片；HPLC法；含量测定复方对乙酰氨基酚片是一种临床上比较常用的解热镇痛的药物，它在应用的过程中疗效非常好，同时在使用的时候也不会产生非常明显的副作用，所以在这种药物也得到了非常广泛的应用，相关标准的含量测定当中采用容量法、中和法、重氮化法以及氧化还原的方法对3种主要的成分进行测定处理在测定的时候，不同的组分之间可以形成良好的玻璃管理，同时还具备良好的线形关系，这种方法比较简单，准确性也比较强，所以也比较适合应用在本品的质量控制工作中。
1、仪器药品及试剂SP8810液相色谱仪，CC100紫外可见光检测器，SP4270积分仪。
对乙酞氨基酚对照品由中国药品生物检定所提供，乙酞水杨酸（含量99.8%），咖啡因（99.6%），以及样品均由赤峰永巨制药厂提供，甲醇、磷酸二氢钾为分析纯。
2、色谱条件流动相：0.05M磷酸二氢钾（磷酸调pH3.0）一甲醇（75：25），流速0.8ml/min，检测波长254nm，灵敏度0.1，室温，进样量10μl。
3、实验方法线形关系：精确称取乙酰水杨酸对照品25mg，对乙酰氨基酚对照品12mg，将其放置在容积为50ml的容量瓶当中。
加入35ml的流动相，同时采用超声的方式使其充分的溶解。
HPLC法测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚的含量
HPLC法测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚的含量目的建立测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚含量的方法。
方法采用HPLC法，C18柱（6.0 mm×200 mm，5μm）；流动相为磷酸盐缓冲液（0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液，用磷酸调节pH至3.4）-甲醇-三乙胺（80︰20︰0.02）；检测波长为254 nm。
结果对乙酰氨基酚在11.43～114.30μg/mL浓度范围内线性关系良好（r=0.999 7），平均回收率99.21%，RSD=0.87%。
结论本方法简便、准确，重现性好，可用于复方氨酚烷胺片的质量控制。
标签：高效液相色谱法；复方氨酚烷胺片；对乙酰氨基酚；含量复方氨酚烷胺片为复方制剂，为感冒用药类非处方药药品。
适用于缓解普通感冒及流行性感冒引起的发热、头痛、四肢酸痛、打喷嚏、流鼻涕、鼻塞、咽痛等症状。
本品不宜与氯霉素类、巴比妥类等并用。
国家药品标准WS1-XG-015-2002所记载的复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚含量方法为永停滴定法。
容量分析最大缺点是误差较大，结果不准确。
作者通过筛选多种色谱体系，建立了HPLC法测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚的含量，方法简单可靠，可用于复方氨酚烷胺片的质量控制。
1 仪器与试药UVIKON紫外分光光度计（法国），METTLER电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司），HP1100高效液相色谱仪（美国安捷伦）；HP1100化学工作站，Agilent G1313ALS自动进样器；对乙酰氨基酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号100018-200408，供HPLC含量测定、比色检查用，使用前不需干燥处理）；复方氨酚烷胺片（长春海外制药集团有限公司，批号：20120403；吉林省吴太感康药业有限公司，批号：1112039；安徽三精万森制药有限公司，批号：20120502）；三乙胺为分析纯，水为纯净水，甲醇为一级色谱纯。
2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱Diamonsil-C18柱（6.0 mm×200 mm，5 μm）；流动相：磷酸盐缓冲液（0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液，用磷酸调节pH至3.4）-甲醇-三乙胺（80︰20︰0.02）；检测波长254 nm；流速为1.0 mL/min；进样量：20μL；柱温：30℃[1]。
