土壤全磷、速效磷、速效钾含量,植物组织全磷、全氮含量快速测试方法

离心替代过滤，酶标仪替代分光光度计的土壤全磷测试方法

1.用万分之一天平，称取1g左右的风干土，记录下重量。

2.加入8ml浓硫酸，放置过夜后加入10滴高氯酸，消煮至白色。

3.在50ml消煮管中定容，可以先加水1/3，混匀后再加水至刻度线附近，放置过夜后再加水至刻度线，摇匀。

4.吸取1ml消煮液到1.5ml离心管中，10000rpm，离心1分钟。

5.吸取50ul上清液+750ul H2O+100ul NaOH(4mol/L,16g NaOH定容到100ml)+100ul钼锑抗试剂到1.5ml离心管中。

6.摇匀后，14000rcf离心一分钟，室温高于15℃情况下，30min后，吸取300ul至酶标板比色

备注：5.中吸取的上清液的量可根据显色状况调整，相应地NaOH的量也要做出调整，保证比色体系体积为1ml，氢离子浓度为0.55mol/L左右，每个样品做三个重复，重复间允许误差<0.005%即

50mg/kg。

磷酸二氢钾工作曲线制做方法

1.先将100mg/L(0.4394g KH2PO4(烘干2小时)先加水300ml，再加5ml浓硫酸，再定容到1L)的磷标贮液(磷酸二氢钾溶液)稀释20倍，比如吸取5ml定容到100ml

2.配制

3.摇匀后，10000rpm离心一分钟，室温高于15℃情况下，30min后，吸取300ul至酶标板比色

备注：利用散点图绘制曲线，添加趋势线和r值，r^2要大于0.999。利用forecast.line函数计算比

色液磷含量

钼锑抗配制方法

1.浓硫酸153ml加入500ml左右H2O(用1L的烧杯)，用磁力搅拌器搅匀

2. 1L烧杯中加入10g 钼酸铵,用磁力搅拌器融化

3. 0.5g酒石酸锑钾加入100ml左右H2O(用100ml的烧杯)，用磁力搅拌器溶化

4. 步骤3所得溶液倒入1L烧杯，在磁力搅拌器上混合均匀，定容到1L

备注：避光储存，使用时每10ml 加入0.15g抗坏血酸

二硝基酚溶液：0.2g 二硝基酚溶于100ml水中

离心替代过滤，酶标仪替代分光光度计的土壤有效磷(碳酸氢钠浸提)测定方法

1. 42g碳酸氢钠定容到1L，用4mol/L NaOH溶液(4mol/L,16g NaOH定容到100ml)调节pH至8.5，得到浸提剂

2. 1.00g风干土加入50ml塑料管中，再加入0.1g活性炭粉，再加入20ml碳酸氢钠溶液，

20~25℃，180rpm，震荡30min

3.吸取1ml浸提液到1.5ml离心管中，10000rpm，离心1分钟

4.吸取200ul上清液+700ul H2O+100ul钼锑抗试剂到1.5ml离心管中

5.摇匀后，14000rcf，离心一分钟，室温高于15℃情况下，30min后，吸取300ul至酶标板比色

备注：吸取的上清液体积可以根据显色情况调整，保证比色体系1ml，每个样品做三个重复

植物组织全磷含量快速测定

1.将烘干后的植物组织样品磨碎，再将样品粉末继续烘干至恒重。

2.称取0.1g粉末放入50ml消煮管，加入5ml浓硫酸，盖上小漏斗，放置过夜，在300℃下，消煮

1h，直到消煮液呈棕黑色。

3.取出消煮管放置在金属试管架下，管口不要对着人，用塑料滴管吸取大约1管双氧水，加入消煮管，消煮液若没有澄清则补加双氧水，之后再消煮1个小时，除去双氧水。

4.在50ml消煮管中定容，可以先加水1/3，混匀后再加水至刻度线附近，放置过夜后再加水至刻度线，摇匀。

5.钼锑抗显色方法

6.摇匀后，14000rcf离心一分钟，室温高于15℃情况下，30min后，吸取300ul至酶标板比色

备注：5.中吸取的上清液的量可根据显色状况调整，相应地NaOH的量也要做出调整，保证比色体系体积为1ml，氢离子浓度为0.55mol/L左右，每个样品做三个重复，重复间允许误差<0.005%即50mg/kg

植物组织快速全氮测定-改进型靛酚蓝比色法

土壤速效钾快速测定方法

钾标准溶液配制

称取在110℃下烘干2h的KCl0.1907g定容到1L，制得100mg/L的钾标准溶液

乙酸铵溶液配制

称取77.08gNH4OAc定容到1L，用乙酸或者氨水调至pH7.0，制得1mol/L的乙酸铵溶液

操作步骤

1.取过0.25mm筛的风干土1g+10ml 1mol/L的乙酸铵溶液于50ml的离心管

2.以120r/min的速度振荡30min

3.吸取1ml浸提液装入1.5ml的离心管中，每份浸提液吸取2次，一共吸取2ml

4.1400rcf离心1分钟

5.将上清液合入5ml的离心管

6.在火焰光度计上测试检测上清液的钾浓度

注：每个土样做三个重复

火焰光度计使用方法

1.检查变色硅胶是否是蓝色，将进样管浸入装有蒸馏水的烧杯中，打开排气泵

2.打开总气阀，调节减压阀到合适的气压

3.通气10s后打开点火开关点火

4.如果点不燃，转动火焰大小的转盘，加大火焰

5.点燃后，转动火焰大小的转盘，调节火焰至锯齿状

6.送入标样中浓度最高的样，转动灵敏度表盘，调节最高浓度的读数在100左右

7.送入浓度为0的样品，转动空白表盘，调节空白读数为0

8.测定标样的读数

9.测试样品的读数

10.关闭总气阀，等火焰熄灭后关闭点火开关，最后关闭排气泵

注：保证进样管一直有液体吸入，保证吸收水气的变色硅胶是蓝色，变红后需及时更换