对乙酰氨基酚片剂的含量测定
实训六--对乙酰氨基酚片的质量检验
实训六对乙酰氨基酚片的质量检验一、实训目标通过本实训，要求掌握对乙酰氨基酚片的质量检验的程序、方法与操作技能，掌握检验结果的处理与判断，能够规范书写检验原始记录及检验报告书。
二、质量标准对乙酰氨基酚片Duiyixian’anjifen PianParacetamol Tablets本品含对乙酰氨基酚（C8H9NO2）应为标示量的95.0％~105。
0％.【性状】本品为白色片、薄膜衣或明胶包衣体，除去包衣后显白色。
【鉴别】取本品的细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚0.5g)，用乙醇20ml分次研磨使对乙酰氨基酚溶解，滤过，合并滤液，蒸干，残渣照对乙酰氨基酚项下鉴别(1）(2)项试验，显相同反应.【检查】溶出度取本品，照溶出度测定法（附录1[1]ⅩC第一法），以稀盐酸24ml 加水至1000ml为溶出介质，转速为每分钟100 转，依法操作，经30分钟时，取溶液5ml 滤过，精密量取续滤液1ml，加0。
04％氢氧化钠溶液稀释至50ml，摇匀,照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA）,在257nm 的波长处测定吸光度，按C8H9NO2的吸收系数（E cm%11）为715计算出每片的溶出量，限度为标示量的80％，应符合规定。
其他应符合片剂项下有关的各项规定(附录ⅠA）.【含量测定】取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg),置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml及水50ml,振摇15分钟,加水至刻度，摇匀,用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，照对乙酰氨基酚含量测定项下方法，自“置100ml量瓶中”起，依法测定，即得.【类别】同对乙酰氨基酚。
【规格】（1）0.1g（2) 0。
3g（3）0.5g【贮藏】密封保存。
四、实训过程(一）仪器、试药准备及实训用液的制备1、实训用仪器与试药的准备仪器：溶出仪、紫外分光光度仪、电子或分析天平（感量0。
1mg）、托盘天平、称量瓶、试管、小烧杯（50ml、10ml）、量筒（1000ml、100ml）、胶头滴管、移液管（5ml、1ml）、量瓶（250ml、100ml、50ml)、注射器（10ml）、漏斗、干燥器、玻棒及乳钵。
高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚片中防腐剂含量
高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚片中防腐剂含量摘要目的：建立对乙酰氨基酚片中防腐剂（羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯）的含量测定方法并检测防腐剂含量。
方法：采用高效液相色谱法同时测定对乙酰氨基酚片成品中三种防腐剂的含量，色谱柱为Venusil，MP C18（4.6mm×250mm，5μm），以甲醇-1%冰醋酸（60:40）为流动相，流速为 1.0ml/min，柱温：30℃，检测波长：254nm。
结果：HPLC法可同时测定对乙酰氨基酚片中羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯的含量。
对乙酰氨基酚片中羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯的进样体积为20μl时，羟苯甲酯在27.2250μg/ml~81.6750μg/ml的浓度范围内线性关系好（相关系数r=0.9999），线性方程为y=115793.4993x+61202.9655；羟苯乙酯在5.2448μg/ml~15.7343μg/ml的浓度范围内线性关系好（相关系数r=0.9998），线性方程为y =105821.2400x-304.0966；羟苯丙酯在2.6070μg/ml~7.8411μg/ml的浓度范围内线性关系好（相关系数r=0.9999），线性方程为y=96999.2343x+893.1724。
羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯平均加样回收率分别为99.8%、100.2%和102.2%，RSD分别为0.47%，2.16%和1.82%。
结论：本法采用一个高效液相色谱条件同时检测三种防腐剂成份，方法专属性强、准确度高，重复性好，节约检测时间，可作为对乙酰氨基酚片中防腐剂质量控制方法。
关键词对乙酰氨基酚片；高效液相色谱分析法；羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯；含量对乙酰氨基酚片主要用于普通感冒或流行性感冒引起的发热，也用于缓解轻至中度疼痛如头痛、关节痛、偏头痛、牙痛、肌肉痛、神经痛、痛经。
属于要求一致评价的品种，我公司在该品的一致性评价过程中，对该品原研处方进行了剖析，该品种加入3种防腐剂，其目的是为了产品在生产线上能连续生产，防止生产环境微生物超标，而节约清场时间。
对乙酰氨基酚片剂的相对生物利用度的测定实验讲义
对乙酰氨基酚片剂的相对生物利用度的测定一、实验目的1. 掌握尿药法测定相对生物利用度的实验设计与方法2. 了解尿药法的特点和对乙酰氨基酚的体内过程二、实验原理对乙酰氨基酚在体内以原型（约5%）及葡萄糖醛酸结合物（55%~75%）和硫酸结合物（20%~40%）自尿中排出。
因此，可采用尿药法测定生物利用度，其测定原理是对乙酰氨基酚及其代谢物水解成对氨基酚，对氨基酚在次氯酸钠的存在下与百里酚产生反应，生成蓝色染料，此染料在601nm 的波长处有最大吸收。
生物利用度是指药物或制剂服用后，主药到达大循环的相对数量和速度。
它是药物制剂的质量的重要指标。
绝对生物利用度的测定以静脉注射剂作为标准参比制剂，相对生物利用度常采用口服溶液剂，或市场认可、吸收较好且临床有效的制剂作为标准参比制剂。
在评价生物利用度的参数中，相对生物利用度常用AUC 或尿药排泄总量的相对比值Fr 来反映吸收程度。
尿药数据法与血药浓度法一样，可以通过给药后收集各时间的尿样，经测定后拟合出动力学参数以及生物利用度数据。
尿药法要求有较多的原形药物从尿中排出，并且药物的肾排泄过程符合一级速度过程。
单室模型口服给药尿药法基本公式为：dX u dt =k e X =k e k a FX 0k a −k(e −kt−e −k a t ) 式中，X0是给药剂量；F 为生物利用度；ka 为表观一级吸收速度常数；X 为体内药量；k 为一级消除速度常数；X 与Xu 为t 时间体内药量与排泄于尿中的原形药物累积；ke 为肾排泄速度常数。
当时间趋向无穷大时，后面一项相对于前面一项可以忽略不计，即变为单指数方程。
取对数，并以平均尿药速度tX u ∆∆代替瞬时速度dtdX u ，以集尿中点时间t 中代替t,则得到下式：kk FX k k t kt X a a e u --=∆∆0lg 303.2lg＋中 因此，给药后收集尿样，以()t X u ∆∆lg 对t 中作图得一曲线，由末端直线斜率可求出k ，并可计算出1t 。
对乙酰氨基酚的鉴定结构确证与含量测定
对乙酰氨基酚的鉴定结构确证与含量测定一、实验目的（1）掌握对乙酰氨基酚的鉴定的方法 （2）了解对乙酰氨基酚结构确证的过程（3）运用仪器分析手段对对乙酰氨基酚进行含量测定 二、实验原理（1）对乙酰氨基酚（298NO HC ）为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味微苦。
在热水或乙醇中易溶，在丙酮中溶解，在水中微溶。
熔点168-172℃。
对乙酰氨基酚是临床常用的解热镇痛药物，且毒副作用小，较适合儿科患者使用。
已成为全世界应用最广泛的的药物之一，是国际医药市场上头号解热镇痛药。
（2）以一定浓度的对乙酰氨基酚溶液充分水解全部生成对氨基酚溶液，对氨基酚溶液在碱性条件下与亚硝基铁氢化钠试剂作用，生成蓝色配位化合物。
利用721 － 分光光度计测定其波长确定最大吸收，并通过分光光度计进行条件优化，依据比尔定律绘制标准曲线。
通过标准曲线法求得对乙酰氨基酚的浓度，从而求得对乙酰氨基酚的含量。
（3)取对乙酰氨基酚溶解于流动相后于200 ~ 400波长范围扫描, 结果在250的波长处有最大吸收, 故选择此波长作为测定波长。