HPLC法测定对乙酰氨基酚含量验证方案
按上述色谱条件进样，计算回收率及回收率平均值和相对标准偏差。
结果要求：平均回收率在95.0%-102.0%，RSD≦1.0%。
（五）样品含量测定
取对乙酰氨基酚供试品适量，精密称定，按“供试品溶液的制备”项下制备供试品溶液和“对照品溶液的制备”项下制备对照品溶液，按“色谱条件”项下的条件进行进样测定，记录色谱图，按外标法计算含量。
根据《中国药典》二部规定，按干燥品计算，含对乙酰氨基酚应为98.0%-102%。
四、设计小结
高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚的含量，在检测的过程中方法简单便于操作，且测定方准确度高，稳定性较好。
本设计方案运用高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚的含量，HPLC 法专属性强，重现性较好、稳定性较好，准确度和回收率较高，可以作为对乙酰氨基酚片的质量控制方法，用来提高对乙酰氨基酚的质量标准。
利用甲醇-水溶液的配比作为流动相进行检测，再利用试液进样前应用0.22μm微孔滤膜过滤，以除去流动相中的微小杂质，这样可以较大提升试验的准确性。
五、附件材料
图1高效液相色谱仪图2 分析天平
六、参考资料。
小儿氨酚黄那敏片中对乙酰氨基酚含量的HPLC测定
小儿氨酚黄那敏片中对乙酰氨基酚含量的ＨＰＬＣ测定目的：建立高效液相色谱(HPLC)法测定小儿氨酚黄那敏片中对乙酰氨基酚含量。
方法：采用安捷伦Eclipse XDB-C18 色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)，甲醇－水(80∶20)为流动相，流速为0.8 ml/min，柱温为30℃，检测波长为249 nm。
结果: 对乙酰氨基酚在0.200 5～2.004 8 μg 范围内呈良好线性关系，r=0.999 9，平均回收率为99．82％，RSD为0.23% (n=6)。
结论：该法稳定、简便，可用于小儿氨酚黄那敏片的质量控制。
[Abstract] Objective：To establish an HPLC method for the determination of Paracetamol in Xiao’er Anfen Huang Namin Tablets. Methods：Agilent Eclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm, 5μm) column was used. The mobile phase consisted of methanol and water(80∶20),the flow rate was 0.8 ml/min,column temperature was 30℃and wavelength of detecting at 249 nm. Results：The linear range of paracetamol was within 0.200 5～2.004 8 μg, (r=0.999 9), the average recovery was 99.82%, RSD=0.23%(n=6). Conclusion：The method is simple and stable. It can be used for the control of Xiao’er Anfen Huang Namin Tablets.[Key words] Xiao’er Anfen Huang Namin Tablets; HPLC; Paracetamol小儿氨酚黄那敏片为复方制剂，组分为每片含对乙酰氨基酚125 mg，人工牛黄5 mg，马来酸氯苯那敏0.5 mg，用于感冒引起的发热、头痛、关节痛、鼻塞等，主要用药对象为15岁以下的少年及儿童。
HPLC法测定泰诺片剂中乙酰氨基酚及盐酸伪麻黄碱的含量的研究
HPLC法测定泰诺片剂中乙酰氨基酚及盐酸伪麻黄碱的含量的研究摘要：测定泰诺片剂中对乙酰氨基酚和盐酸伪麻黄碱含量。
方法：采用十八烷基硅烷键合硅胶柱,4.6mm×150mm；流动相：甲醇-0.05 mol·L- 1磷酸二氢钾（30:70）；紫外检测波长为210nm；流速为1.0 ml·min – 1;PH 4.0。
结论方法简便，结果准确。
两者线性结果良好，对含量的测定有很好的基础作用。
