循环酶法双试剂测定血清同型半胱氨酸的方法学评价

１ １ 标 本 来 源 选 择 ２ １ ． Ｏ Ｏ年 １月 至 ２ １ ０ １年 ｌ １月 本 院 门 诊
和 １ 院 的患 者 ９ Ｅ ７例 ， ｌ 男 ５ 其 ｆ ｌ ２例 ， 女
半均 （ １ ７土ｌ ３ 岁 。 ４． ０ ）
例， 龄 ３ 年 卜～８ ６岁 ，
１ ２ 仪 器 ｉ 刹 『 ７ ８ ． ｊＪ 弋 １ １０型 全 自动 生 化 分 析 仪 。 Ｈｃ ｙ检
近 年 来 研 究表 明 ， 型 半胱 氨 酸 （ ｙ 与 冠 心 病 、 卒 中 Ｈｃ ） 脑 弥 漫 性 脑 动脉 硬 化 、 尿 病 肾 病 等 疾 病 关 系 甚 为 密 切 糖 。最
氨 酸 （ 度 为 ０ １ ｍ ｌＩ） 三 （ 浓 ． ｍｏ／ ，、 ２羧 乙 基 ） 氯 化 氢 （ 度 为 磷 浓 ０ ５ｍｍｏ ／ ） 谷 氨 酸脱 氢 酶 （ Ｏ ｋ Ｉ ； 剂 Ⅱ ： ｌｙ水 解 酶 ． ｌＬ 、 ２ ｕ／ 试 ） ｔｃ （ ． Ｕ／ 、 ｙ 转 移 酶 （ ． Ｕ Ｉ ； 水 平 的 Ｈｃ 标 准 ３ ０ｋ Ｉ Ｈｃ 基 ） ３ ０ ｋ ／ ２个 ） ｙ 液 （ 别 为 ０ ０和 ２ ． ｍｏ／ ，。 分 ． ８ ０ｇ ｌＩ ） １ ３ 测 定 原 理 样 品 中 的 氧 化 型 Ｈｅ 被 还 原 剂 还 原 成 游 离 ． ｙ 型 Ｈｃ ， 离 型 Ｈｃ ｙ游 ｙ与 试 剂 中 的 底 物 和 酶 发 生 反 应 引 起 吸 光 度 变 化 ， 过 检 测 反 应 中 的 吸 光 度 变 化 的 速 率 ， 以 计算 出 待 通 可 测 样本 中 Ｈｅ ｙ的 浓 度 。
测 试 利（ 浙 利埭 物 技 术 白限公 问 ） 括 试 剂 Ｉ： 包 腺 硫
检 验 医 学 与 临床 ２ １ ０ ２年 ９月 第 ９卷 第 １ ８期
自动 化 等 特 点 ， 渐 成 为 适 用 于 各 级 实 验 室 的 常 规 检 测 方 法 。 逐
本 文 对 循 环 酶 法 双 试剂 测 定 血 清 ｔ ｃ 仃 方 法 学 评 价 。 ｌｙ进
ｌ 材 料 与 方 法
１ ５ 方 法 学 评 价 指标 ．
进 行 方法 的 回收 试 验 、 扰 试 验 ， 密 十 精
原 剂还 原 成 游 离型 ｒｃ ， 离型 Ｈｃ Ｉｙ 游 ｙ与 试 剂 中的 底物 和酶 发 生反 应 ， 引起 吸 光度 变化 ， 过 检 测 反 应 中 的吸 光 度 变 通
化 的速 率 ， 以 计 算 出待 测样 本 中 ｔｃ 可 ｌｙ的 浓 度 。 结果 测 定线 性 范 围达 ０ ６ ／ ｌＩ； 内 （ 分 别 为 ２８ 、 ． ～６ ｌ ／ 批 ｍｏ 、 Ｖ ．５