对乙酰氨基酚易溶于热水中, 用温水浴溶解15分钟以上时对乙酰氨基酚已全部溶解。
以甲醇- 水- 磷酸( 22 - 78- 0. 1) 为流动相, 能使对乙酰氨基酚得到很好的分离。
采用外标法，用对乙酰氨基酚标准溶液作为对照品，求得样品对乙酰氨基酚的浓度，从而求得对乙酰氨基酚的含量。
三、实验过程 （1）鉴定①本品的水溶液加三氯化铁试液，即显蓝紫色。
②取本品约0.1g ，加稀盐酸5ml ，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5ml ，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml 稀释后，加碱性β-萘酚试液2ml ，振摇，即显红色。
③本品的红外吸收图谱应于对照的光谱一致。
（2）结构确证 ①红外光谱图②核磁共振氢谱（3）含量测定①紫外分光光度法3.1.1溶液的制备Na2CO3溶液的制备准确称取Na2CO3 5.3035 g，置于1000mL 容量瓶中，加纯水标定至刻度，摇匀。
对乙酰氨基酚的实验设计
外观性状：完整光洁，色泽均匀，无异物，无杂斑，有效期内保持不变片重差异取供试品20片——精密称定总的质量——求平均片重——再分别精密称定每片的重量。
标准判断: 每片重量与平均片重相比较（凡无含量测定的片剂，每片重量应该与标示片重比较）按下表中的规定，超出重量差异限度的不得多于2片，并不得有1片超出限度1倍。
含量测定：供试品的制备：取本品10片——精密称定——研细——精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg）——置250ml量瓶——加0.4%氢氧化钠溶液50ml——加水定容——摇匀——滤过——精密量取续滤液5ml ——置１００ml量瓶——加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水定容，摇匀——紫外257nm下测定吸光度，测定3次求均值。
空白溶剂的制备: 以0.4%氢氧化钠溶液50ml，置250ml量瓶中，加水至刻度，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度。
标示量百分含量的计算溶出度：实验原理：溶出度系指药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度。
凡检查溶出度的制剂，不再进行崩解时限检查。
药物只有固体制剂中的活性成分溶解之后，才能为机体吸收。
溶出度试验能有效地区分同一药物制生物利用度的差异，是控制固体制剂内在的重要指标之一。
对乙酰氨基酚的溶解度大小、辅料的亲水性程度和制片工艺都会影响制剂的溶出度，对乙酰氨基酚溶出度测定采用转篮法。
操作方法：量取的人工胃液900ml，注入每个操作容器内，加温使溶剂温度保持在37℃土0.5℃，调整转速100转/min使其稳定。
取供试品6片，分别投入6个转篮内，将转篮降入容器中，立即开始计时，至45分钟时，在规定取样点吸取溶液5ml，立即经不大于0.8µm微孔滤膜滤过，自取样至滤过应在30秒钟内完成。
精密量取续滤液1ml，加0.04%氢氧化钠溶液稀释至50ml，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在257nm的波长测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数（E1%1cm）为715，计算每片的溶出量。
实验三 复方对乙酰氨基酚片的含量测定
实验三 复方对乙酰氨基酚片的含量测定一、目的要求1、掌握复方片剂中各成分含量测定的基本原理和操作方法。
2、掌握复方片剂的分析特点。
二、基本原理复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主成分。
各成分之间性质差异大。
乙酰水杨酸为芳酸类药物，具酸性，K a ＝3.27×10-4，可用酸量法测定；对乙酰氨基酚为芳酰胺类药物，具酰胺基，呈中性，但具潜在芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，K b ＝0.7×10-14，不能采用一般生物碱的含量测定方法，但可将其与碘发生定量沉淀以后，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定从而求得咖啡因的含量。