Abstract: Determination of tylenol tablets of acetaminophen and pseudoephedrine hydrochloride content.Method: With 18 alkyl silane bonding silica gel column,4.6mm×150mm;flowingphrase: methyl alcohol 0.05 mol·L- 1potassium dihydrogen phosphate (30:70);Ultraviolet wavelength detection:210nm;flow velocity : 1.0ml·min –1.The conclusion and the method is simple and accurate.Both of them have good linear results, which plays a very good basic role in determination of acontent.引言：泰诺（Tylenol）是上海强生制药有限公司生产的一种非处方类感冒药。
用于感冒和上呼吸道过敏，能缓解因感冒引起的鼻塞，流涕、流泪、打喷嚏、头痛、咽喉痛、发热、咳嗽等症状。
其配方为对乙酰氨基酚，盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬和马来酸氯苯那敏。
基于HPLC法的对乙酰氨基酚片中有关物质含量的测定
基于HPLC法的对乙酰氨基酚片中有关物质含量的测定发表时间：2020-10-14T15:33:10.580Z 来源：《科学与技术》2020年第17期作者：杨世娟[导读] 本文采用高效液相色谱法（HPLC）测定了对乙酰氨基酚片中有关物质的含量。
结果表明杨世娟连云港康乐药业有限公司，江苏连云港 222100摘要：本文采用高效液相色谱法（HPLC）测定了对乙酰氨基酚片中有关物质的含量。
结果表明，采用HPLC法测定对乙酰氨基酚片中的主要药物:对乙酰氨基酚、6种已知杂质（对氯苯乙酰胺、对氨基酚和a、N-苯乙酰胺、对丙乙酰胺、对硝基酚）以及3种特殊辅料（羟苯乙酯、羟苯甲酯和杂质），羟苯丙酯和1种未知杂质的分离度均大于1.5。
高效液相色谱法准确度高，专属性强，可用于对乙酰氨基酚片中有关物质的测定。
关键词：HPLC法；对乙酰氨基酚片；物质；含量0.引言对乙酰氨基酚片是乙酰苯胺类解热镇痛药，主要用于缓解轻中度疼痛，可以将膝盖疼痛减轻到最小程度。
是治疗轻度骨关节炎的首选短期镇痛药。
对乙酰氨基酚片作为常用的解热镇痛药，在治疗剂量范围内是安全可靠的。
但剂量过大，可能导致急性肝功能衰竭，也可能引起血压升高、哮喘、肝毒性、胃肠道反应等不良反应。
因此，应严格遵循对乙酰氨基酚片的使用原则。
《国家药品安全十二五规划》中明确指出对乙酰氨基酚片是一种一致性评价品种。
参考处方资料，原研药由对乙酰氨基酚、预胶化淀粉、二氧化硅、海藻酸、聚维酮K30、羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯组成。
这是一种有标记的胶囊片剂。
产品中可能存在的主要杂质是对氨基苯酚、对氯苯乙酰胺和杂质a、b、d和f。
这些杂质中大多数含有潜在的遗传毒性。
然而，除了对氨基苯酚外，2015年版《中国药典公约》（第二部分）并未控制上述其他杂质。
此外，为了避免生产经营中频繁清洗设备造成的污染，在处方中加入了羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯，所有这些都可以在分析中检测到。
以上三种成分作为制剂的具体辅料，在计算杂质含量时应扣除。
HPLC法测定氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量
5
5. 000
100. 0
100 %
5
4. 995
99. 9
100. 0
0. 1
5
5. 005
100. 1
5
5. 005
100. 1
6
6. 012
100. 2
6
6. 000
100. 0
120 %
6
6. 018
100. 3
100. 2
0. 1
6
6. 018
100. 3
6
6. 018
100. 3
3. 4. 3 取样品三批 (批号 :030201 、030804 、030905) 分别用本 法与原标准方法测定对乙酰氨基酚的含量 ,结果见表 2 。