耗 时 等 缺 点 】所 以 两种 方 法 适 用 于 各 级 实 验 室 ， 其 是 基 ， 尤 层 医疗 单位 的推 广 。近 年 来 ， 于 Ｈｃ 由 ｙ检 测 技 术 的 发 展 ， 其 对
研 究 逐 渐 深 入 ， 环 酶 法 凶 为 具 有 快 速 、 便 、 敏 度 高 ， 于 循 简 灵 易
的客观指标。 参 考 文 献
作 者统 计分 析 了 ２ ０ ２ ¨ 年 肌 酐 室 问 质 控 结 果 ＶＩ ０８ ０ Ｓ值 ， 发 现使 用 多水 平 参 比物 （ ０ ０年 １ ） ， 酐 室 间 质控 结 果 ＶＩ ２】 月 后 肌 Ｓ 值 明 显 降低 。 因 为 费用 等 很 多 题 。 用 单 ・ 平 参 比 物 是 较 常 见 的 。 使 水
堡堕 堕堂 Ｉ ２ １— ９ ０ 年 月第 ９ ２ 卷第 １ 期 ＬｂＭｅ ｌ ，ｅｔ ｂｒ ０２Ｖ １ ， ｏ １ ８ ａ ｄ ｉ Ｓｐｅ ｅ ２ １， ｏ ９ Ｎ ．８ Ｃｎ ｍ ．
定 的 准确 干 ｎ靠 性 较 好 。 岛 、 值 难 以 测定 准确 ； 别 是 黄 ¨Ｊ 但 低 特
疸 标 本 ， 沦足 质控 还 是 Ｈ常 Ｔ作 实 际差 异 较 大 。本 研 究 结 果 尢 一 还 表 明 ． 疸 ｔ扰 加 ｆ肌 测 定 的 方法 缺 陷 ． 肌 酐 测 定 线 性 黄 一 使 不 佳 ； 过 实 验 验 诅 ． 刚 舣 试 剂 多 点 定标 后 ， 验 质 量 明 显 提 经 ：改 实 高 ， 黄疸 干扰 减 少 刮 ｒ较 低 水 ， 之 室 间 质 控 成 绩 明 显 提 对 随 高 ， 床 反 应 良好 。 临 Ｊ 多 水 平 参 比物 很 难 发 现 问 题 方 面 ， ｔ Ｊ
极 或 电极 套 ， 证 了病 理 性 标 本 检 测 的 灵 敏 度 ， 制 ｒ失 控 状 保 控
态 ， 高 － 验质量 。 提 ｒ 检 综 上 所 述 ， 水 平 参 比 物 仅 可 反 映 试 验 质 量 。 且 可 为 多 而
检 验 人 员 评 价 试 剂 质 量 提 供 客 观 指标 ， 者 相 信 此 举 能 提 高 病 作 理 情 况 下 检 验 结 果 的 质 量 ． 临 床 诊 断 、 疗 提 供 高 质 量 可 靠 为 治
早 榆 测 ｌｃ 是 氨 基 酸 分 析 法 ， ｌ ｄ 测 定 Ｉ 中 Ｈｅ ， 经 ｛ｙ Ｕｅ ｎ 等 ａ 衄清 ｙ后
改 良 ， 前 常 月 法 为 高 效 液 十Ｉ 谱 法 （ Ｉ ） 荧 光 偏 振 免 Ｊ ｌ ｝ 色 ＨＰ 、 ｃ 疫 检 测 法 （ Ｐ Ａ） 酶 免 疫 分 析 法 （ Ｉ 。 Ｈｌ ＦＩ 和 Ｅ Ａ） Ｃ足 经 典 的 参 Ｉ
高 、 性 范 围宽 、 干扰 因 素 强 、 密度 较 好 易 于 自动化 等特 点 ， 作 为 临床 实验 室 Ｈｃ 线 抗 精 可 ｙ常 规 测 定 方 法 。