反应式表示如下：1、乙酰水杨酸的测定原理 COOH O C OCH 3+NaOH COONa O C O CH 3+H 2O等当点时，由于生成物水杨酸钠的水解，溶液呈微碱性，所以选用碱性区域变色的指示剂--酚酞。
2、对乙酰氨基酚的测定原理3、咖啡因的测定原理 N NO O H 3C3N N ＋2I+KI+H 2SO 4N N O O H 3C 3N CH 3N HI I 4+KHSO 4CH 3I 2(剩余)+2Na 2S 2O 32NaI+Na 2S 4O 6三、实验方法取本品20片，精密称定，研细备用。
（一）乙酰水杨酸的含量测定药典规定每片检品中含乙酰水杨酸应为0.219 g ～0.242 g 。
精密称取上述细粉适量（约相当于乙酰水杨酸0.4g ），置分液漏斗中，加水15ml ，摇匀，用氯仿振摇提取4次（20 ml ，10 ml ，10 ml ，10ml ），提取氯仿液用同一分水10ml 洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml 溶解后，加酚酞指示液3滴，用0.1mol/L 氢氧化钠液滴定，即得。
每1ml 0.1mol/L 氢氧化钠液相当于18.02mg 的C 9H 8O 4。
高效液相色谱法测定复方对乙酰氨基酚片的含量
高效液相色谱法测定复方对乙酰氨基酚片的含量复方对乙酰氨基酚的概述：复方对乙酰氨基酚是对乙酰氨基酚、异丙基安替比林和咖啡因的复方制剂，主要用于治疗头痛、牙痛、月经痛、神经痛、风湿痛及感冒引起的发热等。
异丙基安替比林的极性弱，与对乙酰氨基酚和咖啡因的极性相差很大，且这3组分的紫外吸收特征及溶解度也有较大差异, 因此建立同时测定这3 组分血药浓度的色谱方法存在较大困难，目前尚未见相关报道。
二、实验部分1.仪器与试剂(1)仪器。
日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪，配UV检测器，N-2000双通道色谱工作站，BS 224 S型电子天平。
（2)试剂。
对乙酰氨基酚标准品，咖啡因对照品，异丙安替比林标准品；复方对乙酰氨基酚片II；甲醇。
2.溶液的配制(1)标准储备液的配制。
分别精密量取对乙酰氨基酚标准品（约25mg）、咖啡因标准品（约10mg）、异丙安替比林标准品（约15mg）置于50ml容量瓶中，加混合溶剂甲醇-水（70∶30）溶解并稀释到刻度。
其中对乙酰氨基酚的浓度约为0.5mg/ml，咖啡因的浓度约为0.2mg/ml，异丙安替比林的浓度约为0.3mg/ml。
(2)对照液的制备。
精密量取对乙酰氨基酚储备液10ml，咖啡因储备液5ml、异丙安替比林储备液10ml，并分别置于50ml容量瓶中，加混合溶剂甲醇-水（70∶30）稀释至刻度，使其浓度分别约为0.1mg/ml、0.02mg/ml、0.06mg/ml，作为对照液。
(3)标准溶液的配制。
分别精密移取三组分的储备液，置于25ml容量瓶中，加混合溶剂稀释至刻度，配成五种不同浓度的标准溶液。
(4)供试品溶液的制备。
取20片复方对乙酰氨基酚片，精密称定（平均片重0.6539g），充分研细，精密量取适量（约相当于对乙酰氨基酚250mg）置50ml容量瓶中，加混合溶剂甲醇-水（70∶30）30ml，超声提取15min，加混合溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置50ml容量瓶中，加混合溶剂稀释至刻度，作为供试液。
实训六对乙酰氨基酚片的质量检验
实训六：对乙酰氨基酚片的质量检验1. 引言对乙酰氨基酚片是常见的非处方药，用于缓解头痛、发烧、关节疼痛等症状。
但是，不同厂家制造的对乙酰氨基酚片在成分、质量等方面可能存在差异，因此需要对其进行质量检验，以保证产品的质量和安全。
2. 检验项目对乙酰氨基酚片的质量检验项目包括外观质量、含量测定、溶出度、分散性等多个方面。
2.1 外观质量外观质量的检验主要包括药片的形状、颜色、大小、厚度等方面。
检验时，首先要检查药片是否破损、翻边、断裂等，其次要检查药片的颜色是否一致，是否有斑点、异物等。
2.2 含量测定含量测定是对乙酰氨基酚片质量检验的关键项目之一。