取对乙酰氨基酚对照品适量 ,用流动相溶解并制成每 1 ml 约含 015 mg 的溶液 ,备用 。 3. 1 干扰实验 取备用液 1 ml 于 10 ml 量瓶中 ,分别加入 1 ml 011 mol·L - 1 氢氧化钠溶液 、1 ml 011 mol·L - 1 盐酸溶液 、 水 、011 mol·L - 1高锰酸钾溶液 1 ml ,于 100 ℃加热 30 min ,放 冷后用流动相稀释至刻度 ,分别进样 20μl 记录色谱图到主峰 保留时间 2 倍 ,从色谱图知对乙酰氨基酚的酸 、碱 、水化及氧 化后破坏的降解物峰与主药峰能很好的分离 ,不干扰主药的 含量测定 。辅料未见色谱峰 。 3. 2 线性关系 精密量取备用液 210 、2125 、215 、2175 、310
从以上结果知本方法测得对乙酰氨基酚含量与原方法结 果基本一致 。 3. 5 回收率测定 取已知含量供试品一批 ,分别按 80 %、 100 %、120 %加入对乙酰氨基酚对照品 ,照含量测定方法测定 含量 ,结果见表 3 。 4 讨论
HPLC法测定对乙酰氨基酚泡腾片含量精品文档4页
HPLC法测定对乙酰氨基酚泡腾片含量对乙酰氨基酚也称为对羟基乙酰苯胺、醋氨酚或扑热息痛，是一种常用的退热和止痛药物。
对乙酰氨基酚有解热镇痛作用，用于感冒发烧、关节痛、神经痛、偏头痛、癌痛及手术后止痛等。
对乙酰氨基酚是非那西丁在体内的代谢产生，其抑制中枢神经系统前列腺素合成的作用与阿司匹林相似，但抑制外周前列腺素合成作用弱。
本实验采用高效液相色谱法对对乙酰氨基酚泡腾片中的对乙酰氨基酚的进行了含量测定。
1.仪器与试药1.1仪器FL2200-2高效液相色谱仪（浙江福立分析仪器有限公司）；CO-1000型色谱柱温箱（上海子期实验设备有限公司）；R-215旋转蒸发仪（瑞士步琦有限公司）；HQ-50高端试剂级超纯水机（郑州华新电气公司）；ABS220-4分析天平（德祥科技有限公司）；AP-01P无油隔膜真空泵（杭州格图科技有限公司）；JL_720DTH超声波清洗器（南京科捷分析仪器有限公司）；TU-1810紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。
1.2色谱柱安捷伦 C18色谱柱（218 mm×4.6mm，5μm）。
1.3对照品对乙酰氨基酚购自中国药品生物制品检定所。
1.4试剂甲醇（上海谱振生物科技有限公司）、磷酸二氢钠（抚顺市新光精细化工有限责任公司）、溴化四丁基铵（北京迈瑞达科技有限公司）、乙腈（上海谱振生物科技有限公司）、冰醋酸（武汉宏信康精细化工有限公司）、三乙胺（郑州皇朝化工产品有限公司）、四丁基硫酸氢铵（上海谱振生物科技有限公司）、庚烷磺酸钠（沈阳试三生化科技开发有限公司）、四氢呋喃（武汉宏信康精细化工有限公司）。
1.5试药对乙酰氨基酚泡腾片。
2.测定方法确定2.1色谱条件依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-10]。
流动相：磷酸盐缓冲液（pH4.5）-甲醇-乙腈（85：5：10），检测波长：254nm，流速：1.0ml?min-1。
柱温：30℃。
理论板数按对乙酰氨基酚峰计算应不得低于2000。
内标校正因子法测定对-乙酰氨基酚的含量
内标校正因子法测定对－乙酰氨基酚的含量
内标校正因子法是一种常用的测定化合物含量的方法。
其基本原理是在样品中添加已知浓度的内标化合物，通过测定内标化合物和目标化合物的响应因子来进行含量计算，从而消除仪器响应和样品前处理的影响。
在测定对-乙酰氨基酚含量时，可以选择一种内标化合物，如对氨基苯酚。
首先准备不同浓度的对－乙酰氨基酚标准溶液，并向每个标准溶液中加入相同浓度的对氨基苯酚，再加入一定量的稀释剂。
然后使用高效液相色谱仪（HPLC）进行分析，测定对－乙酰氨基酚和对氨基苯酚的峰面积，并计算出两者的响应因子。
接着测定待测样品中对－乙酰氨基酚和对氨基苯酚的峰面积，利用响应因子计算出待测样品中对－乙酰氨基酚的含量。
最终校正结果为含量值与内标化合物的含量之比。
使用内标校正因子法可以提高测定结果的精确度和准确度，减小实验误差和仪器漂移，因此在分析对-乙酰氨基酚含量时是一种常用的方法。
仪器分析实验 HPLC内标法测定原料药中对-乙酰氨基酚的含量