ＤＯＩ １ ． ９ ９ ｊ ｉ ｎ １ ７ － ４ ５ ２１２ １ ． ５ 文 献标 志 码 ： 文 章编 号 ： ７ — ４ ５ ２ ｌ ） ８ ２ ５ ２ ：０ ３ ６ ／ ．ｓ ． ６ ２９ ５ ． １ ． ８ ０ ３ ｓ １ Ｂ ｊ ２ ９ ５ （ ０ ２ １ — ３ ２Ｏ ６
学 检 验 临 床 ， ０ １ ２ （ ） ８ —９ ２ １ ， ２ ４ ： ８８ ．
［ ］ 王跃 荣 ， 邦 彦 ． ＹＮ ｌ ＯＮ Ｃ ｙ ｔ ３ 秦 Ｓ ＣｔＲ Ｘ９Ｓ ｓ ｍｓ测 定 葡 萄 糖 ｅ 和尿 素 的 ２种 方 法 比较 ［］ 上 海 医学 检 验 杂 志 ，０ ３ ｌ Ｊ． ２ ０ ，８
近结 果 可靠 性 较 好 ， 仳对 于 过 高 和 过 低 标 本 则 难 以 监 控 ， 不 也
能及 时发 现 问题 ； 极法 测 定 各 种 化 学 物 质 是 当 今检 验 科 常 用 电
［ ］ 杨 ， 雷． 套 全 自动 生 化 检 测 系 统 比对 研 究 ［］ 医 ２ １ 王 英 两 Ｊ．
（ ）： ０２ ３ ５ ３ ０３．
的方 法之 一 ， 有快 速 、 养 简 便 、 果 可 靠 的 优 点 ， 可 因 为 具 保 结 但 电极 老化 等原 因造 成 敏 感 度 Ｆ降 ， 别 是 对 于 低 水 平 标 本 检 测 特
误 差 较 大 。作 者 以葡 萄 糖 和 尿 素 氮 （ 电极 法 测 定 ） 例 ， 行 了 为 进 对 比分 析 ． 示 如 用 单 一 平 参 比 物 难 以 发 现 Ｌ述 问 题 ， 多 显 水 而
度 、 性 范 围 及 方 法 对 比试 验 。 线 １ ５ １ 精 密 度 评 价 按 照 Ｎ Ｃ （ Ｐ ２ 文 件 的 评 价 方 ．． Ｃ Ｉ Ｅ ５Ｔ ） Ｓ 案 ． 浓度为 １。 取 ２ ０和 ２ ． ｍｏ／ ８ ０“ ｌＩ 的 Ｈｃ ｙ质 控 品 各 ． ， ・ 用 份 循 环 酶 法 将 此 两 份标 本 每 天上 午 、 午 双 份 测 定 ， 续 ２ 。 下 连 ０ｄ １ ５ ２ 回收 试验 向 ５ ０ Ｌ血 清 中 加 入 ５ Ｉ 生 理 盐 水 ．． ０ Ｏ 的 作 为 基 础样 本 ， 得 Ｈｃ 浓 度 为 ８ ５ ｍ ［Ｉ 向删 体 积 的血 清 测 ｙ ． ｏ ／ ， 标 奉 中 分 别 Ｊｌ ５ Ｉ 浓 度 为 ５ ． 和 ２ ０ ０ ｍｏ／ Ｊ 入 Ｏ 的 ｌ ００ ０． ｌＩ 的
３ ｛ ｎ） Ｉ ， 氨 小 于或 等 于 ７ ｍｏ／ 时 ， 结果 无 明显 干扰 。结 论 ０ Ｉ（ 时 血 ’ ｌ ０ｕ ＩＩ 对
【 键 词】 循 环 酶 法 ； 双试 剂 ； 同型 半 胱氨 酸 ； 酶 免 疫 分 析 法 关
循 环 酶 法 双 试 刘 测 定 Ｈｃ ， 有 灵敏 度 ｙ具