含量测定一般采用高效液相色谱法。
检验时，首先要准备好标准品和待测样品，然后进行色谱分析。
检测结果应该与标准品符合要求，测定误差应小于规定范围。
2.3 溶出度溶出度检验是衡量药物释放速度和效果的重要指标。
检验时，首先要准备好溶解介质和药物，然后进行溶出度测定。
通常情况下，溶解时间为15分钟左右，检测结果应符合规定。
2.4 分散性分散性检验可以反映药物分散的能力。
检验时，首先要准备好药物和分散剂，然后进行分散性测定。
检测结果应符合规定。
3. 检验方法对乙酰氨基酚片的质量检验应该由专业的检验机构进行，检验方法应该符合国家相关标准和法规。
以下是对乙酰氨基酚片质量检验的基本方法：1.外观检验：用肉眼观察药片外观，并用显微镜进行细微观察。
2.含量测定：将标准品和待测样品用适当的溶液溶解，进行色谱分析。
3.溶出度测定：将药物放入溶解介质中，按照规定时间进行溶出率测定。
4.分散性测定：将药物和分散剂放入试管中，在规定条件下进行分散性测定。
4.对乙酰氨基酚片的质量检验是医药行业中非常重要的检验项目。
正确进行质量检验，可以保证产品的质量和安全。
合格的对乙酰氨基酚片应该具有外观清晰、颜色一致、含量准确、溶出度理想、分散性良好等特点。
我们应该注意选择正规认证的生产厂家，以保证对乙酰氨基酚片的质量和安全。
对乙酰氨基酚
对乙酰氨基酚片的含量测定原理：对乙酰氨基酚在257nm的波长处有最大吸光度。
试剂：0.4%氢氧化钠溶液；对乙酰氨基酚对照品40mg；对乙酰氨基酚片10片；蒸馏水仪器：250ml量瓶2个；100ml量瓶8个；移液管：10ml一个、5ml一个15ml 的一个；电子天平一台；研钵、杵棒一套；漏斗一个；烧杯100ml的一个铁架台一个；分光光度计、滤纸一片。
标准曲线的配制：取对乙酰氨基酚对照品约40mg，精密称定，置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水稀释至刻度，摇匀。
分别精密量取2，4，6，8，10，12ml，置100ml量瓶中，加入0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水稀释至刻度，摇匀；另取100ml容量瓶加入0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水稀释至刻度。
照分光光度法，在257nm的波长处测定吸收度。
供试品测定：取本品10片，精密称定，研细，精密称取（相当于对乙酰氨基酚40mg），置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml及水50ml，振摇15分钟，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm的波长处测定吸收度。
片剂的一般检查：重量差异片剂重量差异限度应符合下表规定：检查法：取供试品20片，精密称定总重量，求得平均片重后，再分别精密称定每片的重量，每片重量与平均片重相比较（凡有标示片重的片剂，每片重量与标示片重相比较），超出限度的不得多于2片，并不得有1片超出限度一倍。
平均重量重量差异限度0.3g以下±7.5%0.30g或0.30g以上±5%片剂脆碎度检检查法：片重为0.65g或以下者取若干片，使其总重约为6.5g；片重大于0.65g 者取10片。
用吹风机吹去脱落的粉末，精密称重，置圆筒中，转动100次。
取出，同法除去粉末，精密称重，减失重量不得过1%，且不得检出断裂、龟裂及粉碎的片。
实验三 复方对乙酰氨基酚片的含量测定
实验三复方对乙酰氨基酚片的含量测定一、目的要求1、掌握复方片剂中各成分含量测定的基本原理和操作方法。
2、掌握复方片剂的分析特点。
二、基本原理复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主成分。
各成分之间性质差异大。
乙酰水杨酸为芳酸类药物，具酸性，K a ＝3.27×10-4，可用酸量法测定；对乙酰氨基酚为芳酰胺类药物，具酰胺基，呈中性，但具潜在芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，K b ＝0.7×10-14，不能采用一般生物碱的含量测定方法，但可将其与碘发生定量沉淀以后，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定从而求得咖啡因的含量。