HPLC 内标法测定原料药中对-乙酰氨基酚的含量一、实验目的1、掌握高效液相色谱仪的使用方法2、掌握输液泵和色谱柱的使用注意事项2、掌握内标法定量的测定步骤和计算方法二、实验原理分别配制含有内标物的对准品溶液和供试品溶液，由对照品溶液中组分i 和内标物s 的A i ’和As ’计算相对校正因子f ，再由供试品溶液中待测组分i 和内标物s 的A i 和As 计算待测组分的含量，由对准品溶液求相对校正因子f ：由供试品溶液求待测组分的含量：100100(%)⨯=⨯=⇒=⇒=试样试样m A m A f m m m A A f m A A f m m s s i i i i S i i s i s i ω 三、色谱条件色谱柱：C 18柱（250mm ×4.6mm ，5μm ）；流动相：甲醇-水（60:40）；流速1ml/min ；检测器：UV 257nm ；柱温：室温；内标物：咖啡因。
四、实验步骤1、溶液配制称取对-乙酰氨基酚对照品 mg ，内标物咖啡因对照品 mg ，置50ml 容量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取1ml ，置10ml 容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，过0.45μm 的微孔滤膜，取滤液即得对准品溶液。
称取对-乙酰氨基酚样品 mg ，内标物咖啡因对照品 mg ，相同方法配制供试品溶液。
2、实验部分打开仪器各部电源，更换流动相，设置泵流量，排气；设置检测波长257nm ；打开工作站，设置参数，查看基线。
基线平稳后，注入对照品溶液，重复3次进样。
记录保留时间、半峰宽、峰面积等参数。
注入试样溶液，重复3次进样。
记录保留时间、半峰宽、峰面积等参数。
实验完毕关检测器电源，更换流动相，冲洗色谱柱和进样阀。
五、数据处理要求1、计算公式2、结果表格（另附）3、系统适用性试验（对-乙酰氨基酚的理论塔板数、对-乙酰氨基酚和咖啡因的分离度）六、思考与讨论题1、高效液相色谱仪的输液泵有何使用注意事项？2、高效液相色谱柱有何使用注意事项？3、HPLC 法中，外标法和内标法定量各有何优缺点？4、本实验的定量方法采用了哪种方法？内标法绘制标准曲线时，如果（Ai/As ）—Ci 直线不通过原点，能否用内标对比法（内标一点法）定量？''''''i i i i s s s s m f A A f m f A A ==⇒''''i s s i m A f m A =。
HPLC测定复方感冒灵颗粒中对乙酰氨基酚的含量_农毅清
的对乙酰氨基酚对照品溶液 , 连续 进样测定 6 次 , 峰面积的 RSD 为 0.42%(n =6)。 结果表明 , 此分析 方法精密度良好 。 2.5 稳定性试验 取对乙酰氨基 酚对照品溶液 , 分别在 0, 2, 4, 8, 12h 内 进 样 测 定 , RSD =0.26% (n =5)。 结果表明供试品溶液在 12h 内稳定 。 2.6 重现性试验 取同一批号样 品 6 份 , 按“供试品溶液的制备” 项
表 1 加样回收率试验结果
取样量(mg)
503 .20 497 .15 500 .85 502 .56 500 .40 501 .52 498 .68 504 .72 506 .18
原有含量(mg)
6 .34 6 .26 6 .31 6 .33 6 .30 6 .32 6 .28 6 .36 6 .38
含量 , 结果超声波振荡 5min 即可 完全溶解 , 5～ 15min 内样品含量基 本不变 , 考虑到若提取时间过长 , 部分中药成份可能会被溶解 , 影响 对乙酰氨基酚含量的测定 , 故选择 5min 超声波提取 。 3 .3 流动相的选择 试验中曾选 择流动相为甲醇 -水 (35∶65)或 (15∶85), 结果峰形不好 , 甚至拖 尾 。后改用流动相为甲醇 _水 _冰 醋酸 (20∶80∶0 .5), 出峰时间适
按色谱条件 分别精密 吸取对 照品溶液 、供试品溶液和阴性对照 品溶液各 20μl , 进样测定 , 对乙酰 氨基酚 峰的保留 时间为 13min 左 右 , 阴性对照无干扰 , 主成分和相 邻杂质峰得到良好的分离 , 分离度 大于 2。 色谱图见图 1 。
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广西中医药 2007 年 4 月第 30 卷第 2 期
HPLC法测定对乙酰氨基酚片的含量