Ｉ ８ ， 间 ＣＶ分 别 为 ４ ２ 、 ． ， ．８ 日 ． ６ ３ １ 总 ９ 分 别 为 ６ ５ 、 ． ３ ； 收 率 ９ ． ～ ９ ． ； 法 和 酶 免 疫 分 析 ３ ５ ３ 回 ３５ ７７ 本
法 Ｌ ｌ 比较 ： — ｌ ０ ０ ０ Ｅ Ａ） ｙ １ ４ Ｘ一０ ５ ９８ 一 ０ ９ ５ ９ Ｐ ０ ０ ， 异 无 统 计 学 意 叉 ； 品 中 三 酰 甘 油 浓 度 小 于 或 等 ． ．４ ， ． ９ ， ＞ ． ５ 差 样 于 １ ｍｏ／ ，血 红 蛋 白浓 度 小 于 或等 于 ４ ５ ｇ １， 生 素 （ 浓 度 小 于 或 等 于 ５ ０ ｍｇ ｌ， 红 素 浓 度 小 于 或 等 于 ０ｒ ｌＩ ｎ ， ． ／ 维 ： ０ ／ 胆
ｌ ］ Ｌ ｔａ ＇ｏ ｓ临 床 实 验 诊 断 学 ［ ． 荣 武 译 ． 海 ： １ ｏｈ ｒＩ ｍａ． ｈ Ｍ］ 孙 上
Ｊ 海 科 学 技 术 出版 社 ， ０ ，： ３ ９１ ０ ． ２ ０１ １ ９ ４ ７ ： ，
本研 究结 果提 示 ， 一 平 参 比物 通 常 任健 康 人 参 考 值 范 围附 单 ・ 水
循 环 酶 法 双试 剂 测定 血 清 同型 半 胱 氨 酸 的 方 法 学评 价
焦文 学 ， 王 洁 （ 甘肃 省陇 南市第 一人 民 医对 循 环 酶 法 双 试 剂 测 定 血 清 同 型 半胱 氨 酸 （ ｙ 进 行 评 价 。方 法 样 品 中 的氧 化 型 Ｈｃ 被 还 摘 Ｈｃ ） ｙ
［ ］ 冯仁 丰 ． ４ 临床 检 验 质 量 管 理 技 术 基 础 Ｅ ． Ｍ］ ２版 ． 上海 ： 上
海 科 学 技 术 文 献 出 版 社 ，０ ７ ３ ～ ８ ２ ０ ： ７３ ．
（ 稿 日期 ：０ ０ ７ 收 ２ １ － ２０ ） ２
水 平 参 比物 町及 时 发 现 问题 ， 示 实 验 人 员 及 时 处 理 。作 者 在 提 实 际 作 中发 现 葡 萄 糖 、 素 氮 电 极 老 化 状 态 后 ， 时 更换 电 尿 及
ｌ４ 测 定 方 法 Ｊ
生 化 分 析 仪 基 本 参 数 设 置 ： 应 类 型 为 速 率 反
Ａ 法 ； 长 ３０ｎ 主 ） ４ ５ｎ 副 ） ３ 波 ４ ｍ（ ／ ０ ｍ（ ； ７℃ 反 应 １ ａｎ 渎 数 ０ｒ ， ｉ
时 间 ２ 一一ｌ点 ， 品 量 ８ Ｉ， ３ ３ 样 Ｒ１量 ｌ ５ Ｉ， Ｒ２量 ２ 『 ２ ５』 。 Ｉ
考 方法 ， 操 作 比较 复杂 、 验 耗 时 比 较 Ｋ、 验 数 据 变 异 比较 其 试 试
人 ， ｌ 应用 方 曲逐 渐 被 Ｆ Ｉ 和 Ｅ Ａ 所 取 代 。但 Ｆ Ｉ 存 在 临床 ＰＡ Ｉ ＰＡ
价 格 昂贵 的缺 点 ， Ｉ 存 在 人 部 分 操 作 还 是 手 工 操 作 ， 较 ＥＡ 比