反应式表示如下： 1、乙酰水杨酸的测定原理COOHO COCH 3+NaOHCOONaO COCH 3+H 2O等当点时，由于生成物水杨酸钠的水解，溶液呈微碱性，所以选用碱性区域变色的指示剂--酚酞。
2、对乙酰氨基酚的测定原理3、咖啡因的测定原理NN OO H 3C 3NN＋2I+KI+H 2SO 4NN OO H 3C 3NCH 3NHI I 4+KHSO 4CH 3I 2(剩余)+2Na 2S 2O 32NaI+Na 2S 4O 6三、实验方法取本品20片，精密称定，研细备用。
（一）乙酰水杨酸的含量测定药典规定每片检品中含乙酰水杨酸应为0.219g ～0.242g 。
精密称取上述细粉适量（约相当于乙酰水杨酸0.4g ），置分液漏斗中，加水15ml ，摇匀，用氯仿振摇提取4次（20ml ，10ml ，10ml ，10ml ），提取氯仿液用同一分水10ml 洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml 溶解后，加酚酞指示液3滴，用0.1mol/L 氢氧化钠液滴定，即得。
每1ml0.1mol/L 氢氧化钠液相当于18.02mg 的C 9H 8O 4。
按下式计算每片含乙酰水杨酸的克数平均片重称样量片＝W T /⨯⋅⋅W fV g其中：T －为滴定度；V －消耗滴定液体积；f-为滴定液浓度校正因子（二）对乙酰氨基酚的含量测定药典规定每片检品中含对乙酰氨基酚应为0.120g ～0.132g 。
对乙酰氨基酚
硬度检查：
用适当的仪器测定片剂的硬度可以得到定量的结果，一般能承受30～40N的压力即认为合格。常用的仪器：孟山都（Monsanto）硬度计
标准曲线的配制：取对乙酰氨基酚对照品约40mg，精密称定，置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水稀释至刻度，摇匀。分别精密量取2，4，6，8，10，12ml，置100ml量瓶中，加入0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水稀释至刻度，摇匀；另取100ml容量瓶加入0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水稀释至刻度。照分光光度法，在257nm的波长处测定吸收度。
平均重量
重量差异限度
0.3g以下
±7.5%
0.30g或0.30g以上
±5%
片剂的一般检查：
重量差异
片剂重量差异限度应符合下表规定：
检查法：
取供试品20片，精密称定总重量，求得平均片重后，再分别精密称定每片的重量，每片重量与平限度的不得多于2片，并不得有1片超出限度一倍。
对乙酰氨基酚片的含量测定
原理：对乙酰氨基酚在257nm的波长处有最大吸光度。
试剂：0.4%氢氧化钠溶液；对乙酰氨基酚对照品40mg；对乙酰氨基酚片10片；蒸馏水
仪器：250ml量瓶2个；100ml量瓶8个；移液管：10ml一个、5ml一个15ml的一个；电子天平一台；研钵、杵棒一套；漏斗一个；烧杯100ml的一个铁架台一个；分光光度计、滤纸一片。
紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚片的含量
实验七
紫外分光光度法测定药物
含量的方法学研究
实验七 方法学研究—紫外分光光度法 测定对乙酰氨基酚片的含量
一、实验目的
1. 掌握紫外分光光度法的验证内容和要求； 2.熟悉建立紫外分光光度法测定药物含量的 基本思路。
实验七 方法学研究—紫外分光光度法 测定对乙酰氨基酚片的含量
二、验证项目
(X
RSD SD 100% X
i 1 n i
X )2 100%
n 1 X
实验七 方法学研究—紫外分光光度法 测定对乙酰氨基酚片的含量
三、实验内容
（3）回收率试验
已知含量的对乙酰氨基酚片适量，共9份
对乙酰氨基酚对照品高、中、低 3个浓度
回收率% 总值 - 本底值 100% 加入量
制剂中有效成分的含量测定检测限和定量限）
实验七 方法学研究—紫外分光光度法 测定对乙酰氨基酚片的含量
三、实验内容
对乙酰氨基酚片含对乙酰氨基酚 (C8H9NO2 ）