HPLC法测定对乙酰氨基酚片的含量吴玮【摘要】目的建立HPLC法测定对乙酰氨基酚片的含量.方法色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相为甲醇-水(20:80),流速为1.0 ml/min,检测波长为244 nm,柱温30℃.结果对乙酰氨基酚浓度在10.16～30.48μg/ml范围内线性关系良好,r=0.9998(n=5);平均加样回收率为100.04％,RSD=0.95％(n=6).结论 HPLC法操作简便、结果准确、重复性好、专属性强,适用于测定对乙酰氨基酚片中对乙酰氨基酚的含量.【期刊名称】《医学信息》【年(卷),期】2018(031)018【总页数】3页(P127-128,131)【关键词】HPLC;对乙酰氨基酚;含量测定【作者】吴玮【作者单位】安徽省宿州市食品药品检验检测中心,安徽宿州 234000【正文语种】中文【中图分类】R927.2对乙酰氨基酚片为目前临床常用的一种乙酰苯胺类解热镇痛药，适应于普通感冒或流行性感冒引起的发热，也用于缓解轻至中度疼痛如头痛、关节痛、偏头痛、牙痛、肌肉痛、神经痛、痛经。
《中国药典》2015年版[1]二部采用紫外-可见分光光度法测定其含量，本次试验建立了高效液相色谱法（HPLC法）测定对乙酰氨基酚片的含量，该方法专属性强，重现性好，可用于该制剂的质量控制。
1 仪器与试药1.1 仪器 Waters2695高效液相色谱仪，Waters2998二极管阵列检测器，Waters Empower工作站（美国Waters有限公司）；UV2550紫外-可见分光光度计；ABS-135S电子天平，BS110S电子天平。
1.2 试药对乙酰氨基酚对照品（中国食品药品检定研究院，批号为100018-201610）；对乙酰氨基酚片（东北制药集团沈阳第一制药有限公司，批号：4170911；天津市健生制药有限公司，批号：170301；通化万通药业股份有限公司，批号：170106）；甲醇（色谱纯）；水（纯化水）。
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HPLC 内标法测定原料药中对-乙酰氨基酚的含量
一、实验目的
1、掌握内标法的测定步骤和结果计算方法；
2、熟悉高效液相色谱仪的一般使用方法。
二、实验原理
分别配制含有内标物的对准品溶液和试样溶液，由对照品中组分i 和内标物s 的Ai ’和As ’计算相对校正因子f ，再由试样中待测组分i 和内标物s 的Ai 和As 计算待测组分的含量，有
三、色谱条件 色谱柱：C 18柱（15cm ×4.6cm ，5μm ）；流动相：甲醇-水（60:40）；流速0.6ml/min ；检测器：UV 257nm ；柱温：室温；内标物：咖啡因。
四、实验步骤
1、溶液配制
称取对-乙酰氨基酚对照品 mg ，内标物咖啡因 mg ，置50ml 容量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取1ml ，置10ml 容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，过0.45μm 的微孔滤膜，取滤液即得。
称取对-乙酰氨基酚样品 mg ，内标物咖啡因 mg ，相同方法配制样品溶液。
2、实验部分
打开仪器各部电源，更换流动相，设置泵流量，排气；设置检测波长257nm ；打开工作站，设置参数，查看基线。
基线平稳后，注入对照品溶液，重复3次进样。
记录保留时间、半峰宽、峰面积等参数。
注入试样溶液，重复3次进样。
记录保留时间、半峰宽、峰面积等参数。
实验完毕关检测器电源，更换流动相，冲洗色谱柱和进样阀。
五、数据处理要求
1、公式
2、结果表格（另附）
3、运算示例
要求：先计算校正因子再求结果平均值。
六、思考题
P157 3，5； 另加： 内标法有何优缺点？ (%)100i i t inject m V x m V =⨯100i s s t inject
A m V f A m V =⨯1100inject i
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V A V f m A m V V ⎛⎫=⨯⨯⨯ ⎪⎝⎭100i st s t A m f A m =⨯i i
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