应为标示量的95.0%-105.0%。
实验七 方法学研究—紫外分光光度法 测定对乙酰氨基酚片的含量
三、实验内容
（1）线性与范围：
对乙酰氨基酚对照品,
照分光光度法，在λ257nm测定吸收度
线性回归方程：y=a+bx,
线性范围:3.2-16μg/ml
r≥0.999
实验七 方法学研究—紫外分光光度法 测定对乙酰氨基酚片的含量
三、实验内容
（2）精密度试验：
计算片剂含量相当于标示量的百分数
6份测定结果的相对标准偏差(RSD )≤1%
A E 100
1% 1 cm
×D
×平均片重
×100%
实验三 对乙酰氨基酚片的含量测定方法学研究
4. 回收率试验
取本品10片，精密称定，研细，精密称 取细粉0.07g（相当于对乙酰氨基酚 40mg）1份，置250ml量瓶中，按1：1 比例，向其中加入对乙酰氨基酚对照品， 其余照“供试品测定法”项下的方法操 作，按标准曲线法计算回收率。
实验三 对乙酰氨基酚片的 含量测定方法学研究
一、目的要求
掌握确证分析方法的效能指标内容和 要求。
二、操作步骤
本品为对乙酰氨基酚的片剂（标 示量为300 mg/片），含对乙酰氨基 酚（ C8H9NO2 ）应为标示量的 90%～110.0%。
1．线性与线性范围
取对乙酰氨基酚对照品约40mg，精密称定， 置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml 溶解后，加水稀释至刻度，摇匀。分别精密量 取2，4，6，8，10，12ml，置100ml量瓶中， 加入0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水稀释至刻 度，摇匀，照分光光度法，在257nm的波长处 测定吸收度。将浓度C对吸收度A回归，得线 性回归方程：A=aC+b (r= ，n=6)。线性 浓度范围： ~ mg/ml。
三、思考题
含量测定方法的效能指标有哪些？
2．供试品测定法
取本品10片，精密称定，研细，精密称 取0.07g（相当于对乙酰氨基酚40mg）， 置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液 50ml及水50ml，振摇15分钟，加水稀释 至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精 密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加 0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水稀释至刻 度，摇匀，照分光光度法，在257nm的 波长处测定吸收度。
液相色谱法测定对乙酰氨基酚片的含量
ｓｌｔ ｎ—ｍ ｔａｏ（５ １ ）ａ ｔｅｆ ｗ ｒ ｅｏ ． Ｌ ｍｉ， ｈ ｅ ｃ ｏ ａｅ ｎｔ ４ ｍ ａｄｔｅｔ ｐ ｒ ｕｅｏ ｅ ｏ ｉ ｕｏ ｅ ｎ ｌ８ ：５ ｔ ｈ ｏ ｔ ｆ１０ｍ ／ ｎ ｔｅｄｔ ｔ ｎｗ ｖｌ ｇ ２４ ｎ ｎ ｅ ｅａ ｒ ｆ ｈ ｈ ｌ ａ ｅｉ ｅ ｈ ｈ ｍ ｔ ｔ
１２ １ ． ． 色谱条件进行分析 ， 结果 对照品的保 留时 间为 ４ ８ ６ｒ ｎ ． １ ｉ， ａ
ｊ
４ ６
样 品的保 留时间为 ４ ８４ｍ ｎ 其色谱图见图 １ ． １ ｉ ， 。 １２ ６ 线性关系考察 ．．
分别 量 取 标 １至 标 ５对 照 品溶 液 １０ Ｉ ， 次 进 样 ， ０ Ｌ 依 ｘ 按 １２ １色谱条件进行分析 ， ．． 采用 外标法 ， 定峰 面积 ， 测 以浓度 （ ） Ｃ 为横 坐标 、 面 积 （ 为 纵 坐标 进行 线 性 回归 ， 回归方 程 为 峰 Ａ） 得 Ａ＝ ４ ８ ２ ５ 一１０ １７ ｒ ０ ９９ ， ５ ．９ ４ ｃ ．７ ２ ，＝ ．９ ７ 线性 范围为 ３—１ ｇ ｍ 。 ５ ／ Ｌ 标准 曲线 见图 ３ 。
配 置成 ３０ Ｉ ／ Ｌ的储 备液 ， ０ ｇ ｍ Ｘ 精密量 取 ２ ５ｍ ． Ｌ的储 备液 ，分别 置 ２ Ｌ容量 瓶 中， 流动相稀 释至 刻度 ， ５ｍ 加 摇匀 ， 即得 含对 乙酰 氨基 酚 ３ ｇ ｍＬ的母液 。精密量取母液 １２ ３４、 ｍＬ 分别置 ０ ／ 、、、 ５ ， 五个 １ Ｌ容量瓶 中 ， 流动相 稀释至 刻度 ， 匀 ， ０ｍ 加 摇 即得标 １ ２ 、、 ３４、 、 ５对照品溶 液 ， 浓度 分别 为 ３ ６ ９ １ 、５ ｇ ｍ 进 样前 用 、 、 、２ １ ／ Ｌ， ０ ４ ｍ针筒式过滤器过滤 ， ．５Ｉ ｘ 取续滤液进样 。 （） ２ 样品溶液的制备 取对乙酰氨基 酚片 ｌ ， 密称定 ， ０片 精 研 细 。精密称取适量（ 约相当于对 乙酰氨基 酚 ９ ｇ ， １０ｍ ０ｍ ） 置 ０ Ｌ容
紫外分光光度法测定开放实验-对乙酰氨基酚片含量测定
对乙酰氨基酚片含量测定
标准曲线 供试品测定 回收率试验 精密度试验
线性、范围 Lambert-Beer定律
准确度 精密度
含量测定原理
测定原理：结构中有苯环，碱性溶液中，257 nm
波长处有最大吸收。
百分吸收系数：E
1% 1
cm
715
三、回收率试验
准确度：指测定结果与真实值或参考值接近 的程度，是表示测量结果中系统误差和偶然 误差大小的程度的量。
回收率接近100%：说明分析方法对于分析物无论在 纯溶液中，还是在复杂的基体环境中，分析物不受 基体效应影响。
若回收率明显偏离100%：说明分析物处的基体环境 不同，反应能力有明显差别。回收试验证明所采用 的分析方法适合于相应的检测要求。
• 250 mL容量瓶 3 个 • 100 mL容量瓶 4 个（空白对照1个） 紫外分光光度计
三、回收率试验
回收试验操作过程
取本品 5 片，精密称定，研细，精密称取适 量（约相当于对乙酰氨基酚 40 mg），共 3 份， 置 250 mL容量瓶中，按 2:1 的比例加入对乙 酰氨基酚对照品；
加0.4%NaOH 50 mL及水50 mL，振摇15 min， 加水稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液；
空白 + 已知量 A 的对照品（或标准品）测定， 测定值为 M。
三、回收率试验
加样回收试验
当所分析的试样组分复杂，不完全清楚时，向 已准确测定药物含量 P 的真实样品 + 已知量 A 被测组分的对照品（或标准品）测定，测定值 为 M。
三、回收率试验
回收试验
原料药可用已知纯度的对照品或样品进行 测定；
三、回收率试验
吸收系数法测对乙酰氨基酚含量测定实验注意事项
吸收系数法测对乙酰氨基酚含量测定实验注意事项含量测定操作注意事项：1、精密分析天平称量时需要等数值稳定后再归雾,称量时要一点一点加入样品，越到目标值要越慢,不小心加多了也不能取出来。
2、样品定容到约剩2mL的时候拿去超声10秒，观看样品是否溶解,不溶则继续超声,之后放进室温静置，静置原因是超声温度会升高，而使容量瓶定容不准，另外容量瓶壁上还可能有液滴,需等待液滴滑下,大约2min后即可定容。
3、定容后，将容量瓶底部放于手心震荡,然后轻轻打开盖头让盖头上的溶液滑下，再重复两次之前的动作，最后按住盖头上下倒溶液即可取样去测。
4、取样时不用过滤，因为滤头会吸附部分样品导致检测有误差。
5、同一个样品的两份平行样，含量之间相差不得超过1.0% ，每个样品浓度的确定标准是要保证目标峰在走液相时其峰高在500-1000mAu之间。
6、含量测定RSD%值不能大于2% ,样品称量不能超过目标范围的正负0.5mg。
7、含量测定的Area响应值要保留两位小数,响应因子= Area/重量*稀释倍数。
8、对照品含量等于其纯度，一般约为98%。
9、样品含量=样品响应因子/对照品响应因子平均数*对照品纯度(一般100%)含量方法学认证主要考察以下几个性质:专属性:查看被测物质与被测结果间是否正确且唯一对应。
考察方法:将处被测成分外的其他物质均做空白干扰对照，包括流动相、辅料空白、溶剂空白、其他成分(多组分产品)空白、如果方法有衍生还应包括衍生空白等等。
精密度:查看方法多次测定是否能够得到相同的结果。
察方法:重复性试验，应包括仪器精密度(对照多次进样查看偏差)，方法精密度(多次测定同一样品查看结果，该测定应包含全部试验过程，即配制多个供试品溶液)，中间精密度(不同人员不同时间不同仪器，最好试剂和实验室也更换，测定同一样品，查看结果偏差)。
RSD应小于2%。
准确度:测得结果与实际量间是否一致。
考察方法:通过回收率试验来确定，应包含3个浓度至少9个样品的测定结果，测定时应采取对照品(或原料)加辅料等其他干扰，计算回收率和结果偏差。